趙美玲，李哲肖，冷志爽，趙鶯歌

（1. 天士力控股集團有限公司天士力研究院，天津 300410；2. 石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司，河北 石家莊050035）

杠柳毒苷為香加皮中一種具有甾核和不飽和五元內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)的甲型強心苷，具有強心利尿[1]、抗腫瘤[2]、抗炎、免疫調(diào)節(jié)[3]等藥理作用。其強心作用與其他甲型強心苷類成分一樣可選擇作用于心臟，有加強正性肌力作用，可增加心肌收縮力，減慢心率，相對于洋地黃毒苷和地高辛等強心苷類成分，具有治療窗較寬、起效迅速，持續(xù)時間短，無蓄積等優(yōu)勢[3]。近年來，均以復方的形式治療慢性充血性心力衰竭，自 2005 版起《中國藥典》中已注明“香加皮有毒，服用不宜過量”[4]，香加皮毒性反應(yīng)主要表現(xiàn)為強心苷中毒癥狀[5]，而杠柳毒苷為香加皮強心的主要有效成分，以單體形式入藥。規(guī)范香加皮的藥量，可保障臨床用藥的安全有效。有研究[6]表明，杠柳毒苷口服存在顯著的肝腸循環(huán)，且在腸道內(nèi)會被腸道菌群大量代謝為毒性更強的杠柳次苷，從而限制了其口服制劑的應(yīng)用，所以，臨床亟需開發(fā)新劑型。本文旨在考察杠柳毒苷原料藥的理化性質(zhì)的探索，為制劑開發(fā)提供參考思路及技術(shù)支持，加快產(chǎn)品研發(fā)歷程。

1 儀器與材料

MSA/125P-CE 型和 BS200S-WEI 型天平（Sartorious 公司）；S220-R-CN 型 pH 計（Mettler Toledo 公司）；e2695-2998 型高效液相色譜儀（PDA，Waters 公司）；HPP750 型和 ICH260L型恒溫恒濕箱（Memmert 公司）。

磷酸二氫鈉（AR）、氫氧化鈉（AR），均為國藥集團化學試劑有限公司產(chǎn)品；無水磷酸氫二鈉（AR）、鹽酸（AR）、三水醋酸鈉（AR）、冰醋酸（AR），均為天津市科密歐化學試劑有限公司產(chǎn)品；乙腈（HPLC）、甲醇（HPLC），均為默克集團產(chǎn)品；杠柳毒苷（97.2%，石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司自提）；對照品杠柳毒苷（93.8%，批號 111793-200901，中國食品藥品檢定研究院）；杠柳次苷（93.8%，批號 111793-200901）、杠柳苷元（93.8%，批號 111793-200901）均購自中國科學院成都生物研究所；其他試劑（國產(chǎn)分析純，市售）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

含量色譜條件：色譜柱：C18 色譜柱（250 mm × 4.6 mm, 5 μm），流動相：乙腈—水（26 :74），檢測波長：350 nm，流速：1.0 mL·min-1，柱溫：30℃，進樣盤溫度：4℃，進樣量：10 μL；檢測波長：220 nm。典型色譜圖見圖 1。

Fig. 1 The typical chromatogram of the content of periplocin solution圖 1 杠柳毒苷溶液的含量典型色譜圖

有關(guān)物質(zhì)色譜條件: 色譜柱：C18 色譜柱（250 mm × 4.6 mm, 5 μm），流動相：乙腈—甲醇—水（27 : 10 : 63），檢測波長：220 nm，流速：1.0 mL·min-1，柱溫：30℃，進樣盤溫度：4℃，進樣量：10 μL。典型色譜圖見圖 2。

Fig. 2 The related substances typical chromatograms of periplocin solution圖 2 杠柳毒苷溶液的有關(guān)物質(zhì)典型色譜圖

2.2 杠柳毒苷溶解度考察

參考《中國藥典》2020 版四部通則 8004 中配制方法配制了不同 pH 值溶液[7]，對杠柳毒苷在不同 pH 溶液中的溶解度進行測定，并繪制了原料藥溶解度曲線，考察結(jié)果見表 1，原料藥的溶解度曲線見圖 3。

Table 1 The solubility of periplocin in different pH media表 1 杠柳毒苷在不同 pH 溶液中的溶解度

Fig. 3 The solubility curves of periplocin in different pH media圖 3 杠柳毒苷在不同 pH 介質(zhì)中的溶解度曲線圖

2.3 杠柳毒苷引濕性考察

依據(jù)《中國藥典》2020 版四部通則 9103 藥物引濕性試驗指導原則[8]，鹽杠柳毒苷引濕增重等于 6.32%，具有引濕性。

2.4 杠柳毒苷在不同條件下的穩(wěn)定性考察

分別將樣品放置于高濕（25℃/RH 75%、25℃/RH 92.5%）、高溫高濕（60℃/RH 75%）、加速（40℃/RH 75%）和強光照射（總照度不低于 1.2×106Lux·hr）條件下，5、10、15 天后分別取樣測定含量和有關(guān)物質(zhì)，并與 0 天數(shù)據(jù)進行比較，結(jié)果如表 2 所示。

Table 2 The stability of periplocin in different conditions表 2 杠柳毒苷在不同條件下的穩(wěn)定性

為了更加全面了解影響杠柳毒苷穩(wěn)定性的因素，進行了酸堿氧化降解的降解試驗，試驗結(jié)果見表 3。

Table 3 The stress degradation test results of periplocin表 3 杠柳毒苷的強制降解試驗結(jié)果

2.5 杠柳毒苷溶液的滲透壓及 pH 值考察

測定了 0.1 mg·mL-1的杠柳毒苷溶液的滲透壓為 1.0 mosmol·kg-1，pH 值為 3.86。

2.6 不同 pH 介質(zhì)的溶液穩(wěn)定性考察

考察了 pH 值范圍為 1.0～10.0 內(nèi)杠柳毒苷溶液在 60℃ 條件下的穩(wěn)定性情況，考察結(jié)果見表 4。

Table 4 The stability of periplocin in different pH media at 60℃表 4 不同 pH 值杠柳毒苷溶液在 60℃ 條件下的穩(wěn)定性

2.7 離子相容性考察

準確移取 5 份 8 mL 的 1 mg·mL-1杠柳毒苷溶液于量瓶中，分別加入 2 mL 0.5mg·mL-1的AlCl3、FeCl3、CaCl2、CuSO4、MgSO4溶液于量中震蕩混勻，放 60℃ 條件下考察工業(yè)生產(chǎn)中常見 5 種金屬離子與杠柳毒苷的相容性情況，考察結(jié)果見表 5。

Table 5 Effects of different metal ions on the stability of periplocin solution表 5 不同種金屬離子對杠柳毒苷溶液穩(wěn)定性的影響

3 討論

對于創(chuàng)新藥物來說，劑型的選擇在新藥研發(fā)中是非常重要的方面，以盡可能的降低化合物的毒性，提高療效為指標.劑型選擇應(yīng)根據(jù)藥理、毒理和臨床等方面的研究結(jié)果，并結(jié)合化合物的性質(zhì)綜合考慮確定，結(jié)合強心苷類的常用給藥方式及杠柳毒苷的藥理學特性，建議杠柳毒苷劑型開發(fā)優(yōu)先選擇注射給藥。

杠柳毒苷因具有治療窗較寬、起效迅速，持續(xù)時間短，無蓄積的特點，在治療心衰方面具有優(yōu)異的臨床價值?，F(xiàn)有大量的文獻報道，杠柳毒苷的藥理學性質(zhì)，鮮有文字報道其理化性質(zhì)，而理化性質(zhì)是制劑開發(fā)前的重點研究內(nèi)容。本文重點考察了原料藥的溶解度、引濕性、穩(wěn)定性，試驗結(jié)果表明，杠柳毒苷原料藥在各 pH 水介質(zhì)均屬于微溶，且溶解度存在一定的 pH 值依賴性，為后續(xù)非口服制劑規(guī)格的選擇提供了依據(jù)；杠柳毒苷具有引濕性，為后續(xù)其貯藏保存提供了依據(jù)；杠柳毒苷在高溫、高濕、酸的條件下均不穩(wěn)定，在氧化、強堿及光照條件下較為穩(wěn)定；金屬離子影響溶液的穩(wěn)定性，可為后續(xù)制劑處方開發(fā)提供科學的參考思路及技術(shù)支持，加快產(chǎn)品研發(fā)歷程。