賈麗娜,佘 欣

桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗科,廣西桂林 541001

B族鏈球菌(GBS)是主要寄生在人消化道下端及泌尿生殖道的一種條件致病菌,是一種革蘭陽性球菌,屬于β-溶血性鏈球菌。依據(jù)其莢膜多糖的抗原性,GBS可分為Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ 及Ⅸ共10種血清型。GBS是引起圍生期孕婦感染的主要致病菌之一,GBS感染后可導(dǎo)致孕婦胎膜早破、絨毛膜羊膜炎、產(chǎn)后出血等不良妊娠結(jié)局;寄生在孕婦生殖道的GBS通過母嬰傳播可致新生兒感染,導(dǎo)致新生兒肺炎、新生兒敗血癥、新生兒腦膜炎等嚴重的感染性疾病,嚴重時可造成新生兒死亡或者神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥[1]。本研究擬了解圍生期孕婦GBS感染狀況及其血清型與不良妊娠結(jié)局的關(guān)系,為開展GBS篩查、臨床防治GBS感染及保證圍生期孕婦良好妊娠結(jié)局提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年7月至2020年12月在本院建卡產(chǎn)檢并分娩的圍生期孕婦1 294例為研究對象。所有研究對象對本研究均知情同意且自愿參加;本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過。納入標(biāo)準:21～35歲;未合并妊娠期并發(fā)癥(糖尿病、高血壓、甲狀腺功能減退癥等);標(biāo)本采集前1周孕婦未使用抗菌藥物。排除標(biāo)準:雙胎妊娠;存在滴蟲、真菌、支原體等其他微生物生殖道感染;患肝、腎、心、腦等慢性疾病;患精神疾病。

1.2儀器與試劑 VITEK MS質(zhì)譜儀及配套的基質(zhì)液、靶板、質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC8739均購自法國生物梅里埃股份有限公司;生物安全柜購自濟南鑫貝生物技術(shù)有限公司;哥倫比亞血瓊脂平板購自杭州天和微生物試劑有限公司;血清分型試劑購自丹麥血清研究所。

1.3方法

1.3.1GBS標(biāo)本采集方法 所有研究對象入院時由專業(yè)技術(shù)熟練的產(chǎn)科醫(yī)生采集陰道分泌物,醫(yī)生使用一次性無菌棉簽拭子在受檢孕婦陰道下1/3處旋轉(zhuǎn)一周,將采集好的拭子放入無菌試管保存并立即送往檢驗科微生物室檢測。

1.3.2GBS培養(yǎng)及鑒定 按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第4版[2]進行GBS培養(yǎng)及鑒定。陰道分泌物拭子接種于哥倫比亞血瓊脂平板,放置恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)18～24 h后觀察血平板菌落特點,挑取灰白色、半透明、圓形、中等大小、β溶血的GBS可疑菌落涂于質(zhì)譜儀的靶板,加基質(zhì)液處理干燥后采用VITEK MS質(zhì)譜儀進行快速鑒定。

1.3.3GBS血清型分型 鑒定為GBS的菌株血清型分型采用型特異的乳膠凝集試劑盒,不與任何一種型抗血清反應(yīng)的菌株歸為不能分型菌株。

1.3.4分組及觀察指標(biāo) 以GBS細菌培養(yǎng)為標(biāo)準,了解圍生期孕婦生殖道GBS感染率。將GBS陽性孕婦作為陽性組,按1∶3比例隨機抽取同期GBS陰性孕婦作為陰性組,并查閱醫(yī)院臨床病例系統(tǒng),比較兩組孕婦早產(chǎn)、胎膜早破、產(chǎn)后出血、絨毛膜羊膜炎和宮內(nèi)胎兒窘迫等不良妊娠結(jié)局情況。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 20.0軟件進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料以例數(shù)、百分率表示,組間比較采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1圍生期孕婦GBS感染狀況 1 294例圍生期孕婦中,陰道分泌物GBS檢測陽性75例,故陽性組孕婦有75例,陰性組孕婦有225例。生殖道GBS感染率為5.80%(75/1 294)。

2.2兩組孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生情況比較 陽性組孕婦胎膜早破、產(chǎn)后出血發(fā)生率均高于陰性組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);兩組早產(chǎn)、胎兒窘迫和絨毛膜羊膜炎發(fā)生率比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生情況比較[n(%)]

2.3陽性組不良妊娠結(jié)局孕婦感染GBS血清型的分布 陽性組孕婦感染的75株GBS中共檢出Ⅰa型(24株,32.00%)、Ⅰb型(20株,26.67%)和Ⅲ型(31株,41.33%) 3種血清型。感染GBS發(fā)生不良妊娠結(jié)局的孕婦中,檢出Ⅰa型6株,Ⅰb型12株,Ⅲ型17株。感染Ⅰb型GBS的孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生率為60.00%(12/20),高于Ⅰa型[25.00%(6/24)],差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.528,P=0.019);感染Ⅲ型GBS的孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生率為54.84%(17/31),高于Ⅰa型,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.950,P=0.026);而感染Ⅰb型和Ⅲ型GBS的孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生率[60.00%(12/20)vs.54.84%(17/31)]比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.132,P=0.716)。

由表2可見,陽性組中23例胎膜早破孕婦感染Ⅲ型GBS的比例最高,占60.87%,其次是Ⅰb型(26.09%)和Ⅰa型(13.04%);5例產(chǎn)后出血孕婦感染Ⅰb型GBS的比例最高,占60.00%,Ⅰa型和Ⅲ型均占20.00%;而7例早產(chǎn)、胎兒窘迫和絨毛膜羊膜炎孕婦感染的GBS 3種血清型分布相對比較均衡。

表2 陽性組不良妊娠結(jié)局孕婦感染GBS血清型的分布[n(%)]

3 討 論

妊娠會引起孕婦陰道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境紊亂,尤其妊娠晚期陰道黏膜水腫、充血等均可能增加生殖道GBS的感染率[3]。既往有研究報道我國圍生期孕婦GBS感染率為3.5%～32.4%[4]。本研究圍生期孕婦生殖道GBS感染率為5.80%,在全國范圍內(nèi)處于較低水平。其原因有以下幾方面:(1)標(biāo)本采集方面。本研究僅單采集陰道下1/3分泌物培養(yǎng)。由于GBS也寄生在人消化道下端,如同時采集直腸分泌物可提高陽性率。(2)檢測方法的局限性。本研究采用的是傳統(tǒng)的一般細菌培養(yǎng)法,直接培養(yǎng)出GBS雖然是確診的金標(biāo)準,但是在培養(yǎng)中易受陰道中其他病原菌的生長抑制而導(dǎo)致漏檢。邢薇等[5]報道PCR法檢測的GBS陽性率高于細菌培養(yǎng)法(P<0.001)。容莉莉等[6]報道,層析法檢出的GBS陽性率(12.6%)高于培養(yǎng)法 (6.3%),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。PCR法和層析法雖然檢出率高,但是不能進行藥敏試驗,所以一般細菌培養(yǎng)法還是不可替代的。(3)研究對象的選擇限制。本研究納入研究對象的年齡為21～35歲,而杜文淵等[7]報道GBS感染與年齡有關(guān),在年齡≤30歲組、31～35歲組、>35歲組中,>35歲組感染率最高。此外,本研究排除了滴蟲、真菌、支原體等生殖道感染者,宦宇等[8]報道,白帶清潔度Ⅲ～Ⅳ度、唾液酸苷酶陽性、解脲支原體陽性、有流產(chǎn)史是孕晚期孕婦GBS定植的獨立危險因素(P<0.05)。

在探討圍生期孕婦生殖道GBS感染與不良妊娠結(jié)局關(guān)系的報道中:何建維等[9]研究顯示GBS陽性顯著增加了胎膜早破、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血、產(chǎn)褥感染的發(fā)生率,增加了不良妊娠結(jié)局的發(fā)生;張雪梅等[10]研究報道,GBS感染組孕婦剖宮產(chǎn)、胎膜早破、早產(chǎn)、產(chǎn)褥感染、子宮內(nèi)膜感染、胎兒窘迫、新生兒窒息的比例均高于未感染組;方雪等[11]報道,研究組胎膜早破、早產(chǎn)發(fā)生率高于對照組,而兩組剖宮產(chǎn)、產(chǎn)后出血及新生兒窒息發(fā)生率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);王曉娜等[12]報道,感染組孕婦胎膜早破、早產(chǎn)發(fā)生率高于對照組,而感染組產(chǎn)后出血發(fā)生率與對照組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);劉曉一等[13]研究結(jié)果顯示,帶菌組孕婦早產(chǎn)、宮內(nèi)感染的發(fā)生率較對照組明顯增高,而兩組孕婦胎膜早破、胎兒窘迫和稽留流產(chǎn)的發(fā)生率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究中,兩組胎膜早破和產(chǎn)后出血發(fā)生率比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而早產(chǎn)、胎兒窘迫和絨毛膜羊膜炎發(fā)生率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。各研究結(jié)果之間存在一定的差異,這可能與研究對象的納入標(biāo)準不同有關(guān)。楊煒婷等[14]報道,孕婦高齡、文化程度低、既往有陰道炎史、有流產(chǎn)史是導(dǎo)致生殖道GBS感染的主要因素;也可能與地區(qū)差異有關(guān),GBS感染有很大的區(qū)域性和種族性差異,因此南北地區(qū)感染的菌株表型也有所差異;還有可能與樣本量的大小及是否進行預(yù)防性使用抗菌藥物有關(guān)。

本研究結(jié)果顯示,孕婦GBS感染株共檢出Ⅰa型、Ⅰb型和Ⅲ型3種血清型,其中Ⅲ型占比最高,其次是Ⅰa型和Ⅰb型,陽性組中感染Ⅰb型和Ⅲ型GBS的孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生率高于Ⅰa型,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。GBS不同血清型菌株毒力基因的表達與其定植力和侵襲力密切相關(guān),不同地區(qū)血清型分布也有很大的差異。有文獻報道GBS致病性與血清型相關(guān)[15];徐億力等[16]報道,Ⅲ型GBS的定植、侵襲能力更強且與不良妊娠結(jié)局有關(guān),妊娠晚期孕婦有必要進行GBS篩查及血清型鑒別。

綜上所述,GBS感染增加了圍生期孕婦胎膜早破、產(chǎn)后出血等不良妊娠結(jié)局的發(fā)生率,感染Ⅰb型和Ⅲ型GBS的孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生率更高,因此臨床需加強對孕婦的健康宣教,早期預(yù)防GBS感染,重視圍生期孕婦生殖道GBS及其血清型篩查并及時進行干預(yù),這對改善孕婦妊娠結(jié)局具有重要意義。由于一些客觀條件的限制,本研究仍存在一定的局限性,本研究對圍生期孕婦僅采集陰道分泌物通過一般細菌培養(yǎng)法檢測GBS,可能會造成GBS漏檢而對檢測結(jié)果有所影響;本研究僅探討了圍生期孕婦GBS感染與不良妊娠結(jié)局的關(guān)系,并未對孕婦GBS感染妊娠后新生兒的結(jié)局進行探討,因此仍需進一步研究。