習(xí)丙文

(中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，江蘇 無錫 214081)

一、多子小瓜蟲的基礎(chǔ)生物學(xué)特征

多子小瓜蟲(Ichthyophthirius multifiliis)隸屬于原生動物纖毛門、寡膜綱、膜口目、凹口科和小瓜蟲屬(Ichthyophthirius),可感染世界范圍內(nèi)幾乎所有淡水硬骨魚。嚴(yán)重感染時魚體皮膚、鰓覆蓋一層小白點，故稱“白點病”。病魚呼吸、滲透壓調(diào)節(jié)等功能受到嚴(yán)重影響；同時，由成蟲鉆出魚體所產(chǎn)生的傷口會進一步誘發(fā)細(xì)菌性繼發(fā)感染。由于沒有嚴(yán)格宿主特異性，小瓜蟲病(“白點病”)嚴(yán)重感染時可造成苗種培育池、養(yǎng)殖池塘、河流水庫養(yǎng)殖網(wǎng)箱、室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)以及水族箱中養(yǎng)殖魚和觀賞魚大量死亡。據(jù)倪達書等(1960)考證，北宋文學(xué)家蘇軾在《物類相感志》中曾有“魚瘦而生白點者名虱，用楓樹皮投水中則愈”，為我國對魚的小瓜蟲病最早期的記載。

多子小瓜蟲的生活史相對較為簡單。魚體寄生階段主要為滋養(yǎng)體；發(fā)育成熟的成蟲(大小300～800微米)鉆出表皮，沉入水底或附著于懸浮物上，蟲體表面纖毛消失，分泌凝膠狀物質(zhì)形成包囊；在適宜水溫下(15～25℃)包囊內(nèi)蟲體經(jīng)多次分裂生殖產(chǎn)生數(shù)百至上千個掠食體幼蟲；從包囊釋放出來的掠食體(大小20～50 微米)自由游動在水體中，找到魚體后再次鉆入鰓、皮膚或鰭條的上皮層下發(fā)育成滋養(yǎng)體。在適宜的溫度和水環(huán)境下，小瓜蟲的繁殖和生長速度很快，1～2 周內(nèi)可由零星幾個不易察覺的蟲體形成大量白點，覆蓋魚的鰓、皮膚、鰭條。

多子小瓜蟲的掠食體蟲與水體中的浮游纖毛蟲相似。其在包囊內(nèi)未成熟時呈圓形，隨著發(fā)育成熟，身體逐漸變長，具有鉆孔器的前端比后端更尖。離開包囊的掠食體幼蟲呈扁鞋底形，兩側(cè)較寬，中間向內(nèi)凹陷。蟲體前部有1個大型伸縮泡，圓形的大核位于后部，小核位置不定，尾部有1 條約20 微米的尾毛。從包囊中剛剛孵出的掠食體游動最為活躍，感染活力最強。根據(jù)外部環(huán)境條件，其在水體中可存活10～96小時。

掠食體侵入魚體后轉(zhuǎn)變?yōu)樽甜B(yǎng)體，在20℃條件下經(jīng)7天左右滋養(yǎng)體可以發(fā)育成熟。蟲體表有短而密集的纖毛快速擺動，胞口位于腹面，胞咽呈袋狀。其最明顯的特征是具有1個馬蹄形或香腸形的大核。多子小瓜蟲滋養(yǎng)體成熟或受到刺激時，就會從宿主增生組織的“白點”中鉆出。數(shù)分鐘后形成包囊，一般是圓形或橢圓形。在適宜條件下進行無性分裂繁殖，釋放大量的掠食體。

根據(jù)其生活史的特點，在魚體寄生階段的滋養(yǎng)體由宿主表皮和包囊覆蓋，治療小瓜蟲病的藥物往往需要很高濃度透過表皮后才能殺死蟲體。這導(dǎo)致很多藥物由于安全濃度問題無法使用。目前常用的防治藥物主要針對小瓜蟲在水體中易被殺滅的掠食體階段；然而，由于魚體寄生滋養(yǎng)體發(fā)育不同步，會不斷釋放新的成蟲和掠食體而再次感染，導(dǎo)致許多治療藥物需要長時間重復(fù)用藥，對魚體健康、養(yǎng)殖環(huán)境和質(zhì)量安全造成嚴(yán)重影響，如福爾馬林、硫酸銅、過氧化氫等。在養(yǎng)殖中孔雀石綠、硝酸亞汞等由于環(huán)境毒性、致畸致癌性在我國和多數(shù)國家被嚴(yán)格禁止使用，近年來，國內(nèi)外研究人員一直致力于從免疫疫苗、植物提取物和菌體產(chǎn)物等方面探索有效防治藥物。

二、環(huán)境因素對小瓜蟲發(fā)生的影響

多子小瓜蟲的繁殖和病害發(fā)生與水溫密切相關(guān)。Forwood 等(2015)研究發(fā)現(xiàn)在5℃下，包囊孵化率只有71%，孵化時間約180小時，平均每個包囊孵化出200個掠食體；當(dāng)水溫升至21℃時，包囊孵化率達到100%，孵化耗時降低至18小時，平均產(chǎn)生420個掠食體；溫度25℃時，孵化時間進一步縮短(14小時)，孵化率有所降低(88%)；溫度較高(30℃)時，盡管孵化時間僅需12小時，但掠食體產(chǎn)量(288個)大幅降低。掠食體在5℃環(huán)境下可存活長達9天，25～30℃時可存活18小時。在低于5℃時，魚體上感染的滋養(yǎng)體一般不會離開魚體。

水體鹽度可以影響小瓜蟲病發(fā)生。陳達麗(2004)研究表明在水溫13.5℃時，鹽度20 對多子小瓜蟲滋養(yǎng)體、掠食體和包囊的殺滅時間依次是1、9和20分鐘。Mifsud和Rowland(2008)使用2～3 鹽度處理可有效控制多子小瓜蟲感染澳洲銀鱸。Forwood 等(2015)發(fā) 現(xiàn) 在12℃和17℃下，5～7.5鹽度暴露可顯著抑制包囊發(fā)育。

多子小瓜蟲存活和完成生活史要求溶氧1.0毫克/升以上和pH 5.5～10。Tange 等(2020)的研究發(fā)現(xiàn)，pH 為2.0～4.0時，所有的包囊在6小時內(nèi)死亡；pH 為5.0時，1/3的包囊存活并孵化出掠食體；pH 為6.0～8.0時，所有包囊都可以正常存活孵化；pH 為8.0時，25小時存活的掠食體數(shù)量最多；pH為9.0時，包囊在7小時內(nèi)能存活，近半包囊孵化出掠食體；pH 為10.0 以上，只有少量包囊可以釋放掠食體。

三、多子小瓜蟲病防治方法

1.物理措施 維持水體溫度≥30℃約1 周時間，對小瓜蟲病有較好的預(yù)防控制作用。需要注意該措施下養(yǎng)殖魚對溫度的耐受性，升溫速度過快會對魚造成應(yīng)激以及高溫會對水族箱水草造成危害。Bodensteiner等(2000)報道20.3厘米/分鐘的水流速度可以降低斑點叉尾鮰幼魚患小瓜蟲病的死亡率；增加流速至36.5厘米/分鐘時，可以清除水體中的多子小瓜蟲。Gratzek等(1983)的研究表明，在循環(huán)水管路中設(shè)置91 900 微瓦·秒/厘米2的紫外燈能有效控制多子小瓜蟲。

2.化學(xué)藥物及中草藥 在早期養(yǎng)殖病害防治中，孔雀石綠和汞制劑(氯化亞汞、硝酸亞汞、醋酸汞等)曾被發(fā)現(xiàn)對小瓜蟲病具有良好的治療效果，但由于其環(huán)境污染和食品安全問題，已被國際上廣泛禁止使用。有報道稱硫酸銅對多子小瓜蟲病有一定的療效，但達治療濃度會對魚鰓損傷較嚴(yán)重。福爾馬林也曾被用于防治小瓜蟲病，但高劑量和多次用藥對魚體損傷較大。多子小瓜蟲的滋養(yǎng)體寄生在魚上皮組織中，很多藥物較難以滲透表皮有效殺滅蟲體。目前化學(xué)藥物主要針對多子小瓜蟲自由生活的掠食體階段，溴硝丙二醇(Shinn 等，2001)、過 碳 酸 鈉(Buchmann 等，2003)、磷酸氯喹(彭碧琳，2007)、高鐵酸鉀(Ling 等，2010)、二氧化氯(Melo 等，2015)等藥物表現(xiàn)出了一定的殺滅作用。

生姜、辣椒合劑是養(yǎng)殖一線最常使用的治療藥物，由于其強烈的刺激作用，故可使多子小瓜蟲滋養(yǎng)體離開魚體。有報道稱貫眾、檳榔組合物(馬澤寧，2019)、烏梅(鉏超等，2010)、黃花蒿(Wu 等，2017)等中草藥對小瓜蟲掠食體活性有抑制作用。近年來，植物提取劑中發(fā)現(xiàn)了多種對多子小瓜蟲有殺滅作用的成分，如丁香酚(姚嘉赟等，2016)、肉桂醛(梁靖涵等，2014)、10-姜酚(Fu等，2019)、小檗堿(Huang等，2022)、白屈菜紅堿(Shan 等，2014)、茵芋堿(Shan 等，2014)、厚樸酚(宋晨光，2018)、青蒿琥酯(彭碧琳，2007)等，在離體試驗中都呈現(xiàn)出對小瓜蟲掠食體有較好的殺滅效果。

3.免疫預(yù)防 在養(yǎng)殖中經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)患過小瓜蟲病的魚，再次感染小瓜蟲的強度和死亡率都要低很多，呈現(xiàn)一定免疫保護作用。Burkart 等(1990)使用福爾馬林滅活的滋養(yǎng)體對斑點叉尾鮰進行腹腔注射，成功誘導(dǎo)了對多子小瓜蟲感染的保護性免疫。閆春梅等(2014)使用人工合成抑動蛋白基因片段的核酸疫苗對鯉進行肌肉注射，疫苗提供的保護率達90%以上。劉芳玲(2022)設(shè)計合成的β-微管蛋白核酸疫苗取得了70%的保護率。然而，當(dāng)前小瓜蟲病疫苗還不成熟，缺乏商業(yè)化產(chǎn)品。

4.生物防治 近期研究發(fā)現(xiàn)水體浮游動物橈足類(劍水蚤)可以捕食多子小瓜蟲的掠食體，模擬感染干預(yù)試驗也證實大型浮游動物的存在可以顯著降低金魚感染多子小瓜蟲的強度。該研究結(jié)果為進一步開發(fā)多子小瓜蟲病的生物防治技術(shù)奠定了基礎(chǔ)。在養(yǎng)殖生產(chǎn)中一直存在這樣的現(xiàn)象：水肥(浮游生物豐富)的養(yǎng)殖環(huán)境不容易暴發(fā)小瓜蟲病，但在水質(zhì)清瘦(浮游生物少)的室內(nèi)循環(huán)水、山泉水或河流網(wǎng)箱等環(huán)境下容易暴發(fā)小瓜蟲病。因此，適度肥水以維持一定量的浮游動物有利于控制小瓜蟲病的發(fā)生。

(待 續(xù))