趙敏杏,溫 馨△,陳 濤,王 軍,吳銀寶,2,3*

(1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,廣東 廣州 510642;2.嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實(shí)驗(yàn)室,廣東 廣州 510642; 3. 嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實(shí)驗(yàn)室茂名分中心,廣東 茂名525000)

抗生素抗性基因(antibiotic resistance genes,ARGs)作為環(huán)境中的新型污染物,兼具“可傳播擴(kuò)散”與“環(huán)境持久”的特性,導(dǎo)致微生物抗生素抗性的快速擴(kuò)散,對(duì)全球公共衛(wèi)生構(gòu)成重大威脅[1]。研究表明,抗生素的發(fā)現(xiàn)和大量使用導(dǎo)致環(huán)境中ARGs豐度呈指數(shù)型上升趨勢(shì),我國(guó)畜禽環(huán)境中ARGs污染形勢(shì)十分嚴(yán)峻[2]。谷艷茹等[3]研究發(fā)現(xiàn),施用糞肥會(huì)使土壤中sul1、sul2和tetO等 ARGs的相對(duì)豐度增加14倍,且還會(huì)增加土壤中四環(huán)素類、氨基糖苷類、多重耐藥類ARGs污染的多樣性[4]。由于ARGs會(huì)通過(guò)垂直轉(zhuǎn)移(vertical gene transfer,VGT)和水平轉(zhuǎn)移(Horizontal Gene Transfer,HGT)的方式在相同種屬或不同種屬的微生物之間傳播,并通過(guò)食物鏈最終影響人類的健康,因而開(kāi)展ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估對(duì)于保障人類健康具有重要意義[5]。近年來(lái),科學(xué)家對(duì)于ARGs的暴露評(píng)價(jià)已開(kāi)展了許多研究。但由于存在ARGs過(guò)程定量數(shù)據(jù)匱乏和HGT等問(wèn)題[6-7],這些研究只關(guān)注ARGs的環(huán)境暴露污染特征,對(duì)其進(jìn)行生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估鮮有報(bào)道,基于畜禽糞肥源ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估更為少見(jiàn)。由此,本文總結(jié)了環(huán)境污染物的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架和評(píng)估ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)所需的ARGs數(shù)據(jù)庫(kù)獲取途徑及方法,結(jié)合畜禽糞肥源ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的關(guān)鍵點(diǎn),提出適用于種養(yǎng)結(jié)合模式下畜禽糞肥源ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估方法。

1 確定ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法

1.1 確定ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架

生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是評(píng)價(jià)生態(tài)系統(tǒng)暴露于一種或多種脅迫因子時(shí)不利效應(yīng)發(fā)生的可能性,是在風(fēng)險(xiǎn)管理的框架下發(fā)展起來(lái)用于制定環(huán)境管理決策的主要科學(xué)依據(jù)[8]。綜合各個(gè)國(guó)家和組織的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)框架和流程,根據(jù)歐盟現(xiàn)有風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)文件(Technical Guidance Document on Risk Assessment,TGD),結(jié)合《中華人民共和國(guó)2020生態(tài)環(huán)境健康風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估技術(shù)指南總綱》和ARGs的污染特征,可綜合得出ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架主要包括暴露評(píng)估、危害評(píng)估和風(fēng)險(xiǎn)表征這三個(gè)階段。ARGs作為一種新型環(huán)境污染物,對(duì)其進(jìn)行生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)首先需對(duì)其進(jìn)行暴露評(píng)估,根據(jù)其暴露種類、暴露豐度、暴露時(shí)間和暴露地點(diǎn)等特點(diǎn)綜合評(píng)估不同ARGs的暴露頻率和暴露路徑,完成暴露評(píng)估過(guò)程。接著,通過(guò)明確目標(biāo)ARGs的主要危害特性,如微生物抗性、可移動(dòng)性、宿主致病性和人類相關(guān)性等[9-10],通過(guò)抗性評(píng)估和傳播評(píng)估的方式綜合評(píng)價(jià)不同ARGs的危害風(fēng)險(xiǎn)值,進(jìn)而完成危害評(píng)估全過(guò)程。最后,再根據(jù)暴露評(píng)估和危害評(píng)估的結(jié)果采用定量或定性的方法,對(duì)目標(biāo)ARGs在該環(huán)境中的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)表征[6-7](圖1)。

1.2 確定用于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的數(shù)據(jù)庫(kù)及測(cè)序工具

對(duì)ARGs進(jìn)行生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí),首先需要確定評(píng)估對(duì)象,即確定需要評(píng)估哪些ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。目前,用于確定ARGs基本信息的數(shù)據(jù)庫(kù)包括Comprehensive Antibiotic Resistance Database(CARD)[11]和Resfinder等[12],具體作用特點(diǎn)如表1所示。通過(guò)檢索下述數(shù)據(jù)庫(kù),即可獲得目前已知的ARGs的信息。

圖1 ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架Fig.1 Framework of ecological risk assessment of ARGs

表1 ARGs的參考數(shù)據(jù)庫(kù)Table 1 Reference database of ARGs

獲得ARGs的相關(guān)信息后,即可開(kāi)展目標(biāo)評(píng)估體系中ARGs的檢測(cè)工作。常用基于PCR的方法和基于基因組測(cè)序的方法確定目標(biāo)評(píng)估體系中ARGs的類別?；赑CR的方法,即提取樣品微生物DNA,用特定ARGs的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,對(duì)目標(biāo)條帶進(jìn)行測(cè)序,從而鑒定ARGs的類別。該方法的優(yōu)點(diǎn)是比較準(zhǔn)確,缺點(diǎn)是效率低?；诨蚪M測(cè)序的方法可借助基因測(cè)序工具實(shí)現(xiàn)[15],具體如表2所示,可通過(guò)對(duì)樣品微生物 DNA 進(jìn)行高通量測(cè)序或宏基因分析的方法,將獲得的基因序列與已知的ARGs數(shù)據(jù)庫(kù)(表1)進(jìn)行比對(duì),即可獲得ARGs類別等信息[16]。該類方法成本較高,大多數(shù)數(shù)據(jù)庫(kù)不夠詳盡且不是定期更新,但是靈敏度和特異性強(qiáng),可極大提高ARGs的檢出效率。評(píng)估基于種養(yǎng)結(jié)合模式的畜禽糞肥源ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)時(shí),也須采用上述方法確定用于評(píng)估的ARGs源數(shù)據(jù)。

2 ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估內(nèi)容

2.1 暴露評(píng)估

暴露評(píng)估是畜禽糞肥源ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的第一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn),即首先要通過(guò)畜禽糞肥源ARGs的暴露種類、暴露豐度、暴露時(shí)間和暴露地點(diǎn)等,明確其暴露頻率和暴露路徑。

規(guī)?；笄蒺B(yǎng)殖場(chǎng)四環(huán)素類抗生素在豬糞中的檢出率顯著高于其它類抗生素[22],由此導(dǎo)致四環(huán)素類ARGs在畜禽糞便中的絕對(duì)豐度高達(dá)1011copies/g,成為畜禽糞肥源主要的ARGs類型[23-24]。不過(guò)畜禽糞污通常需經(jīng)無(wú)害化處理后才會(huì)進(jìn)入環(huán)境,這就會(huì)使其所含ARGs的種類和豐度發(fā)生變化[25]。但通過(guò)對(duì)畜禽糞便采取好氧堆肥、厭氧消化和氧化塘等處理及資源化利用方式也難以有效削減ARGs的豐度[26]。Diehl等[27]發(fā)現(xiàn),tetA和tetX的相對(duì)豐度經(jīng)厭氧消化后增加了30%～150%。Cheng等[28]調(diào)查了中國(guó)東部8所養(yǎng)殖場(chǎng)經(jīng)厭氧消化及堆肥處理后糞便中ARGs的豐度,發(fā)現(xiàn)10種四環(huán)素類抗性基因和2種磺胺類抗性基因在各種畜禽糞便中被廣泛檢出,ARGs豐度最高達(dá)2.26×1011copies/g。Huang等[29]發(fā)現(xiàn),通過(guò)氧化塘貯存的糞水中四環(huán)素類抗性基因被有效降解了69%～99%,但是tetO、tetM和tetX的相對(duì)豐度在不同貯存時(shí)期較原始糞便顯著上升。

此外,畜禽糞污在進(jìn)行無(wú)害化等處理方式進(jìn)入到“土壤-植物”系統(tǒng)后,仍會(huì)使“土壤-植物”系統(tǒng)中部分畜禽糞肥源ARGs和可移動(dòng)遺傳元件(Mobile Genetic Element,MGEs)的豐度和種類發(fā)生變化[30]。以tetX基因?yàn)槔?會(huì)通過(guò)施肥的方式,從畜禽糞肥源傳播到生菜[31]。研究表明,施用有機(jī)肥導(dǎo)致胡蘿卜塊莖增加了12種ARGs和2個(gè)MGEs,ARGs和MGEs的相對(duì)豐度均較未施肥前顯著上升[32]。但是根際細(xì)菌群落穩(wěn)定性較高,對(duì)抗生素的刺激有抵抗作用,對(duì)ARGs的傳播起到阻遏作用[33]。由于ARGs 無(wú)法被降解、稀釋等自然過(guò)程完全去除,即使微生物裂解死亡后仍有部分ARGs 通過(guò)游離態(tài)的形式轉(zhuǎn)化到其他微生物體內(nèi)進(jìn)行傳播擴(kuò)散[34]。因此,即使停止施用糞肥,環(huán)境中的部分ARGs仍會(huì)維持在一個(gè)較高的水平[35]。

以種養(yǎng)結(jié)合模式為例,對(duì)畜禽糞肥源ARGs的暴露特征進(jìn)行綜合分析,可初步推斷出畜禽糞肥源ARGs在不同暴露路徑下的暴露頻率,該暴露路徑主要包括直接路徑和間接路徑(圖2)。直接路徑指養(yǎng)殖場(chǎng)中部分畜禽糞肥源ARGs可通過(guò)環(huán)境接觸和呼吸等途徑直接擴(kuò)散到人體內(nèi);間接路徑包括5個(gè)階段,“階段Ⅰ-Ⅴ”指的是不同種類畜禽糞肥源ARGs在“畜禽-糞便-糞肥-土壤-植物-人類”這幾個(gè)階段均有檢出,表明可能存在部分畜禽糞肥源ARGs通過(guò)該途徑擴(kuò)散到人體內(nèi),進(jìn)而對(duì)人類健康造成威脅。

圖2 種養(yǎng)結(jié)合模式下抗生素抗性基因的暴露路徑Fig.2 Exposure pathways of antibiotic resistance genes in planting-cultivation combination model

導(dǎo)致ARGs在各個(gè)傳播路徑豐度增加的主次因素很多[36],加之固有方法等因素的限制,解析ARGs在不同傳播階段暴露頻率增加的來(lái)源及傳播趨勢(shì)仍面臨著許多挑戰(zhàn)[37]。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)于ARGs的溯源已經(jīng)開(kāi)展了許多研究。在建立抗生素與ARGs的關(guān)聯(lián)上,Duarte等[38]整合大量文獻(xiàn)中抗生素和 ARGs 相關(guān)性的數(shù)據(jù),使用線性混合模型將ARGs豐度與抗生素壓力相關(guān)聯(lián)。在建立其他因素與ARGs的關(guān)聯(lián)上,可采用模型評(píng)估方法對(duì)ARGs進(jìn)行溯源分析,量化不同影響因素對(duì)評(píng)估體系中 ARGs的潛在貢獻(xiàn)[39]。

畜禽糞肥源ARGs作為生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的對(duì)象,部分畜禽糞肥源ARGs會(huì)通過(guò)直接或間接的暴露路徑通過(guò)污染農(nóng)作物等方式危害人類健康[40]。因此,建立適用于不同畜禽糞肥源ARGs的暴露評(píng)估分析方法,通過(guò)篩選出在不同暴露路徑下暴露頻率較高的畜禽糞肥源ARGs類別,對(duì)于構(gòu)建畜禽糞肥源ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架具有重要意義[41]。

2.2 危害評(píng)估

危害評(píng)估是畜禽糞肥源ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的第二個(gè)關(guān)鍵點(diǎn),在該階段首先應(yīng)該明確需要開(kāi)展危害評(píng)估的畜禽糞肥源AGRs的關(guān)鍵危害點(diǎn),根據(jù)不同類別畜禽糞肥源AGRs危害特性的不同,結(jié)合抗性評(píng)估和傳播評(píng)估的手段,完成危害評(píng)估的過(guò)程。

2006年,ARGs被世界衛(wèi)生組織(WHO)作為下個(gè)世紀(jì)威脅人類健康的最重大挑戰(zhàn),其主要原因在于攜帶ARGs的微生物會(huì)對(duì)抗生素產(chǎn)生耐藥性[42]。一項(xiàng)對(duì)204個(gè)國(guó)家所有地區(qū)抗生素耐藥性影響的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析的研究表明,抗生素耐藥性現(xiàn)在是全球的主要死因,2019年有127萬(wàn)人直接死于抗生素耐藥性,495萬(wàn)人的死亡與抗生素耐藥性感染有關(guān),目前全球迫切需要解決抗生素耐藥性問(wèn)題[43],而要解決抗生素殘留帶來(lái)的微生物的耐藥性問(wèn)題就需要特別關(guān)注微生物抗生素耐藥性產(chǎn)生的根源——ARGs[44]。因此,評(píng)估畜禽糞肥源ARGs是否會(huì)導(dǎo)致微生物產(chǎn)生抗生素耐藥性,特別是人類和畜禽常用抗生素的耐藥性,是對(duì)暴露評(píng)估階段篩選出的畜禽糞肥源ARGs進(jìn)行危害評(píng)估的第一個(gè)關(guān)鍵評(píng)估點(diǎn)。根據(jù)攜帶不同畜禽糞肥源ARGs的微生物對(duì)不同抗生素最小抑菌濃度(Minimum inhibitory concentration,MIC)的不同,可把抗生素的類別以及人類常用抗生素的相關(guān)程度和重要性等作為劃分依據(jù),對(duì)不同畜禽糞肥源ARGs的耐藥性危害等級(jí)做定性的歸類和劃分。

此外,ARGs還具有“可移動(dòng)性”,該特性加劇了醫(yī)用或畜禽用抗生素治療失敗的可能性,同樣是對(duì)人類和動(dòng)物健康造成重大威脅的關(guān)鍵危害點(diǎn)。研究表明,ARGs的傳播方式包括HGT和VGT。HGT 是指攜帶 ARGs 的菌株通過(guò)接合、轉(zhuǎn)化和傳導(dǎo)等方式將遺傳物質(zhì)傳遞給其他微生物而非其子代的過(guò)程[45-46],使其在同種或不同種細(xì)菌間進(jìn)行傳播擴(kuò)散成為可能,較VGT的傳播危害性更大[47]。其中,整合子、轉(zhuǎn)座子及質(zhì)粒等MGEs是HGT的重要載體[48]。系統(tǒng)發(fā)育距離、共享生態(tài)和基因組約束常被認(rèn)為是控制HGT的關(guān)鍵因素[49]。因此,通過(guò)與數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)[50-51]等手段對(duì)畜禽糞肥源ARGs是否具有潛在“可移動(dòng)性”進(jìn)行評(píng)估判斷,是對(duì)暴露評(píng)估階段篩選出的畜禽糞肥源ARGs進(jìn)行危害評(píng)估的第二個(gè)關(guān)鍵評(píng)估點(diǎn)。

“宿主致病性”是危害評(píng)估階段的第三個(gè)關(guān)鍵評(píng)估點(diǎn)。“宿主”指的是攜帶畜禽糞肥源ARGs的潛在宿主和畜禽糞肥源ARGs發(fā)生HGT后可能傳播到的新宿主,攜帶或可能通過(guò)HGT攜帶ARGs的微生物是否擁有“致病性”,是臨床抗生素治療失敗和“超級(jí)細(xì)菌”產(chǎn)生的關(guān)鍵因素。在此評(píng)估階段,可通過(guò)宏基因組學(xué)的方法對(duì)ARGs進(jìn)行源追蹤[52],對(duì)其存在的宿主是否存在致病性進(jìn)行評(píng)估;或可通過(guò)機(jī)器學(xué)習(xí)[53]、微流體技術(shù)[54]和熒光標(biāo)記等[55]方式對(duì)畜禽糞肥源ARGs發(fā)生HGT的潛在可能性和潛在宿主進(jìn)行預(yù)測(cè)。通過(guò)判斷其潛在宿主和畜禽糞肥源ARGs可能通過(guò)HGT傳播到的微生物是否是致病菌,以及該致病菌與人類相關(guān)性的高低對(duì)不同畜禽糞肥源ARGs的危害性進(jìn)行評(píng)估。

微生物抗性、可移動(dòng)性和宿主致病性是對(duì)畜禽糞肥源ARGs進(jìn)行危害評(píng)估的評(píng)估關(guān)鍵點(diǎn),此外,畜禽糞肥源ARGs與人類和畜禽以及各類抗生素使用等的相關(guān)性對(duì)于危害評(píng)估的開(kāi)展也有重要影響。在此階段,根據(jù)不同類別畜禽糞肥源ARGs的危害特性,理清關(guān)鍵危害評(píng)估點(diǎn)的主次順序,對(duì)不同類別畜禽糞肥源ARGs的抗性能力和傳播能力進(jìn)行綜合評(píng)價(jià),進(jìn)而完成危害評(píng)估過(guò)程,對(duì)于構(gòu)建畜禽糞肥源 ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架具有重要作用。

2.3 風(fēng)險(xiǎn)表征

風(fēng)險(xiǎn)表征是生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的最后一個(gè)階段,需要綜合暴露評(píng)估和危害評(píng)估的結(jié)果,通過(guò)定量或定性的方式對(duì)不同類別畜禽糞肥源ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行描述。

在定性表征方面,最為典型的是Ellabaan等[10]構(gòu)建的ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架,該框架以ARGs作為暴露評(píng)估的對(duì)象,著重識(shí)別具有嚴(yán)重危害公共健康的 ARGs;以“宏基因組學(xué)”作為主要的數(shù)據(jù)分析方法,將“人類相關(guān)富集、基因遷移和宿主致病性”作為危害評(píng)估的三大要素,最后基于是否符合三大要素及符合哪些要素,將ARGs劃分為四個(gè)風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)。具體劃分依據(jù)如下:三大要素均符合的ARGs被認(rèn)定為風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)一;符合要素一和要素二的ARGs被認(rèn)定為風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)二;只符合要素一的ARGs被認(rèn)定為風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)三;三大要素均不符合的ARGs被認(rèn)定為風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)四。

在定量表征方面,最具代表性的是Zhang等[9]提出的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架,該框架以ARGs作為暴露評(píng)估的對(duì)象,把“人類可及性、移動(dòng)性、致病性和臨床可用性” 作為危害評(píng)估的四大要素。依據(jù)ARGs危害評(píng)估的要素特征,運(yùn)用宏基因數(shù)據(jù)分析的方法,將每個(gè)要素的危害評(píng)估值量化。其中,“人類可及性”是通過(guò)計(jì)算AGRs在人類相關(guān)棲息地平均豐度和流行率的乘積來(lái)進(jìn)行表示;“移動(dòng)性”則是通過(guò)統(tǒng)計(jì)所有完整基因組中檢測(cè)到ARGs上游和下游5 kb以內(nèi)的MGEs數(shù)量總和來(lái)進(jìn)行表示;“致病性”是通過(guò)計(jì)算攜帶ARGs病原體占總宿主的比例來(lái)進(jìn)行表示;“臨床可用性”則通過(guò)計(jì)算ARGs與臨床可用抗生素相關(guān)的數(shù)量總和進(jìn)行表示。接著,通過(guò)計(jì)算四個(gè)評(píng)估要素的乘積,將不同要素的危害評(píng)估值歸一化,進(jìn)而得出不同ARGs的人類健康風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)。最后,依據(jù)不同ARGs人類健康風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)的數(shù)值大小,將指數(shù)排名前 25%的 ARGs被劃為風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)一級(jí);排名在25%～50% 的ARGs被劃為風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)二級(jí);排名在50%～75% 的ARGs被劃為風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)三級(jí);剩余的則為風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)四級(jí)。由此可見(jiàn),采用定量評(píng)估的方法對(duì)ARGs進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)表征不僅可以將ARGs劃分為不同的風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別,還可比較同一級(jí)別不同ARGs風(fēng)險(xiǎn)值的大小和每一個(gè)危害要素對(duì)人類健康風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)的影響大小,相較于定性評(píng)估而言其獲得的結(jié)果更為豐富且準(zhǔn)確。

綜上可知,在對(duì)ARGs進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)表征時(shí),定量評(píng)估的方法更優(yōu)于定性評(píng)估,因而在對(duì)畜禽糞肥源ARGs進(jìn)行生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí),可首先根據(jù)畜禽糞肥源ARGs的數(shù)據(jù)庫(kù),采用宏基因組等方法通過(guò)對(duì)不同暴露特征和路徑等進(jìn)行暴露評(píng)估,進(jìn)而篩選出需進(jìn)行危害評(píng)估的目標(biāo)ARGs。接著,基于不同種類畜禽糞肥源ARGs的危害特性,明確危害評(píng)估關(guān)鍵點(diǎn)對(duì)不同類別ARGs的主次效應(yīng),將其在單個(gè)暴露路徑的多個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)進(jìn)行綜合評(píng)估,完成單個(gè)暴露路徑目標(biāo)ARGs的危害評(píng)估過(guò)程。最后,可選用合適的定量或定性評(píng)估方法得出ARGs在各個(gè)暴露路徑的風(fēng)險(xiǎn)總值,根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)總值的大小劃分畜禽糞肥源ARGs的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí),以此作為畜禽糞肥源ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型。

3 小 結(jié)

ARGs作為環(huán)境中的新型污染物,已對(duì)全球公共衛(wèi)生構(gòu)成重大威脅。建立畜禽糞肥源ARGs的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估框架,闡明其在不同暴露路徑中的源匯機(jī)制和關(guān)鍵危害意義重大。國(guó)內(nèi)外學(xué)者圍繞畜禽糞肥源中ARGs的主要來(lái)源、轉(zhuǎn)移機(jī)制及抗生素抗性與微生物群落的互作機(jī)制開(kāi)展了一系列的評(píng)估研究,但對(duì)于畜禽糞肥源ARGs和微生物功能群落之間的關(guān)系、傳播途徑中的影響因素以及造成的各種人類健康后果仍不明確。如何預(yù)測(cè)這幾個(gè)因素在不同暴露路徑下對(duì)畜禽糞肥源ARGs的影響,以及如何根據(jù)畜禽糞肥源ARGs關(guān)鍵危害點(diǎn)選擇適用的危害評(píng)估方法,提高畜禽糞肥源ARGs風(fēng)險(xiǎn)表征的可信度,仍是畜禽糞肥源ARGs生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中亟待解決的問(wèn)題。