朱紫結(jié) 王勇 戈偉

腦膠質(zhì)瘤是成人常見的一種顱內(nèi)惡性腫瘤[1-2]。全國統(tǒng)計(jì)資料顯示,腦膠質(zhì)瘤在顱內(nèi)腫瘤中占35%～61%[3]。膠質(zhì)瘤發(fā)病率和死亡率高,侵襲性是其重要臨床特征之一[4]。手術(shù)是治療膠質(zhì)瘤的首選方法,但由于該病具有侵襲性生長的特點(diǎn),難以完全切除病灶并確保邊緣無殘留,從而導(dǎo)致術(shù)后復(fù)發(fā)率高[5-6]。近年來,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)膠質(zhì)瘤生物分子進(jìn)行了深入研究,逐漸發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘤的發(fā)生與發(fā)展與細(xì)胞因子的參與密切相關(guān)。研究表明,中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(NLR)是影響多種惡性腫瘤患者預(yù)后的一個(gè)因素[7],其表達(dá)水平隨腫瘤細(xì)胞損傷程度而變化[8]。IL-17是一種促炎細(xì)胞因子,與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展等多個(gè)過程密切相關(guān),但在顱內(nèi)腫瘤中的研究中主要集中在體外研究[9]。單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)是一種具有單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞趨化性和活化作用的趨化因子,其在各種疾病的發(fā)生和發(fā)展中具有關(guān)鍵作用[10]?；诖?本研究探討血清NLR、MCP-1、IL-17在腦膠質(zhì)瘤患者中的表達(dá),并分析術(shù)后復(fù)發(fā)影響因素。

對(duì)象與方法

1.對(duì)象:回顧性選取2019年1月～2022年3月泰康同濟(jì)(武漢)醫(yī)院腫瘤中心收治的腦膠質(zhì)瘤患者100例,其中男64例、女36例,年齡30～60歲,平均年齡(45.27±9.86)歲;按照病理分級(jí)[11]將100例患者分為低級(jí)別組54例(Ⅰ級(jí)28例、Ⅱ級(jí)26例)和高級(jí)別組46例(Ⅲ級(jí)25例、Ⅳ級(jí)21例)。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合腦膠質(zhì)瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)且術(shù)后經(jīng)病理檢查確診;(2)行顯微鏡下切除術(shù)治療;(3)術(shù)后生存時(shí)間>6個(gè)月。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)重要臟器嚴(yán)重功能不全;(2)血液系統(tǒng)疾病、感染性疾病;(3)合并其他惡性腫瘤或存在轉(zhuǎn)移;(4)術(shù)前開展放、化療治療;(5)既往有激素治療史。另按2:1比例選取同院同期健康體檢者50例作為對(duì)照組,其中男30例、女20例,年齡30～60歲,平均年齡(44.97±10.12)歲,兩組受試者性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,具有可比性(P>0.05)。本研究方案已通過泰康同濟(jì)(武漢)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn),所有患者均知情同意。

2.方法

(1)資料收集:通過電子病歷系統(tǒng)收集患者相關(guān)資料,包括年齡、性別、病理類型、病程、切除范圍、術(shù)后放化療、術(shù)前卡氏(KPS)評(píng)分、腫瘤直徑、病理級(jí)別、組織學(xué)分化程度、侵襲浸潤情況。

(2)NLR、MCP-1、IL-17檢測(cè):所有受試者均于入院第2天空腹抽取2 ml外周靜脈血,離心處理10 min(轉(zhuǎn)速200 r/min、半徑10 cm)取上清液低溫保存待測(cè),使用血細(xì)胞生化分析儀檢測(cè)淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù),并計(jì)算NLR。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清MCP-1、IL-17水平。

(3)隨訪:采用電話或門診復(fù)查的形式對(duì)患者進(jìn)行隨訪,時(shí)間截至2022年9月,記錄腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)情況。根據(jù)復(fù)發(fā)情況將100例腦膠質(zhì)瘤患者分為未復(fù)發(fā)組(75例)與復(fù)發(fā)組(25例)。復(fù)發(fā)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn):患者切除膠質(zhì)瘤后,術(shù)后復(fù)查CT、MRI等檢查結(jié)果顯示手術(shù)部位無病灶,但術(shù)后6個(gè)月復(fù)查時(shí)顯示原病灶處再次存在膠質(zhì)瘤。

結(jié) 果

1．3組患者血清NLR、MCP-1、IL-17水平比較:對(duì)照組、低級(jí)別組及高級(jí)別組患者血清NLR、MCP-1、IL-17水平比較差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。對(duì)照組、低級(jí)別組、高級(jí)別組患者血清NLR、IL-17水平依次升高,血清MCP-1水平依次降低(P<0.05)。見表1。

表1 3組患者血清NLR、MCP-1、IL-17水平比較

2.單因素分析:復(fù)發(fā)組非全切、術(shù)后未放化療、術(shù)前KPS評(píng)分≤70分、腫瘤直徑>6 cm、病理級(jí)別為高級(jí)別、組織學(xué)分化程度低、有侵襲浸潤的患者比例與血清NLR、MCP-1、IL-17水平均高于未復(fù)發(fā)組(P<0.05),而兩組患者其他指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)的單因素分析[例,(%)]

3.腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)影響因素的二元logistic回歸分析:以術(shù)后復(fù)發(fā)情況為因變量(0=復(fù)發(fā),1=未復(fù)發(fā)),以切除范圍、術(shù)后放化療、術(shù)前KPS評(píng)分、腫瘤直徑、病理級(jí)別、組織學(xué)分化程度、侵襲浸潤、NLR、MCP-1、IL-17為自變量,進(jìn)行二元logistic回歸分析,結(jié)果顯示NLR、IL-17、非全切、腫瘤直徑>6 cm、高級(jí)別病變、低分化、侵襲浸潤均為腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素,MCP-1、術(shù)后放化療、術(shù)前KPS評(píng)分>70分為術(shù)后復(fù)發(fā)的保護(hù)因素(P<0.05)。見表3。

表3 腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)影響因素的二元logistic回歸分析

4.腦膠質(zhì)瘤患者術(shù)前血清NLR、MCP-1、IL-17水平診斷腦膠質(zhì)瘤與評(píng)估病情的預(yù)測(cè)價(jià)值:ROC曲線分析結(jié)果顯示,NLR、MCP-1、IL-17診斷腦膠質(zhì)瘤的ROC曲線下面積(AUC)分別為0.819、0.908、0.986,均具有較好準(zhǔn)確性;預(yù)測(cè)的敏感度分別為76.0%、74.0%、65.0%;特異度分別為76.0%、98.0%、75.0%。ROC曲線分析結(jié)果顯示,NLR、MCP-1、IL-17與三者聯(lián)合評(píng)估腦膠質(zhì)瘤病情的AUC分別為0.790、0.897、0.754與0.996,均具有較好準(zhǔn)確性;預(yù)測(cè)的敏感度分別為45.7%、50.0%、64.4%與95.7%;特異度分別為58.7%、50.0%、84.8%與98.1%。

討 論

據(jù)WHO 2016年在中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)中指明,膠質(zhì)瘤具有強(qiáng)侵襲性,可促進(jìn)瘤周血管生成能力增強(qiáng),預(yù)后較差,并首次將基因檢測(cè)與分子表達(dá)納入膠質(zhì)瘤的分類標(biāo)準(zhǔn)[12]。腦膠質(zhì)瘤無明顯邊界,且主要為浸潤生長,手術(shù)切除后仍然具有較高復(fù)發(fā)率。因此,臨床需尋找術(shù)前有效診斷腦膠質(zhì)瘤病情方式,血清指標(biāo)多項(xiàng)聯(lián)合診斷是現(xiàn)階段臨床研究主要方向[11]。

既往研究指出,促腫瘤因子可參與對(duì)腫瘤細(xì)胞生長的調(diào)節(jié)與凋亡,而中性粒細(xì)胞通過釋放促腫瘤因子進(jìn)而促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移、浸潤[13]。既往研究表明,NLR變化與腫瘤病情密切相關(guān)[14]。而炎癥因子與腫瘤發(fā)生及進(jìn)展密切相關(guān),是腫瘤重要標(biāo)志物。IL-17作為一種促炎因子[15],既往研究發(fā)現(xiàn),其在多種腫瘤組織中高表達(dá),推測(cè)其與腫瘤的病發(fā)、發(fā)展過程存在相關(guān)性,但既往研究多集中于體外[16]。腫瘤生長轉(zhuǎn)移多依賴于新生血管生長,既往研究表明,MCP-1可通過多種途徑促進(jìn)血管內(nèi)皮生長因子生成,對(duì)腫瘤血管新生進(jìn)行誘導(dǎo)[17-18]。本研究結(jié)果顯示,對(duì)照組、低級(jí)別組、高級(jí)別組患者血清NLR、IL-17水平依次升高,血清MCP-1水平依次降低,提示血清NLR,MCP-1,IL-17水平與腦膠質(zhì)瘤病情發(fā)展存在相關(guān)。分析原因可能為,在腫瘤微環(huán)境中,隨著腫瘤生長,中性粒細(xì)胞逐漸增加,而淋巴細(xì)胞逐漸減少,機(jī)體抗腫瘤能力下降,逐漸形成腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移適宜生長環(huán)境,導(dǎo)致惡性循環(huán),NLR上升。正常人群血清IL-17水平較低,而腦膠質(zhì)瘤患者因血-腦脊液屏障存在損傷,IL-17分泌增加、水平升高,且病情越重患者血-腦脊液屏障損傷越明顯,IL-17水平越高。MCP-1作為趨化因子,其可趨化募集巨噬細(xì)胞,且在腫瘤組織中可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞分化為腫瘤細(xì)胞,本研究中高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤患者血清MCP-1水平降低,分析可能是因?yàn)槠洳∏樵絿?yán)重,MCP-1趨化性越顯著,從而多富集于腫瘤組織,使得血清中MCP-1水平下降。進(jìn)一步通過ROC曲線分析,結(jié)果顯示NLR、MCP-1、IL-17診斷腦膠質(zhì)瘤的AUC分別為0.819、0.986、0.908;NLR、MCP-1、IL-17與三者聯(lián)合評(píng)估腦膠質(zhì)瘤病情的AUC分別為0.790、0.754、0.897、0.996,均具有較好準(zhǔn)確性。提示血清NLR,MCP-1,IL-17可作為腦膠質(zhì)瘤病情評(píng)估指標(biāo),且三者聯(lián)合評(píng)估效果更佳。

外科手術(shù)是治療腦膠質(zhì)瘤的主要方式,可最大程度切除病灶組織,降低神經(jīng)功能損傷。但因腦膠質(zhì)瘤具有較高惡性程度,致使術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)更高[19]。本研究二元logistic回歸分析結(jié)果顯示,NLR、IL-17、非全切、腫瘤直徑>6 cm、高級(jí)別病變、低分化、侵襲浸潤為影響術(shù)后復(fù)發(fā)危險(xiǎn)因素,MCP-1、術(shù)后放化療、術(shù)前KPS評(píng)分>70分為術(shù)后復(fù)發(fā)保護(hù)因素。分析原因可能為[20-21]:(1)淋巴細(xì)胞參與機(jī)體免疫反應(yīng)可對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行直接殺傷,而淋巴細(xì)胞減少會(huì)致使免疫力消弱,利于腫瘤生長,復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)增加。(2)IL-17水平升高代表機(jī)體炎癥反應(yīng)增強(qiáng),進(jìn)而對(duì)免疫功能產(chǎn)生影響,機(jī)體免疫抵抗能力削弱,腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)增加。(3)MPC-1是多種組織細(xì)胞分泌產(chǎn)生,具有促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移作用,血清中MPC-1水平越低,體現(xiàn)腫瘤組織中MPC-1富集越顯著,患者病情越重,復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)越高。(3)因手術(shù)治療腦膠質(zhì)瘤觀念發(fā)生改變,由最大范圍切除改變?yōu)樽畲蟪潭劝踩谐?但非全切手術(shù)存在病灶復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn);然而術(shù)后放化療是治療腦膠質(zhì)瘤的重要輔助手段,可輔助最大程度殺傷腫瘤細(xì)胞,降低復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn);(4)直徑>6 cm的腫瘤存在廣泛累及周圍組織,手術(shù)難以完全切除,存在術(shù)后復(fù)發(fā)隱患;(5)高級(jí)別、低分化或存在侵襲浸潤患者病情越嚴(yán)重,復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)越高;(6)KPS評(píng)分是評(píng)估患者機(jī)體狀態(tài)的重要工具,術(shù)前KPS評(píng)分>70分患者神經(jīng)損傷較小,往往患者腦組織受腫瘤壓迫與侵襲較少,預(yù)后更好。

綜上所述,腦膠質(zhì)瘤患者中血清NLR、IL-17高表達(dá),MCP-1水平低表達(dá),均可作為腦膠質(zhì)瘤患者診斷與病情評(píng)估有效指標(biāo),且聯(lián)合評(píng)估病情更好。NLR、IL-17、非全切、腫瘤直徑>6 cm、高級(jí)別病變、低分化、侵襲浸潤為術(shù)后復(fù)發(fā)危險(xiǎn)因素,MCP-1、術(shù)后放化療、術(shù)前KPS評(píng)分>70分為術(shù)后復(fù)發(fā)保護(hù)因素,臨床針對(duì)上述因素需加強(qiáng)重視。