許運(yùn)巧，剛小清，李金鋒

1. 駐馬店市中心醫(yī)院 婦產(chǎn)科，河南 駐馬店 463000

2. 河南省人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科，河南 鄭州 450000

卵巢癌是死亡率最高的婦科腫瘤，嚴(yán)重威脅女性健康。中藥在抗腫瘤治療中發(fā)揮重要的作用，能夠直接抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，具有多靶點(diǎn)、綜合調(diào)節(jié)、不良反應(yīng)少的優(yōu)點(diǎn)，使用包括植物化學(xué)物質(zhì)在內(nèi)的天然產(chǎn)品是一種潛在且有用的癌癥治療方法[1-2]。地榆藥材為薔薇科植物地榆SanguisorbaofficinalisL.或長(zhǎng)葉地榆S.officinalisL. var.longifolia(Bert.) Yu et Li 的干燥根，是一種常見的草本植物，廣泛分布于我國(guó)和其他亞洲國(guó)家，具有多種藥用價(jià)值，地榆中含有多種皂苷類化合物，主要包括地榆皂苷I、II，其中以地榆皂苷I 含量最高，具有較強(qiáng)的抗氧化、抗炎、抗腫瘤活性，應(yīng)用前景廣闊[3]。研究報(bào)道，地榆皂苷II 可誘導(dǎo)人結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡[4]；地榆皂苷II 可抑制三陰性乳腺癌細(xì)胞的遷移和侵襲[5]；地榆皂苷I 可通過(guò)激活線粒體通路抑制人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞生長(zhǎng)[6]，但其對(duì)卵巢癌細(xì)胞腫瘤特性的影響尚不清楚。

miR-138-5p在卵巢癌組織和細(xì)胞中下調(diào)表達(dá)，miR-138-5p上調(diào)可抑制卵巢癌進(jìn)展，且其受lncRNATRPM2-AS調(diào)控[7]。IGFL2-AS1表達(dá)下調(diào)限制胃癌細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移[8]。生物學(xué)軟件預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)miR-138-5p與IGFL2-AS1有結(jié)合位點(diǎn)。而IGFL2-AS1對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖、侵襲遷移的影響及其與miR-138-5p的關(guān)系也尚未可知。本研究旨在探討地榆皂苷I 對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖、侵襲遷移的影響是否涉及IGFL2-AS1和miR-138-5p。

1 材料

1.1 細(xì)胞

人卵巢癌A2780細(xì)胞購(gòu)自上海雅吉生物科技有限公司。

1.2 藥品與試劑

地榆皂苷I（質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%，批號(hào)35286-58-9）購(gòu)自四川精萃天成藥物科技有限公司；RPMI 1640 培養(yǎng)基（批號(hào)R101）、E-鈣黏蛋白（E-cadherin，批號(hào)147301）一抗、N-鈣黏蛋白（N-cadherin，批號(hào)350802）一抗、磷酸緩沖鹽溶液（批號(hào)CC0005）購(gòu)自上海雅吉生物科技有限公司；MTT 試劑盒（批號(hào)OX01472）、pcDNA3.1（＋）載體（批號(hào)MZ0157）購(gòu)自上海圻明生物科技有限公司；帶有基質(zhì)膠的Transwell 小室（批號(hào)3407）購(gòu)自美國(guó)Corning 公司；胎牛血清（批號(hào)AB20180244D）購(gòu)自上海諾娃醫(yī)藥科技有限公司；胰蛋白酶（批號(hào)T8150）、二抗（批號(hào)SE131、SE134）、qRT-PCR 試劑（批號(hào)SR1111）雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒（批號(hào)D0011）、RIPA 裂解液（批號(hào)R0010）、Trizol 試劑（批號(hào)15596018）吉姆薩（批號(hào)51811-82-6）購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司。

1.3 儀器

CKX53 型倒置顯微鏡（日本Olympus 公司）；TG16 型離心機(jī)（上海盧湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器有限公司）；Synergy H1 型酶標(biāo)儀（美國(guó)伯騰公司）；XCell4 SureLock 型電泳儀（美國(guó)Thermo Fisher Scientific 公司）；IQ5 型qRT-PCR 儀（美國(guó)Bio-Rad 公司）。

2 方法

2.1 MTT 檢測(cè)細(xì)胞增殖

A2780 細(xì)胞用RPMI 1640 培養(yǎng)，收集處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞并調(diào)整密度，以3×103個(gè)/孔接種于96 孔板，分別加入不同濃度（7.5、15.0、30.0 μmol/L）的地榆皂苷I，另設(shè)置不含藥物的對(duì)照組，培養(yǎng)至鋪滿孔底，每孔加入MTT 溶液20 μL，培養(yǎng)4 h，小心吸去培養(yǎng)液，加入二甲基亞砜，采用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度（A）值，計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率。

細(xì)胞增殖抑制率＝1－A實(shí)驗(yàn)/A對(duì)照

2.2 克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞克隆形成

將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A2780細(xì)胞重懸成細(xì)胞懸液，以500～700 個(gè)/孔接種于6 孔板，分別加入不同濃度（7.5、15.0、30.0 μmol/L）的地榆皂苷I，另設(shè)置不含藥物的對(duì)照組，培養(yǎng)直至出現(xiàn)肉眼可見克隆，甲醇固定，吉姆薩染色，磷酸緩沖液洗滌細(xì)胞并晾干，計(jì)數(shù)＞50 個(gè)細(xì)胞的集落。

2.3 Transwell 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲能力

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A2780 細(xì)胞，用無(wú)血清培養(yǎng)液稀釋，調(diào)整細(xì)胞密度，接種至Transwell 小室上層，用鑷子將小室置于培養(yǎng)板內(nèi)，分別加入不同濃度（7.5、15.0、30.0 μmol/L）的地榆皂苷I，另設(shè)置不含藥物的對(duì)照組，培養(yǎng)24 h，甲醇固定，結(jié)晶紫染色，用磷酸緩沖液除去沒有結(jié)合的結(jié)晶紫，并用棉簽輕輕擦掉上層細(xì)胞，顯微鏡下隨機(jī)觀察并記數(shù)遷移細(xì)胞數(shù)。用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋Matrigel 膠，并涂于上室的聚碳酸酯膜表面，其余步驟同遷移實(shí)驗(yàn)，分析細(xì)胞侵襲能力。

2.4 Western blotting 檢測(cè) E-cadherin 和 Ncadherin 蛋白表達(dá)

將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A2780細(xì)胞重懸成細(xì)胞懸液，以2×105個(gè)/孔接種于6 孔板，分別加入不同濃度（7.5、15.0、30.0 μmol/L）的地榆皂苷I，另設(shè)置不含藥物的對(duì)照組，培養(yǎng)24 h。用細(xì)胞刮刮下各組細(xì)胞，加入RIPA 裂解液提取蛋白，蛋白樣品經(jīng)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳，轉(zhuǎn)至PVDF膜，于封閉液中緩慢搖蕩1 h，分別加入E-cadherin、N-cadherin 一抗后孵育過(guò)夜；加入二抗室溫孵育，滴加化學(xué)發(fā)光液顯影。

2.5 qRT-PCR 檢測(cè)IGFL2-AS1 和miR-138-5p 的表達(dá)

將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A2780細(xì)胞重懸成細(xì)胞懸液，以2×105個(gè)/孔接種于6 孔板，分別加入不同濃度（7.5、15.0、30.0 μmol/L）的地榆皂苷I，另設(shè)置不含藥物的對(duì)照組，培養(yǎng)24 h。收集細(xì)胞，加入Trizol試劑提取RNA，測(cè)定RNA 濃度和純度后加入逆轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA，進(jìn)行qRT-PCR 分析，用2-ΔΔCt法計(jì)算相對(duì)表達(dá)量。以GAPDH和U6為內(nèi)參，引物序列見表1。

表1 引物序列Table 1 Primer sequences

2.6 細(xì)胞轉(zhuǎn)染

將IGFL2-AS1 干擾表達(dá)載體及陰性對(duì)照轉(zhuǎn)染至A2780 細(xì)胞，記為si-NC 組、si-IGFL2-AS1 組；將IGFL2-AS1過(guò)表達(dá)載體及陰性對(duì)照轉(zhuǎn)染至A2780細(xì)胞，然后用30 μmol/L 的地榆皂苷I 處理，記為地榆皂苷I＋pcDNA-IGFL2-AS1 組、地榆皂苷I＋pcDNA 組。分別檢測(cè)細(xì)胞活性、增殖、遷移、侵襲、IGFL2-AS1、miR-138-5pmRNA 表達(dá)和E-cadherin、N-cadherin 蛋白表達(dá)。

2.7 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)

設(shè)置miR-138-5p 與MUT-IGFL2-AS1 組、miR-138-5p 與WT-IGFL2-AS1 組、miR-NC 與MUTIGFL2-AS1 組以及miR-NC 與WT-IGFL2-AS1 組。用轉(zhuǎn)染試劑依據(jù)分組情況將載體轉(zhuǎn)染A2780 細(xì)胞中，按照說(shuō)明書分析熒光素酶活性。

2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，本研究相關(guān)數(shù)據(jù)均為計(jì)量資料，且符合正態(tài)分布，用±s表示，兩組比較行t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析。

3 結(jié)果

3.1 地榆皂苷I 對(duì)A2780 細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和E-cadherin、N-cadherin 蛋白表達(dá)的影響

如圖1 和表2 所示，不同濃度的榆皂苷I 處理A2780 細(xì)胞后，細(xì)胞增殖抑制率和E-cadherin 蛋白表達(dá)水平均顯著升高（P＜0.05），克隆形成數(shù)、遷移細(xì)胞數(shù)、侵襲細(xì)胞數(shù)和N-cadherin 蛋白表達(dá)水平均顯著降低（P＜0.05），呈劑量相關(guān)性。

圖1 地榆皂苷I 對(duì)A2780 細(xì)胞克隆形成、遷移和侵襲以及E-cadherin、N-cadherin 蛋白表達(dá)的影響Fig. 1 Effect of ziyuglycoside I on colony formation, migration, invasion and E-cadherin, N-cadherin protein expressions in A2780 cells

表2 地榆皂苷I 抑制A2780 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲 (±s, n = 9)Table 2 Inhibit of proliferation, migration and invasion of A2780 cells by ziyuglycoside I (±s, n = 9)

表2 地榆皂苷I 抑制A2780 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲 (±s, n = 9)Table 2 Inhibit of proliferation, migration and invasion of A2780 cells by ziyuglycoside I (±s, n = 9)

與對(duì)照組比較：*P＜0.05；與地榆皂苷I（7.5 μmol·L-1）組比較：#P＜0.05；與地榆皂苷I（15.0 μmol·L-1）組比較：&P＜0.05，表3 同。*P ＜ 0.05 vs control group; #P ＜ 0.05 vs ziyuglycoside I (7.5 μmol·L-1) group; &P ＜ 0.05 vs ziyuglycoside I (15.0 μmol·L-1) group, same as table 3.

組別 劑量/(μmol·L-1) 抑制率/% 克隆形成數(shù)/個(gè) 細(xì)胞數(shù)/個(gè) 蛋白相對(duì)表達(dá)量遷移 侵襲 E-cadherin N-cadherin對(duì)照 — 0.00±0.00 115.22±5.61 168.44±8.00 135.33±6.09 0.15±0.01 0.65±0.05地榆皂苷I 7.5 18.31±1.12* 92.56±4.14* 136.56±4.25* 103.89±5.66* 0.29±0.04* 0.50±0.04*15.0 31.92±1.66*# 71.00±4.42*# 92.22±4.68*# 81.89±4.28*# 0.48±0.04*# 0.34±0.03*#30.0 55.81±1.99*#& 52.33±2.31*#& 68.22±3.97*#& 57.67±3.92*#& 0.71±0.06*#& 0.15±0.01*#&

3.2 地榆皂苷I 對(duì)A2780 細(xì)胞IGFL2-AS1 和miR-138-5p mRNA 表達(dá)的影響

如表3 所示，與對(duì)照組比較，地榆皂苷I 顯著抑制A2780 細(xì)胞IGFL2-AS1mRNA 表達(dá)（P＜0.05），促進(jìn)miR-138-5pmRNA 表達(dá)（P＜0.05），呈劑量相關(guān)性。

表3 地榆皂苷I 對(duì)A2780 細(xì)胞IGFL2-AS1 和miR-138-5p mRNA 表達(dá)的影響 (±s, n = 9)Table 3 Effect of ziyuglycoside I on IGFL2-AS1 and miR-138-5p mRNA expressions in A2780 cells (±s, n = 9)

表3 地榆皂苷I 對(duì)A2780 細(xì)胞IGFL2-AS1 和miR-138-5p mRNA 表達(dá)的影響 (±s, n = 9)Table 3 Effect of ziyuglycoside I on IGFL2-AS1 and miR-138-5p mRNA expressions in A2780 cells (±s, n = 9)

組別 劑量/(μmol·L-1) mRNA 相對(duì)表達(dá)量IGFL2-AS1 miR-138-5p對(duì)照 — 1.00±0.00 1.00±0.00地榆皂苷I 7.5 0.75±0.04* 1.59±0.09*15.0 0.51±0.05*# 2.16±0.13*#30.0 0.25±0.03*#& 3.01±0.16*#&

3.3 IGFL2-AS1 轉(zhuǎn)染效率的檢測(cè)

如表4 所示，與si-NC 組比較，si-IGFL2-AS1組IGFL2-AS1mRNA 表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05）；與pcDNA 組比較，pcDNA-IGFL2-AS1 組IGFL2-AS1mRNA 表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05）。

表4 各組IGFL2-AS1 mRNA 表達(dá) (±s, n = 9)Table 4 IGFL2-AS1 mRNA expression in each group(±s, n = 9)

表4 各組IGFL2-AS1 mRNA 表達(dá) (±s, n = 9)Table 4 IGFL2-AS1 mRNA expression in each group(±s, n = 9)

與si-NC 組比較：*P＜0.05；與pcDNA 組比較：#P＜0.05。*P ＜ 0.05 vs si-NC group; #P ＜ 0.05 vs pcDNA group.

組別 IGFL2-AS1 mRNA 相對(duì)表達(dá)量si-NC 1.00±0.00 si-IGFL2-AS1 0.34±0.03*pcDNA 1.00±0.00 pcDNA-IGFL2-AS1 3.21±0.06#

3.4 下調(diào)IGFL2-AS1 對(duì)A2780 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響

如圖2 和表5 所示，IGFL2-AS1表達(dá)下調(diào)顯著增加miR-138-5p表達(dá)、增殖抑制率以及E-cadherin蛋白表達(dá)（P＜0.05），但減少克隆形成數(shù)、遷移細(xì)胞數(shù)、侵襲細(xì)胞數(shù)和N-cadherin 蛋白表達(dá)（P＜0.05）。

圖2 下調(diào)IGFL2-AS1 對(duì)A2780 細(xì)胞克隆形成、遷移和侵襲以及E-cadherin、N-cadherin 蛋白表達(dá)的影響Fig. 2 Effect of down-regulation of IGFL2-AS1 on colony formation, migration, invasion and E-cadherin, N-cadherin protein expressions in A2780 cells

表5 下調(diào)IGFL2-AS1 抑制A2780 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲 (±s, n = 9)Table 5 Down-regulation of IGFL2-AS1 inhibits proliferation, migration and invasion of A2780 cells (±s, n = 9)

表5 下調(diào)IGFL2-AS1 抑制A2780 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲 (±s, n = 9)Table 5 Down-regulation of IGFL2-AS1 inhibits proliferation, migration and invasion of A2780 cells (±s, n = 9)

與si-NC 組比較：*P＜0.05。*P ＜ 0.05 vs si-NC group.

組別 miR-138-5p mRNA相對(duì)表達(dá)量 抑制率/% 克隆形成數(shù)/個(gè) 細(xì)胞數(shù)/個(gè) 蛋白相對(duì)表達(dá)量遷移 侵襲 E-cadherin N-cadherin si-NC 1.00±0.00 0.00±0.00 114.33±6.31 165.67±4.85 136.44±7.79 0.16±0.01 0.66±0.05 si-IGFL2-AS1 2.62±0.09* 46.51±2.59* 61.44±2.71* 78.67±4.71* 67.22±2.97* 0.59±0.05* 0.24±0.02*

3.5 IGFL2-AS1 和miR-138-5p 的靶向關(guān)系

Starbase 在線軟件預(yù)測(cè)顯示IGFL2-AS1和miR-138-5p有互補(bǔ)序列（圖3）。如表6 所示，miR-138-5p與WT-IGFL2-AS1 共轉(zhuǎn)染后細(xì)胞熒光素酶活性降低，而miR-138-5p 與MUT-IGFL2-AS1 共轉(zhuǎn)染后細(xì)胞熒光素酶活性無(wú)顯著變化。

表6 熒光素酶活性分析 (±s, n = 9)Table 6 Analysis of luciferase activity (±s, n = 9)

表6 熒光素酶活性分析 (±s, n = 9)Table 6 Analysis of luciferase activity (±s, n = 9)

與miR-NC 組比較：*P＜0.05。*P ＜ 0.05 vs miR-NC group.

組別 熒光素酶活性WT-IGFL2-AS1 MUT-IGFL2-AS1 miR-NC 0.95±0.06 1.00±0.09 miR-138-5p 0.38±0.04* 1.02±0.12

3.6 過(guò)表達(dá)IGFL2-AS1對(duì)地榆皂苷I處理的A2780細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響

如圖4 和表7 所示，與地榆皂苷I＋pcDNA 組比較，地榆皂苷I＋pcDNA-IGFL2-AS1 組miR-138-5pmRNA 表達(dá)、增殖抑制率和E-cadherin 蛋白表達(dá)水平均顯著降低（P＜0.05），克隆形成數(shù)、遷移細(xì)胞數(shù)、侵襲細(xì)胞數(shù)和N-cadherin 蛋白表達(dá)水平均顯著升高（P＜0.05）。

圖4 過(guò)表達(dá)IGFL2-AS1 對(duì)地榆皂苷I 處理的A2780 細(xì)胞克隆形成、遷移和侵襲以及E-cadherin、N-cadherin 蛋白表達(dá)的影響Fig. 4 Effect of overexpression of IGFL2-AS1 on colony formation, migration, invasion and E-cadherin, N-cadherin protein expressions in A2780 cells treated with ziyuglycoside I

表7 過(guò)表達(dá)IGFL2-AS1 對(duì)地榆皂苷I 處理的A2780 增殖、遷移和侵襲的作用 (±s, n = 9)Table 7 Effect of overexpression of IGFL2-AS1 on proliferation, migration and invasion of A2780 cells treated with ziyuglycoside I (±s, n = 9)

表7 過(guò)表達(dá)IGFL2-AS1 對(duì)地榆皂苷I 處理的A2780 增殖、遷移和侵襲的作用 (±s, n = 9)Table 7 Effect of overexpression of IGFL2-AS1 on proliferation, migration and invasion of A2780 cells treated with ziyuglycoside I (±s, n = 9)

與地榆皂苷I＋pcDNA 組比較：*P＜0.05。*P ＜ 0.05 vs ziyuglycoside I + pcDNA group.

組別 劑量/(μmol·L-1)miR-138-5p mRNA相對(duì)表達(dá)量 抑制率/% 克隆形成數(shù)/個(gè)細(xì)胞數(shù)/個(gè) 蛋白相對(duì)表達(dá)量遷移 侵襲 E-cadherin N-cadherin地榆皂苷I＋pcDNA 30 1.00±0.00 55.99±2.20 52.22±3.52 70.22±4.13 58.33±3.92 0.69±0.04 0.15±0.02地榆皂苷I＋pcDNAIGFL2-AS1 30 0.37±0.04* 21.21±1.67* 85.22±4.41* 121.22±5.09* 90.33±5.23* 0.35±0.03* 0.43±0.03*

4 討論

中藥抗腫瘤有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，能改善患者生活質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期，或能夠?yàn)槁殉舶┑木S持治療提供新的思路[9-10]。因此，開發(fā)可用于防治卵巢癌的中藥及有效成分有助于卵巢癌的治療。研究報(bào)道，地榆皂苷II 可抑制肝癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[11]；地榆皂苷II 可抑制人舌鱗癌CAL27 細(xì)胞的增殖[12]；地榆皂苷I 通過(guò)誘導(dǎo)p53 介導(dǎo)的G2/M 細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡，抑制乳腺癌MDA-MB-231 細(xì)胞的增殖[13]；地榆皂苷I 可以抑制細(xì)胞活力并誘導(dǎo)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤WERI-Rb-1 細(xì)胞的凋亡[14]。本研究結(jié)果顯示，地榆皂苷I 處理A2780 細(xì)胞后，細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力減弱，E-cadherin 和miR-138-5p表達(dá)上調(diào)，N-cadherin 和IGFL2-AS1表達(dá)下調(diào)，呈劑量相關(guān)性；表明地榆皂苷I 抑制A2780 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲。然而，尚未知地榆皂苷I 在卵巢癌的分子機(jī)制。

lncRNAIGFL2-AS1可以通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miRNA 來(lái)解除靶下游靶點(diǎn)的表達(dá)抑制，進(jìn)而調(diào)控人類腫瘤的進(jìn)展。研究報(bào)道，IGFL2-AS1在結(jié)直腸癌細(xì)胞和組織中顯著上調(diào)，敲低IGFL2-AS1抑制了舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲通過(guò)靶向調(diào)控miR-433-3p的表達(dá)[15]。同時(shí)，過(guò)表達(dá)的IGFL2-AS1可以促進(jìn)胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-802調(diào)控環(huán)磷酸腺苷調(diào)節(jié)的磷酸蛋白19（cyclic adenosine monophosphate-regulated phosphoprotein 19，ARPP19）[8]。本研究結(jié)果表明IGFL2-AS1沉默可抑制A2780 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲。此外，通過(guò)Starbase 預(yù)測(cè)網(wǎng)站發(fā)現(xiàn)，miR-138-5p在IGFL2-AS1上存在結(jié)合位點(diǎn)，隨后，本研究證實(shí)miR-138-5p是IGFL2-AS1的靶基因。此外，一些研究表明miR-138-5p在人類多種癌癥中發(fā)揮抑癌作用。過(guò)表達(dá)miR-138-5p可通過(guò)靶向細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶6（cyclin-dependent kinase 6，CDK6）使抗性上皮性卵巢癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇敏感[16]。同時(shí)，研究報(bào)道敲除lncRNA HOTAIR 可以通過(guò)抑制miR-138-5p調(diào)控的zeste 增強(qiáng)子同源物2（enhancer of zeste homolog 2，EZH2）和沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silent information regulator factor 1，SIRT1）逆轉(zhuǎn)卵巢癌細(xì)胞的順鉑耐藥[17]。本研究發(fā)現(xiàn)IGFL2-AS1靶向調(diào)控miR-138-5p。提示IGFL2-AS1可能通過(guò)調(diào)控miR-138-5p影響卵巢癌進(jìn)展。

本研究用不同濃度的地榆皂苷I 處理A2780 細(xì)胞后，IGFL2-AS1表達(dá)水平降低，miR-138-5p表達(dá)水平逐漸升高，表明地榆皂苷I 可調(diào)控IGFL2-AS1和miR-138-5p的表達(dá)。且本研究還發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)IGFL2-AS1可減弱地榆皂苷I 對(duì)A2780 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的作用。綜上，地榆皂苷I 可通過(guò)抑制IGFL2-AS1的表達(dá)來(lái)促進(jìn)miR-138-5p產(chǎn)生，進(jìn)而抑制卵巢癌細(xì)胞腫瘤特性。提示IGFL2-AS1可能是卵巢癌的潛在治療靶點(diǎn)。但本研究?jī)H限于體外實(shí)驗(yàn)，其在體內(nèi)的作用還有待進(jìn)一步研究。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突