摘要要：雙孢蘑菇是世界上種植最多的食用菌之一，具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，富含碳水化合物、氨基酸、脂肪、維生素等，具有潛在的抗癌、抗氧化、抗肥胖和抗炎特性。菌被又稱子座（菌絲墊狀結(jié)構(gòu)），是雙孢蘑菇制種和栽培過(guò)程中常見(jiàn)的一種生理性病害，對(duì)蘑菇生產(chǎn)造成了嚴(yán)重?fù)p害。通過(guò)菌株特性、菌絲角變、菌種退化、環(huán)境因素等方面對(duì)菌被發(fā)生成因進(jìn)行了闡述，并從制種過(guò)程、基質(zhì)選擇、菌種保藏、環(huán)境控制等方面為菌被防控提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞：雙孢蘑菇；菌被；角變；生理性病害

中圖分類號(hào)：S646.11" " " " " " " " " " "文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A" " " " " " " " " " " " 文章編號(hào)：2095-5774（2024）04-0241-09

Research Progress on the Coat Occurrence and Control of Agaricus bisporus

Chen Wenzhi，Zeng Zhiheng，Cai Zhixin，Lu Yuanping，Chen Meiyuan，Dai Jianqing*，Zeng Hui*

（Institute of Edible Fungi，F(xiàn)ujian Academy of Agricultural Sciences/National and Local Joint Engineering Research Center for Breeding amp; Cultivation of Featured Edible Fungi，F(xiàn)ujian Academy of Agricultural Sciences，F(xiàn)uzhou，F(xiàn)ujian 350013，China）

Abstract：Agaricus bisporus，one of the most widely cultivated edible mushrooms in the world，is rich in nutrients such as carbohydrates，amino acids，fats，and vitamins，has potential anticancer，antioxidant，anti-obesity，and anti-inflammation properties. Coat also known as stroma （pad structure of mycelia），is the common physiological disease in the spawning and cultivation of Agaricus bisporus，causing serious damage to mushroom production.The cause of coat was expounded from the aspects of strain characteristics，sector mutation，strain degeneration，environmental factors，and the basis for coat prevention and control from the aspects of spawn making，substrate selection，strain preservation and environmental control.

Key words：Agaricus bisporus；Coat；Sector mutation；Physiological diseases

收稿日期：2024-05-28

基金項(xiàng)目：財(cái)政部和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系資助項(xiàng)目（CARS20）；福建省人民政府與中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展超越“5511”協(xié)同創(chuàng)新工程項(xiàng)目（XTCXGC2021007）；福建省種業(yè)創(chuàng)新與產(chǎn)業(yè)化工程項(xiàng)目（zycxny2021011）；福建省屬公益類科研院所基本科研專項(xiàng)（2023R1033002）；福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院東西部協(xié)作項(xiàng)目（DKBF2024-11）

作者簡(jiǎn)介：*為通訊作者，曾輝（1969-），男，教授級(jí)高級(jí)工程師，博士，主要從事食用菌制種及種質(zhì)資源研究，E-mail：475027860@qq.com；戴建清（1972-），男，高級(jí)農(nóng)藝師，主要從事食用菌工廠化制種工藝研究，E-mail：317152396@qq.com。陳文智（1996-），男，研究實(shí)習(xí)員，碩士，主要從事食用藥菌栽培及育種研究，E-mail：wz13123167516@163.com

雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）是世界上種植最多的食用菌之一，其產(chǎn)量占世界食用菌總產(chǎn)量的15%［1］。雙孢蘑菇富含碳水化合物、氨基酸、脂肪、維生素等［2-5］，具有潛在的抗癌、抗氧化、抗肥胖和抗炎特性，可以對(duì)人體的冠心病、癌癥、糖尿病、免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病以及病毒、細(xì)菌和真菌感染等方面起治療作用［6-7］，因其優(yōu)質(zhì)的口感和高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，200多年來(lái)一直是人類飲食的重要組成部分［8-10］。我國(guó)雙孢蘑菇自1924年胡昌熾先生引進(jìn)以來(lái)［11］，經(jīng)過(guò)多年選育工作，育種者們不斷實(shí)現(xiàn)品種的更新?lián)Q代。目前農(nóng)業(yè)與設(shè)施栽培（占全國(guó)雙孢蘑菇總量近70%）使用的品種主要為福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所的As2796、W192、W2000、福蘑38等，二次與三次發(fā)酵工廠化國(guó)產(chǎn)品種有W192、福蘑58、福蘑78、上海申K6等，進(jìn)口品種有美國(guó)A15等，使得我國(guó)雙孢蘑菇年產(chǎn)量從1975年的5萬(wàn)t上升至2021年的161萬(wàn)t，提高了30余倍［12］，接近全球年產(chǎn)量的一半。

雙孢蘑菇在生產(chǎn)的過(guò)程中常見(jiàn)蘑菇病害有兩種：由真菌、細(xì)菌、病毒等引起的生物性或傳染性疾病和由環(huán)境因素引起的生理性病害（非生物性或非傳染性疾病或障礙）。環(huán)境參數(shù)如果偏離最佳要求通常會(huì)使基質(zhì)對(duì)蘑菇菌絲不具選擇性，促進(jìn)其他霉菌和害蟲(chóng)的生長(zhǎng)，或者干擾正常的生產(chǎn)從而導(dǎo)致蘑菇出現(xiàn)許多異常［13］。表1列舉了一些因環(huán)境參數(shù)變化導(dǎo)致的病害，這些病害發(fā)生大多跟基質(zhì)中的低或高濕度、pH值和溫度，房間內(nèi)的CO2濃度、風(fēng)速、煙霧和相對(duì)濕度等環(huán)境因素相關(guān)。與其他生理性病害不同，菌被發(fā)生造成的危害，不僅影響蘑菇制種行業(yè)，還對(duì)蘑菇生產(chǎn)造成嚴(yán)重?fù)p失。

菌被又稱子座（菌絲墊狀結(jié)構(gòu)）［14］，在生產(chǎn)上主要表現(xiàn)為雙孢蘑菇菌絲體在覆土表面和堆肥中大量生長(zhǎng)，這個(gè)現(xiàn)象會(huì)導(dǎo)致原基數(shù)量減少，嚴(yán)重影響子實(shí)體的形成或推遲出菇。此外由于菌被產(chǎn)生后，菌絲將覆土層封閉，使水無(wú)法穿透覆土層，還對(duì)澆水效果造成影響［15］。輕度菌被不會(huì)對(duì)產(chǎn)量產(chǎn)生不利影響（圖1A），但過(guò)多的菌被可能會(huì)降低產(chǎn)量，嚴(yán)重的可能導(dǎo)致絕收（圖1B）［16-17］。菌被發(fā)生與菌絲角變［18］、環(huán)境變化等因素有關(guān)。其中，角變是一種菌株不穩(wěn)定的表現(xiàn)，其菌絲會(huì)在營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中出現(xiàn)一定比例的形態(tài)和生理變異，主要表現(xiàn)為貼生型菌絲的扇形氣生變異（圖2）。雙孢蘑菇實(shí)行母種、原種和栽培種三級(jí)繁育體系，角變的出現(xiàn)，會(huì)從母種菌絲的狀態(tài)影響到原種，最終導(dǎo)致栽培種產(chǎn)生菌被，且大量生產(chǎn)實(shí)踐表明，栽培種出現(xiàn)菌被，生產(chǎn)上大概率會(huì)產(chǎn)生菌被。我國(guó)雙孢蘑菇種植每年需栽培種約11萬(wàn)t，產(chǎn)值近10億元，菌被的發(fā)生極大地影響了制種環(huán)節(jié)，對(duì)制種行業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此，加強(qiáng)對(duì)母種、原種、栽培種的質(zhì)量控制，減少其菌被的發(fā)生，并嚴(yán)格淘汰產(chǎn)生菌被的不合格菌種，對(duì)后續(xù)的栽培生產(chǎn)至關(guān)重要。

目前關(guān)于菌被發(fā)生的具體機(jī)制還未明晰，如何科學(xué)地減少菌被發(fā)生對(duì)雙孢蘑菇制種和栽培的影響，對(duì)指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐有重要意義。因此，本文結(jié)合國(guó)內(nèi)外最新研究進(jìn)展，從雙孢蘑菇的菌株特性、菌絲角變、菌種退化、環(huán)境因素等方面對(duì)菌被發(fā)生成因進(jìn)行系統(tǒng)的闡述，并在制種過(guò)程、基質(zhì)選擇、菌種保藏、環(huán)境控制等方面為菌被防控提供一定的參考。

1 菌被的成因

雙孢蘑菇菌被的發(fā)生與菌株的遺傳特性有關(guān)，氣生型菌株比其他菌株更常見(jiàn)這種情況，菌種保存時(shí)間過(guò)久，菌種退化，或者是菌種在擴(kuò)繁時(shí)質(zhì)量把控不嚴(yán)，菌種儲(chǔ)藏和運(yùn)輸過(guò)程中溫度過(guò)高，都有可能產(chǎn)生菌被。菌被是栽培種培養(yǎng)中的一種遺傳功能障礙，有時(shí)也會(huì)由環(huán)境因素觸發(fā)在生產(chǎn)階段［15］，如濕度和水分的變化，可能會(huì)刺激菌絲體的過(guò)度生長(zhǎng)，導(dǎo)致其在覆土表層產(chǎn)生一層細(xì)密的、不透水的菌皮。過(guò)量的CO2、堆肥中的高水分含量以及延長(zhǎng)的菌絲生長(zhǎng)周期也是導(dǎo)致菌被形成的原因［13］，此外，覆土的水分不均勻，特別是潮濕區(qū)域，通常也與菌被的出現(xiàn)有關(guān)。有大量研究表明，在營(yíng)養(yǎng)豐富的環(huán)境中，食用菌會(huì)表現(xiàn)出高水平的形態(tài)和生理多樣性，且往往發(fā)生在沒(méi)有任何誘變劑的情況下［19］，因此營(yíng)養(yǎng)條件的改變也與菌被發(fā)生有一定的關(guān)系。

1.1 菌株特性

研究表明，菌被發(fā)生與菌株特性有關(guān)，氣生型菌株因其氣生菌絲旺盛，更易發(fā)生菌絲徒長(zhǎng)，在瓶口處形成菌被［20］。任愛(ài)民［21］通過(guò)對(duì)生產(chǎn)上使用的4個(gè)品種的菌絲萌發(fā)吃料試驗(yàn)表明，W192和A15無(wú)氣生菌絲現(xiàn)象發(fā)生，而W2000和As2796菌絲灰白色，有氣生菌絲現(xiàn)象發(fā)生，尤其As2796氣生菌絲發(fā)生明顯。王倩等［22］通過(guò)菌株比較試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)W2000、ZN-1、442等菌株在結(jié)菇前，覆土表面產(chǎn)生大量菌被。Li等［18］研究表明雙孢蘑菇野生菌株中獲得的擔(dān)孢子培養(yǎng)物均產(chǎn)生正常的菌絲，沒(méi)有任何產(chǎn)生角變的傾向。相似地，本課題組通過(guò)對(duì)多種野生分離菌株進(jìn)行馴化和出菇試驗(yàn)的大量實(shí)踐也證明了野生分離株不會(huì)產(chǎn)生菌被，且出菇時(shí)間提前。以上研究結(jié)果均表明菌被發(fā)生與菌株本身的種性密切相關(guān)，且具有遺傳傾向。

1.2 菌絲角變

雙孢蘑菇的菌絲形態(tài)可能與菌株不穩(wěn)定性有關(guān)，通常角變會(huì)以快速生長(zhǎng)的菌絲體結(jié)塊形成子座，早期發(fā)現(xiàn)這些角變對(duì)控制菌被的發(fā)生、維持栽培種質(zhì)量非常重要。Li等［18］研究表明商業(yè)化的菌株可能具有自發(fā)產(chǎn)生角變的傾向，通過(guò)對(duì)健康的U1菌株獲得的擔(dān)孢子培養(yǎng)物進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)約有5%在谷物基質(zhì)試驗(yàn)中產(chǎn)生不可逆的角變，并對(duì)已經(jīng)產(chǎn)生角變的菌株再次進(jìn)行該試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其子代有一半正常生長(zhǎng)，另一半則產(chǎn)生了某種程度的角變；傳代和第二次谷物基質(zhì)試驗(yàn)表明，80%以上的初始擔(dān)孢子培養(yǎng)物角變是不可逆的。Heath等［23］研究表明角變與具有異常生長(zhǎng)模式的菌絲高頻率形成有關(guān)，由于這種發(fā)生率在菌落內(nèi)分布并不均勻，從母種菌落的不同部位采集的菌絲接種物可能具有不同的角變潛力。但研究表明角變的發(fā)生不是必然的，而且角變的培養(yǎng)物并不會(huì)每次都表現(xiàn)出異常生長(zhǎng)［16，24-25］。Li等［18］發(fā)現(xiàn)谷物基質(zhì)培養(yǎng)中觀察到的從絨毛或子座分離的擔(dān)孢子分離株并不總是形成與親本分離株相同類型的角變，有些甚至根本不形成角變。Straatsma等［26］在傳代培養(yǎng)過(guò)程中使用少量的角變接種物時(shí)，經(jīng)常會(huì)發(fā)生從蓬松生長(zhǎng)到正常生長(zhǎng)的逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象。

有報(bào)道稱，角變的菌株會(huì)比正常菌落有更多的氣生菌絲［27］。為探究菌絲形態(tài)與角變是否有關(guān)，Heath等［23］通過(guò)對(duì)正常U1商業(yè)菌株和一些不可逆的子座角變的菌絲形態(tài)進(jìn)行了鏡檢，結(jié)果表明，雙孢蘑菇正常分離株和子座角變分離株之間的宏觀差異反映在單個(gè)菌絲的微觀特征上的差異主要表現(xiàn)為子座分離物的主導(dǎo)菌絲頂點(diǎn)到第一個(gè)分支的平均距離顯著高于其余菌株，以及所有的角變分離株都在菌落邊緣有較高的菌絲頻率，表現(xiàn)出分支上不規(guī)則的異常生長(zhǎng)；此外，所有的角變分離株，都傾向于產(chǎn)生比正常菌株更高頻率的不規(guī)則分枝模式的菌絲。

1.3 菌種退化

在蘑菇菌種生產(chǎn)過(guò)程中，出現(xiàn)的不可逆的和永久性的菌絲生長(zhǎng)變?nèi)?、?yōu)良性狀喪失、代謝能力降低等變化被稱為菌種退化［18］。造成菌種退化的因素有很多，如體細(xì)胞變異，研究表明繼代培養(yǎng)的次數(shù)越多，變異就越多，多次轉(zhuǎn)管造成的菌種退化是菌被形成的原因之一。李洪榮［28］通過(guò)馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基對(duì)As2796母種進(jìn)行多次轉(zhuǎn)管，發(fā)現(xiàn)菌落形態(tài)由貼生型轉(zhuǎn)變?yōu)闅馍?，菌種出現(xiàn)了退化現(xiàn)象。Farimani等［29］檢測(cè)了菌絲在PDA培養(yǎng)基上連續(xù)傳代10次后菌絲的遺傳變化，通過(guò)擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（AFLP）方法對(duì)母種菌絲、正常菌絲和絨毛狀菌絲進(jìn)行遺傳比較，發(fā)現(xiàn)H2菌株中產(chǎn)生了137個(gè)片段，其中57個(gè)片段在母種、正常和絨毛狀菌絲之間存在多態(tài)性；樣本間的多態(tài)性程度證實(shí)了母種、正常和絨毛狀菌絲之間的遺傳差異，但正常菌絲進(jìn)行連續(xù)10次傳代后，菌絲表型上并沒(méi)有發(fā)生變化，總的來(lái)說(shuō)，雙孢蘑菇的菌株退化，表現(xiàn)為易形成絨毛狀菌絲，且具有遺傳傾向；這些遺傳差異可歸因于多種因素，如異核性、無(wú)性重組和有絲分裂交叉的形成，還可能與細(xì)胞學(xué)因素、生理學(xué)因素、病毒感染因素、環(huán)境條件和人為條件等相關(guān)。

1.3.1 病毒感染

導(dǎo)致菌株退化的可能原因之一是病毒感染。雙孢蘑菇在種植過(guò)程中易患由雙鏈RNA病毒引起的法蘭西病毒病（La France isometric virus，LIV）［30-31］，

其癥狀包括子實(shí)體生長(zhǎng)遲緩和畸形，并與可識(shí)別的顆粒和一種9段病毒AbV1有關(guān)［32-33］，隨著診斷技術(shù)的成熟以及相應(yīng)的控制措施，目前該病毒已極為少見(jiàn)［34］。Horgen等［14］使用逆轉(zhuǎn)錄PCR在U1正常株和8個(gè)不可逆角變的分離株中對(duì)這種RNA病毒進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果表明均無(wú)此RNA病毒的變異。然而，引起雙孢蘑菇病毒病的病原種類較多，雙孢蘑菇病毒病另一種重要病原是蘑菇X病毒 （Mushroom virus X，MVX），該病毒病是與30種雙鏈RNA相關(guān)的癥狀（子實(shí)體褐變、子實(shí)體生長(zhǎng)遲緩和畸形）的統(tǒng)稱，其中26種由Grogan等［35］發(fā)現(xiàn)，另外4種由Eastwood等［36］發(fā)現(xiàn)。研究表明，該病毒與已發(fā)現(xiàn)的其他雙孢蘑菇病毒不同［37］，其中有23條dsRNAs與癥狀相關(guān)，包括抑制原基形成，導(dǎo)致菇床成塊不出菇形成菇床“禿斑”、出菇過(guò)程易出現(xiàn)薄皮開(kāi)傘、延遲出菇、畸形菇和變色菇

等［38］，分子量最小的4條dsRNAs（2.0 kb，1.8 kb，

0.8 kb，0.6 kb）與菌蓋褐變有關(guān)［35］。因此，雖然前期研究表明菌株退化與“La France”RNA病毒無(wú)關(guān)，但是否與蘑菇X病毒或其他雙孢蘑菇病毒相關(guān)仍需進(jìn)一步研究。

1.3.2 遺傳變異

雙孢蘑菇是一種次級(jí)同宗結(jié)合擔(dān)子菌，產(chǎn)生的擔(dān)孢子大多是雙核且自身可育。因此造成正常分離株和扇形分離株之間生長(zhǎng)特性差異的一種可能解釋，是與菌絲的天然異核性和去異核化的可能性有關(guān)，在雙孢蘑菇異核體分裂過(guò)程中，有時(shí)會(huì)發(fā)生不相等的核分裂。Horgen等［14］通過(guò)檢測(cè)U1的8個(gè)退化菌株的遺傳改變，發(fā)現(xiàn)有6株丟失了一個(gè)V染色體同源物，RFLP的數(shù)據(jù)與CHEF的數(shù)據(jù)完全一致；此外，除了Fl3分離株外，所有退化的U1分離株似乎都是異核體或部分異核體，它們似乎是去異核化的，從而形成了一個(gè)同核體；總的來(lái)說(shuō)，Horgen等研究的結(jié)果清楚地顯示了一系列與U1角變分離株相關(guān)的遺傳異常，雖然沒(méi)有出現(xiàn)普遍的模式，但在這項(xiàng)研究中檢測(cè)的不可逆角變確實(shí)表現(xiàn)出了基因異常，包括去異核化、等位基因丟失、等位基因轉(zhuǎn)換、染色體長(zhǎng)度多態(tài)。

1.4 環(huán)境因素

菌被的形成與環(huán)境因素、營(yíng)養(yǎng)因素等息息相關(guān)。環(huán)境因素是雙孢蘑菇生產(chǎn)過(guò)程中重要的調(diào)控環(huán)節(jié)，環(huán)境參數(shù)如果出現(xiàn)偏差，會(huì)為蘑菇的正常生長(zhǎng)創(chuàng)造不利環(huán)境，導(dǎo)致產(chǎn)量和質(zhì)量的損失。環(huán)境因素包括基質(zhì)中的低或高濕度、pH值和溫度，以及房間內(nèi)的CO2濃度、風(fēng)速、煙霧和相對(duì)濕度等。環(huán)境因素的改變會(huì)使基質(zhì)對(duì)蘑菇菌絲體沒(méi)有選擇性，促進(jìn)其他霉菌和害蟲(chóng)的生長(zhǎng)，而有些則干擾正常的蘑菇生產(chǎn)［13］。營(yíng)養(yǎng)因素則主要與培養(yǎng)料的C/N比等營(yíng)養(yǎng)成分相關(guān)，研究表明，雙孢蘑菇培養(yǎng)料含氮量過(guò)高、培養(yǎng)溫度過(guò)高，容易引起菌絲徒長(zhǎng)形成氣生型菌絲，出菇室高溫、通風(fēng)不良、CO2濃度過(guò)高等也易引起菌絲徒長(zhǎng)甚至形成床面菌被，不利于子實(shí)體分化。

2 菌被的防控

2.1 制種過(guò)程

目前商業(yè)菌株的菌落形態(tài)主要有貼生型（匍匐型）和半氣生型，工廠化高產(chǎn)的品種如A15、福蘑78、W192等均為貼生型，農(nóng)法栽培的品種As2796、W2000等為半氣生型。在制種的過(guò)程中，氣生菌絲過(guò)多會(huì)引起菌絲徒長(zhǎng)造成菌被發(fā)生。因此需要把好菌種關(guān)，選擇符合種性、符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的優(yōu)質(zhì)菌種進(jìn)行擴(kuò)繁。如圖3所示，A圖為貼生型菌株，B圖為半氣生型菌株，在母種轉(zhuǎn)接過(guò)程中，要挑選貼生的菌絲接種，B圖中邊緣上出現(xiàn)氣生的菌絲不要挑選用來(lái)接種，如果菌種已有菌絲徒長(zhǎng)現(xiàn)象時(shí)應(yīng)不再使用，大量實(shí)踐證明，挑取貼生的菌絲進(jìn)行逐級(jí)擴(kuò)繁，栽培種不易產(chǎn)生菌被。

2.2 基質(zhì)選擇

菌種的培養(yǎng)基質(zhì)選擇也會(huì)影響菌被的發(fā)生，雙孢蘑菇菌種主要包括麥粒菌種、小米菌種和礦物菌種等。有研究表明退化的菌種在麥粒培養(yǎng)基中易形成菌被，通過(guò)使用不同培養(yǎng)基的菌落形態(tài)進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)PDA培養(yǎng)基更易誘導(dǎo)氣生菌絲的生長(zhǎng)［28］。大量生產(chǎn)實(shí)踐和試驗(yàn)表明，非糧基質(zhì)原種可以減少栽培種產(chǎn)生菌被［39］。礦物菌種如使用浸透營(yíng)養(yǎng)成分的珍珠巖菌種，其菌種的接種操作方法、菌種成活率、菌絲萌發(fā)速度等與谷粒菌種相似［40］，此外還具有使用方便、顆粒小、接種量大、不易產(chǎn)生菌被的優(yōu)點(diǎn)。曾志恒等［39］通過(guò)對(duì)新型顆粒原種配方進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明新型顆粒原種相對(duì)菌絲量分別為小米原種的1.29倍以及麥粒原種的2.35倍，其菌絲滿袋時(shí)間也大幅縮短，更不易產(chǎn)生菌被。曾輝［41］研究表明以膨脹珍珠巖、蛭石為配方的礦物原種，其生產(chǎn)耗時(shí)、染菌率、培養(yǎng)時(shí)間和保存期等比發(fā)酵棉籽殼原種和麥粒種原種具有明顯優(yōu)勢(shì)。因此研究新型顆粒原種配方不僅有利于減少菌被發(fā)生，更有利于提升菌種性能。在生產(chǎn)過(guò)程中，對(duì)于堆肥的選擇需要嚴(yán)格按照培養(yǎng)料的配方標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行堆料，控制好C/N比、含水量和發(fā)酵溫度，避免培養(yǎng)料的過(guò)度腐熟，使其適合菌絲的生長(zhǎng)，從而減少菌被的發(fā)生。

2.3菌種保藏

雙孢蘑菇產(chǎn)業(yè)中，菌種的質(zhì)量問(wèn)題是雙孢蘑菇能否高產(chǎn)的關(guān)鍵問(wèn)題。雙孢蘑菇栽培種，尤其是麥粒菌種經(jīng)歷長(zhǎng)時(shí)間保藏（一般指在低溫4℃保藏超過(guò)90 d）或高溫脅迫下容易分泌黃水，會(huì)出現(xiàn)異味、菌絲干癟、塌壁，形成大量菌被，而且其生活力降低、菌絲生長(zhǎng)緩慢，接種在蘑菇堆肥中會(huì)大幅度減產(chǎn)達(dá)20%～50%，嚴(yán)重可能不出菇［42］。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GB 19171-2003雙孢蘑菇菌種 》［43］中對(duì)母種、原種、栽培種等貯存作出了規(guī)定，母種應(yīng)在5℃±1℃下貯存，貯存期不超過(guò)90 d；原種應(yīng)盡快使用，在溫度24℃±1℃下貯存不超過(guò)10 d、在5℃±1℃下貯存不超過(guò)40 d；栽培種則應(yīng)盡快使用，在溫度24℃±1℃存放谷粒種不超過(guò)10 d、其余培養(yǎng)基的栽培種不超過(guò)20 d，在5℃±1℃下可貯存90 d。在種源保藏和種性維持上，研究表明，使用液氮保存雙孢蘑菇菌株相對(duì)于4℃冰箱保藏效果好，既可保證菌種的產(chǎn)量和質(zhì)量，又可避免4℃冰箱保藏定期轉(zhuǎn)接可能造成的菌種退化和污染［44］。李洪榮［45］通過(guò)對(duì)雙孢蘑菇As2796、As3003等4個(gè)菌株4 a液氮保藏后的生理生化指標(biāo)、遺傳特性以及出菇穩(wěn)定性等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明液氮保藏方法可以長(zhǎng)期保持雙孢蘑菇菌種的穩(wěn)定性。因此，選擇合適的方式保存菌種能有效減少菌株遺傳特性的改變，預(yù)防菌被發(fā)生。

2.4環(huán)境因素

在栽培過(guò)程中，菌被常發(fā)生于蘑菇調(diào)水以后，或菇房溫度過(guò)高、濕度大、通風(fēng)換氣不良的環(huán)境條件下。因此，應(yīng)選用質(zhì)量良好的菌種，適時(shí)播種；噴水量不要過(guò)少，細(xì)土噴水不要過(guò)急，在早晚涼爽時(shí)噴水；加強(qiáng)通風(fēng)換氣，降低菇房的溫、濕度，抑制菌絲旺長(zhǎng)；發(fā)現(xiàn)菌床土層冒出大量氣生菌絲時(shí)，應(yīng)減少噴水或停止噴水，降低菇房濕度和CO2濃度；對(duì)結(jié)成的菌被，及時(shí)用竹簽或刀片戳幾個(gè)小孔，或用刀劃破菌被，結(jié)合噴重水、加大通風(fēng)量，促使菇蕾生長(zhǎng)［46］。

3總結(jié)與展望

菌被的形成是多因素共同的產(chǎn)物，菌種自身種性、菌種退化、制種過(guò)程以及環(huán)境等因素都會(huì)對(duì)菌被的發(fā)生起到重要影響，隨著雙孢蘑菇工廠化程度的不斷加深，只有深入了解菌被發(fā)生的相關(guān)機(jī)制，嚴(yán)格做好每個(gè)過(guò)程的工藝控制，才能更好地減輕乃至杜絕菌被對(duì)雙孢蘑菇生產(chǎn)造成的危害和巨大經(jīng)濟(jì)損失。本文通過(guò)對(duì)菌被的相關(guān)研究進(jìn)行了總結(jié)，發(fā)現(xiàn)菌被控制的關(guān)鍵主要還是在于保持菌株特性與控制遺傳變異，除通過(guò)與野生菌株雜交系統(tǒng)選育出更優(yōu)質(zhì)的無(wú)菌被品種外，如何提前判斷菌被發(fā)生也十分重要。雖然Begin等［16］已經(jīng)制定了判斷蘑菇培養(yǎng)物角變可能性的程序，但因其需要根據(jù)蘑菇生長(zhǎng)2周后才能進(jìn)行肉眼評(píng)估，耗時(shí)過(guò)長(zhǎng)。因此，進(jìn)一步闡明造成角變或子座形成的關(guān)鍵靶位點(diǎn)或相關(guān)生物學(xué)機(jī)制，明確菌被發(fā)生的相關(guān)基因，開(kāi)發(fā)出快速簡(jiǎn)單有效的菌被早期檢測(cè)診斷技術(shù)或產(chǎn)品，為菌種制作和生產(chǎn)過(guò)程提供更好的質(zhì)量控制技術(shù)，是未來(lái)更好地減少乃至杜絕菌被問(wèn)題的重要研究方向。

參考文獻(xiàn)：

［1］Ramos M，Burgos N，Barnard A，et al. Agaricus bisporus and its by-products as a source of valuable extracts and bioactive compounds［J］. Food Chemistry，2019，292：176-187.

［2］Correa R，Brugnari T，Bracht A，et al. Pleurotus spp.（oyster mushroom） related with its chemical composition：A review on the past decade findings［J］. Trends Food Sci. Technol，2016，50：103-117.

［3］Berna?E，Jaworska G，Lisiewska Z. Edible mushrooms as a source of valuable nutritive constituents［J］. Acta Scientiarum Polonorum Technologia Alimentaria，2006，5（1）：5-20.

［4］Shbeeb D A，F(xiàn)arahat M F，Ismail H M. Macronutrients analysis of fresh and canned Agaricus bisporus and Pleurotus ostreatus mushroom species sold in Alexandria markets，Egypt［J］. Egypt. Prog. Nutr，2019，21： 203-209.

［5］Gheibi N，Saboury A A，Haghbeen K，et al. The effect of some osmolytes on the activity and stability of mushroom tyrosinase［J］. Journal of Biosciences，2006，31（3）：355-362.

［6］Muszyńska B，Ka?a K，Rojowski J，et al. Composition and biological properties of Agaricus bisporus fruiting bodies-a review［J］. Polish journal of food and nutrition sciences，2017，67（3）：173-181.

［7］Das B，De B，Chetree R，et al. Medicinal aspect of mushrooms：A view point［J］. Herbal Medicine in India：Indigenous Knowledge，Practice，Innovation and its Value，2020：509-532.

［8］Morin E，Kohler A，Baker A R，et al. Genome sequence of the button mushroom Agaricus bisporus reveals mechanisms governing adaptation to a humic-rich ecological niche［J］. Proceedings of the National Academy of Science，2012，109（43）：17501-17506.

［9］Meng D M，Zhang Y X，Yang R，et al. Arginase participates in the methyl jasmonate-regulated quality maintenance of postharvest Agaricus bisporus fruit bodies［J］. Postharvest Biology and Technology，2017，132：7-14.

［10］Yang K X，Xi Z A，Zhang Y X，et al. Polyamine biosynthesis and distribution in different tissues of Agaricus bisporus during postharvest storage［J］. Scientia Horticulturae，2020，270：109457.

［11］柯斌榕，蘭清秀，盧政輝，等. 福建省雙孢蘑菇栽培技術(shù)的變革與發(fā)展［J］. 食藥用菌，2017 （1）：12-19.

［12］董浩然，于海龍，姜寧，等.中國(guó)食用菌工廠化生產(chǎn)發(fā)展現(xiàn)狀及趨勢(shì)［J］.食藥用菌，2024，32（1）：1-9.

［13］Sharma S R，Kumar S，Sharma V P. Diseases and competitor moulds of mushrooms and their management［M］. Solan，Himachal Pradesh：National Research Centre for Mushroom，Indian Council of Agricultural Research，2007.

［14］Horgen P A，Carvalho D，Sonnenberg A，et al. Chromosomal abnormalities associated with strain degeneration in the cultivated mushroom，Agaricus bisporus［J］. Fungal Genetics and Biology，1996，20（3）：229-241.

［15］Okigbo R N，Anuagasi C L. Diseases affecting mushrooms in Africa［J］. Journal of Food Technology amp; Nutrition Sciences ，2021：1-10.

［16］Begin M，Spear M. A novel method for inducing the expression of sectors in Agaricus bisporus［J］. Mushroom Science，1991，1（13）：105-109.

［17］Lambert E B. Principles and problems of mushroom culture［J］. The Botanical Review，1938，4（7）：397-426.

［18］Li A，Begin M，Kokurewicz K，et al. Inheritance of strain instability （sectoring） in the commercial button mushroom，Agaricus bisporus［J］. Applied and Environmental Microbiology，1994，60（7）：2384-2388.

［19］Horgen P A. The application of biotechnology to the button mushroom，Agaricus bisporus［M］. Applied molecular genetics of filamentous fungi. Dordrecht：Springer Netherlands，1992：191-200.

［20］林杰，林莫翎. 蘑菇異型菌絲與栽培技術(shù)的相關(guān)性［J］. 福建農(nóng)業(yè)，2007 （11）：20-21.

［21］任愛(ài)民. 4個(gè)雙孢蘑菇菌株篩選試驗(yàn)［J］. 林業(yè)科技通訊，2020，3：79-80.

［22］王倩，雋加香，陳輝，等. 雙孢蘑菇工廠化栽培菌株比較試驗(yàn)［J］. 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2019，35（6）：11-16.

［23］Heath M C，Li A，Horgen P A，et al. Hyphal morphology associated with strain instability in the commercial mushroom，Agaricus bisporus［J］. Mycologia，1995，87（4）：442-450.

［24］Lambert E. Improving spawn cultures of cultivated mushrooms［J］. Mushroom Science，1960，4：33-51.

［25］Van G L. The cultivation of mushrooms：Mushroom experimental station［J］. Mushroom Experimental Station，Horst，Netherlands，1988.

［26］Straatsma G，Gerrits J P G，Gerrits T M，et al.Growth kinetics of Agaricus bisporus mycelium on solid substrate （mushroom compost）［J］. Microbiology，1991，137（7）：1471-1477.

［27］Staatsma G，Di L G，Olijnsma T W，et al. Laboratory media for measuring growth parameters of Agaricus bisporus mycelium as influenced by Scytalidium thermophilum［J］. Cultivated Mushroom Res Newsl，1993，1：1-6.

［28］李洪榮. 培養(yǎng)基質(zhì)對(duì)雙孢蘑菇 As2796 菌落形態(tài)影響［J］. 食藥用菌，2011，19（3）：19-21.

［29］Farimani F G，F(xiàn)arsi M. Strain degeneration in white button mushroom （Agaricus bisporus） using amplified fragment length polymorphism［J］. Jentashapir Journal of Cellular and Molecular Biology，2021，12（4）.

［30］Harmsen M C，van Griensven L J L D，Wessels J G H. Molecular analysis of Agaricus bisporus double-stranded RNA［J］. Journal of General Virology，1989，70（6）：1613-1616.

［31］Hollings M. Viruses associated with a die-back disease of cultivated mushroom［J］. Nature，1962，196：962-965.

［32］Van Der Lende T R，Duitman E H，Gunnewijk M G W，et al. Functional analysis of dsRNAs （L1，L3，L5，and M2） associated with Isometric 34-nm virions of Agaricus bisporus （White button mushroom）［J］. Virology，1996，217（1）：88-96.

［33］Romaine C P，Schlagnhaufer B. Prevalence of double-stranded RNAs in healthy and La France disease-affected basidiocarps of Agaricus bisporus［J］. Mycologia，1989，81（5）：822-825.

［34］Green J M，Grogan H，Eastwood D C，et al. Investigating genetic and environmental control of brown colour development in the cultivated mushroom Agaricus bisporus infected with mushroom virus X［J］. Science and Cultivation of Edible and Medicinal Fungi：Mushroom Science XVII （M. van Gruening.，ed.）. South African Mushroom Farmers Association，Pretoria，South Africa，2008：536-553.

［35］Grogan H M，Adie B A T，Gaze R H，et al. Double-stranded RNA elements associated with the MVX disease of Agaricus bisporus［J］. Mycological Research，2003，107（2）：147-154.

［36］Eastwood D，Green J，Grogan H，et al. Viral agents causing brown cap mushroom disease of Agaricus bisporus［J］. Applied and Environmental Microbiology，2015，81（20）：7125-7134.

［37］Gaze R，Calvo-bado L，Challen M，et al. Science and cultivation of edible fungi，Van Griensven （ed.）2000 Balkema，Rotterdam，new virus disease of Agaricus bisporus？［J］. Science and Cultivation of Edible Fungi 2000，1：701.

［38］蔡為明，李南羿，金群力，等. 雙孢蘑菇病毒病的研究進(jìn)展（綜述）［J］. 食藥用菌，2008 （4）：56-57.

［39］曾志恒，曾輝，蔡志欣，等. 雙孢蘑菇新型顆粒原種配方的優(yōu)化［J］. 生物技術(shù)通報(bào)，2021，37（11）：134-141.

［40］李正鵬，李巧珍，余昌霞，等. 雙孢蘑菇接種技術(shù)［J］. 上海蔬菜，2019（3）：62-63.

［41］曾輝. 工廠化生產(chǎn)雙孢蘑菇栽培種關(guān)鍵工藝研究［J］. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，24 （4）：308-312.

［42］曾輝. 基于雙孢蘑菇工廠化制種的菌種質(zhì)量評(píng)價(jià)與制種管控體系研究［D］. 長(zhǎng)春：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018.

［43］國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局. GB 19171-2003雙孢蘑菇菌種［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

［44］蔡令儀，郭倩，曹暉，等. 活化處理雙孢蘑菇液氮菌種對(duì)產(chǎn)量的影響［J］. 食用菌學(xué)報(bào)，2005，12（4）：50-52.

［45］李洪榮. 雙孢蘑菇液氮保藏菌株的遺傳穩(wěn)定性分析［J］. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2011，27（22）：276-280.

［46］曲云燕. 雙孢蘑菇生產(chǎn)中常見(jiàn)的生理性病害及其防治措施［J］. 中國(guó)果菜，2010，30（6）：54-55.

（責(zé)任編輯：黃雄峰）