饒楊,趙軼男,何紫紅,賀群芳,盧佩佩,謝茂華

多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是常見(jiàn)的內(nèi)分泌紊亂導(dǎo)致的慢性疾病,患者臨床主要表現(xiàn)為多毛、排卵障礙或稀發(fā)排卵、肥胖、月經(jīng)異常、雄激素異常升高等癥狀,發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜[1-3]。PCOS若不及時(shí)干預(yù)容易發(fā)生不良妊娠結(jié)局,故探尋能夠預(yù)測(cè)PCOS患者不良妊娠的血清標(biāo)志物,對(duì)于PCOS的治療具有重要意義。前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)與糖尿病、高脂血癥等疾病的發(fā)生發(fā)展緊密相關(guān),能通過(guò)減少低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)的降解,加重脂質(zhì)代謝紊亂[4-6]。環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白調(diào)控的轉(zhuǎn)錄共激活因子3(CREB regulated transcription coactivator 3,CRTC3)是CRTC蛋白家族成員,有研究發(fā)現(xiàn)2型糖尿病和腹型肥胖患者的血清CRTC3水平異常升高,其升高程度與糖脂代謝紊亂、脂聯(lián)素降低的程度和胰島素抵抗有關(guān)[7-8]。基于此,本研究分析了PCSK9、CRTC3在PCOS患者血清中的表達(dá)及其對(duì)不良妊娠的預(yù)測(cè)價(jià)值,為臨床診治PCOS提供一定的參考依據(jù),報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 納入2020年12月—2022年9月武漢市第三醫(yī)院產(chǎn)科收治的PCOS孕婦123例為研究組,同期醫(yī)院孕檢并生產(chǎn)的健康孕婦120例作為對(duì)照組,2組年齡、BMI、孕周、吸煙史、飲酒史、高血壓史比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與對(duì)照組比較,研究組患者睪酮(testosterone,T)、黃體生成素(luteinizing hormone,LH)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰島素(fasting insulin,FINS)、胰島素抵抗指數(shù)(homeostasis model assessment-insulin resistance,HOMA-IR)顯著升高(P<0.01),見(jiàn)表1。本研究經(jīng)過(guò)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)(2020-0563),受試者及家屬知情同意并簽署知情同意書(shū)。

表1 對(duì)照組與研究組孕婦臨床資料比較

1.2 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn):①符合2008年中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的PCOS診斷標(biāo)準(zhǔn)[9];②年齡≥18歲;③超聲檢查顯示孕婦卵巢呈多囊性變化,且具有雄激素異常升高的表現(xiàn);④配合完成相關(guān)檢查者;⑤臨床資料完整者。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他婦科疾病者;②合并全身感染性疾病者;③合并惡性腫瘤者;④由遺傳、免疫、有害物質(zhì)等其他原因引起的不良妊娠者;⑤近3個(gè)月內(nèi)服用影響激素、血脂、血糖水平的藥物者;⑥伴有心、肝、腎等重要臟器功能障礙者;⑦合并嚴(yán)重慢性基礎(chǔ)性疾病者;⑧合并精神類(lèi)疾病者;⑨過(guò)敏性體質(zhì)者。

1.3 觀測(cè)指標(biāo)與方法

1.3.1 ELISA法檢測(cè)研究對(duì)象血清PCSK9、CRTC3水平:孕婦入組后采取空腹肘靜脈血5 ml,靜置10 min后3 500 r/min離心10 min留取血清,于EP管中進(jìn)行分裝,置于-20℃保存待測(cè)。以人血清PCSK9 ELISA試劑盒(購(gòu)自上海聯(lián)邁生物工程有限公司)、人血清CRTC3 ELISA試劑盒(購(gòu)自美國(guó)Sigma公司)說(shuō)明書(shū)方法檢測(cè)血清PCSK9、CRTC3水平。

1.3.2 隨訪:隨訪調(diào)查,記錄自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)、葡萄胎、出生缺陷、極低出生體質(zhì)量?jī)?、新生兒?yán)重窒息等不良妊娠結(jié)局[10]。通過(guò)電話、門(mén)診的方式自孕婦入院起,隨訪至產(chǎn)后72 d,根據(jù)孕婦是否發(fā)生不良妊娠結(jié)局,將PCOS孕婦分為不良妊娠亞組32例與妊娠良好亞組91例。

2 結(jié) 果

2.1 2組血清PCSK9、CRTC3水平比較 與對(duì)照組比較,研究組患者血清PCSK9、CRTC3水平均顯著升高(P<0.01),見(jiàn)表2。

表2 對(duì)照組與研究組血清PCSK9、CRTC3水平比較

2.2 2亞組血清PCSK9、CRTC3水平比較 研究組患者出現(xiàn)不良妊娠結(jié)局32例(26.02%)。與妊娠良好亞組比較,不良妊娠亞組PCOS患者血清PCSK9、CRTC3水平顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 不良妊娠亞組與妊娠良好亞組血清PCSK9、CRTC3水平比較

2.3 PCOS患者血清PCSK9與CRTC3水平的相關(guān)性分析 Pearson法分析顯示,PCOS患者血清PCSK9與CRTC3水平呈正相關(guān)(r=0.639,P<0.001)。

2.4 多因素Logistic回歸分析PCOS患者發(fā)生不良妊娠結(jié)局的影響因素 以PCOS孕婦是否發(fā)生不良妊娠結(jié)局為因變量(發(fā)生=1,未發(fā)生=0),以PCSK9、CRTC3為自變量(實(shí)測(cè)值),進(jìn)行多因素Logistic回歸分析,結(jié)果顯示:高PCSK9、高CRTC3是PCOS孕婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局的危險(xiǎn)因素(P<0.01),見(jiàn)表4。

表4 多因素Logistic回歸分析PCOS患者發(fā)生不良妊娠結(jié)局的影響因素

2.5 血清PCSK9、CRTC3水平預(yù)測(cè)PCOS孕婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局的價(jià)值分析 繪制血清PCSK9、CRTC3水平與二者聯(lián)合預(yù)測(cè)PCOS孕婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局的ROC曲線,并計(jì)算AUC,結(jié)果顯示:血清PCSK9、CRTC3水平與二者聯(lián)合預(yù)測(cè)PCOS孕婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局的AUC分別為0.852、0.823和0.961,二者聯(lián)合預(yù)測(cè)不良妊娠結(jié)局的AUC優(yōu)于血清PCSK9水平、CRTC3水平單獨(dú)預(yù)測(cè)(Z/P= 2.618/0.009、3.104/0.001),見(jiàn)表5、圖1。

圖1 血清PCSK9、CRTC3水平預(yù)測(cè)PCOS孕婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局的ROC曲線

表5 血清PCSK9、CRTC3水平對(duì)PCOS孕婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討 論

PCOS是常見(jiàn)的婦科內(nèi)分泌性疾病,患者通常會(huì)出現(xiàn)糖脂代謝異常、卵泡發(fā)育不成熟、排卵障礙、胰島素抵抗、月經(jīng)紊亂、高雄激素血癥等主要癥狀[11]。PCOS病因復(fù)雜,發(fā)病機(jī)制目前也尚未闡明,且研究發(fā)現(xiàn),PCOS合并妊娠的婦女經(jīng)促排卵而成功妊娠后較正常孕婦更容易發(fā)生不良妊娠結(jié)局,早孕流產(chǎn)率高達(dá)30%～50%[12-13]。因此,探尋高效準(zhǔn)確的生物標(biāo)志物有助于及時(shí)評(píng)估妊娠結(jié)局,對(duì)于減少PCOS患者的不良妊娠結(jié)局、保障患者與胎兒的生命安全具有重要意義。本研究結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,研究組PCOS患者T、LH、HOMA-IR顯著升高,說(shuō)明PCOS患者會(huì)出現(xiàn)不同程度的高雄激素血癥和胰島素抵抗,這與以往文獻(xiàn)報(bào)道一致。

PCSK9是一種前蛋白轉(zhuǎn)換酶,由肝臟合成和分泌,在肝臟、腎臟、小腸等組織中表達(dá),與脂質(zhì)代謝密切相關(guān),能通過(guò)降解LDL受體而影響LDL的代謝,還參與調(diào)控細(xì)胞周期、炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激等過(guò)程[14]。林少玲等[15]研究發(fā)現(xiàn)PCSK9在妊娠期糖尿病患者血清中呈高表達(dá),與妊娠期糖尿病患者的糖脂代謝和IR密切相關(guān),其可能參與了妊娠期糖尿病的發(fā)生與發(fā)展。劉志文等[16]研究發(fā)現(xiàn)PCSK9參與2型糖尿病并發(fā)大血管病變的過(guò)程,對(duì)于疾病的高效診斷具有重要作用。Wu等[17]研究發(fā)現(xiàn)妊娠期糖尿病患者循環(huán)PCSK9水平顯著高于正常糖耐量的孕婦,PCSK9與血脂異常、妊娠期糖尿病的發(fā)生密切相關(guān)。本研究中,與對(duì)照組、妊娠良好亞組比較,研究組、不良妊娠亞組的PCOS患者血清PCSK9水平均顯著升高,這可能提示PCSK9在PCOS病情進(jìn)展中起著重要的作用,高表達(dá)的PCSK9可能通過(guò)引起糖脂代謝異常和胰島素抵抗來(lái)促進(jìn)PCOS的發(fā)生與發(fā)展,促進(jìn)不良妊娠的發(fā)生。

CRTC3是CRTC家族的一員,在人體多種組織中均有表達(dá),在脂肪組織中表達(dá)較高,能夠參與調(diào)節(jié)細(xì)胞和組織的能量代謝,對(duì)于脂肪組織具有調(diào)節(jié)作用[18]。劉秀娟等[19]研究發(fā)現(xiàn)妊娠期糖尿病患者血清CRTC3水平顯著升高,血清CRTC3水平的升高程度與糖脂代謝和不良妊娠結(jié)局密切相關(guān)。Liu等[20]研究發(fā)現(xiàn)CRTC3的過(guò)表達(dá)通過(guò)上調(diào)肌內(nèi)和皮下脂肪細(xì)胞中的鈣離子—環(huán)磷酸腺苷信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)脂肪的分化,說(shuō)明CRTC3參與調(diào)節(jié)了豬脂肪細(xì)胞的脂質(zhì)代謝和成脂分化。同樣,本研究中與對(duì)照組、妊娠良好亞組比較,研究組、不良妊娠亞組的PCOS患者血清CRTC3水平均顯著升高,說(shuō)明高表達(dá)的CRTC3水平可能影響脂肪代謝,參與PCOS的發(fā)生發(fā)展,引起不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。

本研究還通過(guò)Pearson分析發(fā)現(xiàn),PCOS患者血清PCSK9與CRTC3水平呈正相關(guān),說(shuō)明血清PCSK9與CRTC3水平可能通過(guò)正反饋調(diào)節(jié)的方式加速PCOS的進(jìn)程。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示,PCSK9、CRTC3是PCOS孕婦發(fā)生不良妊娠結(jié)局的危險(xiǎn)因素,因此推測(cè)血清PCSK9、CRTC3水平的升高可能促進(jìn)PCOS疾病的發(fā)生。此外,本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清PCSK9、CRTC3聯(lián)合預(yù)測(cè)PCOS患者發(fā)生不良妊娠結(jié)局的AUC為0.961,均高于血清PCSK9、CRTC3單獨(dú)預(yù)測(cè),這些結(jié)果提示血清PCSK9、CRTC3聯(lián)合預(yù)測(cè)PCOS不良妊娠結(jié)局的有效性提高,對(duì)臨床預(yù)測(cè)和治療PCOS具有一定的參考價(jià)值。

綜上所述,PCOS患者血清中PCSK9、CRTC3水平顯著增加,兩者的升高與妊娠結(jié)局密切相關(guān),二者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)預(yù)測(cè)不良妊娠結(jié)局具有重要價(jià)值。但PCSK9、CRTC3在PCOS中的作用機(jī)制還尚未明確,后期將設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行論證。

利益沖突：所有作者聲明無(wú)利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明

饒楊:設(shè)計(jì)研究方案,實(shí)施研究過(guò)程,論文撰寫(xiě);趙軼男、賀群芳、盧佩佩:實(shí)施研究過(guò)程,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析;何紫紅:數(shù)據(jù)收集及分析整理;謝茂華:論文審核修改