亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        尼可地爾鼻腔給藥制劑的處方前研究

        2023-11-03 04:21:34楊蕾彭俊文谷福根內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院呼和浩特010110內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院呼和浩特010050
        中南藥學(xué) 2023年10期
        關(guān)鍵詞:尼可地爾水相溶解度

        楊蕾,彭俊文,谷福根*(1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,呼和浩特 010110;.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院,呼和浩特 010050)

        尼可地爾是一種新型硝酸酯類化合物,同時(shí)也是一種鉀離子通道開放劑,通過雙重機(jī)制改善心肌缺血,可用于冠心病及各類心絞痛治療[1-2]。與傳統(tǒng)硝酸類抗心肌缺血藥相比,它具有療效確切、不良反應(yīng)少、耐受性好等特點(diǎn),是目前臨床抗心肌缺血首選藥物之一[3]。尼可地爾現(xiàn)上市劑型有口服片劑與注射劑。前者吸收起效緩慢、生物利用度低,不適用于心絞痛的緊急治療,后者屬于侵入性給藥,會(huì)給患者帶來一定痛苦,且需協(xié)助用藥,用藥依從性差,此外,給藥前需要配藥、消毒等操作,易延誤疾病的治療。鼻腔給藥具有給藥方便、吸收起效快、生物利用度高等特點(diǎn),作為快速治療重要手段,已成為部分鎮(zhèn)痛藥、退熱藥、癲癇與偏頭痛治療藥的理想給藥途徑而受到國內(nèi)外高度關(guān)注,也是目前制劑領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)[4-5]。另外,尼可地爾熔點(diǎn)低、使用劑量小,且相對(duì)分子量低,這些性質(zhì)均符合鼻腔給藥的基本要求。藥物溶解度、溶液化學(xué)穩(wěn)定性是制備溶液型鼻腔給藥必須要考慮的主要因素,而藥物油水分配系數(shù)的大小又與其經(jīng)鼻黏膜吸收難易程度密切相關(guān)[6]。鑒于尼可地爾在結(jié)構(gòu)上屬于具有硝酸酯側(cè)鏈的煙酰胺類化合物,故pH值可能對(duì)其溶液化學(xué)穩(wěn)定性、油水分配系數(shù)及溶解度有重要影響;此外,為進(jìn)一步改善藥物經(jīng)鼻黏膜吸收,鼻腔制劑處方中常需加入吸收促滲劑,因而有必要篩選尼可地爾經(jīng)鼻黏膜吸收的理想促滲劑?;谏鲜龇治?,本文將完成尼可地爾鼻腔給藥制劑的處方前研究工作,旨在為今后研制該藥物溶液型鼻腔給藥新制劑提供重要理論依據(jù)。

        1 材料

        1.1 儀器

        LC-20AT高效液相色譜儀(包括SPD-20A紫外-可見檢測(cè)器,日本島津公司);TP-6智能透皮試驗(yàn)儀(天津市鑫洲科技有限公司);PHS-3C型pH計(jì)(上海儀電科學(xué)儀器有限公司);AB265-S型電子分析天平(瑞士梅特勒·托利多公司);KQ5200E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);Arioso UP 900型超純水器(韓國Human公司);101型電熱鼓風(fēng)干燥箱(北京市永光明醫(yī)療儀器廠)。

        1.2 試藥

        尼可地爾對(duì)照品(純度:99.5%,批號(hào):k1710021,上海阿拉丁生化科技股份有限公司);HP-β-CD(純度:98%,山東新大精細(xì)化工有限公司);SBE-β-CD(純度:99%,山東新大生物科技有限公司);DM-β-CD(純度:98%,山東濱洲智源生物科技有限公司);正辛醇(AR,天津市化學(xué)試劑有限公司,批號(hào):20200401);生理鹽水(批號(hào):2104153404,石家莊四藥有限公司);水為雙蒸水,甲醇、乙腈均為色譜純,其余試劑均為分析純。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 尼可地爾含量測(cè)定方法建立

        2.1.1 色譜條件[7]色譜柱:InertSustain C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相:甲醇-水(48∶52);流速:1.0 mL·min-1;檢測(cè)波長:254 nm;柱溫:36℃;進(jìn)樣量:10 μL。

        2.1.2 專屬性試驗(yàn) 以50%甲醇溶液為溶劑,配制質(zhì)量濃度為80 μg·mL-1的尼可地爾溶液。取上述尼可地爾溶液適當(dāng)體積于10 mL具塞刻度試管中,分別以0.1 mol·L-1鹽酸溶液、0.01 mol·L-1氫氧化鈉溶液、0.5%過氧化氫溶液稀釋至刻度,搖勻,然后置于80℃恒溫條件下放置,分別于適當(dāng)時(shí)間取樣,進(jìn)樣分析,其中,以0.1 mol·L-1鹽酸溶液、0.01 mol·L-1氫氧化鈉溶液所制樣品,需在進(jìn)樣前以相同濃度堿或酸溶液進(jìn)行中和。結(jié)果見圖1,在該色譜條件下,尼可地爾與其降解產(chǎn)物能夠很好地分離,表明該分析方法專屬性強(qiáng);此外,尼可地爾溶液在酸性及堿性條件下均不穩(wěn)定,但在強(qiáng)氧化條件下較穩(wěn)定。

        2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取尼可地爾對(duì)照品適量,以50%甲醇溶液為溶劑,制得質(zhì)量濃度為500.0 μg·mL-1的尼可地爾儲(chǔ)備液。將上述尼可地爾儲(chǔ)備液,以50%甲醇稀釋不同倍數(shù),分別制得質(zhì)量濃度為 2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0 μg·mL-1的尼可地爾系列對(duì)照品溶液。進(jìn)樣分析,記錄藥物色譜峰面積。以尼可地爾質(zhì)量濃度(C,μg·mL-1)為橫坐標(biāo),峰面積(A)為縱坐標(biāo),求得回歸方程為:A=3255.5C-1713.7(r=0.9997),表明尼可地爾在2.5~80.0 μg·mL-1內(nèi)與峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

        2.1.4 精密度試驗(yàn) 分別取5.0、20.0、60.0 μg·mL-1的尼可地爾對(duì)照品溶液,日內(nèi)重復(fù)測(cè)定5次,連續(xù)測(cè)定5 d,計(jì)算方法的日內(nèi)及日間RSD值。結(jié)果該方法的日內(nèi)RSD在0.23%~0.63%,日間RSD在0.60%~1.6%(n=5),表明該方法的精密度良好。

        2.1.5 回收試驗(yàn) 配制5.0、20.0、60.0 μg·mL-1尼可地爾對(duì)照品溶液,每個(gè)濃度各5份,進(jìn)樣分析,記錄尼可地爾峰面積,并根據(jù)隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,計(jì)算方法的回收率。結(jié)果低、中、高濃度尼可地爾的回收率分別為103.12%、96.72%、98.52%,RSD分別為0.92%、0.67%、0.39%,表明該方法的準(zhǔn)確度較高。

        2.1.6 檢測(cè)限與定量限 將標(biāo)準(zhǔn)曲線下尼可地爾最低濃度對(duì)照品溶液逐步稀釋,以信噪比S/N=3時(shí),藥物濃度作為方法的檢測(cè)限,以S/N=10時(shí),藥物濃度作為方法的定量限。結(jié)果該方法的檢測(cè)限為0.05 μg·mL-1,定量限為0.15 μg·mL-1。

        2.2 尼可地爾溶液化學(xué)穩(wěn)定性研究

        按照《中國藥典》2020年版四部中“緩沖液”項(xiàng)下方法,分別配制pH值為2.0、4.5、6.0、7.0、8.0、10.0、12.0的系列緩沖液。

        精密稱取尼可地爾適量,加50%甲醇溶液溶解,制得質(zhì)量濃度為1000.0 μg·mL-1的尼可地爾儲(chǔ)備液。取尼可地爾儲(chǔ)備液,加蒸餾水稀釋,制得質(zhì)量濃度為80.0 μg·mL-1的尼可地爾溶液。取尼可地爾溶液1 mL置于10 mL試管中,分別加入上述不同pH值系列緩沖液至10 mL,搖勻,密封,于80℃恒溫條件下放置,分別于0、2、4、8 h取樣,放冷至室溫,進(jìn)樣分析,測(cè)定反應(yīng)液中尼可地爾的濃度并計(jì)算藥物降解百分率,結(jié)果見圖2。可見,尼可地爾溶液隨著介質(zhì)pH的增加,其降解百分率總體呈現(xiàn)上升趨勢(shì);且隨著加熱時(shí)間的延長,藥物的降解百分率也隨之增加。此外,在pH 2.0的強(qiáng)酸條件下藥物溶液的降解速度最慢,而pH值在4.5~8.0時(shí)藥物溶液的降解速度較pH 2.0時(shí)明顯增大,但在此pH值范圍內(nèi),不同pH值下藥物降解速度基本相似,而尼可地爾溶液在pH 10.0及以上強(qiáng)堿性條件下,其降解速度顯著加快,化學(xué)穩(wěn)定性最差,如在pH值為12時(shí),2 h內(nèi)藥物已基本降解完全。

        圖2 尼可地爾溶液在不同pH條件下的降解曲線(n=3)Fig 2 Degradation curves of nicorandil solution under different pH conditions(n=3)

        2.3 尼可地爾油水分配系數(shù)的測(cè)定

        2.3.1 油水平衡時(shí)間測(cè)定 配制pH值分別為2.0、4.5、6.0、7.0、8.0、10.0、12.0的系列緩沖液作為水相,以經(jīng)過水飽和的正辛醇作為油相。

        取質(zhì)量濃度為1000 μg·mL-1的尼可地爾儲(chǔ)備液,分別加入不同pH值水相進(jìn)行稀釋,制得質(zhì)量濃度為32 μg·mL-1的尼可地爾系列水相溶液。取尼可地爾水相溶液10 mL,置于具塞錐形瓶中,加入相同體積油相,密塞,于25℃恒溫振蕩器中振蕩,分別于0、20、40、60、120、180 min在水相中取樣,再用0.45 μm微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液,進(jìn)樣分析,測(cè)定水相中尼可地爾的濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見,當(dāng)恒溫振搖120 min時(shí),不同pH值水相中尼可地爾的濃度已達(dá)恒定,故將該藥物在油相、水相中分配平衡時(shí)間設(shè)為120 min。

        2.3.2 油水分配系數(shù)的測(cè)定 將不同pH值藥物水相溶液與相同體積油相混合,在25℃恒溫振蕩器中振蕩120 min后,在水相中取樣,同法處理后進(jìn)樣分析,測(cè)定不同pH值水相中藥物的濃度。根據(jù)公式:P=(C0-Cw)/Cw,計(jì)算不同pH下藥物的油水分配系數(shù)P。式中,C0是水相中藥物初始濃度,Cw是分配平衡后水相中藥物濃度。結(jié)果測(cè)得,尼可地爾在正辛醇-水中的P值為2.31,而藥物在正辛醇/不同pH值緩沖液中尼可地爾的P值變化,見圖3??梢?,尼可地爾的P值隨著pH值增大而呈波動(dòng)式增加,在pH值為6.0時(shí),P值出現(xiàn)一定程度下降,而后又逐漸增大。

        圖3 尼可地爾的P值隨pH變化的曲線(n=3)Fig 3 P change curve of nicorandil under various pHs(n=3)

        2.4 溶解度的考察[8]

        分別取適當(dāng)體積水、丙二醇、PEG400及pH值分別為2.0、4.5、6.0、8.0 磷酸鹽緩沖液,置于0.5 mL EP管中,均加入過量尼可地爾,超聲處理,觀察藥物溶解情況,直至藥物不再溶解。然后,將樣品置于25℃恒溫振蕩器中繼續(xù)振搖72 h,使藥物溶解達(dá)飽和狀態(tài)。將EP管以10 000 r·min-1離心10 min,取上清液以0.45 μm微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液以50%甲醇溶液稀釋適當(dāng)倍數(shù)后,進(jìn)樣分析,計(jì)算尼可地爾在不同溶劑中的溶解度,結(jié)果見表1??梢?,在pH值2.0~8.0內(nèi),尼可地爾的溶解度隨介質(zhì)pH的增加而總體呈減小趨勢(shì),而其在丙二醇中的溶解度與在水中的溶解度基本相似,在PEG400中的溶解度卻較小。

        表1 尼可地爾在不同溶劑中的平衡溶解度(n=3)Tab 1 Equilibrium solubility of nicorandil in different solvents(n=3)

        2.5 促滲劑的篩選

        以鼻腔給藥制劑中使用廣泛、安全性高的3種β-CD水溶性衍生物DM-β-CD、HP-β-CD、SBE-β-CD為候選促滲劑[9],篩選尼可地爾鼻用制劑的最佳促滲劑。

        取新宰殺羊鼻黏膜,采用Franz立式擴(kuò)散池法,完成藥物滲透性試驗(yàn)。試驗(yàn)時(shí),將鼻黏膜剪成適宜大小,固定于擴(kuò)散池接口處,黏膜側(cè)朝向供給池,以生理鹽水為接收液,在供給池內(nèi)加0.1%尼可地爾供試液1.0 mL,內(nèi)含5%β-CD水溶性衍生物,水浴溫度設(shè)為34℃,攪拌速率為300 r·min-1,分別于20、40、60、90、120、180 min,從接收池中取樣1.0 mL,并立即補(bǔ)充同體積等溫生理鹽水。按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件,測(cè)定樣品中尼可地爾的濃度。樣品中尼可地爾的定量方程為:A=2883.9C+2199(r=0.9999),尼可地爾在0.2~80.0 μg·mL-1與峰面積呈良好線性關(guān)系。方法的日內(nèi)精密度在0.18%~0.72%,日間精密度在0.41%~2.3%(n=5)。

        依據(jù)藥物累積滲透量(Qn,μg·cm-2)計(jì)算公式[10]:計(jì)算不同時(shí)間尼可地爾的累積滲透量。式中,V0為接收液體積,Cn為第n個(gè)取樣點(diǎn)的藥物濃度,Vi為第i次取樣體積,Ci為第i次取樣接收液中藥物濃度,A為有效透皮面積,以Qn對(duì)時(shí)間t作圖,繪制尼可地爾經(jīng)鼻黏膜的滲透曲線,結(jié)果見圖4。可見,5%SBE-β-CD對(duì)尼可地爾經(jīng)鼻黏膜吸收的促滲作用最強(qiáng),5%HP-β-CD的促滲作用次之,而5%DM-β-CD卻抑制藥物的鼻黏膜滲透。

        圖4 不同促滲劑對(duì)尼可地爾經(jīng)離體羊鼻黏膜滲透量的影響(n=3)Fig 4 Effect of different absorption enhancers on the permeation amount of nicorandil via in vitro sheep nasal mucosa(n=3)

        因此,確定了SBE-β-CD為最佳促滲劑,進(jìn)一步考察其濃度對(duì)促滲效果的影響,方法同前。分別考察了1.0%、3.0%、5.0%、7.0% SBE-β-CD對(duì)尼可地爾的促滲作用,結(jié)果見圖5??梢姡?dāng)SBE-β-CD 濃度較低時(shí),隨著濃度的增加,其促滲作用隨之增加,當(dāng)濃度為5.0%時(shí),其促滲效果達(dá)到最大,此后,隨著濃度增加,其促滲作用下降。因此,5.0%SBE-β-CD作為尼可地爾鼻腔給藥制劑的最佳促滲劑。

        圖5 SBE-β-CD濃度對(duì)尼可地爾經(jīng)離體羊鼻黏膜滲透的影響(n=3)Fig 5 Effect of SBE-β-CD concentrations on permeation amount of nicorandil via in vitro sheep nasal mucosa(n=3)

        3 討論

        本文首先建立了HPLC法測(cè)定尼可地爾含量的方法,該方法專屬性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單、線性范圍大、精密度與準(zhǔn)確度良好。因尼可地爾結(jié)構(gòu)上屬于硝酸酯類化合物,具有易水解的特性,其溶液化學(xué)穩(wěn)定性易受介質(zhì)pH的影響。尼可地爾溶液穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示,藥物溶液在強(qiáng)酸性pH條件下穩(wěn)定性最好,在弱酸性與中性pH下穩(wěn)定性次之,而在強(qiáng)堿性pH下穩(wěn)定性最差,這是由于在堿性條件下,尼可地爾易發(fā)生專屬性堿催化水解反應(yīng),生成降解產(chǎn)物N-(2-羥乙基)-煙酰胺的緣故,該結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[11-12]。

        有研究證實(shí),當(dāng)藥物油水分配系數(shù)為-1<logP<2,在此范圍內(nèi)藥物通過被動(dòng)擴(kuò)散較易透過細(xì)胞膜[13]。本文測(cè)定結(jié)果顯示,在pH 4.5~12內(nèi),尼可地爾的P值在2.2~4.5,其logP大致在0.33~0.65,在正辛醇-水中的logP為0.36,均處于藥物最佳吸收范圍內(nèi),預(yù)期經(jīng)鼻腔黏膜較易吸收。尼可地爾的P值隨pH值增大而呈波動(dòng)式增加,其原因可能是由于其結(jié)構(gòu)上同時(shí)含有酰胺基與吡啶環(huán),使藥物總體呈現(xiàn)弱堿性,導(dǎo)致其P值隨pH值的變化不同于一般弱堿的變化規(guī)律[14-15]。

        其次,本文采用飽和溶液法測(cè)定了尼可地爾溶解度,發(fā)現(xiàn)在強(qiáng)酸性pH條件下,該藥物的溶解度最大,隨著介質(zhì)pH值增大,藥物溶解度總體呈逐漸下降趨勢(shì),這可能是由于尼可地爾屬于弱堿性化合物,在強(qiáng)酸性pH值下,有部分藥物發(fā)生解離,以離子形式存在,從而增加藥物的溶解度,而隨著介質(zhì)pH值逐漸增加,絕大部分藥物以分子形式存在,故溶解度明顯降低。此外,還發(fā)現(xiàn)尼可地爾在丙二醇中的溶解度與其在水中相似,均遠(yuǎn)大于在PEG400中的溶解度。鑒于尼可地爾上市口服片劑的規(guī)格為5 mg,而人單側(cè)鼻孔每次給藥體積范圍應(yīng)為100~200 μL[16],本文測(cè)得該藥物在常溫下水中的溶解度大于70 mg·mL-1,完全可滿足制備溶液型鼻用制劑要求,因此,可考慮以水作為制備尼可地爾鼻腔制劑的理想溶劑。

        最后,離體鼻黏膜滲透性試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),候選的3種促滲劑中,HP-β-CD與SBE-β-CD均可明顯促進(jìn)尼可地爾的經(jīng)鼻黏膜吸收,但后者促滲效果更好;相反,DM-β-CD則表現(xiàn)為明顯抑制該藥物經(jīng)鼻黏膜的滲透作用,產(chǎn)生這一現(xiàn)象的原因尚不明確,可能與β-CD母體結(jié)構(gòu)上取代基的不同有關(guān)。此外發(fā)現(xiàn),不同濃度SBE-β-CD的促滲作用大小順序?yàn)椋?.0%SBE-β-CD>7.0%SBE-β-CD≈3%SBE-β-CD>1.0%SBE-β-CD,表明SBEβ-CD對(duì)尼可地爾的促滲效果具有一定程度的濃度依賴性:在低濃度時(shí),促滲作用隨其濃度增加而增強(qiáng),當(dāng)濃度達(dá)到5%時(shí),其促滲效果最大,進(jìn)一步提高SBE-β-CD的濃度,其促滲作用不再增加,這一現(xiàn)象與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果類似[17]。

        人體鼻腔正常生理pH值范圍為5.5~6.5,平均值為6.4[18],綜合考慮尼可地爾溶液化學(xué)穩(wěn)定性、油水分配系數(shù)、溶解度和對(duì)鼻黏膜可能產(chǎn)生的刺激性,制備該藥物鼻腔制劑的pH值應(yīng)控制在6.0~6.5為宜,而其最佳促滲劑為5.0%SBE-β-CD。后續(xù)將通過體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究來驗(yàn)證制劑在體內(nèi)吸收以及生物利用度情況。

        猜你喜歡
        尼可地爾水相溶解度
        “溶解度曲線”考點(diǎn)擊破
        尼可地爾對(duì)ST段抬高型心肌梗死患者介入治療效果的影響
        尼可地爾治療慢性缺血性心肌病患者心力衰竭的臨床療效觀察分析
        海上中高滲透率砂巖油藏油水相滲曲線合理性綜合分析技術(shù)
        更 正
        地下水流速與介質(zhì)非均質(zhì)性對(duì)于重非水相流體運(yùn)移的影響
        溶解度曲線的理解與應(yīng)用例析
        尼可地爾聯(lián)合單硝酸異山梨酯應(yīng)用于老年頑固性心絞痛患者的療效評(píng)價(jià)
        尼可地爾治療急性ST段抬高型心肌梗死的療效觀察
        CO2捕集的吸收溶解度計(jì)算和過程模擬
        日韩精品av在线一区二区| 一个人看的视频www免费| 97人人超碰国产精品最新o| 国产一区二区三区爆白浆| 亚洲精品中文字幕熟女| 伊人久久综合无码成人网| 人人妻人人妻人人片av| 国产夫妻av| 国内偷拍视频一区二区| 不卡一区二区黄色av| 久久精品成人无码观看不卡| 国产亚洲欧美在线观看的| 日本高清长片一区二区| 一二三区无线乱码中文在线| 欧洲熟妇色xxxx欧美老妇多毛| 国产无线乱码一区二三区| 中文字幕精品亚洲一区二区三区| 国产日产韩国av在线| 亚洲日韩一区二区三区| 国产无套视频在线观看香蕉 | 欧美老妇人与禽交| 日本岛国大片不卡人妻| 免费av日韩一区二区| 少妇高潮喷水久久久影院| 国产色噜噜| 后入少妇免费在线观看| 免费人成小说在线观看网站 | 国产98色在线 | 国产| 男女边吃奶边做边爱视频 | 色噜噜亚洲精品中文字幕| 无码小电影在线观看网站免费| 成 人 色综合 综合网站| 日韩精品一区二区av在线| 亚洲色图在线免费观看视频| 中国国语毛片免费观看视频| 蜜桃一区二区三区在线看| 91高清国产经典在线观看| 综合激情中文字幕一区二区| 国产在线视频一区二区天美蜜桃 | 久久精品亚洲熟女av麻豆| 亚洲日韩一区二区一无码|