胡長效,曹丹,王昊晗,張瑩
(徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院,徐州市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇徐州 221006)
徐州地區(qū)草莓種植規(guī)模已達(dá)4 241.3 hm2,占江蘇省草莓種植總面積的37.9%,其中設(shè)施栽培面積占61.87%(周前鋒 等,2020)。草莓白粉病是滇赤才叉絲單囊殼Podosphaeraaphanis(異名:羽衣草單囊殼Sphaerothecaaphanis)引起的空氣傳播型病害(郭予元,2015;楊俊譽(yù) 等,2019)。近年來,由于設(shè)施栽培特殊環(huán)境和連作障礙等原因,該病現(xiàn)已成為徐州地區(qū)草莓設(shè)施栽培中一種重發(fā)真菌病害,嚴(yán)重時(shí)設(shè)施栽培草莓病株率達(dá)45%以上,病果率達(dá)20%以上。
目前,草莓白粉病防治措施有選用抗性品種、培育無病壯苗、科學(xué)栽培管理、藥劑防治等,其中藥劑防治仍是防治草莓白粉病最經(jīng)濟(jì)有效的方法(王璐 等,2018)。生產(chǎn)上使用的殺菌劑以戊唑醇、四氟醚唑、粉唑醇等三唑類和嘧菌酯、醚菌酯、吡唑醚菌酯等甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑為主(董華芳 等,2020;邢艷紅,2021),由于常年用藥單一而頻繁,病菌抗藥性增強(qiáng)明顯。鑒于此,本試驗(yàn)選擇尚未在草莓上登記使用的新型異丙醇三唑類殺菌劑氯氟醚菌唑(高士光 等,2021;劉子琪 等,2021)、甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑醚菌酯單劑及不同配比組合物,進(jìn)行生物活性測定和田間藥效評價(jià),以期為氯氟醚菌唑及其與醚菌酯組合物防治草莓白粉病的登記和應(yīng)用提供參考和依據(jù)。
試驗(yàn)地設(shè)在徐州市賈汪區(qū)耿集鎮(zhèn),北緯34°35′21.38″,東經(jīng)117°37′21″,試驗(yàn)所用大棚均種植草莓5 年以上,草莓白粉病發(fā)生嚴(yán)重。草莓品種為紅顏,壟面寬45 cm,壟高30 cm,溝寬35 cm,一壟種植2 行,株距18 cm,行距20 cm。2021 年8 月14 日定植。所有試驗(yàn)小區(qū)的栽培條件一致。
97%氯氟醚菌唑( mefentrifluconazole) 原藥,購自巴斯夫歐洲公司;98%醚菌酯(kresoximmethyl)原藥,購自江蘇禾裕泰化學(xué)有限公司;田間藥效試驗(yàn)對照藥劑:400 g · L-1氯氟醚菌唑懸浮劑(SC),購自巴斯夫植物保護(hù)(江蘇)有限公司;50%醚菌酯水分散粒劑(WG),購自巴斯夫歐洲公司。
采用盆栽法。在預(yù)備試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,將97%氯氟醚菌唑原藥、98%醚菌酯原藥和氯氟醚菌唑-醚菌酯組合物(質(zhì)量比為1∶9~9∶1),分別用丙酮配制成母液,并用0.1%吐溫80 水溶液等比稀釋5 個(gè)質(zhì)量濃度,其中氯氟醚菌唑質(zhì)量濃度為1.6、0.8、0.4、0.2、0.1 mg · L-1,醚菌酯質(zhì)量濃度為6.4、3.2、1.6、0.8、0.4 mg · L-1,兩者1∶9~9∶1 組合物質(zhì)量濃度分別為3.2、1.6、0.8、0.4、0.2 mg · L-1。草莓單株盆栽,待幼苗長至3~4 葉期時(shí),采集新鮮草莓白粉病發(fā)病葉片,制備孢子懸浮液,用喉頭噴霧器噴施接種葉片,24 h 后用噴口直徑1 mm 的小型噴霧器將藥劑均勻噴灑草莓幼苗上,自然晾干。以含有0.1%吐溫80 的水溶液作空白對照,每處理3 盆,重復(fù)4 次,于溫度18 ℃、相對濕度80%~90%培養(yǎng)箱(光/暗為12 h/12 h)培養(yǎng)10 d后,分級調(diào)查各處理草莓白粉病發(fā)病情況,計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。其中草莓白粉病分級標(biāo)準(zhǔn):1、3、5、7、9 級分別為病斑面積占整片葉面積≤5%、6%~15%、16%~25%、26%~50%、≥51%(邢艷紅,2021)。根據(jù)防治效果的幾率值(y)和質(zhì)量濃度對數(shù)值(x)計(jì)算LC50及其95%置信限、b 值及其標(biāo)準(zhǔn)誤(SE);根據(jù)NY/T 1156.6—2006 《農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑第6 部分:混配的聯(lián)合作用測定》計(jì)算混劑共毒系數(shù)(CTC),篩選出CTC > 120 的最佳增效配比(Liu et al.,2022)。
病情指數(shù) = ∑(各級病葉數(shù) × 相對級數(shù)值)/(調(diào)查總?cè)~數(shù) × 9)× 100
防治效果 = (空白對照病情指數(shù) - 藥劑處理病情指數(shù))/空白對照病情指數(shù) × 100%
共毒系數(shù)(CTC) = (1/混劑LC50)/(單劑A 的含量/單劑A 的LC50+ 單劑B 的含量/單劑B 的LC50)× 100
參照GB/T 17980.119—2004《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則(二)第119 部分:殺菌劑防治草莓白粉病》,設(shè)置400 g · L-1氯氟醚菌唑SC 與50%醚菌酯WG 組合物(質(zhì)量比為4∶6)用藥量15、20、25、30、35 g · (667 m2)-15 個(gè)處理,對照藥劑為400 g · L-1氯氟醚菌唑SC 15 g · (667 m2)-1和50%醚菌酯WG 25 g · (667 m2)-1(用藥量均按廠家推薦低限),設(shè)清水對照。隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),重復(fù)4 次,每小區(qū)面積10 m2。采用背負(fù)式噴霧器均勻噴霧,用水量50 kg · (667 m2)-1,于12 月5、12、19 日各施藥1 次,第1 次施藥前及第1、2、3 次施藥后7 d 各調(diào)查1 次病情指數(shù)。每小區(qū)對角線固定五點(diǎn)取樣,每點(diǎn)調(diào)查3 株,每株調(diào)查全部葉片。
校正防效 = 〔1-(空白對照藥前病情指數(shù) × 藥劑處理藥后病情指數(shù))/(空白對照藥后病情指數(shù) × 藥劑處理藥前病情指數(shù))〕× 100%
試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2016 和DPS 9.5 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,用鄧肯氏新復(fù)極差(DMRT)法對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較。
根據(jù)兩種藥劑對草莓白粉病的室內(nèi)毒力測定結(jié)果可知,氯氟醚菌唑和醚菌酯的單劑對草莓白粉病LC50為0.416 8 mg · L-1和2.673 7 mg · L-1(表1)。氯氟醚菌唑-醚菌酯組合物質(zhì)量比為3∶7、4∶6、5∶5、6∶4 時(shí),共毒系數(shù) CTC 分別為130、149、130 和126,均大于120,說明兩者質(zhì)量比在3∶7~6∶4 之間均有增效作用,其中以質(zhì)量比為4∶6 時(shí)增效最顯著;質(zhì)量比1∶9、2∶8、7∶3、8∶2、9∶1 時(shí)共毒系數(shù)CTC 分別為103、115、118、115、96,介于80~120 之間,有相加作用(表2)。
表1 氯氟醚菌唑和醚菌酯對草莓白粉病的毒力測定
表2 氯氟醚菌唑與醚菌酯的組合物對草莓白粉病的毒力測定
兩種藥劑對草莓白粉病的田間防效如表3 所示,400 g · L-1氯氟醚菌唑SC 與50%醚菌酯WG最佳配比(質(zhì)量比4∶6)不同濃度的防效均顯著優(yōu)于單劑400 g · L-1氯氟醚菌唑SC 和50%醚菌酯WG。以用藥量25~35 g · (667 m2)-1防效最佳,第1、2、3 次施藥后7 d 對草莓白粉病的田間防效分別達(dá)78.67%~79.89%、87.00%~88.48%、91.07%~92.40%,且3種用藥量處理之間差異不顯著。
表3 氯氟醚菌唑、醚菌酯藥劑及組合物對草莓白粉病的田間防效
試驗(yàn)期間,未發(fā)現(xiàn)氯氟醚菌唑和醚菌酯的藥劑及最佳配比組合物對草莓有藥害。第3 次施藥后7d 調(diào)查各試驗(yàn)小區(qū)的草莓灰霉病為害情況,各藥劑處理草莓病果率(2.75%~4.50%)顯著低于空白對照(16.38%)。
氯氟醚菌唑是第一種異丙醇三唑類殺菌劑,屬于14α-脫甲基酶抑制劑(DMI)的一個(gè)新子類,對仁果、核果、葡萄、馬鈴薯、大豆等60 種作物有優(yōu)良防效(劉鵬飛 等,2020;Hideo et al.,2021;Liu et al.,2022)。目前國內(nèi)已將氯氟醚菌唑登記用于防治小麥、玉米、馬鈴薯、番茄、黃瓜、西瓜、花生、葡萄、蘋果、香蕉、柑橘、芒果等12 種作物的真菌病害,但尚未在草莓上登記應(yīng)用。雖有研究顯示,已在桃褐腐菌(Monilinia fructicola)、炭疽病菌(Colletotrichumspp.)、鏈格孢菌(A.alternata)和甜菜褐斑病菌(Cercospora beticola)中發(fā)現(xiàn)氯氟醚菌唑與其他DMI(苯醚甲環(huán)唑、戊唑醇和丙環(huán)唑)間存在交叉抗性,但因其高活性和最小的不良副作用(不存在傳統(tǒng)DMI 對人和動(dòng)物的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)),使其仍是一種有著廣泛應(yīng)用前景的殺菌劑(Hideo et al.,2021;Liu et al.,2022)。
本試驗(yàn)結(jié)果顯示氯氟醚菌唑?qū)Σ葺追鄄【玖^高,LC50為0.416 8 mg · L-1,400 g · L-1氯氟醚菌唑SC 15 g · (667 m2)-1第1、2、3 次施藥后7 d 防效分別達(dá)67.57%、74.34%、80.12%,且對草莓安全,可在草莓上推廣應(yīng)用。該藥劑的LC50略高于普繼雄等(2021)研究的該藥對蘋果白粉病菌(Podosphaeraleucotricha)的毒力(LC50= 0.876 mg · L-1),可能與不同地域、不同種白粉病菌抗性不同有關(guān)。
通過不同作用機(jī)制藥劑的混配可以使藥劑具有一定的增效、抗性延緩、成本降低作用。已有研究表明,氯氟醚菌唑與甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑吡唑醚菌酯的復(fù)配劑對香蕉葉斑病表現(xiàn)出良好的增效作用(王銀鈺 等,2020;崔一平 等,2021)。本研究將氯氟醚菌唑與醚菌酯復(fù)配,在質(zhì)量比3∶7~6∶4范圍內(nèi)增效作用明顯,尤以質(zhì)量比4∶6 時(shí)最為顯著,其共毒系數(shù)(CTC)為149;400 g · L-1氯氟醚菌唑SC 與50%醚菌酯WG(質(zhì)量比4∶6)組合物用藥量25、30、35 g · (667 m2)-1的田間防治效果差異不顯著。綜合考慮防治效果和成本,以用藥量25 g · (667 m2)-1最為經(jīng)濟(jì)有效,第1、2、3 次施藥后7 d 對草莓白粉病的田間防效分別達(dá)78.67%、87.00%、91.07%。
毒力回歸方程斜率越大,病原菌對用藥濃度變化的反應(yīng)靈敏度越大,同等藥劑濃度增量下,抑菌率增量越大(王銀鈺 等,2020)。氯氟醚菌唑與醚菌酯復(fù)配(質(zhì)量比1∶9~9∶1),斜率(b)介于1.300 6~1.645 3 之間,以兩者質(zhì)量比4∶6 時(shí),斜率最大(b = 1.645 3),靈敏度最高,400 g · L-1氯氟醚菌唑SC 與50%醚菌酯WG 質(zhì)量比4∶6 組合物對草莓白粉病的田間防效隨著用量的增加,防效顯著增加。然而,藥劑用量達(dá)到一定程度時(shí),田間防效的最大效應(yīng)則會(huì)顯現(xiàn),該藥田間用量25 g · (667 m2)-1對草莓白粉病防效達(dá)最大效應(yīng)值。因此,建議該組合物在生產(chǎn)上的用量為25 g · (667 m2)-1。