張彤彤，白永杰，張 武，呂和平，高彥萍，吳雁斌，王芳芳，楊昕宇，梁宏杰

（甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院馬鈴薯研究所，蘭州 730070）

以蛭石為基質(zhì)的馬鈴薯種薯生產(chǎn)方式存在諸多弊端，平均單株結(jié)薯率低，約1.5 粒左右，蛭石廢料難以處理，不利于生態(tài)文明建設(shè)且生產(chǎn)成本比較高等。霧培法生產(chǎn)馬鈴薯種薯可使單株結(jié)薯率提高到50粒左右［1］，生產(chǎn)效率遠(yuǎn)超基質(zhì)法。霧培法生產(chǎn)馬鈴薯種薯可以減少脫毒組培苗的使用量70%以上，可分別節(jié)水和節(jié)肥90%和60%，從而使單粒種薯生產(chǎn)成本降低約0.15 元，經(jīng)濟(jì)和生態(tài)效益顯著［1-3］。但是，霧培法生產(chǎn)種薯也存在不容忽視的問(wèn)題，特別是種薯表皮木栓化程度低，水分含量高，氣孔開(kāi)放程度高，易失水萎蔫，容易受到病菌入侵導(dǎo)致腐爛，嚴(yán)重影響種薯種性［3，4］。為了保證霧培法生產(chǎn)的馬鈴薯種薯質(zhì)量，降低種薯采后感病率是重要途徑［4，5］。生產(chǎn)中多采用多菌靈、代森錳鋅等殺菌劑可濕性粉劑進(jìn)行拌種處理，但是粉劑拌種由于飄逸原因不利于工作人員健康，同時(shí)影響種薯外觀和價(jià)值［6-10］。因此，篩選霧培馬鈴薯種薯拌種處理藥劑具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。本研究采用綠色藥劑納他霉素、中生菌素（1∶1、1∶5、5∶1，g∶kg）復(fù)配進(jìn)行拌種處理，優(yōu)化篩選了霧培馬鈴薯種薯拌種處理技術(shù)，評(píng)價(jià)其應(yīng)用效果，以期為霧培馬鈴薯種薯貯藏技術(shù)的發(fā)展提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試霧培馬鈴薯種薯品種為大西洋，由甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院馬鈴薯研究所生產(chǎn)，將采收的霧培種薯置于陰涼有散射光處放置7～10 d 進(jìn)行老化處理，然后進(jìn)行試驗(yàn)處理。

藥劑：中生菌素（12%母藥，福建凱立生物制品有限公司）、納他霉素（98%原藥，南京通盈生物科技有限公司）、代森錳鋅可濕性粉劑（50%，陜西美邦藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司）。

助劑：凹凸棒土、Morwet D-425（烷基萘磺酸甲醛縮聚物的鈉鹽）、Morwet EFW（烷基萘磺酸鹽和陰離子潤(rùn)濕劑的混合物）。

1.2 有效成分配方篩選

采用納他霉素、中生菌素作為有效抑菌成分，以馬鈴薯晚疫病為靶標(biāo)病原菌進(jìn)行配比優(yōu)化篩選。配方篩選在馬鈴薯塊莖上進(jìn)行，分別配置3、9、15、18 μg/mL 納他霉素、中生菌素藥劑，研究2 種藥劑單獨(dú)使用對(duì)馬鈴薯種薯致病疫霉的防效；采用共毒因子法，中生菌素∶納他霉素復(fù)配比例擬定為1∶1、1∶5、5∶1（質(zhì)量比，g∶kg），研究混劑對(duì)馬鈴薯種薯致病疫霉菌的防效。將馬鈴薯種薯清洗干凈，接菌處去皮，用藥液浸泡30 min，12 h 后接種帶有菌絲的菌餅，保濕18 ℃暗培養(yǎng)，等空白對(duì)照明顯發(fā)病后檢查結(jié)果。

共毒因子大于20，表示混劑各成分之間為增效作用，大于-20 且小于20 則為相加作用，小于-20 為拮抗作用。共毒因子按以下公式計(jì)算［11］。

1.3 助劑篩選

在室溫25 ℃條件下，將不同助劑按照篩選比例混勻，研磨后過(guò)400 目篩，按照篩選比例混勻后測(cè)定潤(rùn)濕性、拌種的均勻度［12］。不同助劑的配方見(jiàn)表1。

表1 不同助劑的配方

1.4 拌種效果評(píng)價(jià)

通過(guò)以上配方篩選，得到的適宜配方作為研究劑型進(jìn)行拌種比例篩選。在種薯表面噴灑少量水，以種薯表面濕潤(rùn)為準(zhǔn)。拌種比例設(shè)定為1∶1、1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25（藥劑∶種薯，g∶kg），從拌種均勻度、拌種量，拌種處理對(duì)種薯出苗率、失重率、腐爛率的影響來(lái)評(píng)價(jià)拌種效果。50%代森錳鋅可濕性粉劑1 g 拌種薯10 kg 處理作為陽(yáng)性對(duì)照。不進(jìn)行任何藥劑處理的作為空白對(duì)照。試驗(yàn)在10 ℃左右的常規(guī)種薯貯藏庫(kù)中進(jìn)行，各處理種薯數(shù)量為100 粒。拌種后的種薯與已經(jīng)腐爛的種薯混放30 d，觀察防腐爛情況。

1.5 種薯指標(biāo)測(cè)定

選擇“1.4”中拌種效果較好的處理，再進(jìn)行種薯拌種處理，貯藏30 d 后在花盆中播種，統(tǒng)計(jì)各處理出苗率。

設(shè)置試驗(yàn)處理，A 處理，1 g 藥劑拌種1 kg 種薯；B 處理，1 g 藥劑拌種5 kg 種薯；C 處理，1 g 藥劑拌種10 kg 種薯。代森錳鋅處理：40%代森錳鋅可濕性粉劑1 g 拌種薯10 kg。在貯藏30、60、90、120、150 d時(shí)，測(cè)定種薯失重量和爛薯率。

1.6 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 20 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan 法進(jìn)行差異性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 有效成分配比選擇

由表2、表3 可知，中生菌素與納他霉素藥劑單獨(dú)使用對(duì)馬鈴薯種薯致病疫霉的防效分別為2.99%～14.53%、7.26%～34.19%，中生菌素與納他霉素復(fù)配后具有較好的增效作用，特別是二者以1∶1的比例復(fù)配后，混劑實(shí)際防效達(dá)到41.03%。因此，本研究采用中生菌素和納他霉素1∶1（g∶kg）的復(fù)配比例作為有效成分。

表2 中生菌素與納他霉素對(duì)馬鈴薯種薯致病疫霉的防效

表3 中生菌素與納他霉素混劑對(duì)馬鈴薯種薯致病疫霉的防效

2.2 助劑篩選

經(jīng)過(guò)前期預(yù)試驗(yàn)，有3 種配方基本能夠達(dá)到種薯拌種均勻度的要求，配方A、B、C 的潤(rùn)濕性分別為150、106、75 s，配方C 的潤(rùn)濕時(shí)間最少。因此，本研究選擇配方C 作為下一步試驗(yàn)處理劑型。

2.3 拌種比例選擇

從外觀評(píng)價(jià)拌種效果，結(jié)果（表4）表明，藥劑∶種薯為1∶1、1∶5、1∶10、1∶15 時(shí)拌種效果好，拌種比較均勻。從腐爛率評(píng)價(jià)拌種效果，藥劑∶種薯為1∶1、1∶5、1∶10 時(shí)防腐效果好，3 個(gè)處理腐爛率與其他處理差異顯著。因此，選擇藥劑∶種薯為1∶1、1∶5、1∶10 進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

表4 不同藥劑與種薯拌種比例對(duì)馬鈴薯種薯的拌種效果

2.4 種薯出苗情況

采用藥劑∶種薯為1∶1、1∶5、1∶10 進(jìn)行種薯拌種處理，貯藏30 d 各處理出苗率均能達(dá)到100%。由于是挑選的種薯，排除了非藥劑影響，其出苗率均達(dá)到了100%，該結(jié)果說(shuō)明拌種處理對(duì)霧培種薯的出苗沒(méi)有明顯影響。

2.5 種薯貯藏后的失重情況

結(jié)果（圖1）顯示，不同拌種處理的馬鈴薯種薯隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，失重量逐步減少，從30 d 到150 d，種薯失重量從21 g 以上降低到4 g 左右。不同貯藏時(shí)期各處理的失重量存在差異，30 d 時(shí)除處理C 外，各藥劑處理與對(duì)照間失重量差異顯著；隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng)，各處理間差異逐步減小，到150 d 時(shí)各處理間差異不顯著。說(shuō)明拌種處理能夠在一定時(shí)間內(nèi)減輕種薯失重。與種薯的外觀相一致，拌種的藥劑覆蓋到種薯表面可能具有降低種薯水分散失的作用。

圖1 不同拌種處理馬鈴薯種薯隨貯藏時(shí)間的失重量變化

2.6 種薯腐爛情況

結(jié)果（表5）顯示，空白對(duì)照的爛薯率隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)不斷升高，且顯著高于各藥劑處理，30 d 開(kāi)始出現(xiàn)爛薯，到150 d 時(shí)爛薯率達(dá)18.33%。A、B 處理防爛效果最佳，到150 d 時(shí)沒(méi)有出現(xiàn)爛薯。C 處理效果較A、B 處理較差，但是與二者差異并不顯著。代森錳鋅拌種處理的馬鈴薯種薯在90 d 時(shí)出現(xiàn)爛薯，防爛效果比處理A、B、C 差，但顯著優(yōu)于空白對(duì)照。結(jié)果表明，A、B、C 拌種處理可能更適合霧培種薯貯藏處理，處理劑量應(yīng)該不低于1 g 藥劑拌種10 kg種薯。

表5 不同拌種處理的馬鈴薯種薯隨貯藏時(shí)間的爛薯率

3 討論與結(jié)論

本研究所用的有效抑菌成分為已經(jīng)商業(yè)化的殺菌劑中生菌素和食品防腐藥劑納他霉素，各種助劑也是比較常規(guī)和低毒的，其非靶標(biāo)安全性較高，是綠色拌種處理劑［13］。對(duì)劑型的各項(xiàng)測(cè)定表明，劑型基本能夠滿足生產(chǎn)處理需求，其效果顯著優(yōu)于代森錳鋅可濕性粉劑拌種處理，可能的原因是該拌種處理的有效成分殺菌譜較廣，其殺菌譜包含了真菌和細(xì)菌。研究結(jié)果表明，該拌種處理可能更適合霧培種薯貯藏處理，綜合成本等因素，處理劑量以1 g 藥劑拌種10 kg左右種薯為宜。

中生菌素與納他霉素的復(fù)配有助于防治種薯在貯存期的病害，可以有效降低腐爛率，對(duì)種薯無(wú)藥害，且中生菌素與納他霉素均為微生物代謝產(chǎn)物，可以稱為生物農(nóng)藥，其安全性和環(huán)境友好型是其突出的優(yōu)點(diǎn)［14，15］。后續(xù)在實(shí)際應(yīng)用中還需要進(jìn)一步明確使用劑量等條件，進(jìn)行較大規(guī)模的應(yīng)用效果評(píng)價(jià)。