劉昱成,王晶晶,楊 楊,王福泉,萬(wàn)鵬程*,石國(guó)慶*

(1.新疆農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,新疆 石河子 832000;2.省部共建綿羊遺傳改良與健康養(yǎng)殖國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆 石河子 832000;3.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第七師124團(tuán),新疆 石河子 833011)

當(dāng)前綿羊業(yè)發(fā)展總趨勢(shì)是從單一型的毛用或肉用型生產(chǎn)向肉毛兼用的兩元生產(chǎn)轉(zhuǎn)變,由粗放的管理模式向經(jīng)濟(jì)效益型模式發(fā)展[1]。提高綿羊的繁育率可大大提高養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第七師124團(tuán)1998年引進(jìn)了南非肉用美利奴羊,20多年來(lái)始終把加快純種繁育速度和規(guī)?；驁?chǎng)的品種改良速度作為提高養(yǎng)羊生產(chǎn)效率和經(jīng)濟(jì)效益的重要措施。1998年建成了規(guī)?；B(yǎng)羊場(chǎng),受自然環(huán)境的影響變小;建立胚胎移植車間,有利于肉用品質(zhì)資源的利用和高效繁育配套技術(shù)的實(shí)施。

1998年引入肉毛兼用南非肉用美利奴羊羅米尼·希爾斯胚胎后,兵團(tuán)和種羊場(chǎng)共同組成胚胎移植技術(shù)小組,把胚胎移植作為加快優(yōu)質(zhì)細(xì)毛羊發(fā)展的重要技術(shù)措施,在124團(tuán)養(yǎng)羊場(chǎng)推廣應(yīng)用。2002年124團(tuán)種羊場(chǎng)被定為中國(guó)工程院院士劉守仁肉用美利奴羊選育基地,利用院士團(tuán)隊(duì)的技術(shù)優(yōu)勢(shì),加快了胚胎移植工作的深入開(kāi)展。

羅米尼·希爾斯肉用美利奴羊以其優(yōu)良的肉品質(zhì)引起了有關(guān)部門和專業(yè)人員的重視,2002年出售35只種公羊,平均銷售價(jià)格1.3萬(wàn)元/只,最高價(jià)格2.5萬(wàn)元/只。2003年銷售種公羊39只。2004年銷售種公羊43只。2005年3—5月銷售種羊76只,三代級(jí)進(jìn)雜交種公羊260只,銷往全疆及吉林省等地。經(jīng)了解種羊售后,引進(jìn)后對(duì)當(dāng)?shù)厝庋蚋牧计鸬搅朔e極推動(dòng)作用,得到當(dāng)?shù)匦竽翆I(yè)人員的高度評(píng)價(jià)。每年可向社會(huì)提供純種公羊70余只,三代雜交公羊1 500只以上。

文章通過(guò)不同繁殖技術(shù)的對(duì)比,討論胚胎移植技術(shù)與兩年三胎繁殖技術(shù)對(duì)綿羊群體的影響,對(duì)于羊場(chǎng)持續(xù)開(kāi)展肉羊的雜交改良具有一定的意義。

1 胚胎移植技術(shù)

胚胎移植技術(shù)是加快純種繁育的重要措施[2],1999—2022年該技術(shù)在24團(tuán)得到了廣泛的應(yīng)用。

1.1 主要試劑

卵泡素(FSH,規(guī)格為1 000單位),購(gòu)自寧波第二激素廠;孕馬血清促性腺激素(PMSG,規(guī)格為1 000 單位),購(gòu)自寧波市三生藥業(yè)有限公司。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及分組

試驗(yàn)羊選擇124團(tuán)種羊場(chǎng)符合品種標(biāo)準(zhǔn)、具有較高生產(chǎn)性能和遺傳育種價(jià)值的羅米尼·希爾斯細(xì)毛羊純種母羊90只。母羊均為產(chǎn)后第一胎,體格健壯,無(wú)遺傳性疾病及傳染病。供體母羊在采卵前適量運(yùn)動(dòng)和給予品質(zhì)好的飼草料,并補(bǔ)充維生素和礦物質(zhì),合理飼養(yǎng),精心管理,使其采卵前保持良好的體況,配種前達(dá)到中等以上體膘。

1.3 母羊的超數(shù)排卵

超排方案見(jiàn)表1。

表1 超排方案

超數(shù)排卵及沖胚順序如下:

1)在自然發(fā)情和誘導(dǎo)發(fā)情的情期第12～13 d進(jìn)行超數(shù)排卵。

2)對(duì)母羊進(jìn)行試情、配種。

3)配種后66～72 h進(jìn)行手術(shù)沖卵,從輸卵管回收胚胎。

4)按胚胎移植技術(shù)要求進(jìn)行胚胎鑒定分級(jí)、撿胚并進(jìn)行胚胎移植。

1.4 手術(shù)沖卵技術(shù)步驟

1)手術(shù)沖卵前母羊空腹24 h,限制飲水。

2)將母羊側(cè)臥或仰臥保定,肌肉注射靜松靈0.03～0.05 mg/kg,手術(shù)部位在乳房前端2 cm處腹中線的兩側(cè)均可。

3)手術(shù)部位剃毛,剃毛范圍約20 cm × 20 cm。用肥皂水清洗手術(shù)部位,用手術(shù)刀剃盡毛茬,再用清水洗凈。

4)用0.1%新潔爾滅清洗手術(shù)部位,再用2%～4%碘酊棉球?qū)κ中g(shù)部位由里向外消毒、晾干,最后用75%乙醇棉球脫碘、晾干。

5)避開(kāi)血管,用手術(shù)刀將手術(shù)部縱切6～8 cm長(zhǎng)的刀口,將皮下結(jié)締組織分離,暴露肌膜。用手術(shù)刀將肌膜輕輕切開(kāi),暴露肌層,再用刀柄將肌肉和肌膜鈍形切開(kāi)。

6)在骨盆腔、膀胱周圍觸摸子宮角,并將子宮角引出切口外,記錄卵巢黃體和卵泡數(shù)。

7)輸卵管沖胚。在超數(shù)排卵母羊發(fā)情后66～72 h從輸卵管采集2～8個(gè)細(xì)胞進(jìn)行鮮胚胎移植[3]。用6～8#針頭從子宮輸卵管結(jié)合部位的子宮端導(dǎo)入輸卵管峽部,將喇叭口導(dǎo)卵管插入3～4 cm,導(dǎo)卵管遠(yuǎn)端插入Φ120 mm表面皿中;助手事先用10 mL注射器抽取5～8 mL沖卵液,與頭皮針連接,把沖卵液緩緩?fù)迫?胚胎即通過(guò)母羊輸卵管回收到表面皿中。另一側(cè)輸卵管操作同上。

8)母羊沖胚完畢,采用三層縫合法,即腹膜肌肉連續(xù)縫合、皮膚結(jié)節(jié)縫合,針腳距1 cm,在肌肉與皮膚之間涂抹適量的獸用青霉素-鏈霉素粉劑,以防創(chuàng)口感染。手術(shù)后母羊觀察24 h。

1.5 胚胎分級(jí)

將盛有沖卵液的120 mm直徑表面皿放在體式顯微鏡下進(jìn)行胚胎檢查,不可遺漏[4]。

1.6 輸卵管輸胚優(yōu)勢(shì)

1)與子宮角輸胚相比,減少了輸胚、沖胚技術(shù)費(fèi)用(不必使用內(nèi)窺鏡、沖胚制劑)。

2)輸卵管輸胚操作方法簡(jiǎn)便,手術(shù)程序簡(jiǎn)單易學(xué),易推廣。

3)輸卵管輸胚成功率高。

4)采用輸卵管輸胚方式,不論供體、受體母羊均可以連續(xù)利用。經(jīng)過(guò)兩年的實(shí)踐證明,沒(méi)有發(fā)現(xiàn)輸卵管粘連現(xiàn)象。

5)采用輸卵管輸胚方式不論供體、受體母羊,手術(shù)后間隔兩個(gè)發(fā)情期均可以配種,不影響當(dāng)年配種產(chǎn)羔。

1.7 效 果

經(jīng)過(guò)20年的實(shí)踐,在2022年受體母羊的受孕率為65.5%。集約化羊場(chǎng)現(xiàn)有大小羊只4 800余只,產(chǎn)羔高峰可達(dá)8 500余只。共可改良18萬(wàn)只。已獲得了可觀的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

2 兩年三胎繁殖技術(shù)

在2020年4月非繁殖季節(jié)埋植孕酮陰道釋放裝置[5-6],利用發(fā)情調(diào)控技術(shù)實(shí)行母羊兩年三胎。

2.1 主要試劑

孕激素陰道栓(CIDR),寧波第二激素廠產(chǎn)品;PMSG(規(guī)格1 000 單位),購(gòu)自寧波三生醫(yī)藥工業(yè)公司。

2.2 哺乳母羊的選擇

2020年2月,挑選中上等膘情哺乳母羊90只,于3月5日母羊哺乳1個(gè)半月后對(duì)羔羊?qū)嵭袕?qiáng)制斷奶。

2.3 埋植CIDR裝置

將斷奶后的母羊同時(shí)埋植CIDR裝置。埋植第14天下午撤栓,同時(shí)肌注孕馬血清促性腺激素(PMSG),成年母羊400～500 IU,當(dāng)年母羊300～330 IU。

具體操作程序如下:

1)3月12日90只母羊均埋植CIDR裝置。

2)3月26日撤栓,同時(shí)肌注PMSG。

2.4 種公羊的處理

種公羊提前10 d連續(xù)采精,去除陳精。每天運(yùn)動(dòng)時(shí)間不少于8 h,同時(shí)加強(qiáng)公羊的營(yíng)養(yǎng)。

2.5 發(fā)情檢查

母羊撤栓后24 h開(kāi)始用公羊試情,接受試情公羊爬跨即為發(fā)情。挑出發(fā)情母羊進(jìn)行人工授精。

2.6 精液處理

采精后,先在顯微鏡下檢查精液活力,精液與稀釋液的稀釋比例宜為1∶3～1∶4。

2.7 人工授精

觀察到母羊發(fā)情后,對(duì)發(fā)情母羊于當(dāng)日20:00、次日08:00、20:00各輸精一次,每次人工輸精0.2 mL/只。人工授精2個(gè)情期,每個(gè)情期每只發(fā)情母羊各輸精3次。第2個(gè)情期操作步驟同第一個(gè)情期。

2.8 結(jié)果與分析

2020年3月27日—4月29日試情配種結(jié)果,母羊共發(fā)情配種88只。哺乳母羊90只中第一情期第一階段發(fā)情76只,占總數(shù)的84.4%;第一情期第二階段發(fā)情12只,占總數(shù)的13.3%。發(fā)情情況見(jiàn)表2、表3。

表2 母羊第一情期第一階段發(fā)情羊數(shù)

表3 母羊第一情期第二階段發(fā)情羊數(shù)

2020年11月,第二情期發(fā)情調(diào)控措施與3月份相同。哺乳母羊90只,11月27日—12月15日母羊發(fā)情40只,占總數(shù)的44.4%。見(jiàn)表4。

表4 母羊第二情期發(fā)情羊數(shù)

經(jīng)過(guò)兩年三胎試驗(yàn),90只母羊在第一情期第一階段產(chǎn)羔99只,第二階段產(chǎn)羔50只,第二情期產(chǎn)羔31只。處理后未發(fā)情的母羊在第2年繁殖季節(jié)發(fā)情配種產(chǎn)下羔羊48只,90只母羊兩年三胎累計(jì)產(chǎn)羔228只,繁育率為253.3%。

3 小 結(jié)

近20年來(lái),124團(tuán)技術(shù)人員在新疆農(nóng)墾科學(xué)院和石河子大學(xué)的專家指導(dǎo)下,進(jìn)行了肉用綿羊種質(zhì)資源利用和高效繁育技術(shù)研究嘗試。通過(guò)胚胎移植技術(shù)的推廣和應(yīng)用,加快了純種繁育的速度,最大限度提高了肉用綿羊種質(zhì)資源的利用率[7];通過(guò)兩年三胎和綿羊早期配種產(chǎn)羔的研究,充分應(yīng)用高效的繁育配套技術(shù),加快了該團(tuán)種羊場(chǎng)品種改良的速度,轉(zhuǎn)變了傳統(tǒng)的單一的毛用或肉用型生產(chǎn)為肉毛兼用型并重的兩元化生產(chǎn)。在這一結(jié)構(gòu)調(diào)整過(guò)程中,高效繁育配套技術(shù)發(fā)揮了積極的作用。