周 力，吳振嶺，張 宇，侯生珍，桂林生

（青海大學(xué) 農(nóng)牧學(xué)院，青海 西寧 810016）

【研究意義】藏羊（Ovis aries）作為青藏高原數(shù)量最多的牲畜，已經(jīng)超過5 000萬(wàn)只，不僅為當(dāng)?shù)啬撩裉峁┭蛎?、毛皮和肉類等產(chǎn)品，同時(shí)對(duì)于維護(hù)高原生態(tài)系統(tǒng)以及藏族文化發(fā)揮著至關(guān)重要的作用[1-2]。藏羊肉的品質(zhì)與整個(gè)畜牧業(yè)的發(fā)展密切相關(guān)。藏羊肉因其風(fēng)味獨(dú)特、味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值優(yōu)越而深受消費(fèi)者的青睞[3]。盡管我國(guó)藏羊的存欄量、產(chǎn)肉量持續(xù)上升，但仍無法滿足市場(chǎng)的消費(fèi)需求，所以如何生產(chǎn)更多優(yōu)質(zhì)的羊肉便成為當(dāng)前高原畜牧業(yè)中研究的熱點(diǎn)。【前人研究進(jìn)展】小麥作為可溶性蛋白質(zhì)的中間產(chǎn)物，可消化能量及價(jià)格都與玉米十分接近，被認(rèn)為是替代玉米的適宜產(chǎn)品[4]。在日糧添加40%小麥能夠提高育肥豬的飼料效率，降低肌肉蒸煮損失，且對(duì)養(yǎng)分表觀消化率產(chǎn)生不利影響[5]。完全用小麥替代玉米不會(huì)對(duì)育肥羔羊的生長(zhǎng)性能產(chǎn)生不利影響，其中以75%的小麥替代玉米可以提高其生長(zhǎng)性能[6]。但小麥中含有較多的阿拉伯木聚糖、β-葡聚糖等抗?fàn)I養(yǎng)因子，能夠影響?zhàn)B分的消化吸收[7]。因此，如何消除谷物原料中的不利影響因素對(duì)于推動(dòng)畜禽產(chǎn)業(yè)的發(fā)展尤為重要。在實(shí)踐生產(chǎn)中，酶制劑作為飼料添加劑被廣泛應(yīng)用，能夠達(dá)到提高飼料中養(yǎng)分消化率以及降低生產(chǎn)成本的目的[8]。其中木聚糖酶（xylanase）是一類降解木聚糖重要的酶，能夠有效地分解谷物中（尤其是麥類）的阿拉伯木聚糖，從而產(chǎn)生分子質(zhì)量大小不同的低聚木糖[9]。日糧中添加木聚糖酶可以提高羊的采食量、中性洗滌纖維消化率以及瘤胃發(fā)酵[10]。在含有高比例百慕草青貯飼料的飼糧中添加木聚糖酶可提高奶牛干物質(zhì)、酸性洗滌纖維和中性洗滌纖維的體外降解率[11]。肌苷酸是肉類重要的呈鮮味物質(zhì)，是評(píng)定肉品風(fēng)味和新鮮度的常用指標(biāo)，其含量越高，解產(chǎn)物越少，表明肉鮮味和新鮮度越好[12]。礦物元素在維持身體酸堿平衡，參與機(jī)體的能量代謝以及在維持神經(jīng)肌肉的正常功能方面扮演著重要的作用，可以通過增強(qiáng)機(jī)體超氧化物歧化酶活性，減少機(jī)體自由基對(duì)肉品質(zhì)的影響，從而改善肉品質(zhì)[13]。另外，氨基酸的含量和種類可直接決定肌肉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[14]。【本研究切入點(diǎn)】本團(tuán)隊(duì)前期研究[15]發(fā)現(xiàn)，小麥型飼料中添加0.2%木聚糖酶不僅能促進(jìn)藏羊胃腸道形態(tài)發(fā)育，同時(shí)還能提高其消化酶活性和抗氧化能力。此外，根據(jù)木聚糖酶產(chǎn)品的活性以及藏羊日糧中小麥的含量，筆者推測(cè)0.2%含量的木聚糖酶在飼喂效果以及成本控制方面為最優(yōu)選擇。但是有關(guān)木聚糖酶調(diào)控綿羊（尤其是藏羊）肉質(zhì)性狀的研究較少，仍有待進(jìn)一步探討?！緮M解決的關(guān)鍵問題】鑒于此，本研究擬以高原型藏羊?yàn)檠芯繉?duì)象，探索小麥-玉米型基礎(chǔ)日糧中補(bǔ)充0.2%木聚糖酶能否改善其肉質(zhì)特性，為外源性酶在綿羊生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)動(dòng)物：選取初始體質(zhì)量相近（19.35±2.18）kg且體況良好的2～3月齡高原型藏羊60只，試驗(yàn)地點(diǎn)：青海香咔梅朵牧業(yè)有限公司。木聚糖酶購(gòu)自湖北武漢新華揚(yáng)生物股份有限公司，活性為100 000 U∕g。日糧中精料補(bǔ)充料為粉料，粗飼料由燕麥青干草和燕麥青貯組成（按DM 基礎(chǔ)1∶1 計(jì)），均由青海省海北州共和縣香咔梅朵牧業(yè)飼料廠提供，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）Tab.1 Composition and nutrient levels of the diet（DM basis） %

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將高原型藏羊公羔60 只隨機(jī)分為兩組，每組5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6 只羊。對(duì)照組（control group，CG）飼喂小麥型日糧，試驗(yàn)組（test group，TG）飼喂小麥型日糧中添加0.2%木聚糖酶。預(yù)飼期10 d 正試期90 d。正試期共分為2個(gè)階段，第1～30天，精粗比為6∶4；第31～90天，精粗比為7∶3。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)采取全舍飼單欄飼養(yǎng)，試驗(yàn)羊進(jìn)行編號(hào)和驅(qū)蟲，羊舍定期清理和消毒，每天飼喂2 次（08：30 和16：30），飼喂方式為人工將精料與粗料攪拌后飼喂，所有試驗(yàn)羊自由采食和自由飲水，每日準(zhǔn)確記錄采食量和剩料量，并清理食槽和水槽1次，管理模式和環(huán)境條件一致[16]。

1.4 樣品采集

試驗(yàn)正試期結(jié)束后，從各組中隨機(jī)選擇5 只試驗(yàn)羊進(jìn)行屠宰，參考《家畜解剖學(xué)及組織胚胎學(xué)》中方法[17]，采集左側(cè)胴體第12～13肋骨間背最長(zhǎng)肌，剝離肉眼可見的局部脂肪與筋膜，然后置于-80 ℃，另取一份肌肉用于4%多聚甲醛固定不少于48 h。

1.5 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.5.1 肌纖維觀察 將固定好的肌肉樣品取出，置于冰凍切片機(jī)中，保持溫度為-25 ℃，將其切成約7 μm 厚薄片，采用蘇木精-伊紅（hematoxylin＆eosin staining，H＆E.）染色法對(duì)肌纖維進(jìn)行染色[18]。應(yīng)用Eclipse Ci-L 正置白光拍照顯微鏡（Nikon，日本）在40×10 倍下觀察，并通過Image-Pro Plus 6.0（media cybemetics，美國(guó)）圖像軟件分析肌纖維組織形態(tài)學(xué)。每個(gè)樣本制作3 張切片，每張片子隨機(jī)選擇3～5 個(gè)組織完整的視野進(jìn)行拍照。肌纖維橫截面最長(zhǎng)兩點(diǎn)距離與最短兩點(diǎn)距離之和的平均值，作為肌纖維直徑。

1.5.2 氨基酸檢測(cè) 氨基酸（amino acid，AA）含量的測(cè)定參考GB 5009.124—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中氨基酸的測(cè)定》。具體步驟如下：稱取肌肉凍干粉碎樣品50 mg（精確到0.1 mg）置于消解管，再加入6 mol∕L的鹽酸10 mL，110 ℃烘箱內(nèi)水解24 h，定容至100 mL的容量瓶中，吸取0.5 mL上述液體經(jīng)氮?dú)獯蹈?，加? mL 0.02 mol∕L鹽酸溶解沉淀，樣品過0.22 μm濾膜進(jìn)行過濾，將濾液收集于進(jìn)樣瓶中，置于4 ℃保存，待上機(jī)測(cè)定（日立L-8900全自動(dòng)氨基酸分析儀）。

1.5.3 礦物元素測(cè)定 鈣（Ca）含量的測(cè)定參考GB 5009.92—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中鈣的測(cè)定》；磷（P）含量的測(cè)定參考（GB 5009.87—2016）《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中磷的測(cè)定》；鐵（Fe）含量的測(cè)定參考（GB 5009.90—2016）《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中鐵的測(cè)定》；銅（Cu）含量的測(cè)定參考（GB 5009.13—2017）《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中銅的測(cè)定》；鋅（Zn）含量的測(cè)定參考（GB 5009.14—2017）《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中鋅的測(cè)定》；硒（Se）含量的測(cè)定參考（GB 5009.93—2017）《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中硒的測(cè)定》。

1.5.4 鮮味物質(zhì)含量的測(cè)定 肌苷酸（inosine monophosphate，IMP）和肌苷（inosine，I）含量的測(cè)定采用高效液相色譜法：精確稱取1 g 肉樣置于離心管，加入4 mL 體積分?jǐn)?shù)3.5%高氯酸后勻漿，于4 ℃條件下，4 000 r∕min離心5 min，吸取上清液至容量瓶中作為提取液，調(diào)節(jié)pH值至6.5，轉(zhuǎn)移至25 mL棕色容量瓶定容，并用0.45 μm 濾膜過濾，用于上機(jī)分析。色譜條件：C18 色譜柱，流速為1 mL∕min，柱溫25 ℃，進(jìn)樣量20 μL，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm。

1.5.5 肌肉發(fā)育基因表達(dá)量檢測(cè) 按照TRIzol法對(duì)肌肉樣品總RNA進(jìn)行提取，使用核酸濃度檢測(cè)儀、凝膠電泳法分別檢測(cè)其濃度、純度以及完整性，樣品經(jīng)質(zhì)檢合格后，參照TaKaRa反轉(zhuǎn)錄試劑盒（南京）說明書將總RNA 反轉(zhuǎn)錄為cDNA。采用RT-qPCR 技術(shù)檢測(cè)肌肉發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）為內(nèi)參基因，肌細(xì)胞生成素（myogenin，MyoG）、（growth hormone，GH）、生長(zhǎng)激素釋放激素（growth hormone releasing hormone，GHRH）和胰島素樣生長(zhǎng)因子1（insulin like growth factor 1，IGF1）為目的基因。采用2-ΔΔCt法計(jì)算TG 和CG 組中肌肉發(fā)育基因相對(duì)表達(dá)量。條件為：94 ℃預(yù)變性30 s，94 ℃變性5 s，60 ℃退火15 s，72 ℃延伸15 s，循環(huán)40次。試驗(yàn)所有引物均由北京奧科鼎盛生物科技有限公司合成，其引物序列見表2。

表2 熒光定量RT-PCR引物Tab.2 Primer sequence for qRT-PCR

1.6 數(shù)據(jù)處理分析

原始數(shù)據(jù)均使用Excel 2010 整理匯總，利用SPSS 21.0 軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，結(jié)果用平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤表示，*表示差異顯著（P<0.05），ns 表示差異不顯著（P>0.05），并應(yīng)用Graphpad Prism 8.0.2 軟件進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌肌纖維直徑的影響

使用H＆E法對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌的石蠟切片進(jìn)行染色。如圖1所示，應(yīng)用Eclipse Ci-L正置白光拍照顯微鏡在40×10 倍下觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)肌肉組織學(xué)的結(jié)構(gòu)較為完整，然后通過對(duì)切片圖像進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果表明兩組間肌纖維直徑未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但CG組比TG組高出了0.98%（P>0.05）。

圖1 木聚糖酶對(duì)藏羊肌纖維直徑的影響Fig.1 Effect of Xylanase on muscle fiber diameter of Tibetan sheep

2.2 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌氨基酸含量及組成的影響

使用日立L-8900 全自動(dòng)氨基酸分析儀從藏羊肌肉中共檢測(cè)出17 種氨基酸。如表3 所示，CG 組中必需氨基酸、賴氨酸、蛋氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、蘇氨酸及苯丙氨酸的含量均高于TG 組，但均未達(dá)到顯著差異水平（P>0.05）。除了半胱氨酸外，TG 組的非必需氨基酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、絲氨酸、脯氨酸、丙氨酸、組氨酸、精氨酸、酪氨酸含量均高于CG 組，但差異不顯著（P>0.05）。此外，各組間總氨基酸、鮮味氨基酸、必需氨基酸∕非必需氨基酸及必需氨基酸∕總氨基酸含量差異亦不顯著（P>0.05）。

表3 木聚糖酶對(duì)藏羊肌肉中氨基酸含量及組成的影響Tab.3 Effect of Xylanase on amino acid content and composition in Tibetan sheep muscle

2.3 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌礦物質(zhì)含量的影響

如表4 所示，在微量元素中，相較于CG 組，TG 組的Fe 含量顯著提高了17.84%（P<0.05）。TG 組的鋅、鈣含量大于CG組，而銅、硒及磷含量則呈相反的趨勢(shì)，但均未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異水平（P>0.05）。

表4 木聚糖酶對(duì)藏羊肌肉中礦物質(zhì)含量的影響Tab.4 Effect of Xylanase on mineral content in muscle of Tibetan sheep

2.4 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌肌苷酸和肌苷的影響

采用高效液相色譜法檢測(cè)藏羊肌肉中肌苷酸和肌苷的含量。如圖2 所示，結(jié)果表明相較于CG 組，TG組的肌苷酸（IMP）含量顯著提高（P<0.05）。兩組間肌苷（I）含量未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異水平（P>0.05）。

圖2 木聚糖酶對(duì)藏羊肌肉中鮮味物質(zhì)含量的影響Fig.2 Effect of Xylanase on the content of flavor substances in Tibetan sheep muscle

2.5 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌基因表達(dá)量的影響

采用RT-qPCR 技術(shù)對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)。由圖3 可知，日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌中的肌細(xì)胞生成素（MyoG）、生長(zhǎng)激素（GH）、生長(zhǎng)激素釋放激素（GHRH）以及胰島素樣生長(zhǎng)因子1（IGF1）基因相對(duì)表達(dá)水平差異均不顯著（P>0.05）。

圖3 木聚糖酶對(duì)藏羊肌肉發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)量的影響Fig.3 Effect of Xylanase on the expression of muscle development related genes in Tibetan sheep

3 討論與結(jié)論

3.1 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌肌纖維直徑的影響

肌纖維是構(gòu)成骨骼肌的基本結(jié)構(gòu)單位，其纖維類型受遺傳、品種、營(yíng)養(yǎng)和內(nèi)部調(diào)節(jié)因子等因素相互轉(zhuǎn)化[19]。據(jù)有關(guān)報(bào)道，肌纖維的組成及類型直接影響肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育[20]。因此，可以通過改變肌纖維類型組成來提高羊肉品質(zhì)。肌纖維數(shù)目在動(dòng)物出生前就已固定，此后的生長(zhǎng)發(fā)育主要依賴于直徑的增加以及類型的轉(zhuǎn)化來實(shí)現(xiàn)[21]。研究表明，肌纖維特性與肌肉品質(zhì)直接相關(guān)，如嫩度、pH 值和肉色等[22]。其中嫩度不僅是決定肌肉感官品質(zhì)的重要因素，同時(shí)也是評(píng)價(jià)其多汁性的重要指標(biāo)[23]。而肌纖維直徑越大，說明剪切力越大，肉質(zhì)嫩度也越差，反之則嫩度越佳[24]。本試驗(yàn)結(jié)果說明，與CG組相比，TG組的肌纖維直徑有所下降。推測(cè)可能是木聚糖酶含量不足以影響肌細(xì)胞發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)，從而使肌纖維直徑發(fā)生明顯的變化。迄今為止，關(guān)于國(guó)內(nèi)外在小麥-玉米型飼料中補(bǔ)充外源性酶制與反芻動(dòng)物肌纖維特性的報(bào)道較少，還需進(jìn)一步探索。

3.2 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌氨基酸含量及組成的影響

羊肉品質(zhì)指標(biāo)主要包括食用品質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)成分、氨基酸、脂肪酸等，其品質(zhì)受到品種、性別、年齡及飼養(yǎng)方式等因素影響[25]。目前有關(guān)外源酶制劑調(diào)控羊肉氨基酸組成及含量的研究較少，所以在小麥-玉米型日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊肌肉品質(zhì)的影響，值得深入研究。在本試驗(yàn)中，兩組藏羊肌肉中均檢測(cè)出17種氨基酸，但CG組的TAA 含量略低于TG組。預(yù)示著木聚糖酶在調(diào)控藏羊肌肉中TAA 含量具有一定的促進(jìn)作用。根據(jù)FAO∕WTO 的理想模式，組成理想蛋白質(zhì)的氨基酸中EAA∕TAA 應(yīng)在40%左右，EAA∕NEAA 應(yīng)不低于60%[26]。在本試驗(yàn)中，兩組間EAA∕TAA、EAA∕NEAA 雖差異不顯著，均高于FAO∕WTO的標(biāo)準(zhǔn)，且以TG組含量較高。說明在舍飼條件下，兩組的藏羊肉質(zhì)均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，但在日糧中補(bǔ)充木聚糖酶后肌肉的蛋白質(zhì)量更佳。EAA不能從頭合成，或者合成速率不能充分滿足機(jī)體的需要，必須從膳食中獲得才能滿足新陳代謝的需求[27]。研究[28]證實(shí)，EAA 的含量制約著肌肉蛋白質(zhì)的品質(zhì)，其含量越高，說明營(yíng)養(yǎng)價(jià)值越高。此外，羊肉的鮮美程度主要取決于Glu、Ala、Gly、Asp和Arg等鮮味氨基酸的含量[29]。其中，Glu 在決定羊肉鮮味中起主導(dǎo)作用[30]。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩組間EAA、DAA 及Glu 含量差異不顯著。

3.3 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌礦物元素的影響

礦物元素是構(gòu)成器官和組織的重要組成部分，其濃度能夠衡量肌肉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。孟凡珠等[31]研究表明，年齡能對(duì)蘇尼特羊不同部位的肌肉礦物質(zhì)含量存在顯著影響。其他研究也證實(shí)，公羔臂三頭肌中多數(shù)微量元素含量、臀肌的多數(shù)常量元素與微量元素含量顯著高于母羔[32]。Ca 作為骨骼的重要組成成分，能夠促進(jìn)骨骼的生長(zhǎng)發(fā)育以及參與機(jī)體內(nèi)多種生理作用[33]。本試驗(yàn)中，兩組間Ca 和P 含量差異均不顯著。表明木聚糖酶對(duì)藏羊肌肉中Ca 和P 含量均無顯著影響。Fe 是人體內(nèi)不可缺少的微量元素，能夠輸送氧氣、促進(jìn)酶合成、能量產(chǎn)生以及免疫調(diào)節(jié)等功能[34]。于此同時(shí)，F(xiàn)e 還可促進(jìn)胎兒大腦的發(fā)育和維持神經(jīng)的連接[35]。在本試驗(yàn)中，小麥-玉米型日糧中添加0.2%木聚糖酶，明顯提高了藏羊肌肉的Fe 含量，從15.20 mg∕kg 提高到18.50 mg∕kg。由此可見，木聚糖酶對(duì)藏羊肌肉中鐵的沉積率的提高具有明顯作用。究其原因可能是：木聚糖酶破壞飼料細(xì)胞壁，將被包裹其中的養(yǎng)分釋放出來，供機(jī)體消化、吸收和利用所致，因相關(guān)內(nèi)容較少，其調(diào)控機(jī)理還有待進(jìn)一步深入研究。Cu 和Zn 在輔酶、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)中起重要作用，同時(shí)還可建立肌肉、器官、血細(xì)胞和部分軟組織[36]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與CG 組相比，TG 組肌肉的Cu、Zn 含量均無顯著差異。說明木聚糖酶對(duì)Cu、Zn 元素在肌肉中沉積率無明顯影響。另?yè)?jù)報(bào)道，硒不僅能夠在體內(nèi)發(fā)揮抗氧化功能，同時(shí)還可阻止多不飽和脂肪酸過氧化，進(jìn)而改善肉品質(zhì)[37]。因此，從營(yíng)養(yǎng)價(jià)值角度來說，小麥-玉米型飼料中添加0.2%木聚糖酶飼喂后藏羊的肉品質(zhì)較佳。

3.4 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌肌苷和肌苷酸的影響

隨著高原畜牧業(yè)工作的持續(xù)推進(jìn)，對(duì)于肉品質(zhì)，特別是風(fēng)味特性的研究越來越重視。肌苷酸（IMP）作為肉質(zhì)風(fēng)、鮮味的主要成分，已被作為評(píng)估肌肉鮮味程度的一項(xiàng)重要指標(biāo)[38]。研究表明，日糧中添加百里香從不同程度上提高了灘羊肌肉中肌苷酸的含量，其影響效果與添加的劑量有關(guān)[39]。因此，從風(fēng)味物質(zhì)IMP 入手，掌握其在畜禽肌肉中合成、降解規(guī)律，對(duì)于改善羊肉質(zhì)性狀具有重要的理論和實(shí)踐意義。在三磷酸腺苷酶的作用下，三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）在肌肉的成熟過程中分解形成IMP[40]。研究表明，IMP 的提鮮能力是谷氨酸鈉（味精）的40 倍，并且與谷氨酸鈉具有很強(qiáng)的協(xié)同作用[41]。本試驗(yàn)中，TG 組的IMP 含量顯著高于CG 組。推測(cè)其可能原因是：首先日糧中添加木聚糖酶被機(jī)體吸收后，轉(zhuǎn)化更多的ATP，進(jìn)而增加了肌肉IMP 含量；其次添加的木聚糖酶影響了IMP 代謝過程中相關(guān)酶的活性，從而提高了IMP 含量。此外，肌苷（I）是肌苷酸（IMP）在磷酸脂酶作用下分解產(chǎn)生的，具有一定的苦味，能對(duì)肉品風(fēng)味產(chǎn)生不良的影響。研究發(fā)現(xiàn)，與基礎(chǔ)日糧相比，中草藥添加劑能夠顯著提高巴美羊肉中肌苷含量，這與本試驗(yàn)結(jié)果不一致[42]。在本試驗(yàn)中，相較于CG 組，TG 組的肌肉中I 含量差異不顯著。進(jìn)一步表明在小麥-玉米型日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊肌苷含量無不利影響。

3.5 日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊背最長(zhǎng)肌基因表達(dá)的影響

肌肉發(fā)育是一個(gè)十分復(fù)雜的過程，除了受營(yíng)養(yǎng)、遺傳及環(huán)境等因素調(diào)控外，更多取決于基因表達(dá)的控制[43]。據(jù)有關(guān)報(bào)道，肉質(zhì)性狀的相關(guān)基因進(jìn)行篩選及功能驗(yàn)證都可以很好的實(shí)現(xiàn)肉質(zhì)改善[44-45]。因此，可以從基因表達(dá)水平可以進(jìn)一步闡明畜禽肌肉發(fā)育的潛在分子機(jī)理。其中肌細(xì)胞生成素（MyoG）是唯一表達(dá)于所有骨骼肌細(xì)胞的因子，參與調(diào)控肌纖維的融合[46]，同時(shí)也負(fù)責(zé)集中控制肌細(xì)胞分化過程，能夠直接影響動(dòng)物的產(chǎn)肉量[47]。本試驗(yàn)表明，兩組間MyoG基因的相對(duì)表達(dá)量有所下降，但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著水平，這與肌纖維HE 染色結(jié)果相一致。IGF1作為IGF 家族中最重要的因子之一，具有多種促生長(zhǎng)和代謝活性[48]。另外，IGF1對(duì)于調(diào)節(jié)動(dòng)物產(chǎn)后生長(zhǎng)至關(guān)重要，并且與肌肉生長(zhǎng)抑制素（MSTN）共同調(diào)節(jié)肌肉的大小[49]。本試驗(yàn)中，與CG 組相比，TG 組的IGF1基因相對(duì)表達(dá)量差異不顯著?？赡苁且?yàn)樾←溞腿占Z中添加木聚糖酶含量過低，不足以消除谷物飼料中眾多的抗氧化因子所致。生長(zhǎng)激素（GH）基因調(diào)控肉的生長(zhǎng)，能被用作肉類生長(zhǎng)性狀遺傳標(biāo)記的候選基因[50]。GH 的外顯子4 和5 以及生長(zhǎng)激素受體（GHR）外顯子10 的基因多態(tài)性被認(rèn)為與水牛的產(chǎn)肉量有關(guān)[51]。GHRH作為GH的正調(diào)節(jié)因子，主要促進(jìn)垂體合成和分泌GH[52]。同樣可以控制肌肉生長(zhǎng)和發(fā)育，被認(rèn)為是調(diào)節(jié)動(dòng)物肉質(zhì)性狀的候選基因[53]。從本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩組間GH和GHRH基因的相對(duì)表達(dá)水平差異不顯著。這說明小麥-玉米型日糧中添加0.2%木聚糖酶對(duì)藏羊肌肉發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)水平影響較小。

3.6 結(jié)論

小麥-玉米型日糧中添加0.2%木聚糖酶可提高青海藏羊肌肉中Fe、IMP 含量，可改善藏羊肌肉品質(zhì)。