王 康 孔曉路 河南省鄭州市第二人民醫(yī)院眼科 450000

隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入,已發(fā)現(xiàn)血清因子Fractalkine(FKN)、巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α)、人巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)在糖尿病的進(jìn)展中起主要作用[1]。血清FKN是20世紀(jì)末發(fā)現(xiàn)的,參與白細(xì)胞吞噬和淋巴細(xì)胞遷移,具有趨化黏附作用。研究表明,其與心血管疾病的發(fā)展有一定的關(guān)系[2]。MIP-1α是一種趨化因子,可通過影響下游巨噬和單核細(xì)胞的富集,參與組織細(xì)胞的炎癥損傷。MIP-1α的表達(dá)也可增加中性粒細(xì)胞的浸潤,促進(jìn)白細(xì)胞介素(IL)-6或IL-8的釋放,并通過炎癥因子增加上皮細(xì)胞的凋亡[3]。MCP-1屬趨化因子家族β家族成員,MCP-1分子結(jié)構(gòu)在細(xì)胞中表達(dá)時的糖基化程度及其產(chǎn)生的分子量不同。MCP-1具有明顯的趨化單核細(xì)胞作用,可作用于淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞[4]。本研究通過檢測DR患者FKN、MIP-1α、MCP-1水平,同時分析該三項(xiàng)血清因子與眼底圖像特征、臨床分期的相關(guān)性,旨在探討該三項(xiàng)血清因子在DR患者病情進(jìn)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021年1月—2022年1月在我院接受治療的110例DR患者作為研究組,其中男61例,女49例,年齡50～75歲,平均年齡(57.19±5.18)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)年齡≥18歲;(2)符合2型糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5];(3)無其他嚴(yán)重并發(fā)癥;(4)均知情同意參與本研究。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并急性并發(fā)癥、免疫、血液系統(tǒng)疾病;(2)不了解本研究方法和過程;(3)合并心腦血管疾病等器質(zhì)性病變;(4)近期出現(xiàn)全身炎癥。選取同期的健康體檢者60例作為對照組,其中男32例,女28例,年齡48～76歲,平均年齡(58.24±5.22)歲。兩組一般資料比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法:所有研究對象均禁食8h,晨起抽取空腹靜脈血,采樣量5ml,血樣于離心機(jī)上離心10min,轉(zhuǎn)速3 000r/min,取上清液,在-30℃條件下保存待檢,采用免疫發(fā)光法檢測MIP-1水平,采用ELISA法檢測MCP-1α、FKN水平,按試劑盒說明書操作。

1.2.2 眼底圖像檢查:對所有患者進(jìn)行視力、裂隙燈、眼壓和散瞳檢查,然后使用上海涵飛醫(yī)療器械有限公司提供的歐姆龍(佳能)CR-2 PLUS AFT兔散瞳數(shù)字眼底照相機(jī)進(jìn)行檢查,并按美國早期治療DR研究組推薦的散瞳30度7方位法:1方位:以視盤為中心;2方位:以黃斑為中心;3方位:黃斑顳側(cè);4～7方位:通過視盤中心的垂線和視盤上方和下方的水平線相切的方式進(jìn)行拍照和拼圖。

1.3 DR的臨床分期 按1987年中華醫(yī)學(xué)會眼科學(xué)會通過的1985年第三屆全國眼底病學(xué)組討論建議的6級分期[6]。

1.4 觀察指標(biāo) (1)觀察兩組及不同臨床分期患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平差異,采用Pearson相關(guān)分析法分析DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平與臨床分期的相關(guān)性。(2)觀察DRIV期患者的眼底圖像特征,主要觀察視網(wǎng)膜后極部及周邊微血管的變化及病變類型、范圍、形態(tài)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料用例表示,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。兩組血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平的比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),不同臨床分期患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平的比較采用單因素方差分析,采用Pearson相關(guān)分析法分析DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平與臨床分期的相關(guān)性。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較 研究組血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平均高于對照組(P<0.05),見表1。

表1 兩組血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較

2.2 不同臨床分期患者的血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較 根據(jù)臨床分期標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ期40例,Ⅱ期24例,Ⅲ期34例,Ⅳ期12例,不同臨床分期患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),見表2。

表2 不同臨床分期患者的血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平比較

2.3 DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平與臨床分期的相關(guān)性 Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示,DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1水平與臨床分期均存在相關(guān)性(r=0.882、0.846、0.663,P均<0.001)。

2.4 Ⅳ期糖尿病視網(wǎng)膜病變患者的眼底圖像特征 按美國早期治療糖尿病視網(wǎng)膜病變研究組推薦的7方位法拍攝拼圖。彩色照相診斷為Ⅳ期患者眼底改變?yōu)槊?xì)血管擴(kuò)張迂曲、珊瑚狀新生血管及斑片狀出血。

3 討論

有研究認(rèn)為,MIP-1α可促進(jìn)膠原纖維蛋白的合成,加重上皮組織的增殖和纖維化[7]。另有研究人員認(rèn)為MIP-1α在DR患者中的表達(dá)與DR的程度有關(guān)[8]。本研究對DR患者血清學(xué)指標(biāo)的分析結(jié)果顯示,研究組MIP-1α的表達(dá)顯著高于對照組,且不同臨床分期MIP-1α的表達(dá)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),隨著臨床分期的增加,其表達(dá)水平也隨之升高,提示MIP-1α的高表達(dá)能影響DR的病情進(jìn)展,可能是MIP-1α的表達(dá)可促進(jìn)糖尿病患者微血管病變、炎癥和氧化應(yīng)激的發(fā)展[9]。通過參考不同的相關(guān)文獻(xiàn),認(rèn)為其可能與MIP-1α水平的增加可增加巨噬細(xì)胞對視網(wǎng)膜基底細(xì)胞的吞噬作用,致視網(wǎng)膜基底細(xì)胞凋亡有關(guān)[10]。進(jìn)一步相關(guān)性分析結(jié)果顯示,MIP-1α與臨床分期呈正相關(guān),提示MIP-1α水平與DR的病情有關(guān)。MCP-1不僅作為趨化因子,還具有促凝劑的功能,由巨噬細(xì)胞通過自分泌方式分泌,然后誘導(dǎo)相同的細(xì)胞產(chǎn)生組織因子活性。MCP-1的表達(dá)表明,這些組織因子在調(diào)節(jié)DR中此類細(xì)胞的功能方面具有更大的作用。本研究為MCP-1與DR的研究,通過對比兩組及不同臨床分期患者的MCP-1的表達(dá)水平,得出結(jié)果:研究組血清MCP-1水平明顯高于對照組(P<0.05),且與病情進(jìn)展呈正相關(guān)。FKN也稱為分形趨化因子。其表達(dá)可增加吞噬作用和淋巴細(xì)胞的活性,并使細(xì)胞相互黏附。因此,此物質(zhì)可獨(dú)立于整合素相互黏附,因此其作用時間短,經(jīng)常致炎癥反應(yīng),并對血管和組織造成損害。本文結(jié)果顯示,研究組FKN水平明顯高于對照組,且隨病情的加重FKN水平也隨之升高,與臨床分期呈正相關(guān)(P<0.05)。分析其原因:相比健康人群,DR患者中低密度脂蛋白膽固醇的糖基化過程更快,產(chǎn)生的人氧化低密度脂蛋白可介導(dǎo)血清FKN的產(chǎn)生。

眼底彩色照相的水平軸設(shè)置為穿過視乳頭下緣的雙水平線,垂直軸設(shè)置為通過視乳頭中心的垂直線;在水平軸上分別以黃斑和視乳頭為中心拍攝一張照片;第三張照片是從水平軸顳側(cè)延長線的鼻側(cè)緣到黃斑中心拍攝的;由相互垂直的兩軸形成的4～7圓形區(qū)域,即上下顳象限和上下鼻象限。所有圓的半徑是從視乳頭中心到黃斑中心的直線長度。臨床使用眼底彩色照相作為DR的分期依據(jù)不僅簡單,且可以節(jié)省成本,減輕患者的經(jīng)濟(jì)壓力,具有良好的社會效益。在本研究中,采用了目前準(zhǔn)確率較高的7方位彩色眼底照相法。在臨床實(shí)踐中,醫(yī)生的年齡、學(xué)歷、職稱和經(jīng)驗(yàn)存在較大差異。同一張圖片的不同讀片者也可能有不同的結(jié)果。同一名讀片者在第一次讀片和培訓(xùn)后讀片的結(jié)果也不同。7方位眼底照相是診斷DR的重要方法,在判斷疾病狀況方面具有較高的可靠性。根據(jù)目前國內(nèi)DR分類進(jìn)行DR分期的可行性很高,尤其是在條件較差的基層醫(yī)院和社區(qū)衛(wèi)生機(jī)構(gòu)。如果臨床醫(yī)生能正確掌握眼底照相的分級方法,并據(jù)此制定合理的治療方案,將很大程度節(jié)省治療成本,減少不必要的侵入性檢查,為DR患者的全視網(wǎng)膜光凝治療可提供可靠的依據(jù)[11-12]。

綜上所述,DR患者血清FKN、MIP-1α、MCP-1與DR的臨床分期密切相關(guān),該三項(xiàng)指標(biāo)在DR的損傷機(jī)制中具有協(xié)同作用,對DR患者的免疫機(jī)制和治療具有一定的指導(dǎo)意義。同時7方位彩色眼底照相法可對糖尿病患者進(jìn)行DR分期,臨床可根據(jù)DR患者血清學(xué)指標(biāo)和7方位彩色眼底圖像特征判斷其病情嚴(yán)重程度。