羅鵬飛，夏 俊，張 凌，梁纖纖，2，李曉卓，2，鄭啟銘，2，夏江濤，呂雙燕，侯小輝，胡林波，鄭汝蕓

（1.新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所/新疆畜牧科學(xué)院動(dòng)物臨床醫(yī)學(xué)研究中心/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部草食動(dòng)物疫病防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（部省共建），烏魯木齊 830013；2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，烏魯木齊 830013；3.新疆阿勒泰地區(qū)動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆 阿勒泰 836500）

近年來，隨著畜牧業(yè)高質(zhì)量發(fā)展，養(yǎng)牛業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大，犢牛腹瀉的發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，不僅導(dǎo)致犢牛大量死亡，還影響愈后犢牛的生長發(fā)育和種牛的換代，其中某些病原體還屬于人畜共患病原微生物，制約養(yǎng)牛業(yè)健康發(fā)展的同時(shí)還嚴(yán)重威脅公共衛(wèi)生安全。通過分析臨床病例數(shù)可知，相比飼養(yǎng)管理不良導(dǎo)致的犢牛腹瀉，病原體引起的傳染性犢牛腹瀉病例數(shù)占比超過70%，危害更為嚴(yán)重。因此鑒別檢測(cè)不同病原體，可以指導(dǎo)合理用藥，制定相應(yīng)的防控措施，對(duì)阻斷疾病傳播和降低養(yǎng)殖場經(jīng)濟(jì)損失具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

1 犢牛病毒性腹瀉相關(guān)病原

1.1 病毒引起的腹瀉

1.1.1 病毒性腹瀉牛病毒性腹瀉是由牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral diarrhea-mucosal disease，BVDV）或黏膜病病毒（Mucosal Disease Virus，MDV）引起的接觸性傳染性疾病[1]，該病毒屬于黃病毒科瘟病毒屬的單鏈正股RNA 病毒[1]。BVDV 呈全球分布，可感染豬、牛、羊、鹿以及駱駝等多種家畜和野生動(dòng)物，引發(fā)病毒性腹瀉[2]。牛在不同年齡段對(duì)BVDV均易感，其致病性和致死率隨牛的年齡增長而降低。因此，急性感染常見于6 ～18月齡斷奶期犢牛，其臨床癥狀主要表現(xiàn)為腹瀉、高熱、脫水、白細(xì)胞減少等。6月齡以下犢牛感染BVDV臨床癥狀因母體健康狀態(tài)和感染毒株血清型而有所差異，其中因哺乳獲得母源抗體感染不同血清型BVDV的犢牛常表現(xiàn)為亞臨床癥狀，而部分未獲得母源抗體保護(hù)的新生犢牛發(fā)病更嚴(yán)重，除急性腸炎外還可見急性肺炎。此外，孕期通過胎盤感染的胎兒出生后呈BVDV先天持續(xù)性感染，機(jī)體可不斷排出病毒，是BVDV 在牛群中難以根除的重要原因之一，且當(dāng)其再次感染不同血清型BVDV時(shí)，病情發(fā)展為“黏膜病”，表現(xiàn)為急性感染癥狀，一周后該感染犢牛出現(xiàn)急性死亡[3，4]。

1.1.2 牛輪狀病毒

牛輪狀病毒（Bovine Rotavirus，BRoV）屬于呼腸孤病毒科輪狀病毒屬，BRoV主要感染15～90日齡犢牛，尤其是小日齡犢牛[5]。輪狀病毒是由11個(gè)雙鏈RNA片段組成，編碼6種結(jié)構(gòu)蛋白病毒（VP1 ～4、VP6、VP7）和6 種非結(jié)構(gòu)蛋白（NSP1 ～6）[6]。根據(jù)中間衣殼蛋白（VP6）的抗體和遺傳相似性，可將輪狀病毒劃分為7 個(gè)血清群（A-G）[7]。其中，A 組輪狀病毒是家養(yǎng)動(dòng)物輪狀病毒感染的主要原因[8]。犢牛輪狀病毒感染腹瀉病例通常在1 ～2周齡的新生犢牛中被發(fā)現(xiàn)，發(fā)病率可達(dá)60%～80%，死亡率在0%～50%之間[9]。新生犢牛無并發(fā)癥的輪狀病毒感染腹瀉病例死亡率不到10%，但繼發(fā)腸致病性大腸桿菌或其他腸道病毒感染后死亡率會(huì)增加[10]。犢牛在感染BRoV 后12 ～24 h 即可發(fā)生急性腹瀉，排泄物呈水樣黏液狀，并伴隨嘔吐、精神萎靡、食欲減退等癥狀。感染5 ～7 d后大量病毒會(huì)隨糞便排出，并感染同舍牛群[11]。

1.1.3 牛冠狀病毒

牛冠狀病毒（Bovine coronavirus，BCoV）屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬，基因組由單鏈RNA 組成，大小為27 ～32 kb，是目前已知基因組最大的RNA 病毒之一[12]。根據(jù)其致病性特點(diǎn)，可分為腸道型BCoV 和呼吸型BCoV，其中引發(fā)犢牛腹瀉和引發(fā)成年牛冬季痢疾的腸道型BCoV 毒株類型又有所不同。致病機(jī)制上，當(dāng)BCoV 感染消化系統(tǒng)時(shí)，首先入侵小腸近端，在小腸進(jìn)行大量復(fù)制后蔓延到大腸處。BCoV 在低溫潮濕環(huán)境中極易繁殖，主要感染30日齡以內(nèi)的犢牛和成年牛，一般會(huì)在感染后7 ～14 d 發(fā)生嚴(yán)重腹瀉，在空氣潮濕或氣溫較低的季節(jié)較易發(fā)生[13-16]。感染初期病毒在小腸下半部分絨毛區(qū)域的上表皮細(xì)胞處進(jìn)行復(fù)制，被感染的腸上皮細(xì)胞死亡并脫落，繼而被未成熟的腸上皮細(xì)胞所取代，導(dǎo)致絨毛發(fā)育遲緩及相鄰絨毛互相纏結(jié)[17]。由于成熟的腸上皮細(xì)胞喪失，腸道的消化吸收功能會(huì)大幅下降，進(jìn)而造成犢牛營養(yǎng)不良，降低飼料報(bào)酬率。更嚴(yán)重的是隨著持續(xù)進(jìn)食，犢牛小腸上皮細(xì)胞無法對(duì)飼料進(jìn)行充分消化吸收，未消化的食物會(huì)在大腸中發(fā)酵，滋生大量的細(xì)菌并產(chǎn)生過量的有機(jī)酸，進(jìn)一步加劇犢牛腹瀉，并伴有脫水、低血糖以及酸中毒等癥狀，嚴(yán)重時(shí)患病?？梢蛐牧λソ吆图毙孕菘硕劳觥?/p>

1.1.4 牛諾如病毒

牛諾如病毒（Bovine Norwalk Viruses，BNoV）是一種無包膜的單鏈正股RNA 病毒，隸屬于杯狀病毒科諾如病毒屬，基因組大小為7.4 ～8.3 kb。由于其高度遺傳多樣性，根據(jù)已開放閱讀框ORF 2（VP 1:主要衣殼蛋白）和ORF 3（VP 2:次要衣殼蛋白）的序列相似性確定了五個(gè)基因組（G1到GV）[18]?；疾∨ＥR床癥狀表現(xiàn)為腹瀉、嘔吐、厭食、精神不振和消化不良等[19]。BNoV 高發(fā)于秋冬季節(jié)，各個(gè)年齡段的牛群均易感染，其中初生犢牛易感性最強(qiáng)[20]。BNoV 傳染途徑廣，可以通過糞-口途徑從消化道和呼吸道進(jìn)入機(jī)體，且傳染能力極強(qiáng)，大約20個(gè)病毒粒子就可以引起感染。根據(jù)目前流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，不同區(qū)域牛諾如病毒的感染率差異較大，如英國牛腹瀉樣本陽性率為11%[21]，美國密歇根州牛腹瀉樣本中陽性率高達(dá)80%[22]，我國6 個(gè)省份的牛腹瀉樣本中陽性率為20.5%[23]，以上表明諾如病毒感染率的高低可能與牛的品種、地域、飼養(yǎng)環(huán)境等多種因素相關(guān)。

1.2 細(xì)菌引起的腹瀉

1.2.1 大腸桿菌

大腸桿菌（Escherichia coli）是牛糞便中的一種主要細(xì)菌成分，充斥在牛群共生環(huán)境中。犢牛大腸桿菌又稱犢牛白痢[24]。相關(guān)報(bào)道稱[4]，由致病性大腸桿菌造成的死亡數(shù)占新生牛犢死亡總數(shù)的28%。根據(jù)毒力不同可以將大腸桿菌分為6 個(gè)致病群：腸產(chǎn)毒素大腸桿菌（ETEC）、產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌（STEC）、腸致病性大腸桿菌（EPEC）、腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）、腸黏附性大腸桿菌（EAEC）和腸出血性大腸桿菌（EHEC）[25，26]。其中，產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（ETEC）可以引發(fā)犢牛白痢，又稱犢牛大腸桿菌病，新生犢牛在出生后的前4 d 內(nèi)最易感染。ETEC 體表的K 99（F 5）黏附抗原幫助其定殖于腸絨毛上皮細(xì)胞，并產(chǎn)生熱穩(wěn)定性毒素，誘導(dǎo)腸道氯化物分泌上調(diào)，增加腸道滲透壓，水分通過滲透作用進(jìn)入腸腔，導(dǎo)致患病牛出現(xiàn)水樣腹瀉[3]。

1.2.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌

產(chǎn)氣莢膜梭菌（Clostridium perfringens）是一種革蘭氏陽性、形成孢子的厭氧細(xì)菌[27]。根據(jù)產(chǎn)生毒素（α、β、ε、ι）的不同可以將其分為5 種毒素型（A—E）[28]。其中C 型是導(dǎo)致犢牛腹瀉的主要類型，其主要產(chǎn)生β致病毒素，可直接或間接對(duì)腸內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生損傷，導(dǎo)致腸壁上出現(xiàn)出血性壞死，先是感染黏膜層，然后會(huì)侵襲腸壁的所有層膜[29]。犢牛感染產(chǎn)氣莢膜梭菌后通常是亞急性病例發(fā)生腹瀉，最急性和急性病例無腹瀉癥狀，發(fā)病的多為健壯和發(fā)育良好的犢牛?；疾∨＜S樣多為醬紅色或者黑紅色，個(gè)別犢牛會(huì)排噴射狀水樣便?；疾∨８闻K、脾臟、心肌、心內(nèi)外膜均有出血，肝臟呈紫黑色，淋巴結(jié)腫大呈褐色，出現(xiàn)壞疽。

1.2.3 沙門氏菌

引起犢牛腹瀉的沙門氏菌（S.typhimurium）主要有鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium）和都柏林沙門氏菌（Salmonella dublin）兩種[30]。10 ～90 日齡的犢牛易感，成年牛抵抗力較強(qiáng)。臨床表現(xiàn)以水樣和黏液樣腹瀉為主，在腹瀉物中會(huì)伴有特征性纖維蛋白和血液[31]。急性腹瀉最常見于鼠傷寒沙門氏菌感染，全身性疾病常見于都柏林沙門氏菌感染。在被感染的小牛腸道還經(jīng)常觀察到小腸假膜炎癥以及腸系膜淋巴結(jié)腫大等病變。沙門氏菌也是一種人畜共患病病原，牛源沙門氏菌可以通過餐飲鏈或直接接觸將病原傳播給人，威脅公共衛(wèi)生安全。

1.3 寄生蟲引起的腹瀉

1.3.1 隱孢子蟲

隱孢子蟲（Cryptosporidium parvum）是一種胃腸道中常見的原生生物病原體，感染奶牛和免疫較弱的犢牛后可以引發(fā)隱孢子蟲病，是全球犢牛腹瀉的主要原因[32]。隱孢子蟲主要通過糞-口途徑傳播，引發(fā)犢牛急性腹瀉。隱孢子蟲的生命周期包括滋養(yǎng)體、分裂體、配子體、受精卵和卵囊五個(gè)階段，其中卵囊為感染階段。隱孢子蟲生命力頑強(qiáng)，可以在環(huán)境中存活1個(gè)月[33]。隱孢子蟲被牛攝入體內(nèi)后，卵囊釋放出的孢子體穿入小腸細(xì)胞，通過無性生殖和有性生殖兩種方式產(chǎn)生大量大孢子體和小孢子體。大孢子體和小孢子體完成授精發(fā)育成孢子，產(chǎn)生的薄壁卵囊留在體內(nèi)進(jìn)行自體感染，厚壁卵囊排出體外繼續(xù)侵染其他個(gè)體。隱孢子蟲侵染腸上皮細(xì)胞后，類似牛冠狀病毒感染，犢牛的小腸細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)發(fā)生改變引發(fā)腸絨毛萎縮，導(dǎo)致犢牛小腸的消化吸收能力下降，降低飼料報(bào)酬率，并引起腸道積食和食物發(fā)酵，對(duì)機(jī)體造成不良影響。

1.3.2 球蟲

球蟲（Coccidia)隸屬于原生動(dòng)物界（Protozoa），其艾美爾科（Eimeridea）多個(gè)屬的病原體可引起家畜球蟲病，給畜牧業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失[34]。相關(guān)文獻(xiàn)記載中可感染牛的艾美爾屬球蟲包括阿拉巴艾美爾球蟲（E. alabamensis）（Christensen，1941）、牛艾美爾球蟲（E. bovis）、加拿大艾美爾球蟲（E.canadensis）、邱氏艾美爾球蟲（E.zuernii）等10余種[34]。各品種不同年齡段的牛均易感，其中6月齡內(nèi)的犢牛發(fā)病率最高，冬季寒冷時(shí)在飼養(yǎng)管理欠佳的奶牛場易感染球蟲[12]。艾美爾屬球蟲感染多發(fā)生在夏秋季及潮濕的雨季，犢牛誤食球蟲卵囊后，卵囊通過消化道進(jìn)入體內(nèi)，潛伏期為2 ～3 周，多為急性發(fā)病，病程可持續(xù)15 d 左右，常引起食欲不振、腹瀉，并且糞便帶有一些稀薄的血液，繼而變?yōu)榕藕谏S便。犢牛發(fā)病后期糞便全部帶血、體溫下降、極度消瘦、貧血、治療不及時(shí)易導(dǎo)致衰竭而死。臨床病變主要包括結(jié)腸中出現(xiàn)紅色水樣內(nèi)容物以及粗糙顆粒狀發(fā)紅的結(jié)腸黏膜，伴有瘀點(diǎn)出血和腸壁水腫。

2 診斷方法

2.1 臨床診斷法

引起犢牛腹瀉的病原復(fù)雜，受病因差異的影響，犢牛在患上腹瀉后的癥狀表現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)不同程度的差異。表1主要對(duì)不同致病原對(duì)應(yīng)的臨床癥狀，以及易感染犢牛的日齡特征進(jìn)行了梳理[35，36]。

表1 不同致病原對(duì)應(yīng)的犢牛腹瀉臨床癥狀

2.2 實(shí)驗(yàn)診斷法

2.2.1 免疫學(xué)方法

ELISA技術(shù)是利用抗體對(duì)靶抗原的識(shí)別來快速檢測(cè)臨床樣本中的病原體的常用免疫學(xué)方法，具有成本低、特異性強(qiáng)、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)[37]。ELISA 所用的抗體通常附著在玻璃、塑料或膜過濾器等固體表面，利用抗體捕獲樣本中存在的目標(biāo)抗原，最后利用比色反應(yīng)驗(yàn)證被捕獲抗原，并指示抗原-抗體反應(yīng)。

ELISA 技術(shù)已在診斷醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到應(yīng)用。商用Ag-ELISA 試劑盒可用于檢測(cè)糞便樣本中的BRoV、BCoV 和隱孢子蟲等病原體。采集高質(zhì)量的樣本對(duì)于獲得可靠的檢測(cè)結(jié)果非常重要，應(yīng)采集急性感染犢牛的新鮮糞便，以便獲得最佳檢測(cè)數(shù)據(jù)。

2.2.2 分子生物學(xué)方法

PCR 技術(shù)是檢測(cè)犢牛腹瀉病原體常用的分子生物學(xué)方法。該法首先需要提取目標(biāo)病原體的基因組，之后將樣品與熱穩(wěn)定的DNA 聚合酶（例如Taq DNA 聚合酶）、dNTP、引物和PCR 緩沖液混合，在自動(dòng)熱循環(huán)儀中進(jìn)行25 ～40 個(gè)擴(kuò)增循環(huán)[38]。反應(yīng)完成后，進(jìn)行電泳、上樣，DNA 經(jīng)過溴化乙錠染色后，PCR產(chǎn)物可以在瓊脂糖或丙烯酰胺凝膠上顯現(xiàn)，根據(jù)擴(kuò)增片段的大小和有無，對(duì)病原體進(jìn)行檢測(cè)和識(shí)別。

PCR檢測(cè)技術(shù)適用于細(xì)胞培養(yǎng)物中難以分離的病毒或需要長時(shí)間生長的細(xì)菌，PCR檢測(cè)技術(shù)具有操作簡便、靈敏度高和速度快等優(yōu)點(diǎn)。但由于其高靈敏度，現(xiàn)場采樣或?qū)嶒?yàn)室處理過程中需要注意假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。此外，對(duì)于具有高突變率的RNA 病毒（如輪狀病毒），還需要持續(xù)監(jiān)測(cè)毒株變異情況，確定流行優(yōu)勢(shì)基因型。

2.2.3 電鏡

電子顯微鏡可以從形態(tài)特征上對(duì)病毒進(jìn)行檢測(cè)和鑒定。目前應(yīng)用于病原檢測(cè)的電鏡技術(shù)主要分為兩種：直接電鏡（EM）和免疫電鏡（IEM）[39]。大多數(shù)導(dǎo)致犢牛腹瀉的病毒如BNoV、BRoV、BCoV等很難在細(xì)胞中分離和繁殖，但這些病毒利用EM 技術(shù)能實(shí)現(xiàn)可視化，利用病毒獨(dú)特的形態(tài)進(jìn)行區(qū)分和鑒定[40]。但是EM 技術(shù)也具有弊端，在病毒檢測(cè)時(shí)靈敏度較低，樣本需要含有大量的病毒顆粒（104～106個(gè)病毒顆粒/mL），并且不能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣本[41]。相較而言，IEM 技術(shù)的檢出率要高得多，IEM技術(shù)的靈敏度比EM高10倍以上，更容易捕捉到特定病原。

從患病犢牛身上準(zhǔn)確采集糞便樣本對(duì)電鏡檢測(cè)鑒定是否成功至關(guān)重要。雖然電鏡檢測(cè)鑒定可以檢測(cè)不明感染原因引起的犢牛腹瀉，但電子顯微鏡的高成本和對(duì)實(shí)驗(yàn)室操作人員的高熟練度要求，限制了EM的普及。

2.2.4 基因芯片

基因芯片技術(shù)是多種學(xué)科交叉滲透的高新生物技術(shù)，它融合了生命科學(xué)、化學(xué)、微電子學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)和生物信息學(xué)等諸多學(xué)科領(lǐng)域的成就，具有快速、高效、大規(guī)模、高容量、高度并行性的特點(diǎn)[42]。基因芯片技術(shù)將大量已知序列的寡核苷酸致密有序的固定在各種載體的表面，形成DNA微陣列，之后與帶有熒光標(biāo)記的待測(cè)核酸樣品進(jìn)行雜交，對(duì)雜交信號(hào)進(jìn)行掃描以及計(jì)算機(jī)檢測(cè)分析后，可以提高臨床樣本中病原體的檢出效率。據(jù)報(bào)道，基因芯片技術(shù)在一些輪狀病毒的鑒定和分群研究中得到使用[43，44]，但是因?yàn)榧夹g(shù)成本高、儀器設(shè)備限制等因素目前尚未普及，主要在部分科研院所動(dòng)物疫病檢測(cè)中應(yīng)用該技術(shù)。

3 綜合防控

誘發(fā)犢牛腹瀉的因素有多種，主要可以概括為犢牛免疫力較弱，易感腹瀉相關(guān)病原體和圍產(chǎn)期育犢環(huán)境差，飼養(yǎng)管理水平跟不上兩類。在養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中，養(yǎng)殖場要充分做好重要環(huán)節(jié)的生物安全防控措施，病畜及時(shí)隔離治療，提高育犢區(qū)飼養(yǎng)條件，方能減少犢牛腹瀉的發(fā)病機(jī)率，從根本上遏制病原體傳播。

3.1 提高犢牛免疫力

新生犢牛由于免疫系統(tǒng)尚未完全發(fā)育，最容易受到環(huán)境中病原體的感染。母牛初乳中含有大量可以抵御病菌的抗體和免疫細(xì)胞，對(duì)增強(qiáng)新生犢牛抵抗力非常關(guān)鍵，所以要及時(shí)為新生犢牛提供足量的初乳。在犢牛的發(fā)育過程中，要保證母牛產(chǎn)乳量滿足犢牛的生長需要，避免因?yàn)槟溉閿z入不足而導(dǎo)致犢牛免疫力低下。

3.2 保障犢牛良好的生活環(huán)境

犢牛受環(huán)境因素變化容易產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，如大風(fēng)、低溫、高濕度等因素都可能引起犢牛產(chǎn)生應(yīng)激，增加犢牛腹瀉發(fā)病概率[45]。因此，要保障犢牛生長的環(huán)境適宜且相對(duì)穩(wěn)定，避免環(huán)境溫度過冷或過熱，或者通過人工控制育種時(shí)間，將產(chǎn)犢時(shí)間設(shè)定在本地氣候相對(duì)穩(wěn)定的季節(jié)。環(huán)境污濁是引發(fā)犢牛腹瀉的主要原因，應(yīng)保證犢牛生存環(huán)境干燥通風(fēng)，溫度相對(duì)穩(wěn)定，定期清理糞便，并要及時(shí)消毒。對(duì)于染病犢牛，應(yīng)做好隔離處理，避免病菌在牛群中擴(kuò)散。

3.3 注重圍產(chǎn)期產(chǎn)仔管理

母牛的營養(yǎng)狀況直接關(guān)系到犢牛生長發(fā)育和免疫力提高[46，47]。母牛攝入的營養(yǎng)不足，容易導(dǎo)致牛奶產(chǎn)量下降和乳汁免疫球蛋白下降等情況，小牛生長所需的牛乳不能得到保障，營養(yǎng)攝入缺失，免疫能力下降，犢牛腹瀉發(fā)生幾率增加。因此，在母牛妊娠期和哺乳期，需要保證母牛攝入充足的營養(yǎng)。此外，母牛在分娩階段比較敏感，疾病感染風(fēng)險(xiǎn)增加，注重圍產(chǎn)期飼養(yǎng)管理，可降低如BVDV 等垂直傳播疾病的發(fā)生概率。

4 討 論

犢牛腹瀉是影響犢牛健康生長最嚴(yán)重的疾病之一，約占新生小牛發(fā)病率的80%，是導(dǎo)致世界各地養(yǎng)牛業(yè)發(fā)展受制和效益下降的主要原因。引起犢牛腹瀉發(fā)病的原因復(fù)雜，臨床表現(xiàn)多樣，養(yǎng)殖從業(yè)主體要在掌握典型癥狀及其對(duì)應(yīng)的致病原因基礎(chǔ)上，采取相應(yīng)的鑒別方法加以診斷。雖然目前針對(duì)犢牛腹瀉的檢測(cè)手段和防控措施都有很大的進(jìn)展，但仍存在較多問題。比如，在檢測(cè)技術(shù)上，應(yīng)用病毒分離可確認(rèn)臨床標(biāo)本中存在的傳染性病毒，但缺點(diǎn)是低靈敏度，受培養(yǎng)細(xì)胞特性的限制，須達(dá)到正確收集和保證病毒生存能力的要求；應(yīng)用電子顯微鏡技術(shù)雖然形態(tài)學(xué)可視化，但樣品中需要大量病毒顆粒；在防控措施上，因管理不當(dāng)、環(huán)境衛(wèi)生差、免疫措施不到位等均可引起犢牛腹瀉。因此，在養(yǎng)殖生產(chǎn)中防控犢牛腹瀉應(yīng)以預(yù)防為主，要特別注意犢牛的防寒保暖、牛舍和用具的消毒、母牛的飼養(yǎng)管理、免疫流程的規(guī)劃以及流行病的預(yù)防等綜合措施。對(duì)受感染的犢牛應(yīng)積極隔離、治療，通過防控和治療相互結(jié)合，從源頭上控制犢牛腹瀉，避免造成經(jīng)濟(jì)損失。