歐志杰，葉成凱，陳昆平，張德茂，邊芳芳，蘇曉盈

（廣東茂名農(nóng)林科技職業(yè)學院，廣東 茂名 525000）

本文以茂名市的漁業(yè)資源為基礎，在實驗室條件下對廣東茂名重要海蝦品種斑節(jié)對蝦進行無水低溫長途運輸初步探究，實驗結果可為斑節(jié)對蝦無水?；铋L途運輸?shù)倪M一步探究和實際應用提供一定的參考。

一、材料與方法

1.實驗用蝦

斑節(jié)對蝦從市場購買，購買時挑選體質健壯、無病無傷、游動活潑的個體(避免購買軟殼蝦或正蛻殼的對蝦)作為實驗用蝦。斑節(jié)對蝦平均體長(13.5±0.5)厘米，平均體重(31.5±1.5)克。

2.儀器設備

醫(yī)用低溫冰箱、冰柜；邁瑞MR-96A 酶標儀；帆布池(1 米×1 米×0.6 米)；保溫泡沫箱(外：34 厘米×22 厘米×18 厘米，內：30 厘米×18 厘米×14.5 厘米，壁厚2 厘米)；泡沫緩沖隔板；木屑(使用前在-15℃的低溫冰箱冷藏過夜)；水盆。

3.實驗方法

(1)暫養(yǎng)。斑節(jié)對蝦放在用海水晶勾兌成濃度為15的淡鹽水中暫養(yǎng)2天。

(2)生態(tài)冰溫的確定。將挑選好的鮮活斑節(jié)對蝦放在水盆中，充氧，放入碎冰塊，慢慢將水溫從常溫分別降至6、8、10、12、14℃低溫下，剛開始按3～4℃/時的梯度從常溫降到14℃，此后按1～2℃/時的梯度降至預定溫度。觀察并記錄其行為變化和蘇醒時間。休眠的判斷標準為斑節(jié)對蝦被放進低溫清水中到蝦體失去平衡，蘇醒時間為從失去平衡到放入清水后能看到正常游動的時間。

(3)無水保活運輸模擬。將鮮活斑節(jié)對蝦隨機分為5組，每組設3個平行。放入對應生態(tài)冰溫的低溫清水中，使其完全進入休眠狀態(tài)。然后先將一層木屑放入泡沫箱中墊底，把休眠狀態(tài)的蝦放入泡沫盒內(密度以將箱底剛好鋪滿為準)，蝦上再覆蓋一層木屑，每層填充木屑約2 厘米，依次操作，最后再蓋上木屑，以使箱內的蝦不能活動為止。為維持箱體溫度恒定，箱內還要加入相同數(shù)量的完好冰袋，并以泡沫隔板緩沖，避免冰塊直接接觸導致蝦體長久凍傷死亡。最后將泡沫箱蓋內側封上冰袋，然后將蓋蓋嚴，用膠帶封住箱縫，分別置于10、12、14、16℃和常溫5個溫度梯度中模擬運輸2、4、6、8、10 小時，待達到預定運輸時間，取出20尾斑節(jié)對蝦放入充氧清水(水溫同運輸溫度)中，讓水溫自然上升，計算斑節(jié)對蝦的存活率。最后實驗數(shù)據(jù)用SPSS 19.0軟件進行差異顯著性檢驗，顯著性水平為0.05。

(4)無水低溫運輸脅迫下氧化產(chǎn)物和抗氧化酶活性的測定。斑節(jié)對蝦在生態(tài)冰溫的冰水中處理后，進入休眠狀態(tài)，然后在10℃的溫度下模擬運輸。分別在處理前鮮活時、冷處理后，及運輸2、4、6、8、10小時取斑節(jié)對蝦的肝胰臟，測定其氧化產(chǎn)物丙二醛的含量以及超氧化物歧化酶的活性。所測定的數(shù)據(jù)均表示為平均值±標準差(SD)，每組有3個平行，進行差異顯著性檢驗。

二、結果與分析

1.生態(tài)冰溫的確定

斑節(jié)對蝦放入不同溫度的冷水中表現(xiàn)出來的狀態(tài)不盡相同，放在6℃和8℃冷水中的斑節(jié)對蝦基本死亡無法蘇醒過來；放在10℃和12℃冷水中的斑節(jié)對蝦大部分個體能從休眠狀態(tài)中蘇醒過來，且放在10℃冷水中的斑節(jié)對蝦的蘇醒時間要比12℃冷水中的時間要短。而放在14℃冷水中的斑節(jié)對蝦，大部分個體始終無法進入休眠狀態(tài)。因此本文認為10℃是斑節(jié)對蝦最佳的生態(tài)冰溫。

2.模擬運輸斑節(jié)對蝦的存活率

結果詳見表1。

表1 模擬運輸斑節(jié)對蝦的存活率%

由表1可知，以木屑作為運輸?shù)奶畛浣橘|，相同的運輸時間，如果運輸溫度越接近生態(tài)冰溫，斑節(jié)對蝦的存活率會更高。此外，相同的運輸溫度下，運輸時間越長，斑節(jié)對蝦的存活率越低。在10℃的運輸條件下、運輸時間6小時以內，斑節(jié)對蝦存活率均能超過80%，然而運輸8 小時時，斑節(jié)對蝦的存活率出現(xiàn)明顯下降，不足60%。

3.在無水低溫運輸脅迫下氧化產(chǎn)物丙二醛含量的變化

丙二醛含量的變化見圖1，由結果可知，斑節(jié)對蝦在冷處理后，其體內肝胰臟的丙二醛含量相比于鮮活時出現(xiàn)了增加，但兩者差異不顯著(P≥0.05)。在低溫運輸下，斑節(jié)對蝦肝胰臟的丙二醛含量顯著增加，在運輸6小時以內，隨著運輸時間的增加，其體內的丙二醛含量也逐漸增加，直至6 小時時出現(xiàn)了最高值，達到264 納摩爾/毫克蛋白。而隨著運輸時間的進一步加長，斑節(jié)對蝦體內的丙二醛水平出現(xiàn)了顯著的下降，在運輸10 小時時只有156納摩爾/毫克蛋白。

圖1 斑節(jié)對蝦無水低溫運輸脅迫下肝胰臟丙二醛含量的變化

4.在無水低溫運輸脅迫下超氧化物歧化酶活性的變化

超氧化物歧化酶活性的變化見圖2，由結果可知，斑節(jié)對蝦在冷處理后，其體內肝胰臟的超氧化物歧化酶活性相比于鮮活時出現(xiàn)了顯著增加(P＜0.05)。在運輸6 小時以內，隨著運輸時間的增加，其體內的超氧化物歧化酶活性也顯著增加，在運輸6小時時出現(xiàn)了最大值，達到473活力單位/毫克蛋白。而隨著運輸時間的加長，斑節(jié)對蝦體內的超氧化物歧化酶活性也出現(xiàn)了顯著的下降，在運輸10 小時時只有314 活力單位/毫克蛋白。

圖2 斑節(jié)對蝦無水低溫脅迫下肝胰臟超氧化物歧化酶活性的變化

三、討論

通過試驗可發(fā)現(xiàn)，相同運輸時間下，運輸溫度越高，斑節(jié)對蝦存活率越低。分析其原因，可能是環(huán)境溫度高，導致斑節(jié)對蝦的活動能力增強，進而引起新陳代謝和呼吸耗氧的增高，使存活率降低。此外，相同的運輸時間下，斑節(jié)對蝦如果在10℃和12℃進行運輸，存活率會顯著高于其他設定的溫度。出現(xiàn)該結果的原因可能是10℃和12℃處在斑節(jié)對蝦的生態(tài)冰溫區(qū)內，可以使其處于休眠狀態(tài)，從而減少其新陳代謝。除了運輸溫度對斑節(jié)對蝦的存活產(chǎn)生顯著影響外，運輸時間也非常重要。相同的運輸溫度下，隨著運輸時間的加長，斑節(jié)對蝦的存活率也會隨之降低。

通過試驗測定可知，斑節(jié)對蝦在10℃的無水低溫運輸脅迫下，其肝胰臟的丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性也發(fā)生了變化，在運輸6 小時以內，隨著運輸時間的增加，體內的丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性也逐漸增加，直至6小時時出現(xiàn)了最高值，然而隨著運輸時間的進一步加長，斑節(jié)對蝦體內的丙二醛水平和超氧化物歧化酶活性出現(xiàn)了顯著下降。這可能是由于隨著運輸時間的推移，斑節(jié)對蝦受到的環(huán)境脅迫應激也越強，產(chǎn)生的氧化產(chǎn)物也更多，也引起抗氧化系統(tǒng)的增強。然而，隨著運輸時間的進一步延長，斑節(jié)對蝦對于環(huán)境也逐漸適應，因此，氧化產(chǎn)物和抗氧化酶的活性出現(xiàn)顯著的下降。

四、小結

本文在實驗室條件下模擬斑節(jié)對蝦在無水低溫條件下進行長途運輸，發(fā)現(xiàn)斑節(jié)對蝦可在10℃的低溫下進入休眠狀態(tài)，然后以木屑作為運輸?shù)奶畛浣橘|，在10℃的運輸溫度下運輸6 小時以內，可保持較高的存活率。