胡敏伶，任江劍，王志安*

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

*王志安，Tel：(0571)85229946，E-mail：wangshou@mail.hz.zj.cn

采收期和加工方法對杭白芍中芍藥苷含量的影響

胡敏伶1，2，任江劍2，王志安2*

(1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，浙江 杭州 310053；2.浙江省中藥研究所，浙江 杭州 310023)

目的通過比較不同采收期和不同加工方法對杭白芍中芍藥苷含量的影響，確定合理的采收期和加工方法。方法以芍藥苷含量為指標(biāo)，采用HPLC法，測定不同采收期和不同加工方法杭白芍藥材中芍藥苷的含量。結(jié)果以8月10日采收的杭白芍中芍藥苷含量為最高，達(dá)到3.43%；加工方法以先去皮后水煮(5min)含量為最高，達(dá)到3.43%。結(jié)論以芍藥苷含量為主要評價(jià)指標(biāo)，杭白芍在8月10日左右采收比較合理，加工方法采用去皮水煮(5min)后生曬比較合理。

杭白芍；芍藥苷；采收期；加工方法

白芍是毛茛科植物芍藥PaeonialactifloraPall.的干燥根，主產(chǎn)于浙江東陽、磐安(杭白芍)及安徽亳縣(亳白芍)，具有平肝止痛，養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，斂陰止汗的功能，用于頭痛眩暈，脅痛，腹痛，四肢攣痛，血虛萎黃，月經(jīng)不調(diào)，自汗，盜汗[1]。芍藥苷為白芍的主要有效成分之一，具吸濕性，有鎮(zhèn)靜、解痙、抗炎、抗應(yīng)激性潰瘍等多方面的作用[2]。杭白芍是著名的“浙八味”之一，杭白芍藥材種植中，采收時(shí)間和加工方法對杭白芍藥材中芍藥苷含量的影響比較大。根據(jù)文獻(xiàn)[3]報(bào)道，不同炮制方法對芍藥苷含量有較大影響；不同采收期也會(huì)影響白芍中芍藥苷含量[4]。本文主要研究了杭白芍處于采收期時(shí)不同采收時(shí)間和不同加工方法對芍藥苷含量的影響，為杭白芍GAP生產(chǎn)過程中提高和控制藥材質(zhì)量提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

Agilent1100系列高效液相色譜儀及agilent化學(xué)工作站，DAD檢測儀器。KQ-100DB型數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司，功率100W，頻率40kHz)。

芍藥苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)110736-200423)。杭白芍藥材(浙江東陽三聯(lián)杭白芍種植協(xié)會(huì)提供)，經(jīng)浙江省中藥研究所俞旭平高級工程師鑒定為芍藥PaeonialactifloraPall.的根。甲醇、乙腈為色譜純，乙醇、磷酸為分析純，水為重蒸餾去離子水。

2 方法

2.1不同采收期及不同加工方法

2.1.1不同采收期試驗(yàn) 在同一種植地塊分別于2008年7月10日、7月30日、8月10日和8月30日4個(gè)時(shí)期采收，每次采收5穴，采收后采用先去皮后沸水煮(5min)生曬的方法進(jìn)行加工。

2.1.2不同加工方法試驗(yàn) 分為先沸水煮(5min)后去皮生曬、先去皮后沸水煮(5min)生曬、先去皮后蒸制(7min)生曬和生曬4種方法。采用同一品種、同一采收時(shí)間及直徑在1.5cm左右的鮮采芍藥進(jìn)行加工炮制。

2.1.2.1先沸水煮后去皮 采收新鮮杭白芍后，洗凈，置沸水中煮至透心(大約5min)，取出，放入裝有沙子的蛇皮袋中蹭去表皮。

2.1.2.2先去皮后水煮 取新鮮杭白芍，按上述方法蹭去表皮后再置沸水中煮至透心(大約5min)。

2.1.2.3去皮后空蒸 取新鮮杭白芍，按上述方法去皮，然后蒸至透心(大約7min)。

2.1.2.4生曬 取新鮮杭白芍，洗凈，曬干即可。

2.2色譜條件

色譜柱：鉆石C18(250mm×4.6mm，5μm)，迪馬公司生產(chǎn)；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液(18∶82)；流速：1.0mL·min-1；檢測波長：230nm，柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL，理論塔板數(shù)按芍藥苷計(jì)算不低于2000。

2.3對照品溶液制備

精密稱取干燥至恒重的芍藥苷對照品16.40mg，置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。再于50mL容量瓶中精密吸取2mL芍藥苷溶液，置10mL容量瓶中，加甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻。制成1mL含0.0656mg芍藥苷的溶液，作為對照品溶液。

2.4供試品溶液的制備

取樣品粉末約0.1g，精密稱定，置50mL容量瓶中，加稀乙醇35mL，超聲處理30min，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用0.45μm微孔濾膜過濾，作為供試品溶液。

2.5線性關(guān)系考察

精密吸取上述對照品溶液4，8，12，16，20μL，分別注入液相色譜儀。以峰面積為縱坐標(biāo)，以對照品進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=11672.16X+77.87，r=0.9961。結(jié)果表明芍藥苷在0.0262～0.1312μg呈良好的線性關(guān)系。

2.6精密度試驗(yàn)

精密吸取上述對照品溶液10μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，結(jié)果平均峰面積為871.4，RSD=0.47%(n=6)，表明儀器具有良好的精密度。

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取同一供試品溶液，依上述色譜條件，分別于0，2，4，6，8h各進(jìn)樣10μL注入液相色譜儀，結(jié)果平均峰面積為737.0，RSD=0.22%(n=6)，表明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8重復(fù)性試驗(yàn)

分別取同一批的杭白芍粉末樣品6份，每份約0.1g，精密稱定，按供試品溶液的制備方法制備，照上述色譜條件各進(jìn)樣10μL測定，結(jié)果杭白芍藥材中芍藥苷平均含量為2.54%，RSD=0.72%(n=6)。

2.9加樣回收率試驗(yàn)

取6份已知含量的供試品約50mg，精密稱定，分別添加芍藥苷對照品(濃度為0.328mg·mL-1)4mL，按擬定的方法制成供試品溶液，依供試品測定方法進(jìn)行測定，結(jié)果見表1。

表1 杭白芍藥材中芍藥苷回收率試驗(yàn)

3 結(jié)果和討論

3.1不同采收期對芍藥苷含量的影響

不同采收期芍藥苷含量測定結(jié)果見表2。

表2 不同采收時(shí)間杭白芍藥材中芍藥苷含量比較

由表2可見，7月10日，杭白芍葉片開始發(fā)黃，芍藥苷含量也逐步提高，到7月30日，部分杭白芍葉片由黃色變?yōu)楹谏?，少量葉片開始枯死，到8月10日，50%左右葉片變?yōu)楹谏?，并?0%左右葉片已經(jīng)枯死，這時(shí)芍藥苷含量達(dá)到最高，為3.43%，到8月30日左右，有50%左右葉片已經(jīng)枯死，芍藥苷含量開始下降。

而黃明遠(yuǎn)等[4]研究表明，5月10日夏季開花時(shí)采收芍藥苷含量比較高，8月5日芍藥苷含量降低，與本文研究結(jié)果有一定的差異，這可能與摘除花蕾有關(guān)。在浙江東陽，5月初摘除花蕾，減少了生殖生長養(yǎng)分的消耗，使更多的養(yǎng)分集中于地下部分的生長，所以8月10日左右芍藥苷含量達(dá)到最高，具體原因還將繼續(xù)研究。

3.2不同加工方法對芍藥苷含量的影響

不同加工方法芍藥苷含量測定結(jié)果見表3。

表3 不同加工方法杭白芍藥材中芍藥苷含量比較

由表3可見，先去皮后沸水煮(5min)加工的杭白芍中芍藥苷含量為最高，達(dá)到3.43%，先水煮(5min)后去皮生曬杭白芍中芍藥苷含量次之，先去皮后蒸制(7min)杭白芍中芍藥苷含量為第三，直接生曬杭白芍中芍藥苷含量為最低。先去皮后水煮為產(chǎn)區(qū)傳統(tǒng)加工方法，試驗(yàn)結(jié)果表明傳統(tǒng)加工方法有一定的合理性。直接生曬可能由于酶還具有活性，生曬過程中可能會(huì)導(dǎo)致芍藥苷含量的下降。

[1] 國家藥典委員會(huì).中國藥典(一部)[J].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：68.

[2] 吳菡子，熊南山.白芍的藥理研究與臨床應(yīng)用[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，1998，18(4)：172-173.

[3] 薛建海．肖統(tǒng)海，王曉華，等.白芍不同炮制方法對芍藥苷含量的影響(簡報(bào))[J].中國中藥雜志，1990，15(8)：27.

[4] 黃明遠(yuǎn)，伍照萬，張興國.采收期與栽培年限對中江產(chǎn)白芍質(zhì)量的影響[J].中藥材，2000,23(8)：435-436.

InfluenceofCollectingPeriodandProcessingMethodsontheContentofPaeonifloriinRadixPaeoniaeAlb

Hu Minling1,2, Ren Jingjian2, Wang Zhian2

(1.ZhejiangChineseMedicalUniversity,HangzhouZhejiang310053,China; 2.ZhengjiangResearchInstituteofTraditionalChineseMedicine,HangzhouZhejiang310023,China)

Objective: By comparing the content of paeoniflori in Radix Paeoniae alb with different collecting periods and different processing methods, the optimum collecting period and processing method was obtained.MethodsFocused on the content of paeoniflori as key value, HPLC was employed to determine the target value, content of paeoniflori, in different Radix Paeoniae alb.ResultsThe highest level (3.43%) of paeoniflori was observed in the Radix Paeoniae alb collected on August 10th,with traditional processing method(first decorticating then boiling).ConclusionTake the content of paeoniflori as key value, the quality of Radix Paeoniae alb is better collected around August 10th, with traditional processing method (first decorticating then boiling).

Radix Paeoniae alb; Paeoniflori; Collecting period; Processing methods

2009-09-11)