萬(wàn)依依,張華峰,倪德芳,趙普凡,胡莎莎,童應(yīng)華

金龜子綠僵菌對(duì)入侵性害蟲(chóng)椰子織蛾的致病力

萬(wàn)依依,張華峰,倪德芳,趙普凡,胡莎莎,童應(yīng)華*

福建農(nóng)林大學(xué)林學(xué)院, 福建 福州 350002

椰子織蛾是危害棕櫚科植物的一種入侵性害蟲(chóng)。為評(píng)價(jià)金龜子綠僵菌（Metarhizium anisopliae (Metschnikoff)）對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致病情況，室內(nèi)采用浸液法測(cè)定了5株綠僵菌菌株對(duì)椰子織蛾3齡幼蟲(chóng)的致病力，結(jié)果表明：以濃度（1.0±0.5）×106個(gè)孢子?mL-1的孢子懸液接菌7 d后，各菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致病力差異較大，校正死亡率范圍在5.00～95.00%之間。其中，MaHA-01菌株對(duì)其致病力較強(qiáng)，校正死亡率和僵蟲(chóng)率分別為（95.00±0.00）%和（94.00±2.24）%，均極顯著高于其它菌株處理，且LT50較短為4.20 d；其次是Ma1775。MaHA-01菌株接菌后5 d對(duì)椰子織蛾3齡幼蟲(chóng)的LC50為3.62×104個(gè)孢子?mL-1。通過(guò)時(shí)間-劑量-死亡率（TDM）模型參數(shù)估計(jì)，MaHA-01菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致死效應(yīng)較強(qiáng)的時(shí)間在接菌后3～5 d。可見(jiàn)，MaHA-01菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)有較強(qiáng)的致病力，在該害蟲(chóng)生物防治中可以應(yīng)用。

金龜子綠僵菌; 椰子織蛾; 生物防治

椰子織蛾Walker，隸屬于鱗翅目（Lepidoptera），織蛾科（Oecophoridae）[1,2]，又名椰子木蛾、椰子黑頭履帶蟲(chóng)、椰蛀蛾[3]。是我國(guó)第四批公布的一種入侵性害蟲(chóng)[4]（環(huán)境保護(hù)部辦公廳2016年12月20日發(fā)布），并在2014年由國(guó)家林業(yè)局根據(jù)《植物檢疫條例實(shí)施細(xì)則（林業(yè)部分）》，將其增補(bǔ)為全國(guó)林業(yè)危險(xiǎn)性有害生物[5]（2014年第6號(hào)）。該蟲(chóng)原產(chǎn)地在印度和斯里蘭卡[6]，后擴(kuò)散至緬甸、泰國(guó)、印度尼西亞等國(guó)[7-9]。2013年在我國(guó)海南萬(wàn)寧首次發(fā)現(xiàn)，目前在我國(guó)廣西、廣東、福建沿海等地均有分布[10]。椰子織蛾主要以幼蟲(chóng)取食危害棕櫚科植物的葉片，偶爾危害甘蔗和香蕉[9]。該蟲(chóng)在海南一年發(fā)生5代，世代重疊嚴(yán)重[11]，以高齡幼蟲(chóng)在蛀道中越冬[12]。雌成蟲(chóng)產(chǎn)卵于葉片之間或葉片背部[13]，卵5～7 d孵化，幼蟲(chóng)取食葉片表面葉肉，并吐絲與自己的糞便混合筑成蟲(chóng)道，粘連在葉片上，幼蟲(chóng)在蟲(chóng)道內(nèi)生活取食，直至化蛹[14,15]。幼蟲(chóng)初期聚集，而后分散危害，3齡后由下層葉片逐漸向中、上層危害[11]。該蟲(chóng)危害影響寄主植物的生長(zhǎng)，導(dǎo)致花穗量減少而減產(chǎn)[16]，嚴(yán)重時(shí)，寄主葉片卷曲發(fā)黃，樹(shù)冠干枯，形似火燒[11,17]。

目前椰子織蛾的防治主要以化學(xué)防治和生物防治為主。化學(xué)防治方面，Shivashankar T運(yùn)用印楝素水劑進(jìn)行樹(shù)干注射，對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)有顯著控制作用[18]；崔義等用4.5%高效氯氰菊酯乳油2000倍液對(duì)綠化帶的椰子樹(shù)進(jìn)行處理，用藥后5 d的防治效果為89.85%[19]；李東等用20%好年冬乳油1200倍液、44%多蟲(chóng)清乳油1 200倍液、50%甲刻水分散粒劑800倍液對(duì)種植基地的霸王棕、貝葉棕進(jìn)行處理，用藥后10 d的防治效果達(dá)到93.16～95.24%[12]。劉向蕊等用5種殺蟲(chóng)劑對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定，篩選出甲維鹽的毒力最強(qiáng)，以20 mg/L濃度處理后72 h致死率為86.67%[20]；楊崇慧等研究表明阿維菌素對(duì)椰子織蛾有良好的致死效果，室內(nèi)試驗(yàn)以5 mg/L濃度用藥后72 h致死率可達(dá)92.85%[21]；曾憲海等用營(yíng)養(yǎng)灌根結(jié)合苦參堿乳油和甲維鹽等綜合處理大王椰子樹(shù)7個(gè)月后，發(fā)現(xiàn)該處理對(duì)椰子織蛾有明顯的防治效果，植株生長(zhǎng)正常，并新增健康葉片[22]；敖蘇等測(cè)定了3種入侵植物乙醇提取物對(duì)椰子織蛾的殺蟲(chóng)活性，以40 mg/mL濃度的3種植物乙醇提取物處理后72 h殺蟲(chóng)活性均超過(guò)50%[23]。生物防治方面，海南林間調(diào)查發(fā)現(xiàn)了6種椰子織蛾的寄生性天敵，已鑒定出4種：褐帶卷蛾繭蜂（Minamikawa）、廣大腿小蜂（Walker）、廣黑點(diǎn)瘤姬蜂（Fabricius）、周氏嚙小蜂（Yang）；其中廣黑點(diǎn)瘤姬蜂和廣大腿小蜂為蛹寄生蜂，林間寄生率分別為3.6%和6.0%；褐帶卷蛾繭蜂為幼蟲(chóng)寄生，林間寄生率為12.2%[11]，室內(nèi)寄生率為83%[24]?？梢?jiàn)，化學(xué)農(nóng)藥存在高殘留、高毒性、對(duì)人畜安全性低等問(wèn)題；生物農(nóng)藥林間防治效率低，藥效作用緩慢；寄生蜂林間種群寄生率低，且寄生蜂種群不穩(wěn)定，因此，亟待尋找對(duì)椰子織蛾安全、有效的控制方法。

綠僵菌是較早應(yīng)用于害蟲(chóng)生物防治的蟲(chóng)生真菌之一，寄主范圍廣[25]，可寄生5個(gè)目30個(gè)科約200多種昆蟲(chóng)、螨類(lèi)及線蟲(chóng)[26-28]。綠僵菌主要通過(guò)分生孢子吸附于昆蟲(chóng)體表，萌發(fā)產(chǎn)生芽管，形成附著胞，產(chǎn)生侵染釘穿透昆蟲(chóng)體壁，消耗寄主營(yíng)養(yǎng)、破壞組織并釋放毒素而致死昆蟲(chóng)[29]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，椰子織蛾3～4月開(kāi)始繁殖，5～7月為爆發(fā)期[17]，綠僵菌最適生長(zhǎng)溫度為20～30 ℃[30]，有利誘發(fā)其流行性真菌病，從而控制蟲(chóng)口密度，減少林間經(jīng)濟(jì)損失。目前綠僵菌對(duì)椰子織蛾的致病力研究與應(yīng)用較少，國(guó)外未有相關(guān)報(bào)道，國(guó)內(nèi)僅有1篇報(bào)道[31]。因此，本研究選用金龜子綠僵菌菌株，測(cè)定其對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致病力，為椰子織蛾的林間生物防治提供理論依據(jù)和菌種資源。

1 材料與方法

1.1 供試蟲(chóng)

供試椰子織蛾幼蟲(chóng)采集于福建省廈門(mén)市湖里區(qū)湯嶼路五緣灣濕地公園（N24°52′45.6″，E118°18′14.3″)。將采集的幼蟲(chóng)放入塑料盒（15×10×10 cm）內(nèi)，置于溫度（25±1）℃、相對(duì)濕度70%的人工氣候箱內(nèi)（LTC-450），以新鮮的蒲葵（（Jacq.）R.Br.）葉片喂食飼養(yǎng)。每2 d更換一次食物。

1.2 供試菌種

供試的5株金龜子綠僵菌菌株基本情況見(jiàn)表1。

表 1 供試菌株來(lái)源

1.3 孢子懸液的制備

供試菌在PPDA斜面培養(yǎng)基（200 g去皮馬鈴薯，瓊脂18 g，蛋白胨10 g，葡萄糖20 g，加水至1000 mL，pH值自然）上充分產(chǎn)孢后，用含0.05% Tween-80的無(wú)菌水洗下孢子于100 mL的錐形瓶中，置于振蕩器（SHZ-B水浴恒溫振蕩器）上充分震蕩20 min（150 r·min-1）。用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，將孢子懸液配制成所需濃度。

1.4 致病力測(cè)定

采用浸液法接菌。選擇椰子織蛾3齡健康幼蟲(chóng)，用毛筆挑取，在濃度為(1.0±0.5)×106個(gè)孢子·mL-1的孢子懸液中浸泡3 s后，挑入有新鮮蒲葵葉片的培養(yǎng)皿中，用浸有無(wú)菌水的脫脂棉保濕，貼上標(biāo)簽，置于溫度(26±1) ℃，RH(90±1)%的人工氣候箱內(nèi)飼養(yǎng)。每1菌株為1處理，每處理5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20頭供試蟲(chóng)。以浸泡相同時(shí)間無(wú)菌水的幼蟲(chóng)為對(duì)照。每天定時(shí)觀察并記錄幼蟲(chóng)死亡情況，以毛筆觸碰不動(dòng)的為死亡，并及時(shí)將死亡蟲(chóng)體移至無(wú)菌培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿底部用濾紙浸無(wú)菌水保濕，置于恒溫培養(yǎng)箱中(26±1) ℃培養(yǎng)，以蟲(chóng)體表面長(zhǎng)出菌絲或分生孢子的為有效致死。連續(xù)觀察統(tǒng)計(jì)9 d。

1.5 高致病力菌株對(duì)幼蟲(chóng)的LC50

采用浸液法接菌。選擇高致病力的菌株，分別以濃度(1±0.5)×104、(1±0.5)×105、(1±0.5)×106、(1±0.5)×107和(1±0.5)×108個(gè)孢子·mL-15個(gè)梯度濃度的孢子懸液，接菌3齡健康幼蟲(chóng)，每種濃度為1處理，每處理5個(gè)重復(fù)，每重復(fù)供試幼蟲(chóng)20頭。以浸泡相同時(shí)間無(wú)菌水的幼蟲(chóng)為對(duì)照。接菌后幼蟲(chóng)飼養(yǎng)和觀察方法同1.4。

1.6 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)用Excel2016處理，用SPSS Statistics 22.0軟件統(tǒng)計(jì)分析[32]，通過(guò)Duncan’s新復(fù)極差法多重比較。計(jì)算出毒力回歸方程、致死中時(shí)LT50、半致死濃度LC50。用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（v7.05）對(duì)時(shí)間—?jiǎng)┝俊劳雎誓Ｐ停═DM模型）進(jìn)行模擬分析[33]。計(jì)算公式如下：

2 結(jié)果與分析

2.1 椰子織蛾幼蟲(chóng)感染綠僵菌病癥

以濃度（1±0.5）×106個(gè)孢子·mL-1菌懸液接菌后2 d，發(fā)現(xiàn)部分幼蟲(chóng)行動(dòng)遲緩，食欲減退，蟲(chóng)體體表失去光澤；接菌后3 d開(kāi)始死亡；接菌后4 d部分存活幼蟲(chóng)于氣孔附近出現(xiàn)褐色斑點(diǎn)，感病嚴(yán)重幼蟲(chóng)體表出現(xiàn)黑色斑塊。幼蟲(chóng)感染死亡初期，蟲(chóng)體體表為暗黃褐色，皺褶處長(zhǎng)出白色菌絲（圖1B），幼蟲(chóng)感染死亡中期，白色菌絲開(kāi)始變綠，并向蟲(chóng)體無(wú)褶皺處生長(zhǎng)，蟲(chóng)體體表有無(wú)色水滴狀（圖1C）。幼蟲(chóng)感染后期，死亡蟲(chóng)體被菌絲完全覆蓋，并全部變綠（圖1D）。

圖 1 椰子織蛾感染綠僵菌癥狀

（A:健康幼蟲(chóng)；B:感染初期；C：感染中期；D：感染后期）

(A: Healthy larva; B: Lethal early stage; C: Lethal middle stage; D: Lethal late stage)

2.2 綠僵菌對(duì)椰子織蛾的致病力

2.2.1 椰子織蛾的累計(jì)死亡率動(dòng)態(tài)統(tǒng)計(jì)分析椰子織蛾幼蟲(chóng)的累計(jì)死亡率動(dòng)態(tài)，結(jié)果如圖2。由圖2可知，總體上，以濃度（1±0.5）×106孢子·mL-1接菌后3 d，幼蟲(chóng)開(kāi)始死亡，3～6 d死亡率迅速上升，6 d后趨于穩(wěn)定。不同菌株對(duì)幼蟲(chóng)的致病力差異較大，其中MaHA-01菌株處理，幼蟲(chóng)累計(jì)死亡率上升最快，并于接菌后7 d到達(dá)100%。其次是，Ma1775菌株處理，接菌后8 d累計(jì)死亡率可達(dá)65%。菌株MaYT-04和MaFZND-07致死效果較弱，接菌后8 d累計(jì)死亡率低于30%。Ma23-2菌株處理累計(jì)死亡率最低。可見(jiàn)，MaHA-01菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)有較強(qiáng)的致病力。

圖 2 不同綠僵菌菌株處理椰子織蛾幼蟲(chóng)累計(jì)死亡率動(dòng)態(tài)

2.2.2各菌株對(duì)幼蟲(chóng)致病力的比較 進(jìn)一步分析比較各菌株處理7 d后椰子織蛾幼蟲(chóng)的死亡率，結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可知，以濃度（1±0.5）×106個(gè)孢子·mL-1的孢子菌懸液接菌后7 d，MaHA-01菌株處理，幼蟲(chóng)校正死亡率和僵蟲(chóng)率最高，分別為（95.00±0.00）%、（94.00±2.24）%，極顯著高于其它菌株處理，致死中時(shí)最短，LT50為4.20 d。其次是Ma1775菌株處理，校正死亡率和僵蟲(chóng)率均極顯著高于其它3株菌株，LT50為6.71 d，其它3株菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致病力效果較弱，校正死亡率低于30 %，僵蟲(chóng)率低于20 %?？梢?jiàn)，5株菌株中，MaHA-01對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致病力較強(qiáng)，其次是Ma1775菌株。

表 2 不同綠僵菌菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致死效果（7d）

2.3 高致病力MaHA-01菌株對(duì)幼蟲(chóng)的LC50

2.3.1 MaHA-01菌株對(duì)幼蟲(chóng)的LC50統(tǒng)計(jì)分析MaHA-01菌株各濃度對(duì)幼蟲(chóng)的致死情況，結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知，MaHA-01菌株不同濃度處理對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)致病力差異較大，其中以濃度（1.0±0.5）×108孢子·mL-1和（1.0±0.5）×107孢子·mL-1孢子懸液處理的致病力最強(qiáng)，處理后5 d累計(jì)死亡率分別為（100.00±0.00）%和（91.00±4.18）%。分析MaHA-01的LC50見(jiàn)表4，MaHA-01菌株對(duì)椰子織蛾3齡幼蟲(chóng)處理后3 d和5 d的LC50分別為2.30×108孢子·mL-1，3.62×104孢子·mL-1。

表 3 MaHA-01菌株不同濃度對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致死效果（5 d）

表 4 菌株MaHA-01不同濃度對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的LC50

2.3.2 時(shí)間-劑量-死亡率模型 分析MaHA-01菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)致病力測(cè)定的時(shí)間-劑量-死亡率模型（TMD模型），結(jié)果見(jiàn)表5。經(jīng)過(guò)擬合度檢驗(yàn)，卡方統(tǒng)計(jì)量為9.5374，值為7，值為0.21634，模型擬合無(wú)顯著差異性，TMD模型擬合成功。結(jié)果中=0.523，說(shuō)明各濃度MaHA-01孢子懸液對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)均有一定致死效果；參數(shù)為表示條件死亡概率的時(shí)間效應(yīng)參數(shù)，椰子織蛾幼蟲(chóng)在接種MaHA-01菌株3～5 d后，較前后顯著要大，說(shuō)明該菌株處理椰子織蛾幼蟲(chóng)，在3～5 d死亡數(shù)量較多，MaHA-01菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)致死效應(yīng)較強(qiáng)。

表 5 菌株MaHA-01對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)致病力測(cè)定時(shí)間—?jiǎng)┝俊劳雎誓Ｐ湍M及參數(shù)估計(jì)

注:參數(shù)符號(hào)下標(biāo)表示接種后天數(shù)。

Note: The subscripts represent the number of days after treatment.

3 討論

棕櫚科植物不僅是重要的經(jīng)濟(jì)作物，而且是重要的園林綠化植物。椰子織蛾的入侵和傳播對(duì)我國(guó)棕櫚科植物資源和產(chǎn)業(yè)發(fā)展構(gòu)成了巨大的危害，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[17,34]。椰子織蛾的生物防治主要集中在寄生蜂的應(yīng)用，用綠僵菌對(duì)椰子織蛾的致病力及其應(yīng)用的相關(guān)研究較少。綠僵菌對(duì)昆蟲(chóng)致病力強(qiáng)、藥效持久，對(duì)人畜、農(nóng)作物無(wú)毒，無(wú)殘留，且可連年發(fā)揮作用，具有廣闊的市場(chǎng)前景[35]。孫曉東等從野外采集到的椰子織蛾僵蟲(chóng)上分離并篩選出高致病力綠僵菌菌株LS-Y1，以1×108個(gè)孢子·mL-1的孢子懸液處理椰子織蛾3齡幼蟲(chóng)后，4 d的累計(jì)死亡率為（66.67±6.66）%，6 d的LC50為4.41×106個(gè)孢子·mL-1，致死中時(shí)為3.36 d[31]。本研究的金龜子綠僵菌MaHA-01菌株以(1.0±0.5)×108個(gè)孢子·mL-1的孢子懸液對(duì)椰子織蛾3齡幼蟲(chóng)接菌，5 d的累計(jì)死亡率為（100.00±0.00）%。說(shuō)明菌株MaHA-01對(duì)椰子織蛾致病效果較好，具有良好的生防潛力。

金龜子綠僵菌對(duì)鱗翅目幼蟲(chóng)的致死率其濃度呈正相關(guān)[36]。本研究為了更好評(píng)價(jià)不同綠僵菌菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致病力，選用濃度較低的（1.0±0.5）×106個(gè)孢子·mL-1孢子懸液對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)進(jìn)行接菌。蟲(chóng)齡也影響著蟲(chóng)生真菌對(duì)鱗翅目幼蟲(chóng)的致病力，蟲(chóng)齡越小越利于蟲(chóng)生真菌侵染[37]。椰子織蛾低齡幼蟲(chóng)發(fā)育歷期較短，為避免低齡幼蟲(chóng)蛻皮對(duì)試驗(yàn)造成誤差，因而選用3齡椰子織蛾幼蟲(chóng)進(jìn)行試驗(yàn)。本研究分離出的5株金龜子綠僵菌菌株皆為蟲(chóng)生真菌，不同來(lái)源的菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致病力存在顯著差異。分離自土壤的MaHA-01菌株對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)有較強(qiáng)的致病性，說(shuō)明土壤中宿存有對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)具有致病性的綠僵菌，為椰子織蛾生物防治提供了新途徑。綠僵菌分生孢子附于昆蟲(chóng)體表，是其成功侵染的首要環(huán)節(jié)。椰子織蛾幼蟲(chóng)聚集取食危害過(guò)程中，吐絲與自身糞便筑成蛀道，幼蟲(chóng)在蛀道中取食危害并結(jié)蛹[14,15]。因此，林間防治應(yīng)用中，如何有效施菌，使綠僵菌分生孢子吸附于椰子織蛾幼蟲(chóng)體表而誘發(fā)流行病等問(wèn)題，有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

本研究以浸液法，應(yīng)用了5株綠僵菌菌株對(duì)椰子織蛾進(jìn)行侵染試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)MaHA-01對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)具有較高的致病力，以（1.0±0.5）×106個(gè)孢子·mL-1的孢子懸液施菌，7 d累計(jì)死亡率可達(dá)100%，僵蟲(chóng)率為94%，LT50為4.20 d，該菌株5 d對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的LC50為3.62×104個(gè)孢子·mL-1，而且對(duì)椰子織蛾幼蟲(chóng)的致死效應(yīng)較強(qiáng)的時(shí)間在接菌后3～5 d?？梢?jiàn)，該菌株在生產(chǎn)中具有良好的應(yīng)用前景。

[1] Becher VO. Identities and provenance of the gelechioid moths originally described by Francis Walker from ‘unknown countries’[J]. Systematic Entomology, 1981,6:137-141

[2] 李后魂,尹艾薈,蔡波,等.重要入侵害蟲(chóng)——椰子木蛾的分類(lèi)地位和形態(tài)特征研究(鱗翅目,木蛾科)[J].應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué) 報(bào),2014,51(1):283-291

[3] 呂寶乾,嚴(yán)珍,金啟安,等.警惕椰子織蛾(鱗翅目:織蛾科)傳入中國(guó)[J].生物安全學(xué)報(bào),2013,22(1):17-22

[4] 環(huán)境保護(hù)部.關(guān)于發(fā)布《中國(guó)自然生態(tài)系統(tǒng)外來(lái)入侵物種名單(第四批)》的公告(2016年第78號(hào))[EB/OL].[2016-12-26].https://www.mee.gov.cn/gkml/hbb/bgg/201612/t20161226_373636.htm.

[5] 國(guó)家林業(yè)局.國(guó)家林業(yè)局公告(2014年第6號(hào))[EB/OL].[2014-06-26].http://www.forestry.gov.cn/main/72/content-663834.html.

[6] Rao YR. An outbreak ofat Mangalore [R]. In report on the Proceedings of the fifth entomology meeting. Pusa, New Delhi.1924:92-98

[7] Alam M. A list of insects and mites of eastern Pakistan [Z]. Report of the Agriculture Department, Dhaka.1962:107

[8] Venkatesan T, Jalali SK, Murthy KS,A novel method of field release of(Muesebeck), an important primary parasitoid ofWalker on coconut [J]. Journal of Biological Control, 2003,17(1):79-80

[9] 閻偉,呂寶乾,李洪,等.椰子織蛾傳入中國(guó)及其海南省的風(fēng)險(xiǎn)性分析[J].生物安全學(xué)報(bào),2013,22(3):163-168

[10] 方萍.椰子木蛾對(duì)不同品種椰子樹(shù)取食適應(yīng)性研究[D].?？?海南大學(xué),2018

[11] 李洪,劉麗,閻偉.新入侵害蟲(chóng)椰子織蛾的發(fā)生及防治[J].中國(guó)森林病蟲(chóng),2015,34(4):11-13

[12] 李東,徐家雄.椰子織蛾生物學(xué)特性觀察和防治[J].林業(yè)與環(huán)境科學(xué),2020,36(4):68-72

[13] 金濤,李應(yīng)梅,林玉英,等.椰子木蛾的產(chǎn)卵節(jié)律及其對(duì)寄主植物的產(chǎn)卵選擇性[J].生物安全學(xué)報(bào),2016,25(1):39-43

[14] 楊崇慧.椰子木蛾的生物學(xué)生態(tài)學(xué)初步研究[D].?？?海南大學(xué),2015

[15] Mohan C, Radhakrishnan CP, Nampoothiri CK,. Leaf-eating caterpillar (-induced yield loss in coconut palm [J]. International Journal of Tropical Insect Science, 2010,30(3):132-137

[16] Mulampurath ASK, Asoke BM. Growth Discruption inWalker by Plumbagin, a naturally occurring insect growth regulator [J]. lnsect Science Application, 2002,22(4):321-323

[17] 岳建軍,陳毅青,孫秀東,等.椰子木蛾對(duì)海南省不同生境園林植物的危害調(diào)查及分析[J].農(nóng)業(yè)科技通訊,2017(7):160-163

[18] Shivashankar T, Annadurai RS, Srinivas M,. Control of coconut black-headed caterpillar (Walker) by systemic application of “Soluneem"-A new water-soluble neem insecticide formulation [J]. Current science, 2000,78(2):176-179

[19] 崔義,陳運(yùn)金,王三勇,等.幾種藥劑防治椰子織蛾的效果評(píng)價(jià)[J].中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè),2018(4):45-46,48

[20] 劉向蕊,呂寶乾,金啟安,等.5種殺蟲(chóng)劑對(duì)入侵害蟲(chóng)椰子織蛾的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].生物安全學(xué)報(bào),2014,23(1):13-17

[21] 楊崇慧,閻偉,劉麗,等.5種藥劑對(duì)椰子木蛾的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2015,31(13):191-195

[22] 曾憲海,劉釗,唐真正,等.海南儋州大王椰子椰子織蛾綜合防治效果比較試驗(yàn)初報(bào)[J].中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè),2016(3):34-36

[23] 敖蘇,林小漫,張旭,等.3種入侵植物乙醇提取物對(duì)椰子木蛾的殺蟲(chóng)活性研究[J].中國(guó)果樹(shù),2018(3):19-22

[24] 黃山春,李朝緒,閻偉,等.海南發(fā)現(xiàn)椰子織蛾的重要天敵褐帶卷蛾繭蜂[J].生物安全學(xué)報(bào),2017,26(3):256-258

[25] 王記祥,馬良進(jìn).蟲(chóng)生真菌在農(nóng)林害蟲(chóng)生物防治中的應(yīng)用[J].浙江林學(xué)院學(xué)報(bào),2009,26(2):286-291

[26] 王露露,王輝,熊焰,等.蟲(chóng)生真菌防治農(nóng)作物害蟲(chóng)的研究進(jìn)展[J].熱帶生物學(xué)報(bào),2022,13(3):309-314

[27] 張娜.金龜子綠僵菌對(duì)綿羊癢螨(兔亞種)的致病力及致病機(jī)制初探[D].成都:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2018

[28] MOST SS.金龜子綠僵菌對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病和灰霉病的生物防治及其機(jī)理研究[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2020

[29] 王海川,尤民生.綠僵菌對(duì)昆蟲(chóng)的入侵機(jī)理[J].微生物學(xué)通報(bào),1999(1):71-73

[30] 宋漳.防治馬尾松毛蟲(chóng)綠僵菌的應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D].福州:福建農(nóng)林大學(xué),2008

[31] 孫曉東,李富恒,閻偉,等.椰子織蛾高毒力金龜子綠僵菌菌株的篩選[J].植物保護(hù),2016,42(6):215-218

[32] 賈春生.利用SPSS軟件計(jì)算殺蟲(chóng)劑的LC_(50)[J].昆蟲(chóng)知識(shí),2006(3):414-417

[33] 馮明光.時(shí)間—?jiǎng)┝俊劳雎誓Ｐ腿〈鷻C(jī)率分析技術(shù)[J].昆蟲(chóng)知識(shí),1998(4):233-237

[34] 閻偉,劉麗,李朝緒,等.入侵害蟲(chóng)椰子織蛾對(duì)海南椰子造成的經(jīng)濟(jì)損失評(píng)估[J].中國(guó)南方果樹(shù),2015,44(4):156-159

[35] 裘暉,吳振強(qiáng),梁世中.金龜子綠僵菌及其殺蟲(chóng)機(jī)理[J].農(nóng)藥,2004(8):342-345

[36] 譚格,李天銘,周志成,等.金龜子綠僵菌對(duì)斜紋夜蛾幼蟲(chóng)的生防效果、抗氧化酶活性和腸道細(xì)菌群落的影響[J].微 生物學(xué)報(bào),2021,61(5):1171-1183

[37] 崔璟輝,譚周進(jìn),陳浩濤.不同溫濕度下球孢白僵菌對(duì)甜菜夜蛾幼蟲(chóng)的致病力[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,24(5):41-43

Pathogenicity ofto Invasive InsectWalker

WAN Yi-yi, ZHANG Hua-feng, NI De-fang, ZHAO Pu-fan, HU Sha-sha, TONG Ying-hua*

350002,

In this thesis, the pathogenicity of five(Metschnikoff) strains to the 3rd instar larvae ofwas evaluated to find high-quality control strain resources by dipping method. The results showed that the pathogenicity ofstrains to the larvae ofwas significantly different after inoculation with spore suspension at a concentration of (1.0 ± 0.5) ×106 spores·mL-1for 7 days, and the corrected mortality ranged from 5.00% to 95.00%, the MaHA-01 strain had the strongest pathogenicity, with the corrected mortality and cadaver rate of (95.00 ± 0.00)% and (94.00 ± 2.24)%, respectively, and the LT50 was 4.20 d, followed by Ma1775. The LC50 of the MaHA-01 against the 3rd instar larvae ofof 5 days after inoculation was 3.62 × 104 spores·mL-1. As estimated by the time-dose-mortality (TDM) model parameters, the lethal effect of the MaHA-01 strain on the larvae ofwas strongest 3-5 days after inoculation. MaHA-01 strain has a strong biocontrol potential for the prevention and control of. It can be seen that the strain has a strong biocontrol potential for the prevention and control of．

(Metschnikoff);Walker; biological control

S763

A

1000-2324(2023)05-0663-07

10.3969/j.issn.1000-2324.2023.05.004

2023-06-15

2023-11-11

福建省林業(yè)科學(xué)研究項(xiàng)目閩林科[(2017)3號(hào)]

萬(wàn)依依(1998-),女,碩士研究生,從事森林保護(hù)學(xué)研究. E-mail:1348369299@qq.com

Author for correpondence. E-mail:fjtongyh@163.com