孫源 趙立涵 曾瑋 吳寧濤

重癥肺炎是指因肺部炎癥發(fā)展擴(kuò)散引起的呼吸道衰竭及加重、累積多個(gè)系統(tǒng)、器官,嚴(yán)重危及生命[1-2]。尋求可靠指標(biāo)指導(dǎo)重癥肺炎患者進(jìn)行準(zhǔn)確治療,是改善重癥肺炎預(yù)后的關(guān)鍵[3]。膜聯(lián)蛋白A1(annexin A1, ANXA1)是一類鈣依賴的磷脂結(jié)合蛋白,在巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞中高表達(dá),與細(xì)胞增殖、凋亡和吞噬有關(guān),并參與細(xì)胞炎癥反應(yīng)[4]。研究報(bào)道,ANXA1與多種炎癥疾病有關(guān),可作為疾病預(yù)后評(píng)估的標(biāo)志物[5]。T細(xì)胞免疫球蛋白黏蛋白-4(T-cell immunoglobulin and mucin-domain-containing molecule 4,TIM-4)在樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞等免疫細(xì)胞中高表達(dá),與炎癥反應(yīng)有關(guān)[6]。目前有關(guān)ANXA1、TIM-4在重癥肺炎疾病中的研究報(bào)道較少。因此,本研究擬探討重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平及臨床意義,以期為臨床診治重癥肺炎提供參考。

資料與方法

一 、一般資料

選取2019年5月至2021年12月本院收治的90例重癥肺炎患者納入重癥肺炎組進(jìn)行研究,并納入同期90例普通肺炎患者為普通肺炎組,同期在醫(yī)院接受常規(guī)體檢的90例健康體檢者為對(duì)照組。三組一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見表1)。

表1 三組一般資料比較

納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合《內(nèi)科學(xué)(第9版)》[7]中肺炎相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。(2)參與者病歷資料完整。(3)預(yù)計(jì)生存時(shí)間大于3天。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并其它感染性疾病患者。(2)近期有重大手術(shù)搶救史等。(3)伴有血液病或惡性腫瘤者。(4)肝、腎功能不全者。三組受試人員或其家屬對(duì)本研究知情并簽署知情同意書。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后進(jìn)行(2019-0029)。

二 、研究方法

1 樣品采集 重癥肺炎組、普通肺炎組患者入院時(shí)(對(duì)照組于體檢日)收集5 mL靜脈血,靜置30min,后3000r/min離心10min,分離血清;血清樣本儲(chǔ)存在-80℃冰箱中,以供進(jìn)一步分析。

2 ELISA法檢測(cè)血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平

采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清ANXA1、TIM-4水平,操作步驟按照ELISA試劑盒及儀器說明書進(jìn)行。試劑盒均購自上海瑞番生物科技有限公司;酶標(biāo)儀購自上海美谷分子儀器有限公司。

三、隨訪

90例重癥肺炎患者,根據(jù)治療28天生存情況分為生存組(67例)、死亡組(23例),并收集兩組重癥肺炎患者吸煙史、飲酒史、是否機(jī)械通氣、是否合并糖尿病、高血壓、冠心病等資料。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本研究數(shù)據(jù)用SPSS 25.0軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料且符合正態(tài)分布的以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用t檢驗(yàn)比較兩組間的差異,三組間差異比較采用單因素方差分析,組間進(jìn)一步兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn);以n(%)表示計(jì)數(shù)資料,采用χ2檢驗(yàn)比較組間差異。Pearson相關(guān)用于評(píng)估血清ANXA1、TIM-4的相關(guān)性。影響重癥肺炎預(yù)后的危險(xiǎn)因素采用多分類Logistic回歸分析;受試者工作特征(ROC)曲線分析血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平對(duì)重癥肺炎預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值,血清ANXA1、TIM-4聯(lián)合預(yù)測(cè)與兩者單獨(dú)預(yù)測(cè)ROC曲線下面積(AUC)比較采用Z檢驗(yàn);Kaplan-Meier曲線分析ANXA1、TIM-4表達(dá)與重癥肺炎預(yù)后的關(guān)系。P<0.05代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、三組患者血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平分析

普通肺炎組、重癥肺炎組患者血清ANXA1、TIM-4水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)(詳見表2)。

表2 三組患者血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平分析

二、重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示,重癥肺炎患者血清ANXA1和TIM-4表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.439,P<0.001)(見圖1)。

圖1 血清ANXA1與TIM-4相關(guān)性分析

三、不同預(yù)后重癥肺炎患者臨床資料和血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平比較

重癥肺炎死亡組與生存組年齡、吸煙史、機(jī)械通氣、合并糖尿病、ANXA1、TIM-4水平相比有明顯差異(P<0.05)。與生存組相比,死亡組ANXA1、TIM-4水平顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),性別、BMI、飲酒史、合并高血壓、合并冠心病相比無明顯差異(P>0.05)(詳見表3)。

表3 不同預(yù)后重癥肺炎患者臨床資料和血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平比較

四、多分類Logistic回歸分析影響重癥肺炎患者預(yù)后的因素

將(表3)中具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的臨床特征指標(biāo)及ANXA1、TIM-4為自變量進(jìn)行多元回歸分析(賦值見表4)。Logistic回歸模型分析顯示,年齡≥60歲、吸煙史、機(jī)械通氣、合并糖尿病、ANXA1高表達(dá)、TIM-4高表達(dá)是影響重癥肺炎患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素(P<0.05)(詳見表5)。

表4 Logistic回歸分析自變量賦值

五、血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平對(duì)重癥肺炎患者預(yù)后的評(píng)估價(jià)值

以重癥肺炎患者預(yù)后情況作為因變量(死亡=1,生存=0),血清ANXA1、TIM-4水平作檢驗(yàn)變量,繪制ROC曲線圖,結(jié)果顯示單獨(dú)及兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)重癥肺炎預(yù)后的AUC分別為0.859、0.840、0.958,兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)的AUC顯著大于ANXA1單獨(dú)預(yù)測(cè)的AUC(Z=2.330,P=0.020),TIM-4單獨(dú)預(yù)測(cè)的AUC(Z=2.096,P=0.036)(見表6、圖2)。

表6 血清ANXA1、TIM-4預(yù)測(cè)重癥肺炎預(yù)后的ROC分析

六、血清ANXA1、TIM-4水平與重癥肺炎患者預(yù)后的關(guān)系

根據(jù)血清ANXA1、TIM-4水平中位數(shù),將重癥肺炎患者分為ANXA1低表達(dá)組(ANXA1<457.23 ng/mL, 45例)、ANXA1高表達(dá)組(ANXA1≥457.23 ng/mL, 45例)和TIM-4高表達(dá)組(TIM-4≥74.37 pg/mL, 45例)、TIM-4低表達(dá)組(TIM-4<74.37 pg/mL, 45例)。28天隨訪結(jié)果顯示,90例重癥肺炎患者有67例生存,23例死亡,總生存率為74.44%。ANXA1高表達(dá)組生存29例(29/45, 64.44%)和ANXA1低表達(dá)組生存38例(38/45, 84.44%),TIM-4高表達(dá)組生存28例(28/45, 62.22%)和TIM-4低表達(dá)組生存39例(39/45, 86.67%)。Kaplan-Meier生存曲線分析表明ANXA1低表達(dá)組生存率顯著高于高表達(dá)組(χ2=4.731,P=0.030),TIM-4低表達(dá)組生存率顯著高于高表達(dá)組(χ2=7.067,P=0.008)(見圖3,4)。

圖3 ANXA1表達(dá)與重癥肺炎患者預(yù)后的關(guān)系

圖4 TIM-4表達(dá)與重癥肺炎患者預(yù)后的關(guān)系

討 論

重癥肺炎常伴有多種并發(fā)癥,容易導(dǎo)致死亡,具有病情兇險(xiǎn)、高死亡率等特點(diǎn)[8-9]。王娜等[10]研究表明,重癥肺炎患者28天病死率為31.25%。而本研究,90例重癥肺炎患者28天病死23例,病死率為25.56%,與王娜的研究相近,表明重癥肺炎患者預(yù)后較差,早期預(yù)測(cè)患者預(yù)后非常重要。本研究主要探討重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平及臨床意義。

ANXA1是一種內(nèi)源性抗炎蛋白,受糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié),參與炎癥疾病的發(fā)生[11]。ANXA1在關(guān)節(jié)炎等慢性炎癥性疾病和慢性阻塞性肺疾中發(fā)揮重要作用[12-13]。研究發(fā)現(xiàn)慢性阻塞性肺疾病合并肺部感染患者血清ANXA1異常高表達(dá)[14-15]。Gu等[16]研究發(fā)現(xiàn)社區(qū)獲得性肺炎患者血清ANXA1水平與病情嚴(yán)重程度及預(yù)后有關(guān)。TIM-4高表達(dá)于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞中,已有研究證明TIM-4與多種炎癥疾病有關(guān)[17-18]。研究發(fā)現(xiàn)成人支氣管哮喘急性發(fā)作期患者TIM-4水平異常升高[18]。缺血性腦卒中患者外周血單核細(xì)胞上TIM-4的表達(dá)水平明顯升高,且與不良預(yù)后有關(guān)[19]。禹萌等[20]研究發(fā)現(xiàn)腦卒中后肺部感染患者血清TIM-4表達(dá)水平升高。本研究中,與對(duì)照組相比,普通肺炎組、重癥肺炎組患者血清ANXA1、TIM-4水平依次明顯上調(diào)。這表明ANXA1、TIM-4可能與肺炎的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。與Gu[16]、禹萌[20]等研究結(jié)果相似。Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示,重癥肺炎患者血清ANXA1和TIM-4表達(dá)水平呈正相關(guān)。兩者之間可能存在一定聯(lián)系,共同影響著重癥肺炎的進(jìn)展。

本研究單因素分析發(fā)現(xiàn),重癥肺炎死亡組與生存組年齡、吸煙史、機(jī)械通氣、合并糖尿病、ANXA1、TIM-4水平相比有明顯差異;死亡組血清ANXA1、TIM-4水平明顯高于生存組。以上說明,重癥肺炎受多種因素影響,檢測(cè)血清ANXA1、TIM-4水平可以及時(shí)反映患者疾病情況且與患者預(yù)后有關(guān)。進(jìn)一步多因素Logistic回歸分析顯示,年齡≥60歲、有吸煙史、機(jī)械通氣、合并糖尿病、ANXA1高表達(dá)、TIM-4高表達(dá)是影響重癥肺炎患者死亡的危險(xiǎn)因素,它們與重癥肺炎的預(yù)后有關(guān)。本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示,ANXA1、TIM-4聯(lián)合預(yù)測(cè)重癥肺炎預(yù)后的AUC顯著大于兩者單獨(dú)預(yù)測(cè)。表明兩者聯(lián)合可提高對(duì)重癥肺炎預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。Kaplan Meier生存分析顯示,ANXA1、TIM-4低表達(dá)組生存率均顯著高于高表達(dá)組。ANXA1、TIM-4表達(dá)升高可能會(huì)造成患者預(yù)后不良。上述結(jié)果表明,早期檢測(cè)重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4水平,若發(fā)現(xiàn)二者異常變化,建議提前為患者實(shí)施治療及改善患者預(yù)后。

綜上所述,重癥肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表達(dá)水平升高,兩者是影響重癥肺炎預(yù)后的危險(xiǎn)因素,兩者聯(lián)合能夠提高重癥肺炎患者預(yù)后預(yù)測(cè)價(jià)值,有望成為準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)指標(biāo)。本研究納入的病例數(shù)較少,結(jié)果可能有一定的偏倚,后續(xù)需要一個(gè)樣本量大的、多中心的研究來驗(yàn)證。