左大磊

西南林業(yè)大學(xué)，云南昆明 650224

云南穗花杉（Amentotaxus yunnanensisH. L. Li）隸屬于紅豆杉科，其原產(chǎn)地為云南、貴州等，在越南也有分布[1-2]。云南穗花杉為小型喬木，多生長(zhǎng)在石山、巖溶溝壑、巖縫中，高度可達(dá)15 m。花序可達(dá)25 cm，具有較強(qiáng)的側(cè)向分枝；葉片分為兩列，呈卵圓形或披針狀，也可呈狹長(zhǎng)的鐮刀狀，長(zhǎng)度為3.5～10.0 mm，前端鈍或變細(xì)，基部楔形或近似圓形，邊緣略微傾斜；上部為綠色，下部為中脈，寬度為1～2 mm，兩邊的氣孔帶干燥后呈棕色或淡黃白色，寬度為3～4 mm，寬度為綠色邊緣的1倍或略寬。雄性球形花序通常為4～6個(gè)花序，通常為10～15 cm。種皮為紫紅色，長(zhǎng)2.2～3.0 cm，直徑1.4 cm，頂部有一小尖，中間留有一小片。開(kāi)花時(shí)間為4月，種子在10月成熟[3]。云南穗花杉木在《二級(jí)瀕危物種名錄》中被列入一級(jí)瀕危物種，木材紋理均勻，色澤艷麗，紋理細(xì)致；易加工，抗磨損，可以制作雕塑和小型手工業(yè)，其種子可食用也可榨油，云南穗花杉外形優(yōu)美，葉片翠綠，背面有亮白色的氣孔，是一種極好的觀賞植物，可以發(fā)展成園林品種[4-5]。

目前云南穗花杉處于瀕臨滅絕的狀態(tài)，是一種十分珍稀的植物物種資源，云南穗花杉自然萌發(fā)率低，且果實(shí)鮮艷易被鳥(niǎo)獸啃食，進(jìn)行人工促進(jìn)繁殖研究和遷地保護(hù)十分必要，本研究就如何利用外援激素提高云南穗花杉萌發(fā)率開(kāi)展本實(shí)驗(yàn)。

1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地位于昌寧縣田園鎮(zhèn)七甲社區(qū)，處于云南西南部，氣候以亞熱帶季風(fēng)為主，地形從西北向東南逐漸降低，山壩和谷地縱橫交錯(cuò)，最高海拔達(dá)2 875.9 m，最低至608 m，山谷氣候差異明顯，年均降雨量為1 259 mm，無(wú)霜期長(zhǎng)達(dá)253 d。森林覆蓋率達(dá)45.2%，境內(nèi)崇山峻嶺，丘陵起伏，河流縱橫，試驗(yàn)苗圃距離昌寧縣城3 km，陽(yáng)光充足，地勢(shì)平坦，存在專門灌溉的自來(lái)水。

2 研究?jī)?nèi)容

本試驗(yàn)為云南穗花杉種子育苗試驗(yàn)，試驗(yàn)采用因素包括IAA、IBA、GA33種外源激素不同濃度組合，研究促進(jìn)穗花杉種子萌發(fā)的最佳措施，每個(gè)因素包括3個(gè)水平，根據(jù)因素水平設(shè)定，采用L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)開(kāi)展試驗(yàn)實(shí)施。扦插育苗實(shí)驗(yàn)設(shè)NAA、IBA、6-BA 3個(gè)因素的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，每個(gè)因素包括2個(gè)水平，采用L4（23）正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)。

3 研究方法

3.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)因素包括IAA（A）、IBA（B）、GA3（C）3個(gè)因素，每個(gè)因素包括3個(gè)水平（表1）。

表1 試驗(yàn)的因素水平表 g/L

根據(jù)因素水平設(shè)定，采用L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)開(kāi)展試驗(yàn)實(shí)施（表2）。

表2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)增加1個(gè)不用外源激素處理的對(duì)照，即組合10，共10個(gè)處理組合，每個(gè)組合用20粒種子，設(shè)置3個(gè)重復(fù)，共需要620粒種子。

3.2 試驗(yàn)實(shí)施

3.2.1 試驗(yàn)準(zhǔn)備 （1）溶液準(zhǔn)備。母液配制：1 g的分析純IAA、IBA和GA3分別溶入100 mL的90%乙醇，獲得10 g/L的母液?；旌先芤号渲疲憾ㄈ?.5 L的混合溶液，以處理組合1為例，計(jì)算蒸餾水和激素母液的需求量，配置結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 500 mL混合溶液的母液和蒸餾水配比一覽表 g/L

總?cè)莘eL=0.5 L，IAA的濃度為0.25 g/L，IBA的濃度為0.15 g/L，GA3的濃度為0.10 g/L

LIAA=500×0.25/10=12.5 mL

LIBA=500×0.15/10=7.5 mL

LGA3=500×0.10/10=5.0 mL

則需要蒸餾水L（蒸餾水）=500-12.5-7.5-5.0=475 mL

（2）種子準(zhǔn)備。挑選大小基本均勻、無(wú)霉變、種粒飽滿且經(jīng)過(guò)沙藏處理的種子，用塑料碗盛放，在盆上用記號(hào)筆做好記號(hào)。

（3）試劑準(zhǔn)備。按照表3配置IAA、IBA、GA3各個(gè)處理的混合液貼好標(biāo)簽備用。

（4）苗圃和苗床準(zhǔn)備。試驗(yàn)前2周清理苗圃雜草雜物并平整土壤，用棕紅壤裝規(guī)格為16×16的育苗袋，寬為15個(gè)育苗袋，長(zhǎng)為18個(gè)育苗袋，分為3排，各為1個(gè)重復(fù)。在播種試驗(yàn)前3 d用0.5%的高錳酸鉀對(duì)苗圃進(jìn)行消毒。

3.2.2 田間試驗(yàn) （1）播種。播種前將土壤澆透水，播種時(shí)以土壤將種子蓋全為準(zhǔn)。

（2）苗期管理。采用遮陽(yáng)網(wǎng)對(duì)苗圃進(jìn)行遮陽(yáng)處理，郁閉度保證在0.6～0.7之間，還要保證空氣流通，從而減少病害發(fā)生，加強(qiáng)對(duì)老鼠、害蟲等預(yù)防和驅(qū)趕。種子發(fā)芽期間要控溫保水，使用噴灌設(shè)施保持基質(zhì)濕度，翌年如果溫度過(guò)高還可以降低溫度保持濕潤(rùn)，鋤草要早要小，1周鋤草1次。

（3）指標(biāo)測(cè)定。試驗(yàn)于2022年4月播種，自漏土發(fā)芽起開(kāi)始統(tǒng)計(jì)為發(fā)芽，每周統(tǒng)計(jì)1次，直到2022年10月8日發(fā)芽率不再變化時(shí)完成出苗率的統(tǒng)計(jì)工作。

3.2.3 單因素方差分析 利用SPSS 19.0軟件進(jìn)行處理分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)，對(duì)云南穗花杉出苗數(shù)量進(jìn)行方差分析。

4 結(jié)果與分析

不同激素處理組合結(jié)果見(jiàn)表4、表5，通過(guò)顯著性檢驗(yàn)（表6）、方差齊性檢驗(yàn)（表7）得出出苗率在不同處理間存在顯著性差異（P＜0.05）。再通過(guò)事后多重比較分析（表8），不同處理間不存在顯著性差異（P＜0.05），說(shuō)明試驗(yàn)的總變異主要不來(lái)源于處理間的變異。結(jié)果表明：處理4出苗率最高為68.9%，顯著高于處理組合8、處理組合10，比處理組合8提高46.7%，比處理10提高40%。通過(guò)方差分析得知不同激素處理組合對(duì)云南穗花杉出苗率的影響顯著，從數(shù)據(jù)分析結(jié)果可以看到方差顯著性值為0.471（P＜0.05）。表明10個(gè)處理組間具有顯著性差異，各個(gè)處理的重復(fù)不具有顯著性差異，說(shuō)明不同濃度的外源激素處理種子造成的差異。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)比最有利于促進(jìn)云南穗花杉種子萌發(fā)為最優(yōu)處理組合為A2B1C2。

表4 試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

表5 顯著性檢驗(yàn)

表6 方差齊性檢驗(yàn)

表7 多重比較分析結(jié)果

5 結(jié)論與討論

5.1 結(jié)論

影響種子發(fā)芽的因素很多，有種皮障礙、種子休眠、抑制物存在、胚發(fā)芽完全等，IAA能顯著提高種子的萌發(fā)能力，IBA處理可在一定程度上加速林木種子的萌發(fā)，GA3可以喚醒種子的休眠，促進(jìn)植物的生長(zhǎng)和發(fā)芽，以及促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)、開(kāi)花和結(jié)果。三者存在一定的最佳比例，本試驗(yàn)中的組合4通過(guò)IAA（0.50 g/L）、IBA（0.15 g/L）、GA3（0.40 g/L）混合溶液浸泡云南穗花杉種子處理發(fā)芽率最高，本試驗(yàn)可以為云南穗花杉種群擴(kuò)繁提供重要理論基礎(chǔ)。

5.2 討論

該研究表明，云南穗花杉在不同激素處理?xiàng)l件下，種子發(fā)芽均可獲得促進(jìn)作用，在今后育苗工作可利用一定比例外源激素破除種皮障礙、種子休眠及其他因素，以提高種子萌發(fā)率。所考察的最佳激素比例處理組合為只考慮萌發(fā)率指標(biāo)所得，未考慮激素的成本問(wèn)題，未來(lái)可以根據(jù)該研究，進(jìn)一步改進(jìn)外源激素處理云南穗花杉的發(fā)芽試驗(yàn)，以期提出更為全面、更為精準(zhǔn)地提出育苗建議。