魏盼盼，豐朝暉，俞錄賢，阿懷云，祁洪芳，董在杰

(1.青海湖裸鯉救護中心，青海省青海湖裸鯉繁育與保護重點實驗室，青海 西寧 810016；2.中國水產科學研究院淡水漁業(yè)研究中心，農業(yè)農村部淡水漁業(yè)與種質資源利用重點實驗室，江蘇 無錫 214081)

聚維酮碘又名聚乙烯吡咯烷酮碘，是一種高效的廣譜殺菌劑，具有刺激性小、作用時間長、無污染、無殘留等特點，在水產養(yǎng)殖行業(yè)中廣泛應用。為有效掌握聚維酮碘對青海湖裸鯉受精卵孵化效果的影響，采用不同濃度的聚維酮碘對青海湖裸鯉受精卵進行處理，觀察孵化效果。

一、試驗條件及材料

1.試驗地點、條件

試驗地點在青海省海南州共和縣青海湖裸鯉布哈河黑馬河增殖試驗站，時間為2023年7月。試驗用水為深井水，經過循環(huán)曝氣24小時，水溫為10～12℃，pH為8.2～8.6。

2.試驗材料

(1)受精卵。在布哈河自然河道人工捕撈、挑選性腺成熟雌雄親魚采卵、取精，采用干法授精，授精后用4%滑石粉溶劑脫黏，將受精卵攜水運輸至增殖實驗站進行試驗。

(2)試驗藥物。聚維酮碘(水產用)有效碘含量為10%，為保證聚維酮碘的有效濃度，試驗過程中現(xiàn)用現(xiàn)配。下文敘述的藥品濃度皆為藥品本身的濃度。

二、試驗方法

1.消毒濃度梯度設置

設置聚維酮碘濃度組，分別為45、90、150、200毫克/升，設1個空白對照組，每組3個平行，每個平行取100 粒受精卵，放置于1.5升燒杯中微充氧孵化。

2.消毒及數(shù)據(jù)收集方式

從受精卵至發(fā)眼孵化期間，將受精卵浸入相應濃度的聚維酮碘藥液中浸泡20分鐘，取出后過濾掉消毒溶液，后放置于1.5升燒杯中，微充氧孵化。每天消毒1次，消毒前進行活卵、死卵、霉菌感染死亡計數(shù)，觀察發(fā)育情況，在試驗過程中不挑出死卵及霉卵，累計計算死卵、霉卵數(shù)量。試驗結束后，對每組存活發(fā)眼卵進行計數(shù)，發(fā)眼率、死卵率、霉卵比率分別為發(fā)眼卵數(shù)、死卵數(shù)、霉菌感染引起的死卵數(shù)與試驗用受精卵總數(shù)的比值。

3.數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

使用SPSS 23.0軟件對樣本數(shù)據(jù)進行單因素方差分析，數(shù)據(jù)結果用平均值±標準差表示，顯著性水平取為P＜0.05。

三、試驗結果與分析

1.聚維酮碘對受精卵死卵率和發(fā)眼率的影響

試驗結果見表1。在24小時和48小時時，各質量濃度組受精卵的死卵率無顯著差異(P＞0.05)；在72小時時，受精卵的死卵率隨著聚維酮碘質量濃度的增加而逐漸升高，200毫克/升組的死卵率顯著高于其他濃度組(P＜0.05）；在96小時時，空白對照組的死卵率增加最多，45毫克/升組的死卵率低于其他組，但除200毫克/升組外，與其余各組間的差異不顯著(P＞0.05）；120小時時，200毫克/升組的死卵率為最高，達到(90.0±0)%，45毫克/升組的死卵率最低并顯著低于除90毫克/升組外的其他各組，與90毫克/升組相比，其死卵率略低，但差異不顯著(P＞0.05)。

表1 聚維酮碘對青海湖裸鯉受精卵孵化的影響結果

發(fā)眼率以45毫克/升組最高，并顯著高于除90毫克/升組外的其他各組，與90毫克/升組相比，其發(fā)眼率略高，但差異不顯著(P＞0.05)。

2.聚維酮碘對受精卵長霉率的影響

試驗結果見表2。當聚維酮碘的質量濃度為90～200毫克/升時，72小時內霉菌抑制效果顯著，霉菌感染率為0。45毫克/升組也能有效抑制水霉生長，長霉率顯著低于對照組(P＜0.05)；96小時各質量濃度組能有效抑制霉菌生長，長霉率顯著低于對照組(P＜0.05)，但45、90 和150毫克/升組差異不顯著(P＞0.05)，200毫克/升組霉菌抑制效果依舊顯著，霉菌感染率為0；120小時時45毫克/升和200毫克/升的抑制霉菌效果最好，與其他各組有顯著差異，90毫克/升和150毫克/升的抑制霉菌效果次之，各質量濃度組的長霉率均顯著低于對照組(P＜0.05)。

表2 聚維酮碘對青海湖裸鯉受精卵長霉率影響結果

綜合看，當聚維酮碘的濃度為45毫克/升時，受精卵的發(fā)眼率最高，長霉率控制在(6.1±1)%，隨著聚維酮碘濃度增加，霉菌生長受到不同程度的限制，在聚維酮碘濃度為200毫克/升時，長霉率為(3.6±1.8)%，但該質量濃度顯著影響受精卵的孵化，其發(fā)眼率僅為(3.6±0)%，說明該濃度聚維酮碘對青海湖裸鯉受精卵具有極強的致死性，不適宜魚卵孵化生產。當聚維酮碘濃度為90、150毫克/升時，長霉率卻比45毫克/升組顯著提高，死卵率也有所增加，發(fā)眼率又在150毫克/升時顯著降低，說明聚維酮碘濃度升至90～150毫克/升時，對青海湖裸鯉受精卵有一定致死性，其死卵發(fā)霉率也隨著孵化時間增加而上升。

四、討論

水霉病是魚卵孵化過程中的常見病，尤其是青海湖裸鯉為高原冷水魚，在水溫為10～12℃時，青海湖裸鯉受精卵孵化時間可達7～10天，周期長，水霉多發(fā)，常給生產造成較大損失。聚維酮碘是水產常用藥，研究表明，用聚維酮碘消毒珍珠龍膽石斑魚受精卵，適宜的消毒濃度為20～70毫克/升，處理時間10分鐘(孔祥迪等，2014)；聚維酮碘處理錦鯉受精卵對其孵化效果的影響變化幅度較大，效果不顯著(楊志強等，2018)；聚維酮碘消毒對綠鰭馬面鲀受精卵出苗率影響不顯著，且聚維酮碘濃度為500毫克/升時，出苗率顯著降低(英娜等，2020)。

魚因種類不同，受精卵的生態(tài)生理和對消毒劑的耐受力也不同，對外部環(huán)境的忍耐力也不同，過高濃度的化學藥物破壞受精卵的卵膜、卵質及滲透壓，致卵粒死亡。青海湖裸鯉作為青海湖特有魚，研究消毒劑對受精卵效果的影響較其他魚相對較少，主要依據(jù)生產魚苗一線人員的經驗，結合藥物的性價比和安全性來進行消毒，如何做到有效用藥、合理用藥將是今后研究的課題。

聚維酮碘對青海湖裸鯉受精卵處理的效果較穩(wěn)定，45、90毫克/升處理組的孵化率都較高，與對照組相比，45毫克/升組更具有顯著差異。因此，可用聚維酮碘45毫克/升濃度消毒20分鐘，在此濃度可顯著提高發(fā)眼率，降低霉卵率。