王官連 劉佳霖 張?jiān)伱?鮑 磊 劉傳文 冉慶森 李 琦 杜茂波

(1 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所,北京,100700; 2 煙臺(tái)中亞保健酒有限公司,煙臺(tái),264000)

腎陽虛證是一種中醫(yī)診斷病證,主要病因是腎陽虛衰、溫煦失職、氣化失權(quán)所表現(xiàn)的一類虛寒證候,是一種由神經(jīng)內(nèi)分泌紊亂引起的代謝性疾病。男性腎陽虛證患者的主要臨床表現(xiàn)為育齡不育、性欲降低或性冷淡、精液少、精子活性低、腰痛、夜尿多。嚴(yán)重者甚至可能導(dǎo)致生精功能障礙,導(dǎo)致不育和出生缺陷[1-3]。

至寶三鞭丸處方由海狗鞭、狗鞭、鹿鞭、人參、鹿茸、海馬、蛤蚧、肉蓯蓉、枸杞子、杜仲等40多味名貴中藥材組成,多年的臨床研究表明該方具有明顯的延緩衰老、抗疲勞作用,是一種強(qiáng)力的補(bǔ)腎藥。作用顯著,療效確切,臨床上廣泛用于治療男性不育,少精,弱精,性功能低下等腎陽虛所致男性性功能障礙[4-6]。但是,目前關(guān)于至寶三鞭丸如何實(shí)現(xiàn)補(bǔ)腎壯陽功效的作用機(jī)制尚不清楚。

通過構(gòu)建腺嘌呤所致腎陽虛證大鼠模型,研究至寶三鞭丸對(duì)腎陽虛大鼠的改善作用,并初步圍繞下丘腦-垂體-性腺軸(Hypothalamic-Pituitary-Gonadal Axis,HPGA)為立足點(diǎn),對(duì)“神經(jīng)”“內(nèi)分泌”“生殖”3個(gè)節(jié)點(diǎn)分別開展至寶三鞭丸相關(guān)的藥效評(píng)價(jià)研究。為至寶三鞭丸誘發(fā)生殖功能變化的潛在機(jī)制和器官互作模式做了初步的探索,以期對(duì)至寶三鞭丸補(bǔ)腎壯陽功效的功效原理和科學(xué)內(nèi)涵進(jìn)行闡釋。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 選取6周齡無特定病原體(Specific Pathogen Free,SPF)SD大鼠98只,雄性,體質(zhì)量(220±10)g,購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司,動(dòng)物許可證號(hào):SCXK(京)2016-0006。飼養(yǎng)于中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范(Good Laboratory Practice,GLP)中心。飼養(yǎng)溫度20～25 ℃,濕度65%～70%,自由飲水進(jìn)食。實(shí)驗(yàn)通過中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(倫理審批號(hào):2021B069)。

1.1.2 藥物 至寶三鞭丸(中亞醫(yī)藥保健有限公司,批號(hào):Z37021007);金匱腎氣丸(北京同仁堂醫(yī)藥有限公司,批號(hào):Z11020147);左卡尼汀口服液(東北制藥集團(tuán)沈陽第一制藥有限公司,批號(hào):H19990372)。

1.1.3 試劑與儀器 腺嘌呤(上海麥克林生化科技有限公司,批號(hào):A800685);雌二醇(Estradiol,E2)ELISA試劑盒(上海江萊生物科技有限公司,批號(hào):JL13135);睪酮(Testosterone,T)ELISA試劑盒(上海江萊生物科技有限公司,批號(hào):JL13284);促卵泡素(Follicle-Stimulating Hormone,FSH)ELISA試劑盒(上海江萊生物科技有限公司，批號(hào)：JL13103)，黃體生成素(Luteinizing Hormone,LH)ELISA試劑盒(上海江萊生物科技有限公司,批號(hào):JL13135),多巴胺(Dopamine,DA)ELISA試劑盒(上海江萊生物科技有限公司,批號(hào):JL13316),5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)ELISA試劑盒(上海江萊生物科技有限公司,批號(hào):JL13048),去甲腎上腺素(Norepinephrine,NE)ELISA試劑盒(上海江萊生物科技有限公司,批號(hào):JL13034),蘇木精-伊紅(Hematoxylin-Eosin,HE)染色試劑盒(北京索萊寶科技有限公司,批號(hào):G1120),Masson三色染色試劑盒(北京雷根生物科技有限公司,批號(hào):G1346),Nikon精子質(zhì)量分析系統(tǒng)高倍顯微鏡(尼康株式會(huì)社,日本,型號(hào):TS2),Molecular Devices酶標(biāo)儀(Molecular Device科技有限公司,美國,型號(hào):ID3)。

1.2 方法

1.2.1 分組和模型制備 將98只SD雄性大鼠按照體質(zhì)量隨機(jī)區(qū)組法分為7組,每組14只,正常組、模型組、三鞭丸高劑量組[0.72 g/(kg·d)]、三鞭丸中劑量組[0.36 g/(kg·d)]、三鞭丸低劑量組[0.18 g/(kg·d)]、金匱腎氣丸組[中藥陽性對(duì)照,10 g/(kg·d)]和左卡尼汀組[西藥陽性對(duì)照,口服液,10 mL/(kg·d)]。除正常組灌胃生理鹽水(25 mL/kg)外,其余各組灌胃腺嘌呤(10 mg/mL),按照200 mg/(100 g·d)劑量,1次/d,連續(xù)30 d,制備腎陽虛證大鼠模型,實(shí)驗(yàn)全過程中沒有動(dòng)物死亡。造模后,每日觀察體征變化并記錄體質(zhì)量變化,出現(xiàn)體質(zhì)量及活動(dòng)能力下降,畏寒,體毛稀疏失去光澤等體征,可判定為造模成功。

1.2.2 給藥方法 至寶三鞭丸、金匱腎氣丸和左卡尼汀口服液均用蒸餾水進(jìn)行溶解,按照人與大鼠藥物體表換算的方式配成對(duì)應(yīng)的濃度[7],放入冰箱保存,使用時(shí)混合均勻即可。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法

造模成功后最后一次給藥2 h后,稱定大鼠體質(zhì)量,腹主動(dòng)脈取血后,取出腎臟、睪丸、附睪、輸精管等器官進(jìn)行稱重,器官指數(shù)計(jì)算采用:器官/體質(zhì)量×100%[8]。

1.2.3.1 腎臟、睪丸組織病理學(xué)檢測(cè) 大鼠腹主動(dòng)脈取血后,取出腎臟、睪丸和附睪組織,浸入4%多聚甲醛固定液中固定,待用。腎臟、睪丸和附睪組織切片用HE染色。將腎臟和睪丸組織切片在二甲苯中脫蠟,在乙醇分級(jí)中再水化至去離子水,根據(jù)說明書進(jìn)行染色,其中使用Weigert蘇木精(細(xì)胞核)、比布里希猩紅酸品紅(細(xì)胞質(zhì)/肌肉)和苯胺藍(lán)(膠原蛋白)。然后,通過Nikon TS2顯微鏡觀察并用數(shù)碼相機(jī)記錄,其中每個(gè)切片檢查5個(gè)隨機(jī)區(qū)域。采用Image J軟件選中炎癥細(xì)胞浸潤區(qū)域,同一方法計(jì)算3張同一組HE圖片面積,計(jì)算平均值,即為該組炎癥反應(yīng)強(qiáng)度[9]。

此外,使用Masson三色染色試劑盒檢測(cè)腎臟纖維化程度。按照說明書中的操作步驟進(jìn)行染色。觀察拍照及計(jì)算方法同HE染色。使用Image J軟件對(duì)Masson染色下腎小球纖維化程度進(jìn)行評(píng)估(腎小球內(nèi)藍(lán)色膠原纖維面積)[10]。

1.2.3.2 精子計(jì)數(shù)及活力檢測(cè) 腹腔注射戊巴比妥鈉后,取出大鼠的附睪。將附睪放入到1 mL的37 ℃預(yù)孵育的生理鹽水(精子解育液)中,用眼科剪成均勻的小碎塊,200目篩過濾,加入預(yù)熱生理鹽水,制成精子懸液。取1滴精子懸液在Nikon TS2精子質(zhì)量分析系統(tǒng)高倍顯微鏡下計(jì)數(shù)。根據(jù)世界衛(wèi)生組織手冊(cè)[11],精子活力分為4個(gè)等級(jí):A級(jí)為快速向前運(yùn)動(dòng);B級(jí)為緩慢向前運(yùn)動(dòng);C級(jí)為非前向運(yùn)動(dòng);D級(jí)為精子原地不動(dòng)。計(jì)算出A+B級(jí)精子的比例。

1.2.3.3 大鼠血清中性激素和神經(jīng)遞質(zhì)表達(dá)水平檢測(cè) 收集大鼠血液10 mL,靜置1 h后,1 000 g/min,離心5 min,吸取上層血清。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)檢測(cè)大鼠血清中性激素(E2、T、FSH、LH)和神經(jīng)遞質(zhì)(DA、5-HT、NE)的含量。

2 結(jié)果

2.1 至寶三鞭丸對(duì)腎陽虛型大鼠體質(zhì)量和器官指數(shù)的影響 與正常組比較,模型組大鼠的體質(zhì)量均有下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,三鞭丸中劑量組、高劑量組、金匱腎氣丸組和左卡尼汀組體質(zhì)量明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01),三鞭丸低劑量組與模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

肉眼觀察可見正常組大鼠雙腎呈淡粉紅色,未見異常;模型組雙腎腫大、表面白色,有實(shí)變感,表現(xiàn)為“大白腎”;給予三鞭丸藥物干預(yù)后,雙腎逐步恢復(fù)至正常大小,白色部分逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榈奂t色。見圖1。

圖1 大鼠腎臟(A)和輸精管(B)

正常組輸精管形態(tài)正常,管內(nèi)部充盈,管壁表面呈淡黃色且有光澤,并且左右側(cè)大小基本相同;模型組輸精管出現(xiàn)皺縮,管內(nèi)部不夠飽滿,管壁表面有紅色充血,無光澤,并且左右側(cè)大小不同;給予三鞭丸藥物干預(yù)后,輸精管的形態(tài)趨于正常,管內(nèi)部也逐漸充盈,管壁紅色充血部分減少,逐步恢復(fù)光澤,并且左右兩側(cè)也逐漸恢復(fù)至大小相同。

與正常組腎臟比較,模型組大鼠的腎臟系數(shù)明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,三鞭丸中劑量組、高劑量組、金匱腎氣丸組和左卡尼汀組的腎臟系數(shù)顯著下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01),三鞭丸低劑量組腎臟系數(shù)也均有所下降,但與模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見圖2。

圖2 大鼠體質(zhì)量(A)、腎臟指數(shù)(B)、睪丸指數(shù)(C)、附睪指數(shù)(D)和輸精管指數(shù)(E)變化

與正常組比較,模型組大鼠的輸精管系數(shù)明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,三鞭丸中劑量組、高劑量組、金匱腎氣丸組和左卡尼汀組的輸精管系數(shù)顯著升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),三鞭丸低劑量組輸精管系數(shù)也均有升高的趨勢(shì),但與模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

與正常組比較,模型組的睪丸和附睪系數(shù)均有所升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05);與模型組比較,三鞭丸高劑量組睪丸系數(shù)下降顯著(P<0.05),三鞭丸低劑量組、中劑量組、金匱腎氣丸組和左卡尼汀組的睪丸系數(shù)均有所下降,但與模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);同樣,與模型組比較,三鞭丸高劑量組和金匱腎氣丸組的附睪系數(shù)同樣下降顯著,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),三鞭丸低劑量組、中劑量組和左卡尼汀組的附睪系數(shù)均有所下降,但與模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 腎臟、睪丸組織病理分析 與正常組比較,模型組大鼠腎臟中,腎小球萎縮,腎小管管腔擴(kuò)大,間質(zhì)中炎癥細(xì)胞大量聚集并且小管間質(zhì)纖維化。與模型組比較,三鞭丸各給藥組和金匱腎氣丸組腎小管間質(zhì)中炎癥細(xì)胞浸潤數(shù)目減少。纖維細(xì)胞減少,腎小管趨于正常。見圖3A。

圖3 大鼠腎(A)、睪丸(B)和附睪組織(C)組織學(xué)(HE染色,×100)

與正常組比較,模型組睪丸萎縮,生精小管管徑變小,排列稀疏,管內(nèi)各級(jí)生精細(xì)胞排列紊亂,管腔內(nèi)精子數(shù)目減少。與模型組比較,三鞭丸低劑量組生精小管結(jié)構(gòu)基本正常;三鞭丸中劑量組大鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)趨于正常,生精小管結(jié)構(gòu)基本正常;三鞭丸高劑量組生精小管中各級(jí)生精細(xì)胞排列趨于規(guī)整,生精小管結(jié)構(gòu)趨于正常;金匱腎氣丸組大鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)趨于正常,生精小管結(jié)構(gòu)基本正常;左卡尼汀組大生精小管結(jié)構(gòu)趨于正常。見圖3B。

與正常組比較,模型組附睪管管壁增厚,排列疏松,間質(zhì)增大,腔內(nèi)精子聚集成團(tuán),數(shù)量減少,排列欠規(guī)整。三鞭丸低、中、高劑量組和金匱腎氣丸組附睪管管壁增厚情況明顯改善,排列緊密,腔內(nèi)精子量增多,分布均勻。左卡尼汀組腔內(nèi)精子量增多,分布均勻,但是附睪管管壁增厚,排列疏松,管腔增生萎縮。見圖3C。

大鼠腎臟Masson染色結(jié)果顯示,與正常組比較,模型組大鼠腎小球和腎小管中觀察到大量藍(lán)色的膠原纖維,系膜細(xì)胞成團(tuán),與管腔壁之間的間隙增大,表明腎臟膠原纖維的表達(dá)明顯升高,腎臟細(xì)胞間質(zhì)纖維化程度高。與模型組比較,大鼠在三鞭丸藥物干預(yù)后,尤其是三鞭丸高劑量組,腎臟的纖維化程度有明顯改善,系膜細(xì)胞排列趨于正常,且與管腔壁之間的間隙縮小,表明腎臟細(xì)胞間質(zhì)纖維化程度減小。金匱腎氣丸組和左卡尼汀組管腔壁之間的間隙縮小。見圖4。

圖4 大鼠腎組織學(xué)(Masson染色,×100)

2.3 至寶三鞭丸對(duì)腎陽虛型大鼠精子的影響 與正常組比較,模型組的精子數(shù)量顯著減少;與模型組比較,三鞭丸低、中、高劑量組的精子數(shù)量均顯著增高提示三鞭丸具有改善精子腎陽虛所致的精子數(shù)量減少問題;金匱腎氣丸組和左卡尼汀組的精子數(shù)量與模型組比較也都顯著升高。見圖5A。

圖5 大鼠精子形態(tài)和大鼠精子活力

在精子活力方面,與正常組比較,模型組的精子形態(tài)上,頭部出現(xiàn)有雙頭、圓頭,并且還出現(xiàn)有頭部與身體分離,精子不呈線性運(yùn)動(dòng),原地打轉(zhuǎn),并且大部分精子處于靜止?fàn)顟B(tài),無活力;與模型組比較,給予三鞭丸后精子活力與形態(tài)均有所改善,精子頭部大部分是鉤狀,基本無斷頭心形態(tài),精子的活力增強(qiáng)。見圖5B。

與正常組比較,模型組的精子濃度,精子運(yùn)動(dòng)能力和精子存活率均顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),而精子的畸形率則顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);而在給予三鞭丸藥物干預(yù)后,大鼠的精子濃度,精子運(yùn)動(dòng)能力和精子存活率均較模型組顯著提升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),而畸形的精子也較模型組顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),其中三鞭丸高劑量組效果最好。比較之下,金匱腎氣丸組和左卡尼汀組雖均能改善精子活力,數(shù)量和形態(tài),但效果均不如三鞭丸高劑量組。見圖5C～F。

2.4 至寶三鞭丸對(duì)大鼠血清中性激素和神經(jīng)遞質(zhì)表達(dá)的影響 與正常組比較,模型組的性激素E2、FSH、LH的含量均顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);T含量顯著下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,除三鞭丸低劑量和金匱腎氣丸組(P>0.05),其余三鞭丸給藥組和左卡尼汀組均能顯著降低E2的含量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且三鞭丸高劑量組效果最好;針對(duì)T的影響,三鞭丸各給藥組、金匱腎氣丸組和左卡尼汀組均能顯著升高T的含量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),三鞭丸高劑量組效果最優(yōu);針對(duì)FSH和LH的含量影響,三鞭丸各給藥組、金匱腎氣丸組和左卡尼汀組均顯著降低,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),三鞭丸高劑量組效果最優(yōu)。見表1。

表1 大鼠血清中神經(jīng)遞質(zhì)和內(nèi)分泌激素的含量

關(guān)于對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)的影響,與正常組比較,模型組的神經(jīng)遞質(zhì)DA、NE和5-HT的含量均有顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,三鞭丸各給藥組金匱腎氣丸和左卡尼汀組的DA、NE、5-HT含量均顯著下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

3 討論

至寶三鞭丸是一種強(qiáng)力的補(bǔ)腎藥,其作用顯著,療效確切,在臨床廣泛用于腎陽虛并伴有性功能低下者為宜。該方中人參、鹿茸、3種鞭藥相互配伍,有效改善腎陽衰微之性欲低下、陽痿等癥狀[12-13]。本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建腺嘌呤誘導(dǎo)的腎陽虛大鼠模型,分別從大鼠整體表征,性器官指數(shù)變化,組織病理學(xué)變化以及與HPGA相關(guān)的性激素和神經(jīng)遞質(zhì)等角度評(píng)價(jià)了至寶三鞭丸對(duì)腎陽虛大鼠的改善作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明了至寶三鞭丸可改善腺嘌呤致腎陽虛模型大鼠的腎陽虛癥狀,從不同程度地減輕腺嘌呤對(duì)大鼠HPGA的抑制作用,且對(duì)腺嘌呤造模引起的大鼠睪丸和附睪組織損傷有一定程度的保護(hù)作用,呈現(xiàn)出良好的補(bǔ)腎助陽功效。

有研究表明,在HPGA與腎虛關(guān)系中,發(fā)現(xiàn)男性腎陽虛證患者T較正常下降,E2較正常升高。在HPGA的調(diào)控下,垂體合成并釋放LH和FSH,進(jìn)而促進(jìn)性腺睪丸釋放T,T、LH和FSH對(duì)下丘腦有反饋抑制作用,形成健康成年男性良好的內(nèi)分泌循環(huán)[14]。另外,有研究表明神經(jīng)遞質(zhì)DA、5-HT和NE的合成與釋放能夠調(diào)控HPGA的功能[15]。本研究結(jié)果顯示腺嘌呤會(huì)誘發(fā)大鼠的一般體征發(fā)生改變;HE染色結(jié)果說明三鞭丸可以有效緩解腺嘌呤所誘導(dǎo)的腎臟,睪丸,附睪等生殖器官的病理改變;大鼠腎臟Masson染色結(jié)果顯示,三鞭丸能有效緩解腺嘌呤所致的腎纖維化程度;三鞭丸可以通過對(duì)相關(guān)性激素和神經(jīng)遞質(zhì)來有效緩解腺嘌呤所致腎陽虛動(dòng)物的病理狀態(tài),并且三鞭丸高劑量組效果最優(yōu),這也與以往研究結(jié)果相符。

本實(shí)驗(yàn)也選取了補(bǔ)腎藥金匱腎氣丸作為陽性對(duì)照藥,但是,至寶三鞭丸在緩解一些腎陽虛病理狀態(tài)的藥效方面要優(yōu)于金匱腎氣丸。腺嘌呤誘導(dǎo)的腎陽虛主要是腎陽衰微的腎功能不全、性欲低下和陽痿,至寶三鞭丸可以通過滋補(bǔ)腎陽、益氣活血有效地改善腺嘌呤誘發(fā)的腎陽衰微等[16-17]。而金匱腎氣丸主要是針對(duì)腎陰虧損,虛火內(nèi)生所致腎陽虛癥狀,其改善腎虛的癥狀主要是通過化氣行水,滋補(bǔ)陰血的功效[4,18-19]。

研究發(fā)現(xiàn),HPGA的功能障礙是腎陽虛證的基礎(chǔ),HPGA由3個(gè)水平組成:下丘腦、垂體、性腺(男性睪丸、女性卵巢)。更為重要的是,性腺功能直接與激素-內(nèi)分泌系統(tǒng)功能穩(wěn)態(tài)緊密關(guān)聯(lián)[20-21]。一般認(rèn)為,性反應(yīng)過程與神經(jīng)內(nèi)分泌的調(diào)控相關(guān)。不同神經(jīng)中樞通過接受各種激素(DA、5-HT、NE)刺激,下丘腦進(jìn)一步接收信息,加工轉(zhuǎn)換為神經(jīng)內(nèi)分泌信號(hào),釋放促性腺激素釋放激素(Gonadotropin-releasing Hormone,GnRH),刺激腺垂體嗜堿性細(xì)胞釋放FSH、E2、LH和T。這4種促性腺激素進(jìn)一步刺激性腺,分泌性激素,促使男性生殖器官發(fā)育成熟,并作為維持正常性功能的基本條件[22-23]。上述現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)識(shí)形成了公認(rèn)的HPGA,從生理功能整合、系統(tǒng)調(diào)節(jié)的角度,揭示出生殖功能改變的深層次、系統(tǒng)性原因,也大大拓展了人們對(duì)生殖相關(guān)疾病的認(rèn)識(shí)領(lǐng)域和治療策略認(rèn)識(shí)[24-25]。

隨著臨床和科研對(duì)HPGA與腎陽虛證的深入探究,已經(jīng)形成了具有科學(xué)意義且相對(duì)統(tǒng)一的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[25],主要對(duì)血清中E2、T、LH、FSH等微觀指標(biāo)的檢測(cè)。經(jīng)至寶三鞭丸干預(yù)后,大鼠血清中LH、T的水平均得以改善,E2/T比值失衡亦得以糾正,尤以高劑量對(duì)FSH、LH、E2/T比值的改善最佳。上述研究結(jié)果表明,至寶三鞭丸可基于對(duì)HPGA的調(diào)控改善腺嘌呤致腎陽虛證模型大鼠的腎陽虛癥狀,呈現(xiàn)出良好的補(bǔ)腎助陽功效。

4 結(jié)論

本研究評(píng)價(jià)至寶三鞭丸對(duì)于腺嘌呤所致腎陽虛證模型動(dòng)物生殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和對(duì)HPGA功能的改善作用,對(duì)于該藥物針對(duì)腎陽虛證治療有效性評(píng)價(jià)和科學(xué)內(nèi)涵揭示具有積極意義。

利益沖突聲明:無。