董淑紅，張海濤，陳永亮，呂顏枝，薛 忠

（徐州生物工程職業(yè)技術學院，江蘇徐州 221006）

為做好動物源性食品安全工作，遏制動物源細菌耐藥等問題，我國在2020 年正式實施飼料禁抗。植物精油是一類從植物中提取的次生代謝物質，主要成分是單萜和倍半萜類化合物，以及含有多種生物活性化學物質的苯丙類化合物，具有可揮發(fā)和抗水解（毛紅霞等，2012），無毒、無副作用、無耐藥性、無殘留等特點，是一種具有發(fā)展前景的天然飼料添加劑（薛萍，2020）。茶樹精油是植物體內的次生代謝產物，儲存于分泌細胞中，具有揮發(fā)性和芳香氣味，有很強的抑菌和殺菌能力（周洪彬等，2020）。本試驗研究日糧中茶樹精油對白羽肉雞免疫功能和血清生化指標的影響，旨為肉雞安全健康養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 試驗用茶樹精油原液，由天津中澳嘉喜諾生物科技有限公司提供，主要成分為35% 4- 松油醇。試驗肉仔雞購由徐州益客食品有限公司提供。

1.2 試驗設計與飼養(yǎng)管理 試驗將200 只1 日齡體重相近、健康的愛拔益加白羽肉雞隨機分為4 組，每組5 個重復，每個重復10 只雞。4 個處理組分別飼喂基礎日糧（對照組），基礎日糧+200 mg/kg（試驗Ⅰ組）、500 mg/kg（試驗Ⅱ組）和800 mg/kg（試驗Ⅲ組）的茶樹精油，試驗分為1 ～21 d 和22 ～42 d 兩個階段，共42 d?；A日糧組成及營養(yǎng)水平見表1，茶樹精油先添加于少量飼料中，攪拌均勻后再逐漸按比例添加，每天現拌現喂。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平（干物質基礎）

試驗于2022 年9 ～11 月在徐州生物工程職業(yè)技術學院動物工程學院進行，試驗雞使用立式雞籠飼養(yǎng)，育雛前雞舍徹底清掃、沖刷和消毒，控制舍內溫濕度，自然采光和人工照明相結合，雞群自由采食和飲水，按常規(guī)程序進行免疫，每天詳細記錄雞只行為及飼料消耗等情況。

1.3 測定指標和方法

1.3.1 免疫器官指數 21 和42 日齡時，每組隨機抽取體重相近且健康的肉雞10 只，空腹屠宰后取出脾臟、胸腺和法氏囊，按照公式計算各免疫器官與體重之間的相對重量。

免疫器官指數（g/kg）=免疫器官鮮重（g）/ 活體重（kg）。

1.3.2 免疫球蛋白和溶菌酶 42 日齡，每組隨機抽取體重相近且健康的肉雞10 只，翅靜脈采血5 mL，12000 轉/min 離心1 min 分離血清，后置于-20℃冰箱中保存，采用酶聯免疫吸附法測定免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）和溶菌酶含量，試劑盒購自南京建成生物工程研究所，各指標由徐州市銅山區(qū)家禽技術指導站協(xié)助完成。

1.3.3 血清生化指標 42 日齡時翅靜脈采血，離心獲得血清后，采用全自動生化分析儀檢測血清中的總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮、堿性磷酸酶、鈣、無機磷、甘油三酯和膽固醇的含量。

1.4 數據統(tǒng)計與分析 試驗數據采用SPSS 20.0軟件進行單因子方差分析，采用Duncan's 法進行多重比較，試驗結果用“平均值± 標準誤”表示，P＜0.05 表示組間差異顯著。

2 結果與分析

2.1 日糧中添加茶樹精油對白羽肉雞免疫器官指數的影響 由表2 可知，21 日齡時，各試驗組肉雞的免疫器官指數與對照組相比差異不顯著（P＞0.05）；試驗Ⅰ～Ⅲ組42 日齡時肉雞法氏囊指數顯著高于對照組（P＜0.05），日糧中添加茶樹精油對肉雞的脾臟指數和胸腺指數差異不顯著（P＞0.05）。

表2 日糧中添加茶樹精油對白羽肉雞免疫器官指數的影響g/kg

2.2 日糧中添加茶樹精油對白羽肉雞免疫球蛋白和溶菌酶的影響 由表3 可知，在42 日齡時，試驗Ⅱ組IgA 的含量比對照組顯著提高1.03mg/mL（P＜0.05），試驗Ⅱ組IgG 含量顯著高于對照組和試驗Ⅰ組（P＜0.05），與試驗Ⅲ組差異不顯著（P＞0.05）；對照組和試驗各組的IgM 含量和溶菌酶活力差異均不顯著（P＞0.05）。

表3 茶樹精油對42d 白羽肉雞免疫球蛋白和溶菌酶的影響

2.3 日糧中添加茶樹精油對白羽肉雞血清生化指標的影響 由表4 可知，各組肉雞血清總蛋白、白蛋白、總膽紅素、無機磷、甘油三酯和膽固醇的含量均差異不顯著（P＞0.05）；試驗Ⅰ組球蛋白含量顯著高于試驗Ⅱ和Ⅲ組（P＜0.05），與對照組無顯著差異（P＞0.05）；試驗Ⅱ組尿素氮的含量顯著低于對照組（P＜0.05）；試驗各組的堿性磷酸酶活性和對照組相比均有提高，其中試驗Ⅱ組的堿性磷酸酶活性顯著高于對照組（P＜0.05）；試驗各組的鈣含量均高于對照組，其中試驗Ⅱ組與對照組相比差異顯著（P＜0.05）。

表4 日糧中添加茶樹精油對白羽肉雞血清生化指標的影響

3 討論

3.1 飼料中添加茶樹精油對白羽肉雞免疫器官指數的影響 肉雞免疫器官的發(fā)育指數是評價肉雞免疫器官發(fā)育好壞的重要參考，是宏觀觀測肉雞免疫功能的重要指標（王亞鍇，2015）。研究表明，肉仔雞胸腺和法氏囊指數在18 日齡時達到最大，脾臟在35 日齡達到最大（王錫樂等，2004）。Amad 等（2011）研究發(fā)現，日糧中添加植物精油可提高肉仔雞脾臟、腎臟、心臟指數。肉雞日糧中添加茶樹精油能促進肉雞胸腺、法氏囊、脾臟的發(fā)育，但不同飼喂周期其促進作用存在差異。

3.2 茶樹精油對白羽肉雞免疫球蛋白和溶菌酶的影響 本研究發(fā)現，不同水平的茶樹精油能提高白羽肉雞42 日齡時血清中IgA、IgG、IgM 含量，增強體液免疫機能。Mathlouthi 等（2012）研究表明，牛至精油對肉雞42 d 血清IgG 無顯著影響，但有提高趨勢。朱曉磊（2014）研究發(fā)現，在麻花雞日糧中添加0.25 mg/kg 百里香精油（主要成分為香荊芥酚、百里酚等）可顯著提高肉雞血清IgA、IgG 和IgM 含量。周美玲等（2014）研究發(fā)現，與對照組相比，紫蘇精油可以顯著提高小鼠免疫血清中溶菌酶含量，說明植物精油可以提高機體的免疫水平，增強肉雞的血清殺菌能力。

3.3 茶樹精油對白羽肉雞血清生化指標的影響 血清生化指標是檢驗機體生理機能的重要參照，對臨床診斷具有重要意義（楊恒偉等，2010）。研究表明，日糧中添加適量的百里香精油可顯著提高麻花雞前期血清中總蛋白和球蛋白含量（朱曉磊，2014），在本試驗中，各試驗組的總蛋白與白蛋白含量均有增加趨勢。孫海濤等（2018）研究發(fā)現，牛至油能顯著降低血清尿素氮含量，本試驗結果為尿素氮含量在添加油茶樹精油后有降低，但無顯著降低趨勢。膽紅素是肝臟代謝的重要物質，如果肝細胞功能障礙會導致血液中的膽紅素升高（夏夢芳，2017），本試驗在日糧中添加茶樹精油后，試驗組膽紅素含量均低于對照組。堿性磷酸酶由成骨細胞和肝膽合成分泌，能反映骨組織的新陳代謝情況（張勇等，2016），在本試驗中，與對照組相比，其他各組血清堿性磷酸酶的活性均有提高，說明在適當劑量下使用茶樹精油對肉雞骨骼發(fā)育有一定作用。

4 結論

茶樹精油能增強肉雞免疫能力，提高血清中白蛋白與總蛋白的含量，增強血清堿性磷酸酶活性，綜合試驗結果，茶樹精油在肉雞日糧中適宜添加量為500 mg/kg，可為肉雞應用提供參考。