嚴(yán)珍 岳建軍 楊小琳

（1. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所云南分所/云南省南藥可持續(xù)利用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 云南景洪 666100；2. 滇西應(yīng)用技術(shù)大學(xué)傣醫(yī)藥學(xué)院 云南景洪 666100）

赤眼蜂Trichogrammaspp.屬膜翅目赤眼蜂科，是全世界防控農(nóng)林業(yè)多種害蟲的主要天敵，也是研究最多的一類卵期寄生蜂[1-2]，其成蜂產(chǎn)卵于寄主卵內(nèi)，取食寄主營養(yǎng)完成其發(fā)育，進(jìn)而導(dǎo)致寄主卵死亡，而且是在寄主害蟲造成危害之前達(dá)到控害的目的[3]。目前國內(nèi)外已有多種赤眼蜂被作為有潛力的生物控制劑進(jìn)行應(yīng)用的基礎(chǔ)研究[4]，如稻螟赤眼蜂Trichogramma japonicumAshmead 防控二化螟Chilo suppressalisWalker 和三化螟Scirpophaga incertulasWalker[5-6]、亞洲玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostriniaePang et Chen 防控亞洲玉米螟Ostrinia furnacalisGuenée[7]、擬澳洲赤眼蜂Trichogramma confusumViggiani 防控小菜蛾P(guān)lutella xylostellaLinnaeus[8]、廣赤眼蜂Trichogramma evanescensWestwood 防控麥紅吸漿蟲Sitotroga cerealellaOlivier 和豆莢野螟Maruca testulalisGeyer[9-10]、短管赤眼蜂Trichogramma pretiosumRiley 防控草地貪夜蛾Spodoptera frugiperdaJ.E. Smith[11]、松毛蟲赤眼蜂Trichogramma dendrolimiMatsumura 防控灰茶尺蠖Ectropis grisescensWarren[12]和螟黃赤眼蜂Trichogramma chilonisIshii防控草地貪夜蛾S. frugiperda[13]。

黃野螟（Heortia vitessoidesMoore）是藥用植物白木香的重大害蟲之一[14]。該蟲在馬來西亞、泰國和印度等東南亞國家，中國的云南、廣東、海南等白木香種植區(qū)危害嚴(yán)重，如在云南西雙版納州，一般危害率可達(dá) 60%以上，高峰月份達(dá)90%[15]。在云南具有產(chǎn)卵量大、取食能力和危害隱蔽性強(qiáng)等特點(diǎn)[15-18]。暗黑赤眼蜂（Trichogramma pintoiVoegele）是本團(tuán)隊(duì)首次發(fā)現(xiàn)的黃野螟本地優(yōu)勢天敵，該蜂為黃野螟的卵期寄生蜂，對黃野螟具有較強(qiáng)的控制作用[19]。該蜂對多種農(nóng)林害蟲有較好的控制作用，如梨小食心蟲Grapholita molestaBusck[20-21]、斜紋夜蛾Spodoptera lituraFabricius[22]、草地螟Loxostege sticticalisL.[23]、灰白蠶蛾Ocinara variansWalker[24-25]和棉鈴蟲Helicoverpa armigeraHübner[26]。

長期以來，傳統(tǒng)的化學(xué)防治一直是防控黃野螟的主要措施[27]，但農(nóng)藥在防治靶標(biāo)害蟲的同時，田間不當(dāng)使用在一定范圍內(nèi)會對害蟲寄生蜂產(chǎn)生毒害作用，如損傷其寄生能力和繁殖力等[28]。因此，本研究選取了生產(chǎn)上防控黃野螟常用的7種殺蟲劑，研究其對暗黑赤眼蜂成蜂的急性毒性、安全性評價以及對該蜂壽命和寄生率的亞致死效應(yīng)，旨在為黃野螟等害蟲的化學(xué)應(yīng)急防控科學(xué)用藥以及保護(hù)利用天敵進(jìn)行白木香蟲害可持續(xù)綜合治理研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試?yán)ハx 供試蟲源為中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所云南分所害蟲生物防治研究團(tuán)隊(duì)于室內(nèi)飼養(yǎng)的暗黑赤眼蜂。該蜂種群采自云南省西雙版納州景洪市白木香試驗(yàn)基地黃野螟寄生卵，帶回實(shí)驗(yàn)室用替代寄主米蛾卵進(jìn)行繼代繁殖，使用人工氣候箱進(jìn)行飼養(yǎng)，條件為溫度(25±1)℃、相對濕度為(75±5)%、光周期為12L:12D。暗黑赤眼蜂成蜂用濃度為10%的蔗糖水作為外源補(bǔ)充營養(yǎng)飼喂。

1.1.2 供試藥劑 選取了生產(chǎn)上用于黃野螟化學(xué)防治的7 種常用殺蟲劑（表1），測定其對暗黑赤眼蜂的急性毒性和亞致死效應(yīng)。

表1 供試藥劑及田間推薦用量

1.2 方法

1.2.1 不同殺蟲劑對暗黑赤眼蜂成蜂的急性毒性采用管測藥膜法，在預(yù)試驗(yàn)明確藥劑濃度范圍內(nèi)，按倍數(shù)稀釋設(shè)置5 個試驗(yàn)濃度（表2），使用55.6 cm2玻璃指形管，每管添加0.5 mL 藥液，滾動指形管使藥劑均勻在管壁上形成藥膜；對照處理組為指形管內(nèi)僅加清水。每管中接入30 頭暗黑赤眼蜂新羽化雌蜂，每個處理重復(fù)3 次。使暗黑赤眼蜂在藥膜管中爬行1 h 后，轉(zhuǎn)入干凈空的玻璃指形管內(nèi)，并使用濃度為10%的蔗糖水作為外源補(bǔ)充營養(yǎng)進(jìn)行飼喂，用紗布及脫脂棉做成的塞子封口，置于人工氣候箱進(jìn)行飼養(yǎng)，條件為溫度(25±1)℃、相對濕度為(75±5)%、光周期為12L∶12D。殺蟲劑處理24 h 后觀察并記錄管內(nèi)存活和死亡的成蜂數(shù)量（日光照射下輕敲試管蜂體不動者即為死亡），統(tǒng)計(jì)死亡率。設(shè)置殺蟲劑上限劑量為供試農(nóng)藥田間推薦用量的10 倍，如試驗(yàn)用該蜂達(dá)到上限用量10 倍時未出現(xiàn)死亡，則無需進(jìn)行試驗(yàn)；如供試農(nóng)藥溶解度小于田間推薦用量的10 倍，則選用其最大溶解度為上限劑量。

表2 本試驗(yàn)中使用的7 種殺蟲劑的濃度

1.2.2 不同殺蟲劑處理對暗黑赤眼蜂壽命和寄生率的影響 采用管測藥膜法同1.2.1，其中蜂在藥膜管中爬行1 h 后，轉(zhuǎn)入干凈空管的同時，放入一張附著200 粒米蛾卵的卵卡，飼喂10%的蔗糖水；對照處理組為指形管內(nèi)加清水。觀察并記錄該蜂的壽命以及卵卡上蜂的寄生情況，直到管中的赤眼蜂全部死亡。統(tǒng)計(jì)暗黑赤眼蜂被7 種殺蟲劑分別處理后的壽命及其每頭雌蜂的寄生率數(shù)據(jù)。

1.2.3 安全性系數(shù)的計(jì)算 安全性系數(shù)（SF）＝藥劑對赤眼蜂的LR50（mg a.i./cm2）/該藥劑的田間推薦施用濃度（mg a.i./cm2），其中LR50為半數(shù)致死用量。在本研究中，LR50=0.5ml×LC50÷55.6 cm2。將不同殺蟲劑對赤眼蜂風(fēng)險性分級標(biāo)準(zhǔn)按安全系數(shù)的大小劃分為4 個等級[29]，分別為低風(fēng)險性（SF>5）、中等風(fēng)險性（0.5

1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 毒力測定數(shù)據(jù)處理采用Logistic 函數(shù)法擬合。數(shù)據(jù)采用Excel 2003 制作表格，采用SAS 9.1 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，差異顯著性分析采用 Duncan’s 新復(fù)極差法（Duncan’s multiple range test, DMRT）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺蟲劑對暗黑赤眼蜂成蜂的急性毒性

由表3 可見，蟲螨腈對暗黑赤眼蜂的毒力最大，LR50低至1.48×10–11mg a.i./cm2；虱螨脲毒力與其相似，LR50為1.56×10–11mg a.i./cm2。茚蟲威對暗黑赤眼蜂的毒力相對較小，LR50為2.62×10–4mg a.i./cm2；相對于茚蟲威，其余4 種殺蟲劑對暗黑赤眼蜂的毒力較高。

表3 不同殺蟲劑對暗黑赤眼蜂的急性毒性

2.2 不同殺蟲劑對暗黑赤眼蜂成蜂的安全性評價

依據(jù)安全性系數(shù)計(jì)算公式可算出殺蟲劑對暗黑赤眼蜂的安全性系數(shù)，進(jìn)而判斷安全性等級，結(jié)果見表4。高效氯氟氰菊酯、乙基多殺菌素、虱螨脲和蟲螨腈的安全性差，安全性系數(shù)均小于0.05，四者的安全性等級均為極高風(fēng)險性。其次，氯蟲苯甲酰胺、茚蟲威和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽的安全性系數(shù)分別為0.054、0.470 和0.330，三者的安全性等級均為高風(fēng)險性。

表4 不同殺蟲劑對暗黑赤眼蜂的安全性評價

2.3 不同殺蟲劑處理對暗黑赤眼蜂壽命和寄生率的影響

由表5 可見，與對照組相比，7 種農(nóng)藥處理過的成蜂壽命和寄生率均顯著降低，表現(xiàn)出較高的亞致死效應(yīng)。在推薦濃度下與對照組相比，氯蟲苯甲酰胺、茚蟲威和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽3 種殺蟲劑顯著減少了成蜂壽命，約減少1/3；高效氯氟氰菊酯、乙基多殺菌素、虱螨脲和蟲螨腈4 種殺蟲劑顯著減少了成蜂壽命，約減少1/5。在田間推薦濃度下與對照相比，7 種殺蟲劑顯著降低了雌蜂的寄生率，其中氯蟲苯甲酰胺最高，為（9.36±0.35）%，約為對照組的1/6，其余6 種殺蟲劑處理后雌蜂的寄生率降低至7.2%以下。

表5 不同殺蟲劑對暗黑赤眼蜂壽命和寄生率的影響

3 討論

化學(xué)防治措施和生物防治措施是害蟲綜合治理的主要內(nèi)容，而如何科學(xué)解決好生物防治和化學(xué)防治兩者之間的關(guān)系，是害蟲生物防治田間應(yīng)用的關(guān)鍵[30]。化學(xué)殺蟲劑對寄生蜂的影響主要包括急性毒性、安全性評價、個體發(fā)育、搜索寄主行為和寄生行為等不同方面[31-34]。研究常用殺蟲劑對赤眼蜂安全性以及其個體發(fā)育、寄生行為等的亞致死效應(yīng)，是統(tǒng)籌化學(xué)控害，并保護(hù)利用天敵進(jìn)行害蟲生物防治的重要內(nèi)容，可為明確不同殺蟲劑對寄生蜂的亞致死效應(yīng)和篩選對其天敵相對安全的殺蟲劑提供依據(jù)。赤眼蜂的個體發(fā)育包括卵、幼蟲、蛹和成蟲4 個發(fā)育階段，其中前3個蟲態(tài)均是在寄主昆蟲卵內(nèi)完成發(fā)育，可見，成蜂是赤眼蜂接觸化學(xué)殺蟲劑的敏感期。本研究發(fā)現(xiàn)，7 種殺蟲劑對暗黑赤眼蜂的安全性均相對較低，均顯著降低該蜂的寄生率和壽命，安全性等級為高風(fēng)險性至極高風(fēng)險性。

不同種類的殺蟲劑對不同寄生蜂的毒力和安全性有著顯著的差異。本研究結(jié)果表明，試驗(yàn)所用的7 種殺蟲劑對暗黑赤眼蜂具有較高殺蟲活性，且安全性等級為高風(fēng)險性至極高風(fēng)險性。據(jù)報道，擬除蟲菊酯類、有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類殺蟲劑對赤眼蜂具有較高的急性毒性，且不安全[35-36]，如醚菊酯對螟黃赤眼蜂和松毛蟲赤眼蜂具有較高的殺蟲活性[37-38]。王彥華等[31]研究發(fā)現(xiàn)，烯啶蟲胺、噻蟲嗪和阿維菌素對稻螟赤眼蜂、亞洲玉米螟赤眼蜂、擬澳洲赤眼蜂和廣赤眼蜂4 種赤眼蜂為高風(fēng)險至極高風(fēng)險性。本文與上述研究結(jié)論相似，可見，在害蟲綜合防控中應(yīng)謹(jǐn)慎使用對赤眼蜂具有較高殺蟲活性且不安全的殺蟲劑，以免造成對赤眼蜂造成大量殺傷。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽對暗黑赤眼蜂為高風(fēng)險性，安全性系數(shù)為0.33，與王彥華等[31]關(guān)于甲維鹽的研究結(jié)果不同，其研究發(fā)現(xiàn)，甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽對稻螟赤眼蜂、亞洲玉米螟赤眼蜂、擬澳洲赤眼蜂和廣赤眼蜂4 種赤眼蜂為低風(fēng)險至中等風(fēng)險性，安全性系數(shù)為0.57～23.54。李宏夢等[32]報道了乙基多殺菌素、蟲螨腈和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽3 種對夜蛾黑卵蜂的安全性等級為中等風(fēng)險性，虱螨脲、氯蟲苯甲酰胺和茚蟲威3 種為低等風(fēng)險性，與本研究結(jié)果不同，主要原因可能是研究對象寄生蜂的種類不同。此外，本研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，7 種殺蟲劑均顯著降低暗黑赤眼蜂的寄生率和壽命，表現(xiàn)出較高的亞致死效應(yīng)。本研究結(jié)果與Wang 等[39]的研究結(jié)果相似，其研究發(fā)現(xiàn)，化學(xué)殺蟲劑處理螟黃赤眼蜂雌蜂后，雌蜂壽命顯著縮短，寄生率顯著降低。為保護(hù)天敵，農(nóng)業(yè)中應(yīng)避免或減少使用殺蟲劑，且田間使用時應(yīng)注意避開暗黑赤眼蜂成蜂高峰期，如在云南西雙版納州，該蜂高峰期為每年的6 和12 月。研究結(jié)果可為科學(xué)使用化學(xué)殺蟲劑及保護(hù)利用寄生蜂進(jìn)行蟲害生物防治奠定基礎(chǔ)，同時有利于減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量和害蟲的抗藥性，進(jìn)而有助于降低對寄生蜂的損傷作用，保護(hù)昆蟲多樣性。