王秀蘭 肖志國 韓葉 陳偉強 劉慧吉 韓晴 陳嬋娟

(吉林省水產(chǎn)科學(xué)研究院,吉林長春 130033)

鴨綠江茴魚(ThymallusarcticusyaluensisMori)又名青鱗子、斑鱒子魚,隸屬于鮭形目(Salmoniformes)、鮭科(Salmonidae)、茴魚亞科(Thymallinae)、茴魚屬(Thymallus)(見圖1)。該魚數(shù)量稀少,分布區(qū)狹小,在中國僅分布于鴨綠江上游,集中分布地在吉林省白山市長白朝鮮族自治縣境內(nèi),海拔1 000～1 200 m的江段和溪流,在朝鮮的鴨綠江上游及其支流亦有分布。該魚為小型名貴魚類,主要以水生昆蟲和陸生昆蟲為食,肉味鮮美細嫩,頗受消費者青睞,市場供不應(yīng)求,其野生種群被農(nóng)業(yè)農(nóng)村部列入第3批《人工繁育國家重點保護水生野生動物名錄》,并被列為國家Ⅱ級保護動物[1]。2017年,本項目組以冰鮮鹵蟲和全價配合飼料為親魚飼料,采用激素誘導(dǎo)、等滲液授精等方法,以活體豐年蟲無節(jié)幼體為仔魚開口餌料,以動物性飼料結(jié)合全價配合飼料為稚魚飼料,突破了野生鴨綠江茴魚的馴化和繁育技術(shù)難關(guān)[2]。為進一步實現(xiàn)鴨綠江茴魚的規(guī)?；斯し庇?本研究采用人工繁殖的3齡鴨綠江茴魚作親本進行了鴨綠江茴魚全人工繁殖及稚幼魚培育技術(shù)試驗。現(xiàn)將繁育技術(shù)總結(jié)如下,以期為保護和恢復(fù)鴨綠江茴魚種質(zhì)資源、開發(fā)吉林省名特優(yōu)魚類新品種提供參考。

圖1 鴨綠江茴魚

1 材料和方法

1.1 試驗地點

試驗于2020年1月至12月在臨江市金鯊冷水魚養(yǎng)殖農(nóng)民專業(yè)合作社和白山森源養(yǎng)殖有限公司進行。養(yǎng)殖用水為天然山泉水,水質(zhì)清澈無污染,溶解氧為9～11 mg/L,pH為7.5～8.3。

1.2 親魚培育

親魚來自2017年野生親本經(jīng)人工繁育的子代,已飼養(yǎng)至3齡,其平均體質(zhì)量為43 g/尾,共4.3萬尾。

采用長方形水泥池作為親魚培育池,水泥池面積在60～80 m2,養(yǎng)殖水深為0.6～0.7 m,培育水溫為2～13 ℃,溶解氧不低于6 mg/L。親魚放養(yǎng)密度為50～100尾/m2(見圖2)。每日投喂鮭鱒魚配合飼料2次,投飼率為魚體質(zhì)量的1%～2%。

圖2 親魚培育

1.3 人工繁殖

1.3.1 親魚性成熟度檢查和催產(chǎn)

2020年3月23日,對培育的親魚進行成熟度檢查,發(fā)現(xiàn)已有1%雌魚達到性成熟,成熟雌魚的腹部松弛而柔軟,輕壓會有橙色或橘紅色卵粒流出;少部分雄魚有精液,輕壓其泄殖腔會有乳白色精液流出。催產(chǎn)藥物選用合劑:絨毛膜促性腺激素(HCG)、促黃體素釋放激素類似物(LHRH-A2)和地歐酮(DOM),每千克魚體質(zhì)量的用藥劑量分別為HCG 1 500 IU+LHRH-A25 μg+DOM 5 mg。催產(chǎn)前,先用0.1%的苯氧乙醇將親魚麻醉2～3 min,然后將其側(cè)臥,胸腔一次性注射。具體方法為:將3種催產(chǎn)藥物按設(shè)計劑量溶于生理鹽水中,雌魚每千克魚體質(zhì)量注射0.1 mL,雄魚減半。試驗共催產(chǎn)雌魚2.13萬尾,雄魚0.8萬尾。為方便采卵和授精,將催產(chǎn)后的雌親魚和雄親魚分別暫養(yǎng)在不同的魚池中,暫養(yǎng)條件和日常管理與親魚培育階段一致。

1.3.2 人工授精

2020年3月30日,對已注射催產(chǎn)藥物的親魚進行熟度檢查,將成熟的雌親魚移入孵化車間,再按雌雄數(shù)量比3∶1挑選成熟的雄魚。在采卵和采精前,先配制等滲液,即將2.4 g氯化鉀(分析純)、2.6 g氯化鈣(分析純)和90.4 g氯化鈉(分析純)充分溶解于10 L蒸餾水中。

采卵、采精時,將親魚先行麻醉,在避光、防水條件下,用擠腹采卵法將3尾雌魚的卵擠入干燥的采卵盆中,用等滲液清洗后,加入與卵體積等量的等滲液,攪拌5～10 s,隨后將1尾雄魚的精液擠入,再充分攪拌10～15 s,靜置5～10 min,即完成授精。對于尚未成熟的雌親魚,根據(jù)其腹部柔軟程度分成2類進行暫養(yǎng):成熟度較好的親魚每2 d檢查1次,成熟度較差的親魚每4 d檢查1次。本次試驗共使用雌親魚2.06萬尾,采卵率為96.7%,共采得魚卵3 711萬粒。

1.3.3 受精卵孵化

將受精卵放在規(guī)格2.80 m×0.52 m×0.22 m(長×寬×深)的玻璃鋼平列槽中進行孵化,其間注意避光、防震。每口玻璃鋼平列槽內(nèi)設(shè)有0.4 m×0.5 m×0.2 m(長×寬×深)的5口串聯(lián)小槽。為使孵化用水順次流經(jīng)每口小槽,小槽的阻水板及側(cè)面用長80 cm、寬5 cm、厚2 cm的海綿帶密封,設(shè)置出水管的高度為11～12 cm;將靜置的受精卵用清水反復(fù)漂洗4～5次后進行布卵,布卵密度為40 000～50 000粒/m2,孵化水的流量為1.5～2.0 L/min,孵化水溫為6～11 ℃,溶解氧不低于6 mg/L。

1.3.4 孵化管理

孵化期間,每天用18%的溴硝丙二醇溶液(質(zhì)量濃度0.35～0.40 g/L)消毒受精卵40～60 min,直至出苗。出苗后,水流量調(diào)整為3～4 L/min,每天旋水?dāng)噭影l(fā)眼卵5次,保證孵化槽內(nèi)水流暢通,沒有死角。經(jīng)常巡查孵化池,及時挑出死卵及卵皮,直至出苗結(jié)束。2020年4月23日—30日,試驗共出苗2 704萬尾,獲得上浮仔魚2 623萬尾(見圖3)。

圖3 鴨綠江茴魚上浮仔魚

1.3.5 稚魚培育

2020年5月1日,利用1.5 m2(規(guī)格2.80 m×0.52 m×0.22 m)的玻璃鋼水槽作為培育槽進行稚魚培育,仔魚平均體質(zhì)量為0.01 g,放養(yǎng)密度約為30 000尾/m2,培育池水深10～15 cm,培育水溫7～12 ℃,溶解氧不低于6 mg/L。仔魚投喂的餌料為鹵蟲無節(jié)幼體,投餌率在20%左右,每天投喂4次。每天早晨清理培育槽,每月消毒1次,方法是將培育槽的水位降至4～5 cm,用2%的食鹽水浸泡消毒30～40 min;如果需進行治療則連續(xù)使用3 d。至7月10日,共培育體質(zhì)量0.5 g的稚魚2 544萬尾(見圖4)。

圖4 鴨綠江茴魚稚魚培育

1.3.6 幼魚前期培育

2020年7月11日,在室外水泥池(面積20～40 m2)開展幼魚前期培育,培育水溫為7～9 ℃,水體溶解氧不低于6 mg/L。幼魚平均體質(zhì)量為0.5 g,放養(yǎng)密度約3 000尾/m2,養(yǎng)殖水深為0.3～0.5 m。培育期間投喂海溞和“升索”牌冷水魚配合飼料,將冰凍海溞掛袋投喂,每天上、下午各1次,投飼率為10%;配合飼料每天投喂8次,上、下午各4次,投飼率為5%。隨著幼魚的生長,海溞個體大小和飼料粒徑也隨之調(diào)整,逐漸增大,以保證餌料的適口性。當(dāng)幼魚體質(zhì)量達1 g左右,調(diào)整放養(yǎng)密度為1 000尾/m2,養(yǎng)殖水深加至0.6～0.7 m,并開始投喂鮭鱒魚配合飼料,每天投喂6次,投飼率為10%。及時清理刷洗進出水口的攔魚柵和魚池,每月用10%的聚維酮碘溶液按5 mL/m3的用量流水消毒1次。至12月15日,共培育體質(zhì)量3.0 g的幼魚2 379萬尾(見圖5)。

圖5 鴨綠江茴魚幼魚培育

2 結(jié)果

本試驗中,親魚培育成活率為95.0%。試驗共使用雌親魚2.06萬尾,共采卵3 711萬粒,采卵率為96.7%;共獲得受精卵3 210萬粒,受精率為86.5%。發(fā)眼積溫為110～121 ℃·d,共獲得發(fā)眼卵2 985萬粒,發(fā)眼率為93.0%。出苗積溫為175～221 ℃·d,共出苗2 704萬尾,孵化率為90.6%。仔魚上浮積溫235～242 ℃·d,共獲得上浮仔魚2 623萬尾。經(jīng)101 d培育,共獲得體質(zhì)量0.5 g的稚魚2 544萬尾,稚魚養(yǎng)殖成活率為97.0%;經(jīng)158 d培育,共獲得體質(zhì)量3.0 g的幼魚2 379萬尾,幼魚培育成活率為93.5%。

3 討論

鴨綠江茴魚鱗片較大,在進行性成熟度檢查和采卵操作時其鱗片易脫落,從而造成魚體損傷。受傷的親魚易感染水霉菌而死亡,而在麻醉后進行檢查和采卵等操作則能最大限度地避免魚體受傷。每次在進行親魚檢查時,將尚未達到性成熟要求的雌魚按其成熟度分開暫養(yǎng),可減少之后的檢查次數(shù),減輕對雌親魚的傷害,提高親魚培育成活率。本試驗人工繁殖親魚的成活率為95.0%,與采取麻醉后進行檢查、采卵,以及按不同的性成熟度將親魚分級暫養(yǎng)的措施是分不開的。

在進行人工繁殖采卵時,難免會出現(xiàn)破卵,破卵所釋放出的卵黃蛋白遇水即凝固,會造成精子凝聚從而失去活力。但卵黃蛋白能溶解于等滲液中,且在等滲液中的精子可以減少滲透調(diào)節(jié)耗能,從而延長壽命和活力。此外,體液對受精率也有影響[3],采用等滲液洗卵,能洗去體液,同時,采取浸卵授精可以溶解破卵的卵黃蛋白,提高受精率。本試驗人工繁殖的受精率為86.5%,與以前的受精率66%[2]相比,效果顯著。

鴨綠江茴魚稚魚在體長3 cm前不攝食配合飼料,因此,選擇何種動物餌料將直接影響其養(yǎng)殖成活率。本試驗以營養(yǎng)價值較高的鹵蟲無節(jié)幼體活體作為餌料[4-5],使仔魚“開口”順利,并能滿足仔稚魚的營養(yǎng)需求,因而稚魚培育成活率達到了97.0%。在幼魚培育早期,選擇冰凍海溞和配合飼料相結(jié)合的方法,將冰凍海溞懸掛在進水口上方,使其在逐漸融化的過程中動態(tài)滴落,有利于鴨綠江茴魚幼魚的馴化和攝食,再結(jié)合投喂配合飼料,不僅促進了其轉(zhuǎn)食,同時能保證營養(yǎng)的均衡性,因此本試驗鴨綠江茴魚幼魚生長良好,獲得了高達93.5%的幼魚培育成活率。

本試驗首次實現(xiàn)了鴨綠江茴魚全人工繁育,結(jié)束了吉林省鴨綠江茴魚養(yǎng)殖依靠采捕野生親本進行人工繁育的歷史,解決了養(yǎng)殖苗種自給問題,建立了池塘養(yǎng)殖鴨綠江茴魚的高效模式,有助于鴨綠江茴魚種質(zhì)資源保護和吉林省冷水魚產(chǎn)業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展。