＊袁海榮 李秀金 左曉宇

（北京化工大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院 北京 100029）

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)地快速發(fā)展和生活水平的不斷提高，我國(guó)有機(jī)固體廢物的產(chǎn)生量也呈逐年上升趨勢(shì)。2021年，我國(guó)城市生活垃圾的產(chǎn)生量為2.49億噸，農(nóng)作物秸稈超過(guò)8億噸[1]。如何使這些有機(jī)固體廢物得到資源化和能源化利用，對(duì)改善我國(guó)生態(tài)環(huán)境和調(diào)整能源結(jié)構(gòu)都具有非常重要的指導(dǎo)意義。厭氧消化技術(shù)是《固體廢物處理與資源化》課程中處理有機(jī)廢物最有效的處理技術(shù)之一，也是我國(guó)實(shí)現(xiàn)“雙碳目標(biāo)”的重要技術(shù)途徑[2]。

厭氧消化是一個(gè)復(fù)雜的生物化學(xué)過(guò)程，涉及的理論和影響因素有很多[3]，導(dǎo)致學(xué)生理解起來(lái)非常困難。為了鞏固基礎(chǔ)理論知識(shí)，在理論教學(xué)之后針對(duì)本科生安排了相關(guān)的科學(xué)小實(shí)驗(yàn)—厭氧消化實(shí)驗(yàn)。以往的厭氧消化實(shí)驗(yàn)是將有機(jī)固體廢物轉(zhuǎn)化成沼氣，這一過(guò)程持續(xù)時(shí)間30～40d，對(duì)于課業(yè)比較繁重的大三學(xué)生來(lái)說(shuō)，這個(gè)實(shí)驗(yàn)周期過(guò)長(zhǎng)，不利于學(xué)生快速鞏固所學(xué)專業(yè)知識(shí)。

因此，將傳統(tǒng)的厭氧消化產(chǎn)沼氣實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)成厭氧暗發(fā)酵產(chǎn)氫產(chǎn)酸性能實(shí)驗(yàn)，將30～40d的厭氧消化周期縮短至7～10d，這可大大縮短實(shí)驗(yàn)周期，學(xué)生可在兩周內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)，具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及數(shù)據(jù)分析如下。

1.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)前，先提前準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)原料和接種物，以及所用實(shí)驗(yàn)耗材等。

(1)實(shí)驗(yàn)原料

實(shí)驗(yàn)采用青稞稈作為原料，取自西藏拉薩達(dá)孜縣，風(fēng)干后用閘刀剪切至3～5cm的片段，再使用粉碎機(jī)粉碎至20目干燥保存?zhèn)溆?。接種物為牛糞，取自北京金銀島牧場(chǎng)。青稞稈和接種物的基本性質(zhì)如表1所示。

表1 原料基本性質(zhì)

(2)實(shí)驗(yàn)裝置

暗發(fā)酵試驗(yàn)裝置主要由恒溫水箱、100mL的封口瓶、500mL和1000mL的藍(lán)蓋瓶、橡膠塞和水槽組成。首先指導(dǎo)學(xué)生按照?qǐng)D1所示的樣子連接好實(shí)驗(yàn)裝置，各部分之間由玻璃泡和乳膠管連接。其中100mL的封口瓶和500mL藍(lán)蓋瓶作為暗發(fā)酵實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)器，1000mL藍(lán)蓋瓶和水槽連接作為500mL藍(lán)蓋瓶排水集氣裝置。實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行氣密性檢驗(yàn)，將厭氧消化反應(yīng)器置于35℃±1℃的恒溫水浴反應(yīng)器中進(jìn)行中溫厭氧消化。

圖1 暗發(fā)酵實(shí)驗(yàn)裝置示意圖

(3)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程

首先對(duì)青稞稈進(jìn)行預(yù)處理，根據(jù)前期研究結(jié)果[4]，對(duì)青稞稈進(jìn)行沼液和CaO聯(lián)合預(yù)處理48h。并讓學(xué)生明確預(yù)處理秸稈的目的、意義及操作方法。CaO的添加量為青稞稈總固體含量（TS）的0%（空白對(duì)照組）、2%、4%、6%和8%（表2），然后加入牛糞的液體部分調(diào)節(jié)預(yù)處理系統(tǒng)的含固率至30%，放入35℃恒溫箱預(yù)處理48h。將20g TS預(yù)處理后的青稞稈放入500mL的藍(lán)蓋瓶中，然后按照物料:接種物5:1（揮發(fā)性固體含量，VS）的接種比加入接種物（牛糞的固體部分），最后再添加相應(yīng)質(zhì)量的去離子水將系統(tǒng)含固率調(diào)至10%，同時(shí)設(shè)置只添加沼液和接種物組用來(lái)去除背景值，每組設(shè)置三平行。對(duì)青稞稈暗發(fā)酵過(guò)程中每日氣體含量和產(chǎn)氣量、pH和總揮發(fā)性脂肪酸（TVFA）濃度進(jìn)行測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后測(cè)定出料氨氮和堿度等性質(zhì)。通過(guò)這些指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)青稞稈暗發(fā)酵過(guò)程中的產(chǎn)氣性能、產(chǎn)酸性能和系統(tǒng)穩(wěn)定性。暗發(fā)酵實(shí)驗(yàn)時(shí)間定為7d。

表2 CaO添加量實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)表

(4)分析方法

用排水集氣法記錄每天所產(chǎn)氣體的量，并用氣相色譜儀（島津GC-2014）測(cè)量氣體含量。樣品的TS和VS采用國(guó)標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定。堿度和氨氮含量分別采用溴甲酚綠-甲基紅指示劑滴定和HI83206高精度試驗(yàn)室多參數(shù)測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。pH值、TVFA和分別采用pH計(jì)、氣相色譜儀（島津GC-2014）進(jìn)行測(cè)定。采用Excel 2019軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和圖表繪制。

2.暗發(fā)酵性能分析

評(píng)價(jià)暗發(fā)酵性能的指標(biāo)包括產(chǎn)酸性能、產(chǎn)氣性能和系統(tǒng)穩(wěn)定性等方面。對(duì)暗發(fā)酵性能分析目的是讓學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法及數(shù)據(jù)分析方法，學(xué)會(huì)畫圖表的同時(shí)，學(xué)會(huì)對(duì)圖表數(shù)據(jù)進(jìn)行描述和對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行分析。

(1)產(chǎn)酸性能

青稞稈暗發(fā)酵過(guò)程中TVFA濃度變化如圖2所示。在暗發(fā)酵過(guò)程中，不同實(shí)驗(yàn)組TVFA濃度呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，所有實(shí)驗(yàn)組中的最大TVFA濃度均出現(xiàn)在第6～7d見圖2（a）。添加CaO后TVFA濃度比對(duì)照組均有所提高。6% CaO預(yù)處理組在暗發(fā)酵第6d獲得最高的TVFA濃度，其值為18241mg/L，比對(duì)照組提高了56.1%。由揮發(fā)性脂肪酸（VFA）中各組分占TVFA的百分比可以判斷出青稞稈的暗發(fā)酵類型[5]。由圖2（b）可以看出，所有實(shí)驗(yàn)組都是乙酸占比最高，可達(dá)41.2%～95.4%。6% CaO預(yù)處理組在整個(gè)暗發(fā)酵過(guò)程中丁酸和乙酸占TVFA的75.6%～86.9%，因此，丁酸型發(fā)酵占據(jù)主導(dǎo)地位，而對(duì)照組和2% CaO預(yù)處理組中丙酸占比較高?？梢娞砑舆m量的CaO可以促使青稞稈發(fā)酵類型向丁酸型發(fā)酵轉(zhuǎn)變。研究發(fā)現(xiàn)乙酸和丁酸更容易被產(chǎn)甲烷菌利用[6]，所以這一發(fā)酵類型的轉(zhuǎn)變對(duì)后續(xù)產(chǎn)甲烷階段提高甲烷產(chǎn)量具有促進(jìn)作用。

圖2 TVFA濃度變化

(2)產(chǎn)氣性能

為了使學(xué)生掌握暗發(fā)酵產(chǎn)氣性能的分析方法，先對(duì)產(chǎn)氣性能圖進(jìn)行總體趨勢(shì)的描述，然后再進(jìn)行產(chǎn)氣性能對(duì)比。如圖3所示，在青稞稈暗發(fā)酵過(guò)程中，不同實(shí)驗(yàn)組日產(chǎn)氣高峰主要集中在前2d見圖3（a），其中2% CaO和4% CaO預(yù)處理組日產(chǎn)氣高峰出現(xiàn)在第1d，出峰時(shí)間比其它實(shí)驗(yàn)組提前了1d。2% CaO、4% CaO和6% CaO預(yù)處理組最高日產(chǎn)氣峰值相近，分別為18.5 mL/gVS、19.9mL/gVS和18.1mL/gVS，比對(duì)照組日產(chǎn)氣峰值高出72%～89.5%。在整個(gè)暗發(fā)酵階段，不同實(shí)驗(yàn)組的累積產(chǎn)氣量主要集中在前3d見圖3（b），從第4d開始累積產(chǎn)氣量增加不明顯。6% CaO預(yù)處理組累積產(chǎn)氣量最高，為35.9mL/gVS，分別比其它實(shí)驗(yàn)組高出了18.9%～54.1%。從H2含量來(lái)看，最大H2含量出現(xiàn)在第1～3d見圖3（c），為5.4%～11.2%。和累積產(chǎn)氣量變化趨勢(shì)相似，累積產(chǎn)氫量主要集中在前2d見圖3（d）。最大累積產(chǎn)氫量出現(xiàn)在4% CaO預(yù)處理組，分別比2% CaO、6% CaO、8% CaO和對(duì)照組累積產(chǎn)氫量提高了23.8%、116.7%、188.9%和225.0%。

圖3 預(yù)處理后青稞稈產(chǎn)氣性能

(3)系統(tǒng)穩(wěn)定性

pH值、氨氮和堿度是評(píng)價(jià)厭氧發(fā)酵系統(tǒng)穩(wěn)定性的主要參數(shù)。由圖4的pH變化趨勢(shì)可知，添加不同劑量的CaO對(duì)青稞稈預(yù)處理后，不同實(shí)驗(yàn)組的pH值在前2d變化非常明顯，從8.76～11.2快速降到6.18～6.90，從第3d開始，pH值維持在5.72～6.03。由于產(chǎn)氫最佳的pH范圍是5.5～5.7[7]，而本實(shí)驗(yàn)中暗發(fā)酵系統(tǒng)的pH均不在最佳產(chǎn)氫pH范圍，所以，雖然添加CaO預(yù)處理后累積產(chǎn)氫量比對(duì)照組有明顯提高，但總體來(lái)說(shuō)累積產(chǎn)氫量還有較大提高空間。暗發(fā)酵結(jié)束后不同實(shí)驗(yàn)組的氨氮和堿度如表3所示，不同實(shí)驗(yàn)組的氨氮濃度為309～437mg/L，遠(yuǎn)低于氨氮的抑制范圍4000mg/L[8]，這說(shuō)明暗發(fā)酵系統(tǒng)沒有受到氨氮的抑制。同時(shí)，不同實(shí)驗(yàn)組的堿度為5750～9417mg/L，經(jīng)不同添加量CaO預(yù)處理后的暗發(fā)酵系統(tǒng)的堿度均高于對(duì)照組，這說(shuō)明CaO預(yù)處理青稞稈有利于提高暗發(fā)酵系統(tǒng)的緩沖能力，從而提高系統(tǒng)的穩(wěn)定性。

圖4 不同實(shí)驗(yàn)組暗發(fā)酵過(guò)程中pH變化

表3 不同實(shí)驗(yàn)組出料的氨氮和堿度

3.結(jié)論

從青稞稈暗發(fā)酵實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，用不同劑量的CaO預(yù)處理青稞稈均可以明顯提高暗發(fā)酵性能。整個(gè)暗發(fā)酵過(guò)程中，6% CaO預(yù)處理實(shí)驗(yàn)組TVFA和累積產(chǎn)氣量均為最佳，而最高累積產(chǎn)氫量出現(xiàn)在4% CaO預(yù)處理組。雖然整個(gè)過(guò)程中實(shí)際獲得的累積產(chǎn)氫量與理論產(chǎn)氫量還有較大差距，但學(xué)生們?cè)诖诉^(guò)程中學(xué)會(huì)了實(shí)驗(yàn)操作、數(shù)據(jù)作圖及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析等技能，使學(xué)生鞏固了所學(xué)專業(yè)知識(shí)的同時(shí)，還廣泛培養(yǎng)了本科生對(duì)科學(xué)研究的濃厚興趣。