孫定周 張?chǎng)?朱潔晨 朱述陽(yáng)

肺癌是全球范圍內(nèi)危害人類健康的常見(jiàn)腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率均位于惡性腫瘤的首位[1]，而腺癌是其最常見(jiàn)的病理類型[2]。目前，手術(shù)是早期肺癌患者的首選且最有效的治療方式。然而，肺癌的早期癥狀缺乏典型性，部分患者偶可見(jiàn)咳嗽、痰中帶血、消瘦等癥狀，因此大部分患者一經(jīng)診斷即處于進(jìn)展期，預(yù)后極差。近年來(lái)，關(guān)于肺癌的基礎(chǔ)及臨床研究發(fā)展迅速，臨床治療理念不斷更新，而靶向治療聯(lián)合免疫治療則有可能為進(jìn)展期肺癌的治療帶來(lái)新希望[3]。因此，探究肺癌細(xì)胞內(nèi)分子表達(dá)異常的機(jī)制及其在肺癌發(fā)展中的作用，對(duì)肺癌的分子靶向治療、改善患者預(yù)后具有重要意義。核因子E2 相關(guān)因子2（nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2）是細(xì)胞抗氧化反應(yīng)的主要調(diào)節(jié)因子，并與DNA 的損傷修復(fù)相關(guān)，可抑制細(xì)胞凋亡[4]。研究發(fā)現(xiàn)Nrf2 在多種類型的腫瘤細(xì)胞中被異常激活，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲能力并參與腫瘤細(xì)胞對(duì)放化療抵抗的過(guò)程[5]，表明Nrf2 可能作為一個(gè)良好的腫瘤治療靶標(biāo)。有研究指出，Nrf2 在肺癌中過(guò)表達(dá)[6-7]，并與肺癌細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為密切相關(guān)[8-10]，但其作用機(jī)制目前尚不清楚。因此，本研究通過(guò)探討Nrf2 對(duì)肺腺癌細(xì)胞增殖、遷移能力的影響，進(jìn)一步研究Nrf2 促進(jìn)肺腺癌進(jìn)展的可能機(jī)制，以期為肺癌的靶向治療提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 組織標(biāo)本收集 收集2020 年10 月至2021 年10月在徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院住院并接受手術(shù)治療的30 例肺腺癌患者的癌組織及癌旁組織標(biāo)本。所有患者術(shù)前均未接受過(guò)放化療，經(jīng)術(shù)后病理檢查確診為肺腺癌。本研究經(jīng)徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查通過(guò)（批準(zhǔn)文號(hào)：XYFY2022-KL278-01）。

1.1.2 細(xì)胞、試劑及儀器 人肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549 細(xì)胞購(gòu)自中科院上海細(xì)胞庫(kù)。FBS（批號(hào)：A4766801）、RPMI 1640 培養(yǎng)基（批號(hào)：R5158）均購(gòu)自美國(guó)Gibco 公司；Trizol 試劑（批號(hào)：15596026）購(gòu)自美國(guó)賽默飛公司；反轉(zhuǎn)錄試劑盒（貨號(hào)：RR014B）、RT-qPCR 試劑盒（貨號(hào)：RR086B）均購(gòu)自日本TaKaRa 公司。Nrf2 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒（vector-Nrf2）及陰性對(duì)照質(zhì)粒（vector）均購(gòu)自上海吉?jiǎng)P公司；Lipofectamine 2000 轉(zhuǎn)染試劑（批號(hào)：C0518）、組織抗原修復(fù)液（批號(hào)：P0081）、抗體稀釋液（批號(hào)：P0277）均購(gòu)自南京碧云天公司；Nrf2 小干擾RNA（small interference RNA，siRNA）序列、Nrf2 引物均購(gòu)自上海生工公司；Transwell 小室（貨號(hào)：3422）購(gòu)自美國(guó)康寧公司；5-乙炔基-2'-脫氧尿苷（5-ethynyl-2'-deoxyuridine, EdU）試劑盒購(gòu)自上海碧云天公司；甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）、Nrf2、蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）、磷酸化Akt（phosphorylated protein kinase B，p-Akt）、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR) 、磷酸化mTOR（phosphorylated mammalian target of rapamycin，p-mTOR）、B 淋巴細(xì)胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2 gene，Bcl-2）、Bcl-2 相關(guān)X 蛋白（Bcl-2-associated X，Bax）、E-鈣黏蛋白（E-cadherin）抗體均購(gòu)自武漢三鷹公司（批號(hào)分別為：10494-1-AP、16396-1-AP、60203-2-Ig、80455-1-RR、28273-1-AP、67778-1-Ig、26593-1-AP、50599-2-Ig、20874-1-AP）；VD-850 型生物超凈工作臺(tái)購(gòu)自蘇州凈化設(shè)備公司；Olympus IX71 型倒置熒光顯微鏡購(gòu)自日本奧林巴斯公司；Mini Protean 3 Cell 型BIO-RAD 電泳-轉(zhuǎn)膜儀購(gòu)自美國(guó)伯樂(lè)公司；PHY-型病理漂烘儀購(gòu)自常州市中威電子儀器廠；LM1235 石蠟切片機(jī)購(gòu)自德國(guó)Leica 公司；TSJ-Ⅱ型電腦自動(dòng)組織脫水機(jī)購(gòu)自常州市中威電子儀器廠；JC101 型電熱鼓風(fēng)干燥箱購(gòu)自上海成順儀器儀表有限公司。

1.2 方法

1.2.1 肺腺癌組織及癌旁組織中Nrf2 蛋白表達(dá)分布檢測(cè) 采用免疫組化法。在徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院病理科完成組織標(biāo)本的石蠟包埋、切片（厚度4 μm）過(guò)程。切片經(jīng)過(guò)脫蠟、梯度乙醇水化、修復(fù)抗原、漂洗后，加入內(nèi)源性過(guò)氧化酶阻斷試劑，漂洗后封閉，然后滴加Nrf2 一抗（稀釋比例1∶300），室溫孵育后漂洗，滴加二抗并孵育，漂洗后DAB 染色、蘇木素復(fù)染、沖洗。隨后將切片梯度脫水，透明并封片，室溫下放置約5 d 后用倒置熒光顯微鏡攝片，隨機(jī)挑選5 個(gè)視野拍攝，使用Image Pro Plus 軟件計(jì)算圖片的累計(jì)光密度/區(qū)域面積（integral optical density/area，IOD/Area）值。

1.2.2 肺腺癌組織及癌旁組織中Nrf2 mRNA 表達(dá)水平檢測(cè) 采用RT-qPCR法。使用Trizol試劑提取總RNA，按照說(shuō)明書(shū)的實(shí)驗(yàn)步驟將mRNA 反轉(zhuǎn)錄成cDNA，隨后通過(guò)RT-qPCR 法檢測(cè)Nrf2 mRNA 表達(dá)水平。采用2-ΔΔCt法評(píng)估目的基因Nrf2 的相對(duì)表達(dá)水平，GAPDH 作為內(nèi)參基因。引物序列見(jiàn)表1。總反應(yīng)體系20 μL，其中ddH2O 6.4 μL，SYBR Green 10 μL，cDNA 2.0 μL，正反向引物各0.8 μL。反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性10 min，95 ℃變性15 s，60 ℃退火1 min，72 ℃延伸10 min，共40 個(gè)循環(huán)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

表1 RT-qPCR 引物序列

1.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)和分組 將A549 細(xì)胞培養(yǎng)于含10%FBS、無(wú)青鏈霉素的RPMI 1640 培養(yǎng)基中，在37 ℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。A549 細(xì)胞傳代培養(yǎng)至第4代，融合度達(dá)到70%時(shí)隨機(jī)分為Nrf2 過(guò)表達(dá)組（vector-Nrf2 組）、過(guò)表達(dá)陰性對(duì)照組（vector 組）、Nrf2 沉默表達(dá)組（si-Nrf2 組）和沉默表達(dá)陰性對(duì)照組（si-NC組）。使用Lipofectamine 2000 轉(zhuǎn)染試劑將5 μg 的vector-Nrf2、vector 以及siRNA 沉默序列、陰性對(duì)照序列分別轉(zhuǎn)染到A549 細(xì)胞，轉(zhuǎn)染6 h 后更換培養(yǎng)基，在正常條件下培養(yǎng)24 h 后裂解細(xì)胞提取蛋白樣本，使用Western blot 法檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果。

1.2.4 細(xì)胞遷移能力檢測(cè) 采用Transwell 法。在轉(zhuǎn)染vector-Nrf2、siRNA 沉默序列的24、48 h 后，消化、重懸A549 細(xì)胞并調(diào)整密度為1×105/mL，吸取200 μL 重懸液接種在Transwell 上層小室內(nèi)，并向下層小室中添加800 μL 含有10%FBS 的培養(yǎng)基，37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中孵育24 h 后取出。吸棄上室中的培養(yǎng)液，醫(yī)用棉簽蘸水后輕柔擦拭上室內(nèi)側(cè)未遷移的細(xì)胞，用PBS 清洗3 次后用4%多聚甲醛固定30 min，0.1%結(jié)晶紫染色15 min，雙蒸水漂洗干凈后倒扣在超凈臺(tái)內(nèi)風(fēng)吹晾干，在倒置熒光顯微鏡下拍照，使用Image J 軟件計(jì)算遷移至小室底層的細(xì)胞數(shù)。

1.2.5 細(xì)胞增殖能力檢測(cè) 采用EdU 熒光計(jì)數(shù)法。重懸A549 細(xì)胞并調(diào)整密度為1×104/mL，吸取100 μL/孔重懸液接種至96 孔板內(nèi)培養(yǎng)16 h，按照產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色操作。倒置熒光顯微鏡下分別拍攝同一視野下的紅色熒光（EdU 陽(yáng)性細(xì)胞）和藍(lán)色熒光（所有細(xì)胞核），使用Image J 軟件分別計(jì)算紅藍(lán)色細(xì)胞總數(shù)，細(xì)胞EdU 陽(yáng)性率與細(xì)胞增殖能力呈正相關(guān)關(guān)系，通過(guò)計(jì)算細(xì)胞EdU 陽(yáng)性率檢測(cè)細(xì)胞增殖能力。

1.2.6 細(xì)胞及組織標(biāo)本中Nrf2 及下游磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K）/Akt 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平檢測(cè) 采用Western blot 法。使用含有蛋白酶抑制劑的RIPA 裂解液提取總蛋白。使用濃度為10%十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行電泳分離目標(biāo)蛋白質(zhì)，然后在濕轉(zhuǎn)槽將蛋白轉(zhuǎn)移到甲醇激活的聚偏二氟乙烯膜，1×Tris 鹽緩沖液（tris buffered saline，TBST）洗膜5 min 后將膜浸入3%牛血清白蛋白，室溫條件下封閉2 h。使用抗體稀釋液將各抗體按照以下比例進(jìn)行稀釋：Nrf2（1∶1 000）、Akt（1∶1 000）、p-Akt（1∶1 000）、mTOR（1∶1 000）、p-mTOR（1∶1 000）、Bcl-2（1∶1 000）、Bax（1∶1 000）、E-cadherin（1∶1 000），在37 ℃下孵育2 h。GAPDH（1∶3 000）作為內(nèi)參。再次用TBST 洗膜5 min×3 次后，ECL 發(fā)光法檢測(cè)目標(biāo)蛋白條帶，并使用Image J 軟件分析條帶灰度值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0 及GraphPad Prism 9.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以表示，方差齊時(shí)，兩組比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；方差不齊時(shí)，兩組比較采用Welch'st檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 組織觀測(cè)指標(biāo)結(jié)果

2.1.1 肺腺癌組織和癌旁組織中Nrf2 表達(dá)的比較肺腺癌組織中Nrf2 陽(yáng)性表達(dá)，主要位于肺腺癌細(xì)胞質(zhì)，見(jiàn)圖1。肺腺癌組織中Nrf2 的IOD/Area 值為0.380±0.040，高于癌旁組織的0.020±0.006，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=5.03，P＜0.01）。

圖1 Nrf2 在肺腺癌組織和癌旁組織中的表達(dá)（A：Nrf2 在癌旁組織中陰性表達(dá)；B：Nrf2 在肺腺癌組織陽(yáng)性表達(dá)）

2.1.2 肺腺癌組織和癌旁組織Nrf2 mRNA 表達(dá)水平比較 肺腺癌組織中Nrf2 mRNA 表達(dá)水平為2.63±0.07，高于癌旁組織的1.00，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=40.33，P＜0.01）。

2.1.3 肺腺癌組織和癌旁組織Nrf2 蛋白表達(dá)水平比較 與癌旁組織比較，肺腺癌組織中Nrf2 蛋白表達(dá)水平為2.30±0.41，高于癌旁組織的1.04±0.27，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.18，P＜0.05），見(jiàn)圖2。

圖2 肺腺癌組織和癌旁組織Nrf2 蛋白表達(dá)的電泳圖

2.2 細(xì)胞觀測(cè)指標(biāo)結(jié)果

2.2.1 Nrf2 過(guò)表達(dá)或Nrf2 沉默對(duì)A549 細(xì)胞遷移能力的影響 vector-Nrf2 組遷移細(xì)胞數(shù)為（574.00±40.90）個(gè)/孔，高于vector 組的（409.00±11.70）個(gè)/孔，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=15.52，P＜0.05），見(jiàn)圖3（插頁(yè)）。si-Nrf2 組遷移細(xì)胞數(shù)為（218.00±29.55）個(gè)/孔，低于si-NC 組的（427.70±27.15）個(gè)/孔，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=8.44，P＜0.05），見(jiàn)圖4（插頁(yè)）。

圖3 Nrf2 過(guò)表達(dá)對(duì)A549 細(xì)胞遷移能力的影響（A：vector 組；B：vector-Nrf2 組）

圖4 Nrf2 沉默對(duì)A549 細(xì)胞遷移能力的影響（A：si-NC 組；B：si-Nrf2 組）

2.2.2 Nrf2 過(guò)表達(dá)或Nrf2 沉默對(duì)A549 細(xì)胞增殖能力的影響 vector-Nrf2 組細(xì)胞EdU 陽(yáng)性率為（38.87±0.50）%，高于vector 組的（28.60±0.95）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=38.50，P＜0.01），見(jiàn)圖5（插頁(yè)）。si-Nrf2 組細(xì)胞EdU 陽(yáng)性率為（23.23±1.55）%，低于si-NC 組的（34.37±1.60）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.32，P＜0.05），見(jiàn)圖6（插頁(yè)）。

圖5 Nrf2 過(guò)表達(dá)對(duì)A549 細(xì)胞增殖能力的影響

圖6 Nrf2 沉默對(duì)A549 細(xì)胞增殖能力的影響

2.2.3 轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)質(zhì)?；騭iRNA 沉默片段對(duì)A549 細(xì)胞Nrf2 蛋白表達(dá)水平的影響 vector-Nrf2 組細(xì)胞Nrf2蛋白表達(dá)水平為1.68±0.29，高于vector 組的0.92±0.17，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.83，P＜0.05），見(jiàn)圖7。si-Nrf2 組Nrf2 蛋白表達(dá)水平為0.52±0.09，低于si-NC組的1.06±0.13，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=19.00，P＜0.01），見(jiàn)圖8。

圖7 Nrf2過(guò)表達(dá)對(duì)A549細(xì)胞Nrf2蛋白表達(dá)水平影響的電泳圖

圖8 Nrf2 沉默對(duì)A549 細(xì)胞Nrf2 蛋白表達(dá)水平影響的電泳圖

2.2.4 Nrf2 過(guò)表達(dá)對(duì)細(xì)胞PI3K/Akt 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 vector-Nrf2 組中p-Akt、p-mTOR、Bcl-2蛋白表達(dá)水平均高于vector 組，而B(niǎo)ax、E-cadherin 蛋白表達(dá)水平均低于vector 組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；而兩組Akt、mTOR 蛋白表達(dá)水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見(jiàn)表2 和圖9。

表2 Nrf2 過(guò)表達(dá)對(duì)細(xì)胞內(nèi)PI3K/Akt 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

圖9 Nrf2 過(guò)表達(dá)對(duì)細(xì)胞PI3K/Akt 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平影響的電泳圖

2.2.5 Nrf2 沉默對(duì)細(xì)胞PI3K/Akt 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 si-Nrf2 組中p-Akt、p-mTOR、Bcl-2 蛋白表達(dá)水平均低于si-NC 組，而B(niǎo)ax、E-cadherin 蛋白表達(dá)水平均高于si-NC 組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；而兩組Akt、mTOR 蛋白表達(dá)水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見(jiàn)表3 和圖10。

表3 Nrf2 沉默對(duì)細(xì)胞PI3K/Akt 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

圖10 Nrf2 沉默對(duì)細(xì)胞PI3K/Akt 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平影響的電泳圖

3 討論

腫瘤的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及到遺傳、環(huán)境、基因突變、免疫微環(huán)境改變等諸多因素。近年來(lái)關(guān)于肺癌的研究發(fā)展迅速，臨床治療理念不斷更新。隨著吉非替尼、阿帕替尼、奧替雷斯及帕博利珠單抗等分子靶向、免疫藥物的臨床應(yīng)用，肺癌患者的預(yù)后已經(jīng)得到了初步的改善，但肺癌的病死率仍較高。因此，尋找有價(jià)值的分子標(biāo)志物有助于揭示肺癌發(fā)展的分子機(jī)制，從而改善患者預(yù)后。

Nrf2 是細(xì)胞內(nèi)調(diào)控氧化應(yīng)激反應(yīng)的重要元件。近年來(lái)研究表明，Nrf2 在多種腫瘤中過(guò)表達(dá)，并能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[11-12]，但其促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的機(jī)制尚不完全清楚。本研究通過(guò)RT-qPCR 法、Western blot法、免疫組化法發(fā)現(xiàn)肺腺癌組織中Nrf2 mRNA、蛋白表達(dá)水平均高于癌旁組織，表明Nrf2 在肺癌的發(fā)展過(guò)程中可能發(fā)揮著不可忽視的作用。腫瘤的發(fā)展與腫瘤細(xì)胞的無(wú)限增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。因此，本研究體外培養(yǎng)了A549 肺腺癌細(xì)胞，將Nrf2 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒、si-RNA 沉默片段瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至細(xì)胞內(nèi)，通過(guò)EdU、Transwell 實(shí)驗(yàn)證明Nrf2 促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞遷移、增殖的能力。PI3K/Akt 信號(hào)通路是腫瘤研究中的經(jīng)典信號(hào)通路，其異常激活可顯著促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲[12-14]，目前該信號(hào)通路抑制劑Copanlisib 可顯著提高濾泡性淋巴瘤患者的預(yù)后[15]。本研究結(jié)果表明，Nrf2沉默可抑制A549 細(xì)胞內(nèi)的PI3K/Akt 信號(hào)通路，使其相關(guān)蛋白p-mTOR、p-Akt 蛋白表達(dá)水平降低，Nrf2 過(guò)表達(dá)則可促進(jìn)該信號(hào)通路的激活。研究表明，Bcl-2、Bax、E-cadherin 作為PI3K/Akt 信號(hào)通路的下游分子[16-17]，受到多種上游蛋白調(diào)控，進(jìn)而影響細(xì)胞的凋亡、遷移、侵襲能力[18]。本研究中Nrf2 沉默后的A549細(xì)胞內(nèi)的Bcl-2 蛋白表達(dá)水平降低，而B(niǎo)ax、E-cadherin蛋白表達(dá)水平升高，而Nrf2 過(guò)表達(dá)后上述分子的蛋白表達(dá)水平則相反。

本研究結(jié)果在一定程度上驗(yàn)證了Nrf2 在肺癌進(jìn)展中發(fā)揮的作用，進(jìn)一步闡明了其作為肺癌治療靶點(diǎn)潛在可行性。之前的研究表明Nrf2 具有抗氧化劑氧化作用，可以保護(hù)細(xì)胞抵抗內(nèi)源性和外源性氧化應(yīng)激，減輕細(xì)胞損傷[19]。本研究體外實(shí)驗(yàn)則表明Nrf2 可以增強(qiáng)肺腺癌細(xì)胞的增殖和遷移能力，在腫瘤的惡化進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。有文獻(xiàn)表明Nrf2 的生物學(xué)作用可能會(huì)在癌組織中發(fā)生改變，主要體現(xiàn)在相關(guān)信號(hào)通路的過(guò)度激活，這可能與Nrf2 蛋白翻譯后修飾形式不同有關(guān)[20-23]。例如有研究報(bào)道Nrf2 的翻譯后修飾在細(xì)胞癌變過(guò)程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)的作用，證據(jù)表明翻譯后修飾可以影響Nrf2 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，Neh1 結(jié)構(gòu)域的p300/CREB 結(jié)合蛋白對(duì)Nrf2 的乙?；龠M(jìn)其與ARE 蛋白的結(jié)合[20]。在肺腺癌細(xì)胞中，下調(diào)Nrf2 的乙?；蓪?dǎo)致氧化應(yīng)激水平增加并激活JNK 信號(hào)通路，進(jìn)而促進(jìn)肺癌細(xì)胞的侵襲[21-23]。而本研究結(jié)果則表明Nrf2 的高表達(dá)促進(jìn)了下游Akt 和mTOR 蛋白磷酸化，表明Nrf2 可能通過(guò)非自身蛋白修飾途徑促進(jìn)腫瘤進(jìn)展，雖然目前的證據(jù)表明Nrf2 翻譯后修飾可以上調(diào)其在癌癥中的表達(dá)，但每種修飾在不同癌癥類型中的確切功能、相關(guān)性和豐度需要進(jìn)一步闡明。由于Nrf2 在正常或癌變細(xì)胞中扮演不同角色，這提示產(chǎn)生這種現(xiàn)象的分子機(jī)制可能是未來(lái)的研究方向。

綜上所述，Nrf2 在肺腺癌組織中過(guò)表達(dá)，可能通過(guò)調(diào)控PI3K/Akt 信號(hào)通路，進(jìn)而調(diào)控Bcl-2、Bax、E-cadherin 的表達(dá)而影響肺腺癌細(xì)胞的增殖、遷移能力，有可能成為一個(gè)潛在的分子靶標(biāo)用于肺腺癌的治療。