張彬 李金秀 王震 石利朝 李金榜

關鍵詞：小麥品種；赤霉病；抗性評價；農(nóng)藝性狀

小麥赤霉病是由禾谷鐮刀菌Fusariurn gra-mznearurn引起的一種世界性小麥病害，長江中下游麥區(qū)是我國小麥赤霉病的多發(fā)區(qū)和重發(fā)區(qū)。近年來，隨著氣候變暖、耕作制度的變化及抗多菌靈病原種群的擴展等原因，該病的發(fā)生區(qū)域呈北上擴展趨勢，常年發(fā)病面積已超過700萬hm2，危害程度逐年加重，重發(fā)頻率明顯上升，于2003年、2012年、2015年、2016年、2018年偏重以上流行，給小麥生產(chǎn)造成了嚴重影響。其中，2012年小麥赤霉病發(fā)生面積最大，危害最重，造成小麥產(chǎn)量損失超過200萬t。小麥赤霉病的發(fā)生不僅導致小麥大面積減產(chǎn)，還會導致小麥品質(zhì)下降，其病原菌產(chǎn)生的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（deoxynivalenol，DON）毒素及其他次生代謝物，干擾核糖體肽基轉移酶的活性，抑制核糖體循環(huán)和蛋白質(zhì)合成，引起嘔吐、頭暈和免疫功能障礙等癥狀，使小麥籽粒加工的面粉商品性喪失，給小麥生產(chǎn)安全和食品安全帶來很大的隱患；甚至病麥籽粒用于飼料也會對畜禽引起明顯的毒害。而農(nóng)業(yè)措施控制小麥赤霉病的發(fā)生收效甚微，并且隨著農(nóng)業(yè)機械化程度的不斷提升，通過改變耕作制度和栽培措施的方式降低赤霉病危害的空間也越來越?。换瘜W防治要投入人力、物力和財力，降低小麥生產(chǎn)的經(jīng)濟效益；并且由于防治小麥赤霉病的藥劑作用位點單一，病原菌靶點基因容易發(fā)生突變，降低了藥劑與病原菌之間的親和性，病原菌極易產(chǎn)生抗藥性，造成“超級病菌”的產(chǎn)生。此外，長期進行化學防治不可避免地對生態(tài)環(huán)境造成污染。當前，我國小麥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展面臨提高產(chǎn)量和品質(zhì)，保護環(huán)境和降低生產(chǎn)成本等諸多挑戰(zhàn)；因此，提高小麥產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展能力，對確保國家糧食安全意義重大。研究與實踐證明，使用抗病品種是控制小麥赤霉病最有效、經(jīng)濟且綠色環(huán)保的防控措施，而攜帶有抗赤霉病基因的抗源材料是選育抗病品種的物質(zhì)基礎。

我國小麥遺傳資源豐富，被認定為普通小麥的變異中心，為抗赤霉病育種提供了種質(zhì)資源條件。我國自20世紀40年代開始進行小麥赤霉病抗性改良工作，并選育出了以‘蘇麥3號’為代表的抗赤霉病小麥品種。但是，小麥對赤霉病的抗性屬于數(shù)量性狀遺傳，受遺傳因素和環(huán)境的雙重影響，抗病性復雜。選育的抗赤霉病小麥品種多有高稈、晚熟、易倒伏、穗粒少、千粒重低等不良農(nóng)藝性狀。導致大面積栽培品種至今仍未能取得豐產(chǎn)性與抗赤霉病性相結合的新突破。挖掘對赤霉病有抗性且農(nóng)藝性狀良好的種質(zhì)資源是選育抗赤霉病品種的首要工作。本研究利用人工接種鑒定的方法，對54個黃淮南部小麥新品種（系）進行赤霉病抗性鑒定，并對其農(nóng)藝性狀進行分析，以期挖掘出抗病性強、綜合農(nóng)藝性狀好的小麥品種（系），為抗病育種和赤霉病的綠色防控提供種質(zhì)資源。

1材料與方法

1.1試驗材料

供試的54份小麥品種（系）來自國家小麥育種重大科研聯(lián)合攻關成員單位，具體信息見表1。病原菌由河南省作物分子育種研究院提供，禾谷鐮刀菌Fusariurn grarninearum包括3個黃淮麥區(qū)赤霉病強致病力菌株（Fg18-1、Fg18-2、Fg18-4）；亞洲鐮刀菌Fusariurn asiaticurn包括1個長江中下游麥區(qū)赤霉病強致病力菌株（Fa301）。選用‘蘇麥3號’作為高抗對照品種；選用適宜在黃淮南部種植且在田間能夠表現(xiàn)出抗病性的‘鄭麥9023’‘鄭麥0943’分別作為中抗、中感對照品種。

1.2赤霉病抗性鑒定方法

供試材料種植于南陽市農(nóng)業(yè)科學院具有保濕功能的赤霉病抗性鑒定圃，每份材料播種2行，行長2m，行距20cm;每隔25個試驗材料種植1組對照品種。整個試驗地采用人工開溝，條播的播種方式。

赤霉病菌培養(yǎng)和田間人工接種方法：將4個菌株等量混合后接種于PDA培養(yǎng)基上活化，25℃黑暗條件下培養(yǎng)4d，用打孔器打取直徑5mm的菌絲塊備用。玉米粒煮10min，裝入三角瓶中滅菌，然后將3個菌絲塊放人裝有玉米粒的三角瓶中，25℃培養(yǎng)至玉米粒表面長滿菌絲。小麥抽穗前分兩次（3月23日和3月31日）將帶病玉米粒均勻撒于鑒定圃，每次接種量為30kg/hm2，接種后噴霧保濕，每天2～4次，每次噴霧3～5min，增大空氣濕度，使麥穗和葉片上有水，地表無積水。為保證抗性調(diào)查時，每個品種處在相同的生育期，需要在試驗的過程中記錄每個品種的揚花期，揚花期后28d，分別對每個小麥品種進行抗性調(diào)查，每份材料隨機抽取20個麥穗，記錄發(fā)病情況。

1.3田間種植方法

小麥品種（系）種植于南陽市農(nóng)業(yè)科學院試驗田，肥力均勻，播種前施復合肥（N-P-K：15-15-15）750kg/hm2。試驗小區(qū)順次排列，不設重復，小區(qū)長100m，寬3.5m，行距20cm，面積350m2。試驗田的管理如常規(guī)育種田。

1.4數(shù)據(jù)分析

參考《小麥抗病蟲性評價技術規(guī)范：小麥抗赤霉病評價技術規(guī)范》（NY/T 1443.4-2007），計算病情指數(shù)進行抗性劃分。嚴重度分為4個等級，O：感病小穗無或極少；1：病部占全穗的0.01%～25.00%;2：病部占全穗的25.01%～50.00%；3：病部占全穗的50.01%～75.00%；4：病部占全穗的75.01%～100%?？剐栽u價以對照品種為基準，劃分為免疫（I）：DI=0；高抗（HR）：0DI鄭麥0943。調(diào)查農(nóng)藝性狀時，采用對角線法，隨機選取3個1m長樣段，用于進行生育動態(tài)調(diào)查；小區(qū)收獲時測量實際產(chǎn)量，再折合成公頃產(chǎn)量。

平均嚴重度（S）=∑（各病級值×相應級別的總穗數(shù)）／總調(diào)查麥穗數(shù)；

病情指數(shù)（DI）=∑（各病級值×相應級別的穗數(shù)）／（總調(diào)查麥穗數(shù)×最高病級數(shù)）×100；

葉面積=0.76×長×寬；

粒密度=穗粒數(shù)／穗長。

2結果與分析

2.1赤霉病抗性鑒定

連續(xù)2年，采用人工接種的方法對供試的54個小麥品種（系）進行赤霉病抗性鑒定，結果表明（表1），不同品種（系）間抗性存在明顯的差異；未發(fā)現(xiàn)有免疫或高抗赤霉病的品種（系）。‘宛1390’和‘宛麥988’等41個品種（系）為高感赤霉病品種，占總數(shù)的75.93%；中感赤霉病品種4個，分別為‘華麥2801’‘漯麥47’‘皖宿1209’和‘周麥48’，占總數(shù)的7.41%；中抗赤霉病品種9個，分別是‘華皖麥24’‘宛1204’‘皖墾麥1708’‘皖宿1232’‘徐麥17252’‘徐麥DH9’‘兆豐36’‘中科166’和‘中科1878’，占總數(shù)的16.67%。此外，分別對2019年-2020年和2020年-2021年的鑒定結果進行分析，2019年-2020年，41個高感品種（系），4個中感品種（系），9個中抗品種（系）；2020年-2021年，38個高感品種（系），5個中感品種（系），11個中抗品種（系）；2個年度的鑒定結果相同的品種（系）50個，鑒定結果有差異的品種（系）為4個，分別占總數(shù)的92.59%和7.41%，說明此種鑒定方法準確度較高。

2.2農(nóng)藝性狀變異性分析

由表2可知，抗病組品種（系）農(nóng)藝性狀的變異性小于感病組品種（系），感病組品種（系）的農(nóng)藝性狀變異幅度更大。抗病組品種（系）的變異系數(shù)為2.11%～29.76%，均值為9.42%，感病組品種（系）的變異系數(shù)為3.19%～27.65%，均值為10.27%。穗下節(jié)長和旗葉面積的變異性較大，抗病組品種（系）二者的變異系數(shù)分別為29.76%、12.97%，變異范圍為5.0～16.1cm、22.0～32.3cm2；感病組品種（系）二者的變異系數(shù)分別為27.65%、18.34%，變異范圍為4.0～15.0cm、18.0～40.cm2。產(chǎn)量和穗粒數(shù)的變異性較小，抗病組品種（系）二者的變異系數(shù)分別2.11%、3.62%，變異范圍為6488.6～6911.4kg/hm2，32.0～35.7個／穗，感病組品種（系）二者的變異系數(shù)分別為3.19%、4.34%，變異范圍為6360.0～7333.5kg/hm2．30.9～36.7個／穗?？共〗M品種（系）和感病組品種（系）的株高、最高分蘗、有效穗、千粒重、穗長、穗密度的變異系數(shù)均在5.00%～10.00%之間；其中，抗病組品種（系）的株高為89.9cm，大于感病組品種（系）的株高，抗病組品種（系）的穗密度為3.0個/cm，小于感病組品種（系）的穗密度。

2.3中抗赤霉病品種（系）的農(nóng)藝性狀

由表3可知，9個被評價為抗性的小麥品種（系）的各農(nóng)藝性狀間有不同程度差異，穗下節(jié)長、旗葉面積、穗密度的差異較大?！钏?232’穗下節(jié)長顯著小于其他品種，‘皖宿1232’和‘徐麥17252’旗葉面積顯著小于其他品種，‘華皖麥24’‘皖蘇1232’‘徐麥17252’穗密度顯著低于其他品種。株高、最高分蘗、有效穗、千粒重、穗粒數(shù)、穗數(shù)、產(chǎn)量間的差異性較小。但是，這9個中抗品種（系）的株高均偏高，平均值為89.9cm，無矮稈品種（系）；其中，‘宛1204’和‘徐麥17252’的株高相對較矮，分別為83.3cm和80.5cm，與其他品種（系）差異顯著，但二者間差異不顯著。綜合以上分析，這9個抗性品種（系）農(nóng)藝性狀間有差異，可以依據(jù)育種目標的不同，選取與改良目標相關且農(nóng)藝性狀較好的親本，分別作為抗赤霉病種質(zhì)資源進一步開發(fā)利用。

3結論與討論

赤霉病抗性鑒定是小麥抗赤霉病育種中的重要環(huán)節(jié)，小麥抗赤霉病育種的根本就是篩選對赤霉病具有抗性的種質(zhì)資源，在育種中通過將不同抗性水平的基因聚合提高對赤霉病的總體抗性。但是，由于多數(shù)數(shù)量性狀位點（quantitative trait locus，QTL）效應較小，并且赤霉病的抗性表型易受環(huán)境因素的影響，正是這種表型鑒定的不穩(wěn)定性和復雜性限制了小麥赤霉病抗源的利用和抗性新品種的選育。因此，為小麥抗赤霉病育種創(chuàng)造一個穩(wěn)定的，選擇壓力一致的病害發(fā)生環(huán)境，并利于大田操作的試驗條件，對親本資源和雜交后代的抗病性進行精準鑒定是抗赤霉病育種的重要工作，也是挖掘抗原、選育抗病小麥品種的重要技術手段。目前，赤霉病抗性鑒定比較成熟的鑒定方法有田間自然誘發(fā)鑒定和人工接種鑒定，后者可較全面、客觀地反映待測品種的抗性類型和水平，與農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實際較吻合，適合大規(guī)模地對試驗材料進行抗病性鑒定。為減少環(huán)境因素對試驗結果的影響，本試驗利用田間彌霧保濕裝置，以人工接種的方法對小麥新品種進行赤霉病抗性鑒定試驗，其接種量和環(huán)境等因素均勻一致，抗性選擇壓力一致，重復性較高，是比較準確可靠的方法，對指導抗病育種具有重要意義。本研究中，2個試驗年度間，50個試驗材料的鑒定結果一致，占總數(shù)的92.59%，說明試驗采用的鑒定方法重復性較好，準確率較高。此外，還可以通過分子標記輔助選擇，較快獲得攜帶有抗性基因的育種材料，并在整個育種過程中對抗性基因進行跟蹤，大幅度提高育種效率。

小麥對赤霉病的抗性是一種受多基因控制的數(shù)量型可遺傳抗性，各抗性基因間以加性效應為主，抗性遺傳符合加性一顯性模型，雜交后代中分離出豐產(chǎn)性和抗病性相結合的個體數(shù)量少，頻率低。迄今為止，以‘蘇麥3號’及其衍生后代為代表的具有赤霉病抗性的種質(zhì)資源，普遍有不良的農(nóng)藝性狀，直接用于抗赤霉病育種實踐中存在困難；并且由于少數(shù)幾個抗源材料的過度使用，導致育種親本材料的遺傳背景愈發(fā)狹窄，抗性改良進程緩慢，在很大程度上不能滿足生產(chǎn)上對抗性品種的要求。有研究表明，赤霉病抗性存在“超親優(yōu)勢”，選用綜合農(nóng)藝性狀和豐產(chǎn)性好，且不高感赤霉病的親本，后代選擇豐產(chǎn)性和抗病性兼顧，可以選育出抗赤霉病的豐產(chǎn)品種。如已成功選育出的中抗赤霉病豐產(chǎn)性小麥品種，‘揚麥4號’‘揚麥5號’‘揚麥158’‘寧麥9號’和‘寧麥16’等，用高感品種‘阿夫’與中感品種‘臺灣小麥’雜交，選育出的抗病品種‘蘇麥3號’，被國內(nèi)外認為是最好的赤霉病抗源。劉宗鎮(zhèn)等認為，中感品種中普遍存在抗赤霉病的超親現(xiàn)象，但是，高感品種中不可能有超親現(xiàn)象。因此，在配制雜交組合時，需要充分了解種質(zhì)資源的遺傳背景，對親本進行準確的赤霉病抗性鑒定，使用的親本應具有較好的綜合農(nóng)藝性狀，非高感赤霉病，充分發(fā)揮“超親優(yōu)勢”，把不同的微效抗性基因聚合，提高后代品種（系）的抗性水平，實現(xiàn)豐產(chǎn)性和抗赤性的結合。本研究中，未鑒定到高抗品種（系），高感品種比例較高，說明抗赤霉病品種仍比較匱乏。

此外，有研究表明，小麥株高、穎殼張開程度、穗部蠟質(zhì)程度、花期長短、穗密度等植株形態(tài)與赤霉病抗性有相關性，這種形態(tài)抗性機制可以使小麥在染病敏感期，最大程度降低病原菌侵染的機會，表現(xiàn)出一種病害的逃避機制，有研究表明，小麥株高與赤霉病敏感性存在負相關性，株高較高的小麥穗部濕度低，并且遠離病原菌主要來源的土壤表面；穗密度小的小麥穗部的小環(huán)境濕度低，不利于病原菌的侵染，這些形態(tài)特征抑制了病原菌的侵入。本研究結果與這些報道相似，抗病組品種（系）的平均穗密度比感病組品種??；抗病的9個小麥品種（系），有6個株高均在90cm以上。

由于本研究只進行了表型鑒定，對部分植株形態(tài)和農(nóng)藝性狀作了調(diào)查，還需要進一步檢測9個抗病品種（系）所含有的抗赤霉病基因，利用基因組技術進行抗赤霉病基因的聚合，從而培育對赤霉病具有較高抗性水平的小麥品種，以便于建立農(nóng)業(yè)投入安全無害、生產(chǎn)過程環(huán)境友好的農(nóng)業(yè)綠色發(fā)展技術體系，服務于小麥產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，確保國家的糧食安全。