摘 要：【目的】研究枸杞植株葉片及根系中氮代謝相關(guān)酶活性對(duì)施氮量的生理響應(yīng)。【方法】共設(shè)置3種不同氮肥施用量處理，分別為N1（減氮20%，540 kg/hm2）、N2（中氮，675 kg/hm2）、N3（增氮20%，810 kg/hm2），分別測(cè)定葉片和根系的硝酸還原酶（NR）、谷氨酰胺合成酶（GS）、脲酶（UE）的活性?！窘Y(jié)果】隨著施氮量的增加，寧杞7號(hào)葉片中NR、GS和UE的活性均呈先增加后降低的變化趨勢(shì)，但N2處理NR顯著高于N1、N3（Plt;0.05），GS和UE在各處理間差異不顯著（Pgt;0.05）。不同土層枸杞植株根系氮素代謝相關(guān)酶活性隨施氮量的變化趨勢(shì)有所不同，在0～10 cm土層中，根系的NR、GS及UE分別呈降低、先增加后降低及基本不變的趨勢(shì)；在10～20 cm土層中，根系的NR和UE均呈先增加后降低的趨勢(shì)、GS則呈先降低后基本持平的趨勢(shì)；在20～30 cm土層中，根系的NR、GS及UE則分別呈先增加后降低、降低及增加的趨勢(shì)；且不同施氮量間根系中NR活性差異顯著（Plt;0.05），各處理間GS、UE差異不顯著（Pgt;0.05）。【結(jié)論】枸杞主栽品種寧杞7號(hào)葉片及根系的NR活性對(duì)施氮量的敏感性較強(qiáng)，GS及UE活性對(duì)施氮量反應(yīng)不敏感。因此NR是寧杞7號(hào)氮代謝的關(guān)鍵酶，可以用來篩選最佳氮肥施用量，提高枸杞植株氮素利用效率。綜合葉片與根系中3種不同氮代謝相關(guān)酶活性及其在不同施氮量下的變化趨勢(shì)可以看出，N2（中氮，675 kg/hm2）處理更有利于酶活性的增強(qiáng)。

關(guān)鍵詞：枸杞； 施氮量； 葉片； 根系； 氮素代謝； 酶活性

中圖分類號(hào)：S567.1+9"""" 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A""" 文章編號(hào)：1002-204X（2023）07-0026-05

doi：10.3969/j.issn.1002-204x.2023.07.008

Effect of Different Nitrogen Application Rates on the Activities of Enzymes Related to Nitrogen Metabolism in Leaves and Roots of Wolfberry

Liang Xiaojie， Li Yuekun*， Qin Xiaoya， An Wei

（Institute of Wolfberry Science， Ningxia Academy of Agriculture and Forestry， Yinchuan， Ningxia 750002）

Abstract [Objective] The four-year-old plant of the main cultivar of wolfberry Ningqi No.7 was used as the test material， and the physiological response of nitrogen metabolism-related enzyme activities in leaves and roots of wolfberry plants to nitrogen application was studied by field experiment. [Method] Three different nitrogen fertilizer application rates were set in the experiment， namely N1（20% nitrogen reduction， 540 kg·hm-2）， N2 （medium nitrogen， 675 kg·hm-2）， and N3（20% nitrogen increase， 810 kg·hm-2）， and the activities of nitrate reductase （NR）， glutamine synthase" （GS） and urease （UE） were measured in leaves and roots respectively. [Result] With the increase of nitrogen application rate， the activities of NR， GS and UE in leaves of Ningqi No.7 all showed a trend of increasing first and then decreasing， but NR under N2 treatment was significantly higher than that of N1 and N3 （Plt;0.05）， GS and UE had no significant difference between treatments （Pgt;0.05）. In terms of root system， the change trend of root nitrogen metabolism-related enzyme activities with nitrogen application rate was different in different soil depths. In the soil depth of 0～10 cm， the root NR， GS and UE showed a trend of decreasing， first increasing and then decreasing， and basically unchanged; In the soil depth of 10～20 cm， root NR and UE both increased first and then decreased， while GS decreased first and then remained basically the same;In the soil depth of 20～30 cm， the root NR， GS and UE showed a trend of increasing first and then decreasing， decreasing and increasing respectively; In the root system， only NR activity was significantly different among different nitrogen application rates （Plt;0.05）， while GS and UE had no significant difference among treatments （Pgt;0.05）. [Conclusion] The NR activity of leaves and roots of the main wolfberry cultivar Ningqi No.7 is more sensitive to nitrogen application rate， while GS and UE activities are not sensitive to nitrogen application rate. Therefore， NR is the key enzyme of nitrogen metabolism in Ningqi No.7， which can be used to screen the best nitrogen fertilizer application rate and improve the nitrogen use efficiency of wolfberry plants; In this paper， it can be seen from the comprehensive analysis of three different nitrogen metabolism-related enzyme activities in leaves and roots and their changing trends under different nitrogen application rates that N2（medium nitrogen， 675 kg·hm-2） treatment is more beneficial to the enhancement of enzyme activities.

Key words Wolfberry; Nitrogen fertilizer application; Leaf; Root system; Nitrogen metabolism; Enzyme activity

·林業(yè)與草業(yè)·

64卷07期

枸杞作為寧夏特色優(yōu)勢(shì)經(jīng)濟(jì)作物，生態(tài)適應(yīng)性極強(qiáng)，抗旱、耐鹽堿、耐瘠薄，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益[1]。枸杞植株具有良好的生態(tài)適應(yīng)特性，加之“不與糧食作物爭地”等政策的實(shí)施，近年來寧夏枸杞主要以鹽堿地、沙荒地作為種植區(qū)域，這些區(qū)域土壤中營養(yǎng)匱乏、水資源供給不足，高pH值還對(duì)營養(yǎng)元素的遷移及有效供應(yīng)產(chǎn)生了一定的抑制作用[2]。氮肥對(duì)各種生境條件下枸杞植株果實(shí)產(chǎn)量的提高及品質(zhì)的改善均具有顯著效果，但枸杞種植農(nóng)戶及企業(yè)為追求高產(chǎn)，盲目地采用大水大肥的粗放式管理方法，導(dǎo)致生產(chǎn)成本增加，也造成一定程度的環(huán)境污染[3-5]。研究不同施氮量條件下枸杞植株葉片及根系的氮代謝作用機(jī)理，對(duì)于篩選出枸杞植株最佳氮肥施用量具有重要意義，而目前關(guān)于氮肥施用量對(duì)枸杞植株氮代謝方面的研究尚少。為此，本試驗(yàn)選用寧夏枸杞主栽品種寧杞7號(hào)4年生植株為試材，研究施用不同水平的氮肥對(duì)葉片、根系氮素代謝相關(guān)酶活性的影響，分析不同處理下枸杞植株氮代謝的差異，為氮肥高效合理使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

本試驗(yàn)于2020年4月起在寧夏中衛(wèi)市海原縣三河鎮(zhèn)杞緣綠豐農(nóng)林科技有限公司基地進(jìn)行。試驗(yàn)地地形平坦、土層深厚、土質(zhì)較好且肥力均勻，耕層土壤（0～20 cm）的基本理化性狀：pH值為7.82，全鹽含量為3.02 g/kg，有機(jī)質(zhì)含量為9.76 g/kg，全氮含量為1.25 g/kg，全磷含量為0.54 g/kg，全鉀含量為11.4 g/kg，速效氮含量為51.6 mg/kg，速效磷含量為4.7 mg/kg，速效鉀含量為118 mg/kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

供試枸杞為主栽品種寧杞7號(hào)4年生植株，所選試驗(yàn)材料生長旺盛、無病蟲害。

試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，共設(shè)3個(gè)處理，分別為處理①：N1（低肥），減氮20%，即施純氮540 kg·hm-2；處理②：N2（中肥），中氮，即施純氮675 kg·hm-2；處理③：N3（高肥），增氮20%，即施純氮810 kg·hm-2。每個(gè)處理設(shè)3次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列。氮肥為普通尿素（含N 46%），磷肥為重過磷酸鈣（含P2O5 50%），鉀肥為硫酸鉀（含K2O 50%），各處理磷、鉀肥施用量分別為450 kg·hm-2和300 kg·hm-2。根據(jù)枸杞物候期進(jìn)行施肥，全年共施肥5次，氮、磷、鉀肥均分批次施入，施肥時(shí)間分別為4月20日左右（春梢生長期）、5月20日左右（青果期）、6月15日左右（果熟期）、7月底至8月初（秋果期）和9月底（秋季休眠期）。其中：5月20日前氮肥施用量占全生育期的50%以上，磷、鉀肥施用量占全生育期的40%以下；6月以后氮肥施用量占全生育期的50%以下，磷、鉀肥施用量占全生育期的60%以上。小區(qū)面積為54 m2（6 m×9 m）。田間水分管理采用當(dāng)?shù)剞r(nóng)民傳統(tǒng)的灌水方法，通常在施肥后的1～2 d灌水，或視土壤干濕狀況而定，全生育期內(nèi)共灌水9次左右。

1.3 樣品采集及項(xiàng)目測(cè)定

于2021年9月10日采集不同施氮量處理下的枸杞植株葉片及根系。采集葉片時(shí)每個(gè)處理隨機(jī)選擇5株枸杞樹作為5個(gè)重復(fù)，采集時(shí)在每株枸杞樹冠中部不同方位選取8～10個(gè)結(jié)果枝，采集每個(gè)結(jié)果枝的中部葉8～10片，采集的葉片放入已編號(hào)的自封袋中，立即置于裝有干冰的恒溫箱中保存。根系取樣時(shí)選擇與葉片取樣一致的5株枸杞樹作為5個(gè)重復(fù)，每株枸杞樹均采集0～10 cm、10～20 cm及20～30 cm 3個(gè)土層的根系，用清水沖洗后用吸水紙擦干，放入已編號(hào)的自封袋中，同樣置于裝有干冰的恒溫箱中保存。

葉片及根系樣品采集完成后均送至蘇州科銘生物技術(shù)有限公司實(shí)驗(yàn)室測(cè)定硝酸還原酶（NR）、谷氨酰胺合成酶（GS）、脲酶（UE）活性。其中硝酸還原酶（NR）采用微量法測(cè)定，測(cè)定原理是硝酸還原酶（NR）催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O；NADH在340 nm有最大吸收峰，通過測(cè)定NADH減少速率來表示NR活性；谷氨酰胺合成酶（GS）同樣采用微量法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定原理是谷氨酰胺合成酶（GS）在ATP和Mg2+作用下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺，谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ-谷氨酰基異羥肟酸，在酸性條件下與鐵形成的絡(luò)合物在540 nm處有最大吸收峰，可用分光光度計(jì)測(cè)定；脲酶（UE）也采用微量法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定原理是利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用EXCEL 2007軟件整理數(shù)據(jù)，采用SPSS 23.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析及相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同施氮量枸杞葉片氮素代謝相關(guān)酶活性差異性分析

如表1所示，不同施氮量枸杞植株葉片中的氮素代謝相關(guān)酶活性不同。N2處理枸杞葉片中的硝酸還原酶的活性最高，為432.56 nmol/min/g鮮重，顯著高于N1、N3（Plt;0.05）；N1、N3處理間枸杞葉片中的硝酸還原酶活性差異不顯著（Pgt;0.05）。各處理間枸杞葉片中的谷氨酰胺合成酶與脲酶差異均不顯著（Pgt;0.05）；其中：谷氨酰胺合成酶在枸杞葉片中的活性由大到小依次為N2、N1、N3，脲酶在枸杞葉片中的活性由大到小依次為N2、N1、N3。

2.2 不同施氮量枸杞根系氮素代謝相關(guān)酶活性差異性分析

如表2所示，不同施氮量條件下枸杞植株根系中的硝酸還原酶活性在不同土層深度中均具有差異。在0～10 cm土層中，3個(gè)處理間枸杞根系硝酸還原酶活性差異顯著（Plt;0.05），其活性由大到小依次為N1、N2、N3；在10～20 cm土層中，N1、N2處理間根系硝酸還原酶活性差異不顯著（Pgt;0.05），但均顯著高于N3處理（Plt;0.05），其活性由大到小依次為N2、N1、N3；在20～30 cm土層中，N1、N2處理間根系硝酸還原酶活性差異顯著（Plt;0.05），但與N3處理間差異均不顯著（Pgt;0.05），其活性由大到小依次為N2、N3、N1。整體上看，N1、N2處理枸杞植株根系硝酸還原酶活性較高。

如表3所示，不同施氮量枸杞植株根系中的谷氨酰胺合成酶活性在不同土層深度中均無顯著差異（Pgt;0.05）。在0～10 cm土層中，枸杞植株根系中谷氨酰胺合成酶活性由大到小依次為N2、N3、N1；在10～20 cm土層中，根系中的谷氨酰胺合成酶活性由大到小依次為N1、N3、N2；在20～30 cm土層中，根系中谷氨酰胺合成酶活性由大到小分別依次為N1、N2、N3。整體上看，N1、N2處理枸杞植株根系谷氨酰胺合成酶活性同樣較高。

如表4所示，不同施氮量枸杞植株根系中的脲酶活性在不同土層深度中差異不顯著（Pgt;0.05）。在0～10 cm土層中，根系中的脲酶活性由大到小依次為N2、N1、N3；在10～20 cm土層中，根系中的脲酶活性由大到小依次為N2、N3、N1；在20～30 cm土層中，根系中的脲酶活性由大到小依次為N3、N2、N1。整體上看，N2、N3處理枸杞植株根系脲酶活性較高。

2.3 不同施氮量枸杞根系及葉片中氮素代謝相關(guān)酶活性相關(guān)性分析

如表5所示，對(duì)枸杞葉片及根系的硝酸還原酶活性（NR）、谷氨酰胺合成酶活性（GS）以及脲酶活性（UE）兩兩進(jìn)行皮爾遜雙變量相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，僅葉片硝酸還原酶活性與葉片脲酶活性之間具有顯著相關(guān)性（r=0.959，Plt;0.05），其他指標(biāo)間均不具有顯著相關(guān)性（Pgt;0.05）。

3 討論

氮素是植物代謝過程所需要的重要營養(yǎng)元素之一，植物吸收的氮主要分為有機(jī)氮化物和無機(jī)態(tài)氮兩類。植物不能直接將空氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為自身利用，它們一般吸收利用土壤或者環(huán)境中的NO3-或者NH4+，并在相關(guān)酶的作用下合成谷氨酰胺和谷氨酸，然后經(jīng)過轉(zhuǎn)氮作用形成不同的氨基酸，再合成蛋白質(zhì)[6]。氮代謝過程包括氮素同化、積累和蛋白質(zhì)合成等過程，在氮素同化過程中，硝酸還原酶（NR）、谷氨酰胺合成酶（GS）、谷氨酸合成酶（GOGAT）、谷氨酸草酰乙酸轉(zhuǎn)氨酶（GOT）和谷氨酸丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶（GPT）酶活性直接影響著植物氮代謝的過程，與植物的生長發(fā)育、果實(shí)產(chǎn)量和品質(zhì)的形成均具有密切相關(guān)性[7]。

其中硝酸還原酶是植物體內(nèi)硝態(tài)氮同化的第一個(gè)酶，也是整個(gè)硝態(tài)氮代謝的關(guān)鍵酶、限速酶[8]，前人在棉花[9]、水稻[10]、早熟禾[11]等農(nóng)作物上的研究結(jié)果均表明，高活性的硝酸還原酶對(duì)于植物的生長發(fā)育及產(chǎn)量的形成具有促進(jìn)作用。本研究結(jié)果表明，隨著施氮量的增加，枸杞主栽品種寧杞7號(hào)葉片中的硝酸還原酶活性呈先增加后降低的趨勢(shì)；在0～10 cm土層中，枸杞植株根系中的硝酸還原酶活性呈降低趨勢(shì)，在10～20 cm、20～30 cm土層中，硝酸還原酶活性呈先增加后降低的趨勢(shì)，且各處理間差異顯著（Plt;0.05）。說明提高土壤施氮量可以使枸杞植株硝酸還原酶活性提高，但是其用量過高則會(huì)對(duì)硝酸還原酶活性產(chǎn)生抑制作用，進(jìn)而影響到枸杞植株的生長發(fā)育、果實(shí)產(chǎn)量與品質(zhì)的形成。

谷氨酰胺合成酶（GS）與谷氨酸合成酶（GOGAT）循環(huán)是高等植物氨同化的主要途徑，在無機(jī)氮轉(zhuǎn)化為有機(jī)氮的過程中起到關(guān)鍵作用，其活性受到植株生長年限、植物種類、氮素形態(tài)及濃度等諸多因素的影響[12]。張智猛的研究結(jié)果表明，隨著施氮量的增加，玉米[13]、花生[14]中的谷氨酰胺合成酶活性會(huì)隨之先升高后降低；但也有研究表明，隨著施氮水平的提高小麥中的谷氨酰胺合成酶活性隨之提高[15]。在本研究中，枸杞主栽品種寧杞7號(hào)葉片中的谷氨酰胺合成酶活性隨施氮量的增加呈先升高后降低的趨勢(shì)；在0～10 cm土層，枸杞植株根系中的谷氨酰胺合成酶活性呈先增加后降低的趨勢(shì)，在10～20 cm、20～30 cm土層中呈降低的趨勢(shì)；各處理間谷氨酰胺合成酶活性差異不顯著（Pgt;0.05）。同樣說明高氮濃度條件會(huì)抑制枸杞植株中的谷氨酰胺合成酶活性，但抑制效果不明顯。

土壤中的尿素能否被植物迅速地利用，取決于植物內(nèi)外環(huán)境中存在的脲酶（UE）活性。在植物細(xì)胞中，已知能分解尿素的酶有2類：脲酶（或尿素酰胺水解酶）和尿素酰胺酶。二者均在細(xì)胞質(zhì)中將尿素水解為CO2和NH3，NH3/NH4+隨即被谷氨酸合成酶利用，以供其他含氮大分子（蛋白質(zhì)及核酸等）的生物合成[16]。在前人的研究結(jié)果中，多針對(duì)土壤中脲酶的活性進(jìn)行研究，對(duì)植物體內(nèi)脲酶活性的研究較少。如，李生儀等[17]的研究結(jié)果表明，施氮始終能增加根際土壤脲酶活性，對(duì)苜蓿的生長有良好的促進(jìn)作用，并減輕了土壤氮限制，從而增加微生物數(shù)量改善了根系的發(fā)育和分泌;秦宇坤等[18]在尿素施用量對(duì)棉田土壤脲酶活性的研究結(jié)果表明，土壤脲酶活性隨施氮量的增加而增強(qiáng)，但當(dāng)施氮量超過240 kg/hm2時(shí)，土壤脲酶活性降低，且隨著土層深度增加，脲酶活性也呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。本文針對(duì)枸杞植株葉片及根系中脲酶活性隨施氮量的變化規(guī)律進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)葉片中脲酶活性隨著施氮量的增加呈先增加后降低的變化趨勢(shì)，在0～10 cm、10～20 cm以及20～30 cm土層的根系中分別呈基本不變、先增加后降低以及增加的趨勢(shì)，但各處理間差異不顯著（Pgt;0.05）。說明隨著土壤中氮濃度的增加，會(huì)影響枸杞植株葉片及根系中脲酶的活性，但影響效果不明顯。

4 結(jié)論

枸杞主栽品種寧杞7號(hào)葉片及根系的硝酸還原酶活性對(duì)施氮量的敏感性較強(qiáng)，可以用來篩選最佳氮肥施用量，以提高枸杞植株氮素利用效率。

綜合枸杞植株葉片與根系中3種不同氮代謝相關(guān)酶活性及其在不同施氮量下的變化趨勢(shì)可以看出，N2（中氮，675 kg·hm-2）處理更有利于枸杞主栽品種寧杞7號(hào)植株葉片及根系中氮代謝相關(guān)酶活性的增強(qiáng)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 尹志榮，黃建成，桂林國，等. 不同滴灌量枸杞田間土壤水分運(yùn)移特征[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2020，29（11）：1695-1702.

[2] 周喜榮，張麗萍，蔣鵬，等. 寧夏枸杞生育期干物質(zhì)與氮磷鉀積累動(dòng)態(tài)和養(yǎng)分需求規(guī)律[J]. 中國土壤與肥料，2021（1）：262-272.

[3] 李鈺，何文壽，張學(xué)軍，等. 枸杞土壤肥力與合理施肥技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 農(nóng)業(yè)科學(xué)研究，2006（2）：62-65.

[4] 韓夢(mèng)雪，張林. 施肥方式和施氮量對(duì)枸杞微孔陶瓷根灌土壤水氮分布的影響[J]. 節(jié)水灌溉，2021（1）：60-64.

[5] 田永雷，張玉霞，朱愛民，等. 施氮對(duì)科爾沁沙地飼用燕麥產(chǎn)量及氮肥利用率的影響[J]. 草原與草坪，2018，38（5）：54-58.

[6] 徐洪超，商靖，劉銘薈，等. 氮代謝相關(guān)酶的研究進(jìn)展[J]."""" 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2022，50（4）：17-20.

[7] 王鑫，張玉霞，鮑青龍，等. 施氮量對(duì)不同飼用燕麥品種苗期氮代謝相關(guān)酶活性的影響[J]. 內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2020，35（5）：396-401.

[8] 孫寶啟，李玉京. 硝酸還原酶與氮素利用的關(guān)系及其在作物遺傳育種中的應(yīng)用（綜述）[J]. 北京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1993（3）：29-33.

[9] 王雷山，AZIZ K，宋興虎，等. 棉花主莖葉與根系硝酸還原酶活性分布對(duì)播期和密度的響應(yīng)[J]. 棉花學(xué)報(bào)，2017，29（1）：88-98.

[10] 楊忠良，劉海英，劉會(huì)，等. 氮素對(duì)水稻幼苗氮代謝相關(guān)酶活性及相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017（10）：26-31.

[11] 張浩瑋，白小明，陳輝，等. 草地早熟禾（Poa pratensis） N積累、分配和硝酸還原酶活性對(duì)氮、磷肥的響應(yīng)[J]. 中國沙漠，2019，39（5）：222-231.

[12] 黃勤妮，印莉萍，柴曉清，等. 不同氮源對(duì)小麥幼苗谷氨酰胺合成酶的影響[J]. 植物學(xué)報(bào)，1995（11）：856-862.

[13] 張智猛，戴良香，胡昌浩，等. 氮素對(duì)不同類型玉米蛋白質(zhì)及其組分和相關(guān)酶活性的影響[J]. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2005（3）：320-326.

[14] 張智猛，萬書波，寧堂原，等. 氮素水平對(duì)花生氮素代謝及相關(guān)酶活性的影響[J]. 植物生態(tài)學(xué)報(bào)，2008（6）：1407-1416.

[15] 王小純，王曉航，熊淑萍，等. 不同供氮水平下小麥品種的氮效率差異及其氮代謝特征[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)2015，48（13）：2569-2579.

[16] 張海濤，宋遠(yuǎn)輝，鄭思怡，等. 植物尿素代謝及穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，49（2）：181-188.

[17] 李生儀，孫延亮，趙俊威，等. 施氮對(duì)苜蓿根際土壤微生物數(shù)量、酶活性及干草產(chǎn)量的影響[J]. 中國草地學(xué)報(bào)，2022，44（4）：113-120.

[18] 秦宇坤，李鵬程，鄭蒼松，等. 氮肥施用量對(duì)棉花產(chǎn)量及土壤脲酶活性的影響[J]. 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，41（2）：86-92.