侯宮明珠 邱國(guó)斌 陳朝陽(yáng) 陳新華 李彥芳 屈勇剛*

（1 石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子 832003；2 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第四師畜牧獸醫(yī)工作站，新疆可克達(dá)拉 835216）

口蹄疫（Foot and Mouth Disease,FMD）是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease virus,FMDV）引起的一種傳染性強(qiáng)、傳播迅速的人畜共患傳染病。FMDV 主要侵害豬、牛、羊、鹿等偶蹄類(lèi)動(dòng)物，其中豬的易感性較高，尤其仔豬，其死亡率可達(dá)100.00%。口蹄疫在豬群中一年四季均可發(fā)生[1]，且容易形成大規(guī)模發(fā)病，該病不僅會(huì)給養(yǎng)豬企業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失，還危害公共衛(wèi)生安全。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病，我國(guó)將其歸為一類(lèi)動(dòng)物疫病[2]。

對(duì)易感動(dòng)物進(jìn)行免疫接種是防控此病最有效的措施，目前，我國(guó)采取強(qiáng)制免疫政策來(lái)防控FMD，免疫抗體水平監(jiān)測(cè)是了解疫苗免疫效果最有效的方法。液相阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Liquid-phase Blocking Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,LPB-ELISA） 是目前用于評(píng)價(jià)FMD 免疫水平普遍采用的試驗(yàn)技術(shù)，其精確性、穩(wěn)定性高于正向間接血凝試驗(yàn)（PHA），且重復(fù)性?xún)?yōu)于病毒中和試驗(yàn)（VNT）[3]。本試驗(yàn)采用O 型口蹄疫病毒LPB-ELISA 試劑盒對(duì)新疆部分地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)中的豬血清樣品進(jìn)行抗體水平檢測(cè)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，可為新疆地區(qū)豬場(chǎng)O 型口蹄疫的防控提供依據(jù)，以減少口蹄疫在豬場(chǎng)的發(fā)生，保障豬群安全。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)樣品

2021 年1—12 月期間，從新疆3 個(gè)地區(qū)7 個(gè)規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)隨機(jī)采集豬全血樣品，無(wú)菌分離血清1 mL 放入滅菌離心管中，共獲得353 份血清樣品。

1.2 試驗(yàn)材料和儀器

口蹄疫O 型抗體液相阻斷ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所；全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)賽默飛世爾科技有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理

豬全血樣品在室溫下靜置2～3 h，待析出清亮血清后，收集1 mL 至無(wú)菌EP 管中，依次編號(hào)。血清可直接檢測(cè)或置于4℃保存待檢。

1.3.2 LPB-ELISA 檢測(cè)法

檢測(cè)盒中所有試劑需放置室溫后再使用，使用前輕微震蕩混勻。嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3.3 結(jié)果判定

臨界值的計(jì)算：4 個(gè)病毒抗原的OD450nm值，棄去最大值和最小值，剩余數(shù)值的平均值再除以2。當(dāng)樣品抗體效價(jià)的OD450nm值＞臨界值時(shí)判定為陰性；當(dāng)OD450nm值≤臨界值時(shí)判定為陽(yáng)性。

1.3.4 數(shù)據(jù)分析

使用Excel 軟件和SPSS 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同地區(qū)豬O 型FMDV 抗體檢測(cè)結(jié)果

不同地區(qū)豬O 型FMDV 抗體水平如表1 所示。3 個(gè)地區(qū)O 型FMDV 抗體平均陽(yáng)性率為76.77%（271/353），達(dá)到國(guó)家70.00%的規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。3 個(gè)地區(qū)的FMDV 陽(yáng)性率均高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，分別為77.97%、78.72%和71.43%。其中3 號(hào)地區(qū)的抗體平均OD 值最高，為0.73；2 號(hào)地區(qū)的平均OD 值最低，為0.58；各地區(qū)之間的平均OD 值差異不顯著（P＞0.05）。

表1 不同地區(qū)豬O 型FMDV 抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同規(guī)?；i場(chǎng)O 型FMDV 抗體檢測(cè)結(jié)果

不同規(guī)?；i場(chǎng)O 型FMDV 抗體水平如表2 所示。7 個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)O 型FMDV 抗體平均陽(yáng)性率為76.77%（271/353），達(dá)到國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。在7 個(gè)豬場(chǎng)中，有6個(gè)豬場(chǎng)的FMDV 陽(yáng)性率高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，分別為A、C、D、E、F、G 豬場(chǎng),其抗體陽(yáng)性率分別為72.07%、70.45%、71.43%、91.80%、85.00%和100.00%；只有B 豬場(chǎng)的FMDV 陽(yáng)性率為62.96%，低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（70%）。B 場(chǎng)的平均OD 值最高，為0.94，G 場(chǎng)的平均OD 值最低，為0.09；B 場(chǎng)與E、F、G 場(chǎng)之間的差異顯著（P＜0.05），與A、C、D 場(chǎng)差異均不顯著（P＞0.05）。

表2 不同規(guī)模化豬場(chǎng)O 型FMDV 抗體檢測(cè)結(jié)果

3 討論與分析

口蹄疫的主要發(fā)生區(qū)域?yàn)榉侵?、中東、亞洲及南美洲部分地區(qū)[5]。在口蹄疫病毒的7 個(gè)血清型中，O 型和A 型是豬口蹄疫常見(jiàn)的血清型，其中O 型口蹄疫病毒的發(fā)病率最高[6]。目前，我國(guó)規(guī)定豬場(chǎng)每年需要接種2 次口蹄疫滅活疫苗，注射密度不低于80%，并監(jiān)測(cè)口蹄疫病毒抗體水平，當(dāng)口蹄疫病毒抗體水平低于70%時(shí)，需要及時(shí)進(jìn)行加強(qiáng)免疫[7]?？梢?jiàn)通過(guò)檢測(cè)口蹄疫抗體水平評(píng)估養(yǎng)豬場(chǎng)的免疫情況尤為重要[8]。養(yǎng)豬場(chǎng)應(yīng)嚴(yán)格按照國(guó)家相關(guān)規(guī)定開(kāi)展口蹄疫防疫工作，并定期監(jiān)測(cè)口蹄疫疫苗免疫效果，這是保障豬場(chǎng)健康生產(chǎn)的有效方法之一。

常軍帥等[9]曾對(duì)2019—2020 年新疆部分地區(qū)豬O型口蹄疫病毒抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)這些地區(qū)口蹄疫病毒的平均陽(yáng)性率高達(dá)81.88%（339/414），明顯高于國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。趙陳霞等[10]對(duì)2011—2020 年新疆兵團(tuán)六師豬O 型口蹄疫病毒抗體水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)近10年內(nèi)的該地區(qū)豬群口蹄疫病毒抗體水平平均陽(yáng)性率為77.96%，高于國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)；從疫苗生產(chǎn)廠商、生豬生長(zhǎng)階段和存欄規(guī)模等不同因素進(jìn)行分析，豬O 型口蹄疫病毒抗體陽(yáng)性率均達(dá)到國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。張小玉等[11]對(duì)2020 年新疆9 個(gè)規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)的整體O 型口蹄疫病毒體水平進(jìn)行了監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)平均陽(yáng)性率為88.06%，也超過(guò)了國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，新疆3 個(gè)地區(qū)的口蹄疫病毒抗體水平陽(yáng)性率均高于國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)（70.00%）；在7 個(gè)豬場(chǎng)中，僅有B 場(chǎng)口蹄疫病毒抗體陽(yáng)性率為62.96%（17/27），低于國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，需及時(shí)加強(qiáng)免疫。試驗(yàn)結(jié)果表明，近些年新疆各養(yǎng)殖場(chǎng)豬O 型口蹄疫病毒抗體水平相對(duì)較高，口蹄疫疫苗的整體免疫效果較好。

雖然，近些年豬O 型口蹄疫防控工作取得較好成果，但仍不能掉以輕心?？茖W(xué)飼養(yǎng)也是防控口蹄疫不可或缺的重要環(huán)節(jié)。首先，養(yǎng)殖戶(hù)要定期對(duì)養(yǎng)殖區(qū)域進(jìn)行清掃，做好相應(yīng)的消毒工作，給豬群創(chuàng)造干凈的飼養(yǎng)環(huán)境。其次，要科學(xué)管理，在給豬只提供充足基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)的同時(shí)，保證微量元素和維生素的攝入，以提高豬的免疫能力[12]。最后，采取自繁自養(yǎng)的飼養(yǎng)模式，盡量減少引種。確需引種時(shí)，要確保引種地區(qū)不屬于疫區(qū)，種豬經(jīng)過(guò)屬地檢疫合格后方可引進(jìn)。引入種豬需要進(jìn)行30 d 的隔離飼養(yǎng)觀察，健康無(wú)疫后可以與豬群混群飼養(yǎng)。大規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)應(yīng)定期對(duì)豬群進(jìn)行抗體水平監(jiān)測(cè)[13]，根據(jù)每次的免疫效果不斷優(yōu)化免疫程序。研究發(fā)現(xiàn)，目前市面上的口蹄疫疫苗對(duì)豬群的保護(hù)效果都很高[14]，而且大規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)的免疫效果普遍高于散養(yǎng)戶(hù)[15,16]，中小養(yǎng)豬場(chǎng)需加強(qiáng)生物安全防控及免疫制度。

4 小結(jié)

通過(guò)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，新疆部分地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)FMD 免疫效果良好，豬群O 型口蹄疫病毒抗體水平高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。完善的生物安全措施和科學(xué)的飼養(yǎng)管理是防控豬口蹄疫發(fā)生的有效措施，各養(yǎng)殖場(chǎng)仍然需要繼續(xù)開(kāi)展防控工作，確保豬場(chǎng)健康生產(chǎn)，以此推動(dòng)新疆養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。