張明鳳,葉忠桂,廖珍珠

作者單位： 364000 福建省龍巖市,龍巖市第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科

肺癌為發(fā)病率較高的惡性腫瘤疾病之一,以非小細(xì)胞肺癌最為常見,也是肺癌的主要類型[1]。肺癌早期幾乎無任何癥狀,部分患者可能會出現(xiàn)輕微咳嗽,加之較多肺癌患者都未定期接受健康體檢,確診時已處于中晚期。臨床部分研究報道指出,中晚期非小細(xì)胞肺癌患者體內(nèi)腫瘤細(xì)胞會向多部位延伸,如肺外部胸腔、縱隔、胸壁等,加重癥狀,降低生存質(zhì)量,威脅患者生命安全。當(dāng)前針對晚期非小細(xì)胞肺癌主要采取化療,其存在較高不良反應(yīng)發(fā)生風(fēng)險,同時因化療無法有效清理微小殘留病灶,限制了整體治療效果。隨著臨床關(guān)于非小細(xì)胞肺癌治療研究的增加,過繼免疫治療在晚期非小細(xì)胞肺癌治療中得到應(yīng)用,現(xiàn)有資料指出,使用過繼免疫治療非小細(xì)胞肺癌,可降低病灶轉(zhuǎn)移風(fēng)險,也有利于降低腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險[2-3]。這些研究都為非小細(xì)胞肺癌患者的綜合治療提供新的思路。本研究觀察樹突狀細(xì)胞—細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞(DC-CIK)過繼免疫治療晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床效果,現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年3月—2020年3月龍巖市第二醫(yī)院收治的晚期非小細(xì)胞肺癌患者120例,根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對照組,各60例。觀察組男32例,女28例;年齡47～78(67.80±5.45)歲;TNM分期：Ⅲ期20例,Ⅳ期40例;病理類型：鱗癌12例,腺癌48例。對照組男34例,女26例;年齡48～79(67.85±5.42)歲;TNM分期：Ⅲ期22例,Ⅳ期38例;病理類型：鱗癌10例,腺癌50例。2組患者臨床資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究通過醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2 選擇標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)參照《中華醫(yī)學(xué)會肺癌臨床診療指南》診斷標(biāo)準(zhǔn),綜合CT、肺穿刺、手術(shù)病理檢查等明確診斷為非小細(xì)胞肺癌[4];(2)患者了解相關(guān)治療方案,并簽署知情同意書;(3)患者為初診患者,無手術(shù)治療、化療、放療等病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往有化療、心臟或肝臟等臟器功能障礙者;(2)合并自身免疫疾病或中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病者;(3)失訪或中途退出研究者。

1.3 治療方法 對照組給予多西他賽注射液(北京協(xié)和藥廠有限公司生產(chǎn))75 mg/m2靜脈滴注,第1天;注射用順鉑(齊魯制藥有限公司生產(chǎn))25 mg/m2靜脈滴注,每天1次,連用3 d,28 d進(jìn)行1次重復(fù)用藥,3個治療周期為1個療程,治療1個療程。觀察組在對照組基礎(chǔ)上第3天開始為患者采取DC-CIK過繼免疫治療。DC細(xì)胞培養(yǎng)方法：告知患者清淡飲食,通過血液成分分離機(jī)循環(huán)處理患者外周血4 000～5 000 ml,采集外周血單核細(xì)胞約100 ml,細(xì)胞計數(shù),并通過培養(yǎng)瓶在37℃條件下孵育2 h,選出懸浮細(xì)胞,用于培養(yǎng)CIK細(xì)胞。將GT-T551培養(yǎng)液30 ml加入培養(yǎng)瓶中,包括1 000 U/ml白介素-4(IL-4)與1 000 U/ml的粒細(xì)胞—巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF),通過5%二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng),每3天進(jìn)行1次換液,并補(bǔ)充相關(guān)細(xì)胞因子,第6天在加入相關(guān)因子的同時還需加入干擾素-γ(IFN-γ),誘導(dǎo)細(xì)胞成熟。CIK細(xì)胞培養(yǎng)方法：在GT-T601培養(yǎng)袋中放置懸浮細(xì)胞,加入GT-T551培養(yǎng)液,包括1 000 U/ml的IFN-r與GM-CSF,培養(yǎng)24 h,將CD3單克隆抗體、1 000 U/ml重組人白介素-2(rhIL-2)加入培養(yǎng)液中,每隔3 d換液1次,并做好rhIL-2的補(bǔ)充。第7天將成熟DC與CIK細(xì)胞一起培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng)后,分2次將其回輸給患者,28 d重復(fù)1次,3個治療周期為1個療程,治療1個療程。

1.4 觀察指標(biāo)與方法 (1)炎性因子：通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測白介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10,試劑盒為上海心語生物科技有限公司提供;(2)T淋巴細(xì)胞亞群：治療前后采集患者空腹靜脈血2～3 ml,常規(guī)抗凝處理后取出50 μl,加入20 μl熒光抗體的細(xì)胞分析專用管中充分混勻,室溫下避光孵育30 min,溶血素常規(guī)溶血并通過磷酸緩沖液洗滌,之后通過XL-EPICS流式細(xì)胞儀檢測CD3+、CD4+、CD8+等T淋巴細(xì)胞亞群百分?jǐn)?shù);(3)生存質(zhì)量評分：治療前后使用癌癥患者生活質(zhì)量測定量表(QLQ-C30)調(diào)查,換算為百分制,分值越高則生存質(zhì)量越好;(4)生存率：比較2組患者1、2年生存率;(5)不良反應(yīng)：包括低熱、白細(xì)胞減少、惡心嘔吐、血小板減少等。

1.5 療效評定標(biāo)準(zhǔn) 參照WHO實體瘤療效評價標(biāo)準(zhǔn),完全緩解(CR)：即病灶完全吸收,持續(xù)時間>4周;部分緩解(PR)：病灶減少或縮小>50%,持續(xù)時間>4周;穩(wěn)定(SD)：病灶縮小≤50%或增大<25%;進(jìn)展(PD)：病灶增大≥25%;客觀緩解率=(CR+PR)/總例數(shù)×100%,疾病控制率=(CR+PR+SD)/總例數(shù)×100%。

2 結(jié) 果

2.1 臨床療效比較 觀察組客觀緩解率、疾病控制率為71.67%、88.33%,均高于對照組的51.67%、73.33%(P<0.05),見表1。

表1 對照組與觀察組臨床療效比較 [例(%)]

2.2 炎性因子水平比較 治療前,2組IL-2、IL-4、IL-6、IL-10水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);治療1個療程后,2組IL-2、IL-6水平較治療前降低,IL-4、IL-10水平較治療前升高,且觀察組降低/升高幅度大于對照組(P<0.05或P<0.01),見表2。

表2 對照組與觀察組治療前后炎性因子水平比較

2.3 T淋巴細(xì)胞亞群比較 治療前,2組CD3+、CD4+、CD8+比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);治療1個療程后,2組CD3+、CD4+較治療前升高,CD8+較治療前降低,且觀察組升高/降低幅度大于對照組(P<0.01),見表3。

表3 對照組與觀察組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群比較

2.4 生存質(zhì)量評分比較 治療前,2組生存質(zhì)量評分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);治療1個療程后,2組生存質(zhì)量評分高于治療前,且觀察組高于對照組(P<0.01),見表4。

表4 對照組與觀察組治療前后生存質(zhì)量評分比較分)

2.5 生存率比較 觀察組1年生存率、2年生存率分別為70.00%、40.00%,均高于對照組的50.00%、21.67%(P<0.05),見表5。

表5 對照組與觀察組生存率比較 [例(%)]

2.6 不良反應(yīng)比較 觀察組與對照組不良反應(yīng)總發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(18.33% vs. 16.67%,χ2=0.058,P=0.810),見表6。

表6 對照組與觀察組不良反應(yīng)比較 [例(%)]

3 討 論

肺癌是一種典型惡性腫瘤疾病,臨床針對早期肺癌可采取手術(shù)治療,結(jié)合現(xiàn)階段非小細(xì)胞肺癌外科治療進(jìn)展,患者可通過全肺切除術(shù)、亞肺葉切除術(shù)、肺葉切除術(shù)、擴(kuò)大切除術(shù)、袖式肺葉切除術(shù)、胸腔鏡肺癌根治術(shù)等方式治療。較多研究證實早期非小細(xì)胞肺癌經(jīng)過外科綜合治療后可取得較好效果,5年生存率較高[5]。針對晚期非小細(xì)胞肺癌,患者通常已錯過最佳手術(shù)治療時機(jī),需采取綜合治療,即放化療,幫助患者穩(wěn)定病情,限制病情發(fā)展。非小細(xì)胞肺癌患者多為老年人,選擇治療方案時還需綜合考慮患者的營養(yǎng)狀況、基礎(chǔ)疾病、功能狀態(tài)等。與此同時,隨著非小細(xì)胞肺癌治療理念的發(fā)展,晚期治療更加側(cè)重于延長患者生存時間,提高生存質(zhì)量,這也使化療成為晚期非小細(xì)胞肺癌治療的主要方法[6]。

化療為非小細(xì)胞肺癌治療的重要方法,目前在晚期非小細(xì)胞肺癌治療中有重要應(yīng)用,相關(guān)研究證實了非小細(xì)胞肺癌采取化療的實際效果,但同時也顯示出其弊端,如治療期間不良反應(yīng)明顯,且發(fā)生率較高,部分患者單純采用化療效果有限,影響整體生存時間與生存質(zhì)量[7]。

近年來,臨床對非小細(xì)胞肺癌的治療逐步從細(xì)胞水平、細(xì)胞免疫功能方面開展研究。腫瘤發(fā)生同宿主免疫功能密切相關(guān)。部分學(xué)者在文獻(xiàn)報道中指出[8],若宿主免疫功能存在缺陷或下降,則其更易發(fā)生相關(guān)腫瘤,隨著腫瘤病灶增加,患者自身免疫功能下降,影響生存質(zhì)量。部分學(xué)者在文獻(xiàn)報道中指出,非小細(xì)胞肺癌患者體內(nèi)細(xì)胞免疫功能存在紊亂,無法及時清除腫瘤細(xì)胞,使患者病情進(jìn)展。Zhou等[9]研究者從分子學(xué)水平予以分析,指出非小細(xì)胞肺癌患者免疫應(yīng)答受到影響,其與患者體內(nèi)T、B細(xì)胞活化的第二信號缺乏、腫瘤表面MHC-抗原肽復(fù)合物水平低下等有關(guān),T、B細(xì)胞活化受到影響,使腫瘤出現(xiàn)免疫耐受,結(jié)合上述學(xué)者的有關(guān)研究與分析,可通過增強(qiáng)腫瘤抗原免疫原性,促進(jìn)細(xì)胞因子、第二信號等增強(qiáng),改變腫瘤細(xì)胞的免疫耐受情況,進(jìn)而通過免疫生物方法實現(xiàn)對腫瘤的抑制。

隨著對細(xì)胞的研究,當(dāng)前已知功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞即為突狀細(xì)胞,該細(xì)胞能向初始T淋巴細(xì)胞提呈抗原,并能誘發(fā)抗原特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞反應(yīng),還可誘發(fā)特異性抗腫瘤免疫反應(yīng),使其可持久產(chǎn)生作用。CIK細(xì)胞可利用自身非特異性免疫殺傷作用清除體內(nèi)微小病灶,有效結(jié)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞與突狀細(xì)胞,可同時發(fā)揮作用,依靠兩者協(xié)同作用機(jī)制幫助患者增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能,依靠自身細(xì)胞免疫功能改善患者病情與治療效果。

綜合上述不同學(xué)者的研究分析,DC-CIK過繼免疫治療逐漸在非小細(xì)胞肺癌治療中應(yīng)用,其中樹突狀細(xì)胞本身存在毛刺樣、樹突樣突起,通過抗原呈遞作用對腫瘤細(xì)胞相關(guān)抗原發(fā)揮捕獲或呈遞作用,調(diào)節(jié)患者體液免疫、細(xì)胞免疫等;CIK細(xì)胞屬于殺傷性T淋巴細(xì)胞,其可清除腫瘤細(xì)胞,作用機(jī)制為,CIK細(xì)胞能對腫瘤細(xì)胞及其分泌的相關(guān)細(xì)胞因子發(fā)揮特異性溶解作用,實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的有效清除。將DC與CIK細(xì)胞有效結(jié)合,通過前者可及時有效識別腫瘤細(xì)胞抗原,并激活免疫應(yīng)答,將其呈遞給CIK細(xì)胞,通過該細(xì)胞實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的清除,增強(qiáng)對腫瘤細(xì)胞的殺傷能力,促進(jìn)整體療效的提升。

本研究結(jié)果顯示,觀察組患者疾病客觀緩解率、疾病控制率較對照組更高,提示多西他賽聯(lián)合順鉑化療方案同時聯(lián)合DC-CIK過繼免疫治療,有利于穩(wěn)定非小細(xì)胞肺癌患者病情,提高疾病緩解率,改善患者預(yù)后,且不會明顯增加不良反應(yīng)。觀察組患者治療后炎性因子水平優(yōu)于對照組,同時各項T淋巴細(xì)胞亞群百分比優(yōu)于對照組,提示DC-CIK過繼免疫治療方法能改善腫瘤相關(guān)因子,增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能,與現(xiàn)階段DC、CIK細(xì)胞的相關(guān)作用機(jī)制具有一致性。觀察組治療后1年生存率、2年生存率均高于對照組,證實過繼免疫治療方案的有效性。觀察組治療后生存質(zhì)量評分高于對照組,提示DC-CIK過繼免疫治療配合常規(guī)治療,有利于提高患者生存質(zhì)量,達(dá)到晚期非小細(xì)胞肺癌綜合治療目的。

綜上所述,采取DC-CIK過繼免疫治療及多西他賽聯(lián)合DP化療方案治療晚期非小細(xì)胞肺癌,能提高治療效果與生存質(zhì)量,改善細(xì)胞免疫功能,且不會明顯增加不良反應(yīng),可作為晚期非小細(xì)胞肺癌治療的一種有效方法。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突。