夏友青，龔順澤，金銀秀，徐德鋒

（臺(tái)州職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院，浙江 臺(tái)州 318000）

嘧啶肟草醚（Pyribenzoxim）是由韓國(guó)LG 化學(xué)集團(tuán)研發(fā)的嘧啶水楊酸類(lèi)除草劑，主要通過(guò)抑制乙酰乳酸合成酶而起除草的作用，是一種廣譜選擇性芽后除草劑。對(duì)水稻田多種一年生禾本科雜草、闊葉雜草、莎草科雜草均具有明顯的防效，使用方式靈活，既可用于水稻直播田又可用于水稻移栽田，使用技術(shù)簡(jiǎn)單［1-4］。有關(guān)嘧啶肟草醚的分析方法標(biāo)準(zhǔn)研究相對(duì)較少。關(guān)于嘧啶肟草醚殘留的分析方法報(bào)道，潘金菊等［5］、張玉婷等［6］建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水稻中嘧啶肟草醚殘留量的方法，陳曉林等［7，8］建立了嘧啶肟草醚在水稻田土壤、植株和大米（糙米）中的殘留分析方法。本研究通過(guò)試驗(yàn)研究，建立了10%嘧啶肟草醚懸浮劑的定量分析方法，該方法具有操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確等特點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 試劑

乙腈（色譜純）、甲醇（色譜純）［阿拉丁試劑（上海）有限公司）］；超純水；嘧啶肟草醚標(biāo)準(zhǔn)品，10%嘧啶肟草醚懸浮劑樣品（江蘇潤(rùn)澤農(nóng)化有限公司）。

1.2 試驗(yàn)儀器

Agilent 1260 型高效液相色譜儀，具有紫外列檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器和色譜工作站；ODS-3 色譜柱（C18，250.0 mm×4.6 mm，5 μm，日本島津公司）；Millipore integral 10 型超純水系統(tǒng)（密立博中國(guó)有限公司）；XS205 型分析天平（梅特勒-托利多公司）；0.45 μm 尼龍濾膜（上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司）［9-11］。

1.3 液相色譜操作條件

流動(dòng)相為乙腈∶水∶乙酸=800∶200∶0.5（體積比）；柱溫為室溫；流速1.0 mL∕min；檢測(cè)波長(zhǎng)245 nm；進(jìn)樣體積10 μL，保留時(shí)間約14 min。

1.4 測(cè)定步驟

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 準(zhǔn)確稱(chēng)取嘧啶肟草醚標(biāo)準(zhǔn)樣品0.038 5 g（精確至0.2 mg），置于50 mL 容量瓶中，加適量乙腈超聲溶解5 min，冷卻至室溫后加乙腈定容搖勻，用0.45 μm 微孔濾膜過(guò)濾，靜置備用。

1.4.2 試樣溶液配制 準(zhǔn)確稱(chēng)取嘧啶肟草醚試樣0.396 0 g（精確至0.2 mg），置于500 mL 容量瓶中，加適量乙腈超聲溶解5 min，冷卻至室溫后加乙腈定容搖勻，用0.45 μm 微孔濾膜過(guò)濾，靜置備用。

1.4.3 測(cè)定 在上述操作條件下，待儀器基線(xiàn)穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)準(zhǔn)溶液，待各針相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.5%時(shí)，按照標(biāo)準(zhǔn)溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的順序進(jìn)樣測(cè)定。

1.4.4 質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)算 將測(cè)得的2 針試樣溶液和試樣溶液前后2 針標(biāo)準(zhǔn)溶液中嘧啶肟草醚的峰面積（圖1、圖2）分別取平均值。試樣中嘧啶肟草醚的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X（%）按下式計(jì)算。

圖1 嘧啶肟草醚標(biāo)樣色譜分布

圖2 10%嘧啶肟草醚懸浮劑色譜分布

式中，A1為標(biāo)準(zhǔn)溶液中嘧啶肟草醚峰面積的平均值；A2為試樣溶液中嘧啶肟草醚峰面積的平均值；m1為嘧啶肟草醚標(biāo)樣的質(zhì)量，單位為g；m2為嘧啶肟草醚試樣的質(zhì)量，單位為g；P為標(biāo)準(zhǔn)品中嘧啶肟草醚的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，單位為%。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

通過(guò)Agilent 1260 型高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，獲得嘧啶肟草醚的紫外可見(jiàn)吸收光譜（圖3）。從圖3 中可以看到，在吸收波長(zhǎng)190～400 nm區(qū)域內(nèi)，嘧啶肟草醚有2個(gè)吸收峰波長(zhǎng)分別在202 nm和245 nm 附近，由于最大吸收波長(zhǎng)202 nm 附近溶劑的干擾比較明顯，因此將檢測(cè)波長(zhǎng)定為245 nm。依據(jù)嘧啶肟草醚的理化性質(zhì)，選用乙腈和酸性水溶液作為流動(dòng)相，用乙腈溶解樣品，二者均能很好地分離且峰形對(duì)稱(chēng)，基線(xiàn)平穩(wěn)，結(jié)果較好。

圖3 嘧啶肟草醚全波長(zhǎng)掃描結(jié)果

2.2 線(xiàn)性相關(guān)性測(cè)定

在上述色譜分析條件下，配制了一系列不同質(zhì)量濃度的嘧啶肟草醚標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定。以質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)，得到嘧啶肟草醚的線(xiàn)性相關(guān)曲線(xiàn)。線(xiàn)性方程為y=21 406x+57.41，相關(guān)系數(shù)r=0.999 6，表明使用該方法測(cè)定的嘧啶肟草醚標(biāo)準(zhǔn)品在0.10～0.98 g∕L 濃度范圍內(nèi)線(xiàn)性相關(guān)性良好。

2.3 精密度測(cè)定

按照上述分析條件，取配制好的10%嘧啶肟草醚懸浮劑溶液，平行進(jìn)樣5 次，計(jì)算嘧啶肟草醚的標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），考察該分析方法的精密度，結(jié)果見(jiàn)表1。由表1 可知，該方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較小，僅為0.12，說(shuō)明分析方法的儀器精密度較好。

表1 10%嘧啶肟草醚懸浮劑精密度測(cè)定

2.4 準(zhǔn)確度測(cè)定

在已知質(zhì)量濃度的10%嘧啶肟草醚懸浮劑中，分別添加不同量的10%嘧啶肟草醚標(biāo)準(zhǔn)品。按照上述色譜條件分析其含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表2。由表2 可知，使用該分析方法的回收率在98.11%～100.00%，平均回收率為98.48%，說(shuō)明測(cè)量準(zhǔn)確度較好。

表2 10%嘧啶肟草醚懸浮劑加標(biāo)回收率的測(cè)定

3 結(jié)論

本研究通過(guò)對(duì)流動(dòng)相與檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇，精確度與回收率的驗(yàn)證等，建立了10%嘧啶肟草醚懸浮劑的高效液相色譜分析方法。該方法嘧啶肟草醚在0.10～0.98 g∕L 的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系（r=0.999 6）；標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.12，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.21%，方法的儀器精密度較高；平均加標(biāo)回收率為98.48%，準(zhǔn)確度較好。該方法具有操作簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)，適合在生產(chǎn)和試驗(yàn)中對(duì)10%嘧啶肟草醚懸浮劑進(jìn)行定量分析，是進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)較理想的分析方法。