蔣 魁，胡曉娟，徐創(chuàng)文，洪敏娜，劉曦瑤，麥曉勇，陳海誼，楊 鏗

1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/廣東省漁業(yè)生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510300

2.廣州市欣海利生生物科技有限公司，廣東 廣州 510300

凡納濱對蝦 (Litopenaeusvannamei) 又名南美白對蝦，最初主要棲息于南美太平洋地區(qū)[1]，其對鹽度、溫度的適應(yīng)范圍廣，且生長快、肉質(zhì)好，是當(dāng)今世界養(yǎng)殖產(chǎn)量最高的對蝦品種[2]，目前在中國東部沿海到西部內(nèi)陸等區(qū)域均有養(yǎng)殖。根據(jù)中國漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒數(shù)據(jù)，2022 年我國凡納濱對蝦養(yǎng)殖總產(chǎn)量高達(dá)209.86 萬噸[3]。

多糖 (Polysaccharide) 是由超過10 個單糖的醛基和酮基通過苷鍵連接成的聚合糖高分子碳水化合物，是構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)之一。多糖可以通過增大巨噬細(xì)胞體積，促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖，改善淋巴細(xì)胞亞群結(jié)構(gòu)，促進(jìn)細(xì)胞因子分泌，提高動物機(jī)體血清中抗體水平等來提高機(jī)體免疫力[4-6]。免疫多糖作為水產(chǎn)養(yǎng)殖免疫增強(qiáng)劑使用，具有廣泛的應(yīng)用前景及生態(tài)和經(jīng)濟(jì)收益，能夠替代部分抗生素，減少藥物的使用量，減輕對養(yǎng)殖水環(huán)境的污染，提高對蝦養(yǎng)殖的成功率。

裂褶菌 (SchizophyllumcommunerFr.) 是裂褶菌科、裂褶菌屬的真菌[7]，廣泛分布于世界各地。裂褶菌多糖是裂褶菌子實(shí)體、菌絲體或發(fā)酵液提取的一種活性多糖，因其具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗腫瘤和調(diào)節(jié)免疫等多種功效而受到廣泛關(guān)注[8]。目前，已陸續(xù)報道樺褐孔菌 (Inonotusobliquus) 多糖[9]、蟲草多糖[10]、靈芝多糖[11]、灰樹花多糖[12]、β-1,3 葡聚糖[13]和香菇多糖[14]等多糖作為免疫增強(qiáng)劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中，顯著提高了養(yǎng)殖動物的生長性能、免疫力和抗氧化能力。已有學(xué)者對裂褶菌多糖的理化性質(zhì)、發(fā)酵提純進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其能顯著提高小鼠 (Musmusculus) 的免疫力和抗腫瘤能力[15]，而在水產(chǎn)養(yǎng)殖中尚未見關(guān)于裂褶菌多糖的應(yīng)用研究報道。本研究在飼料中添加不同水平的裂褶菌多糖，分析凡納濱對蝦的生長性能、免疫酶和抗氧化酶活力、對蝦腸道及菌群結(jié)構(gòu)的變化，以期為裂褶菌多糖在凡納濱對蝦養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

本實(shí)驗(yàn)在饒平西海岸生物科技有限公司養(yǎng)殖基地展開，12 口室內(nèi)水泥池，每口池面積25 m2，凡納濱對蝦選用福建漳浦博澳快大品系蝦苗。裂褶菌多糖由廣州市欣海利生生物科技有限公司提供。所用凡納濱對蝦配合飼料為澳華集團(tuán)蝦安康系列，主要營養(yǎng)成分 (質(zhì)量分?jǐn)?shù)) 為：粗蛋白質(zhì)42.0%，粗脂肪6.0%，粗纖維5.0%，粗灰分18.0%，總磷2.0%，賴氨酸2.4%，水分12%等。

養(yǎng)殖水源為自然海水，鹽度為25‰～28‰，水質(zhì)清澈，符合GB 11607—1989《漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》和NY 5052—2001《無公害食品 海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)》的要求。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與養(yǎng)殖管理

實(shí)驗(yàn)用凡納濱對蝦在池塘中暫養(yǎng)28 d，投喂對蝦配合飼料。實(shí)驗(yàn)開始時選取初始體質(zhì)量約為1.85 g 的對蝦，每口池塘投放約12 500 尾。實(shí)驗(yàn)設(shè)置對照組和實(shí)驗(yàn)組共4 組，飼料中裂褶菌多糖的添加量(質(zhì)量分?jǐn)?shù))分別為0% (C 組)、0.5% (S1 組)、1.0% (S2 組) 和2.0% (S3 組)，每組3 口池塘。每日分別于6:00、12:00 和18:00 投喂3 次，日投喂量為體質(zhì)量的4%～6%，根據(jù)攝食情況調(diào)整投喂量，進(jìn)行56 d 的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。

裂褶菌多糖的添加方法為：稱取對應(yīng)飼料量百分比的裂褶菌多糖用少量水稀釋后，再與飼料攪拌均勻，晾干0.5 h 后投喂。實(shí)驗(yàn)期間保持水溫為(27.5±2.5) ℃、pH 為8.0±0.4、溶解氧質(zhì)量濃度＞7.0 mg·L-1，氨氮質(zhì)量濃度＜0.5 mg·L-1。

1.3 樣品采集

在養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束前禁食24 h。實(shí)驗(yàn)第56 天，從每口池塘隨機(jī)采集65 尾對蝦，其中30 尾用于測量記錄體長及體質(zhì)量。15 尾用于檢測對蝦血清中的生化指標(biāo)及酶活，用滅菌的1 mL 注射器和5 號針頭從蝦頭部的后緣插入圍心腔進(jìn)行采血，置于1.5 mL 無菌離心管中[11]，4 ℃靜置過夜，5 000 r·min-1離心15 min 取上清液，于-80 ℃冰箱中保存。其余20 尾對蝦制備兩份腸道樣品，一份置于10 mL 4% (質(zhì)量分?jǐn)?shù)) 多聚甲醛中常溫保存，用于腸道切片觀察；另一份置于10 mL 保存液 [配方 (1 L)：無水乙醇 750 mL，0.5 mol·L-1EDTA 10 mL，無菌水240 mL] 中于-80 ℃保存，進(jìn)行對蝦腸道菌群結(jié)構(gòu)分析。

1.4 指標(biāo)測定

1.4.1 生長性能測定

用直尺和電子天平測量記錄對蝦的體長和體質(zhì)量。

1.4.2 血清生化、免疫和抗氧化指標(biāo)測定

采用Beckman Synchron CX5 全自動生化分析儀測定血清中總蛋白 (TP)、膽固醇 (CHO)、尿酸(UC) 等的濃度。谷丙轉(zhuǎn)氨酶 (ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總一氧化氮合成酶 (TNOS)、超氧化物歧化酶 (SOD)、溶菌酶 (LZM)、堿性磷酸酶 (AKP)、過氧化氫酶 (CAT) 等酶活性，丙二醛 (MDA) 濃度和總抗氧化能力 (T-AOC) 均采用南京建成生物工程研究所的專用試劑盒測定；酚氧化酶 (PO) 活性采用北京雪杰特科科技有限公司的專用試劑盒測定。

1.4.3 腸道組織上皮細(xì)胞切片分析

取置于10 mL 4%多聚甲醛中常溫保存的對蝦腸道樣品，由武漢塞維爾生物科技有限公司進(jìn)行腸道組織切片、HE 染色、顯微觀察分析，并使用CaseViewer 軟件測量上皮細(xì)胞高度。

1.4.4 對蝦腸道菌群結(jié)構(gòu)分析

取置于10 mL 保存液中保存的對蝦腸道樣品，用于對蝦腸道菌群結(jié)構(gòu)分析。選擇16S rDNA的V4—V5 區(qū)為擴(kuò)增區(qū)間，擴(kuò)增引物為：515F (5'-GTGCCAGCMGCCGCGG-3')和907R (5'-CCGTCAATTCMTTTRAGTTT-3')，高通量測序分析由明科生物技術(shù) (杭州) 有限公司使用Illumina MiSeq 平臺測定。采用 QIIME 1.9.1 軟件計(jì)算對蝦腸道菌群的多樣性指數(shù)。

1.5 生長性能和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

生長性能指標(biāo)體質(zhì)量增長率 (Weight gain rate,WGR)、特定生長率 (Specific growth rate,SGR)、飼料系數(shù) (Feed conversion rate,FCR)、成活率 (Survival rate,SR)、攝食量 (Feed intake,FI) 等計(jì)算公式如下：

式中：RWG為平均體質(zhì)量增長率 (%)；RSG為特定生長率 (%·d-1)；FE為飼料系數(shù)；RS為成活率 (%)；QFI為攝食量 (g)；F為總攝食量 (g)；Wt為終末體質(zhì)量 (g)；W0為初始體質(zhì)量 (g)；n1為實(shí)驗(yàn)開始時的蝦尾數(shù)；n2為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時的蝦尾數(shù)；t為養(yǎng)殖時間 (d)。

2 結(jié)果

2.1 裂褶菌多糖對生長性能的影響

裂褶菌多糖對凡納濱對蝦生長性能的影響見表1。實(shí)驗(yàn)56 d 后，S2 組的終末均體質(zhì)量為23.13 g，顯著高于C、S1 和S3 組 (P＜0.05)，而C、S1、S3組間無顯著性差異 (P＞0.05)。S2 組平均體質(zhì)量增長率和特定生長率分別為1 150.45%和4.51%，顯著高于C、S1 和S3 組 (P＜0.05)，而C、S1、S3 組間無顯著性差異 (P＞0.05)。S2 組成活率為75.37%，顯著高于C、S1 和S3 組 (P＜0.05)，且S3 組成活率顯著高于C 和S1 組 (P＜0.05)。S1、S2、S3 組攝食量顯著高于C 組 (P＜0.05)，且S2 組 (25.63 g) 顯著高于S1 (21.40 g) 和S3 組 (21.13 g) (P＜0.05)，S1、S3 組無顯著性差異 (P＞0.05)。各組間的飼料系數(shù)和終末體長無顯著性差異 (P＞0.05)。

表1 裂褶菌多糖對凡納濱對蝦生長性能比較Table 1 Comparison of effects of schizophyllan on growth performance of L.vannamei

2.2 裂褶菌多糖對腸道上皮細(xì)胞的影響

養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取凡納濱對蝦的腸組織切片，用HE 染色后在顯微鏡下觀察。結(jié)果顯示對照組腸道上皮細(xì)胞有部分損傷、脫落，微絨毛排列不緊密，內(nèi)層上皮細(xì)胞的高度低，而S2 和S3 組對蝦腸道內(nèi)層上皮細(xì)胞緊密連接，微絨毛排列整齊，無明顯損傷 (圖1)。S2 和S3 組內(nèi)層上皮細(xì)胞的高度最高達(dá)36 μm，顯著高于對照組 (30 μm,P＜0.05)，S2、S3 組間無顯著性差異 (P＞0.05，圖2)。

圖1 對照組與實(shí)驗(yàn)組腸道切片對比 (200×)a.C 組 (0%) 腸道切片；b.S1 組 (0.5%) 腸道切片；c.S2 組 (1.0%) 腸道切片；d.S3 組 (2.0%) 腸道切片；A、B、C 為不同上皮細(xì)胞高度。Fig.1 Comparison of intestinal slices between control group and test groups (200×)a.Intestinal slices of Group C; b.Intestinal slices of Group S1; c.Intestinal slices of Group S2; d.Intestinal slices of Group S3;A,B and C represent different epithelial cell heights.

圖2 對照組與實(shí)驗(yàn)組腸道上皮細(xì)胞高度Fig.2 Height of intestinal epithelial cells in control and test groups

2.3 裂褶菌多糖對血清生化指標(biāo)的影響

添加裂褶菌多糖的實(shí)驗(yàn)組血清總蛋白濃度較對照組有升高趨勢，而膽固醇濃度有降低趨勢，但差異均不顯著 (P＞0.05，表2)。S2 (12.95 μmol·L-1)和S3 組 (10.75 μmol·L-1) 的尿酸濃度顯著低于對照組 (20.17 μmol·L-1,P＜0.05)，S1 組則無顯著性差異(P＞0.05)。谷草轉(zhuǎn)氨酶活性各組間無顯著性差異(P＞0.05)；各實(shí)驗(yàn)組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均低于對照組，其中S1 (247.33 U·L-1) 和S3 組 (230.67 U·L-1)顯著低于對照組 (431.67 U·L-1,P＜0.05)?？梢姡砑舆m當(dāng)水平的裂褶菌多糖能夠提高對蝦血清總蛋白濃度，顯著降低尿酸濃度和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性。

表2 裂褶菌多糖對凡納濱對蝦血清生化指標(biāo)的影響Table 2 Effect of schizophyllan on serum biochemical indexes of L.vannamei

添加裂褶菌多糖的實(shí)驗(yàn)組S2 (0.14 U·mL-1) 和S3 組 (0.13 U·mL-1) 血清中溶菌酶活性顯著高于對照組 (0.05 U·mL-1，P＜0.05，表2)。3 個實(shí)驗(yàn)組血清酚氧化酶和堿性磷酸酶活性均顯著高于對照組(P＜0.05)，且3 個實(shí)驗(yàn)組間無顯著性差異 (P＞0.05)。S2 (15.59 U·mL-1) 和S3 組 (16.23 U·mL-1) 血清中總一氧化氮合成酶的活性顯著高于對照組 (12.89 U·mL-1,P＜0.05)，S1 組與對照組無顯著性差異 (P＞0.05)，且S3 組顯著高于S1 組 (P＜0.05)?？梢?，添加不同濃度的裂褶菌多糖能夠提高對蝦溶菌酶、酚氧化酶、堿性磷酸酶和總一氧化氮合成酶活性。

飼料中添加適量的裂褶菌多糖提高了對蝦血清中超氧化物歧化酶活性，S2 組 (333.78 U·mL-1) 活性顯著高于對照組 (246.55 U·mL-1,P＜0.05) (表2)。S1、S2 和S3 組過氧化氫酶活性均顯著高于對照組(P＜0.05)，且S2 組顯著高于S1 組 (P＜0.05)，S3 與S1 組無顯著性差異 (P＞0.05)。各實(shí)驗(yàn)組血清中丙二醛含量較對照組有下降趨勢 (P＞0.05)。S2 組 (8.67 U·mL-1) 血清總抗氧化能力顯著高于對照組 (5.18 U·mL-1,P＜0.05)，其余各實(shí)驗(yàn)組差異不顯著 (P＞0.05)?？梢?，添加不同濃度的裂褶菌多糖能夠提高對蝦總抗氧化能力、超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性，降低丙二醛濃度。

2.4 裂褶菌多糖對凡納濱對蝦腸道菌群的影響

由表3 可知，飼料中添加不同濃度的裂褶菌多糖對凡納濱對蝦腸道有效OTUs 數(shù)目無顯著性影響(P＞0.05)，腸道OTUs 數(shù)目最高值出現(xiàn)在S2 組。用Alpha 多樣性分析對蝦腸道微生物群落的多樣性，顯示各組腸道菌群檢測覆蓋率指數(shù)均大于0.99，樣品達(dá)到要求。凡納濱對蝦腸道菌群Ace、Chao1、Shannon、Simpson 指數(shù)均無顯著性差異(P＞0.05)。

表3 裂褶菌多糖對凡納濱對蝦腸道菌群多樣性的影響Table 3 Effects of schizophyllan on intestinal microflora diversity of L.vannamei

在門水平，對蝦腸道菌群主要包含變形菌門、放線菌門、軟壁菌門、擬桿菌門等 (圖3)。各組菌群類別基本一致，但相對豐度存在一定差異。S1 組變形菌門的相對豐度 (46.35%) 較對照組(52.67%) 有下降趨勢 (P＞0.05)。S2 組軟壁菌門的相對豐度 (5.33%) 較對照組 (1.05%) 有上升趨勢(P＞0.05)，而S3 組軟壁菌門的相對豐度 (12.32%)顯著高于對照組 (P＜0.05)。與對照組相比，添加裂褶菌多糖的各實(shí)驗(yàn)組變形菌門相對豐度均下降，軟壁菌門升高。

在屬水平上，腸道菌群主要由Pseudoruegeria、Formosa、Muricauda、魯杰氏菌 (Ruegeria) 和弧菌屬 (Vibrio) 等組成 (圖4)。其中，S1 和S2 組中Formosa(11.65% 和8.02%)、Pseudoruegeria(12.03%和16.32%)、Muricauda(6.67%和6.69%)的相對豐度均顯著高于對照組 (P＜0.05)；而弧菌屬(2.32%和0.71%) 的相對豐度顯著低于對照組 (5.33%,P＜0.05)。S2 和S3 組魯杰氏菌屬 (5.73%和12.38%)的相對豐度顯著高于對照組 (2.62%,P＜0.05)。

圖4 不同水平裂褶菌多糖飼喂凡納濱對蝦腸道菌群屬水平的相對豐度Fig.4 Relative abundance of predominant genus of intestinal microflora of L.vannamei fet with different concentrations of schizophyllan

3 討論

多糖作為免疫增強(qiáng)劑已廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中，其可顯著提高對蝦的生長性能。本研究將裂褶菌多糖以不同比例添加到飼料中飼養(yǎng)凡納濱對蝦，實(shí)驗(yàn)組對蝦的終末體質(zhì)量、體長等生長性能均有提高，其中S2 組對蝦的體質(zhì)量增長最顯著；且腸道上皮細(xì)胞排列整齊、高度高。這一結(jié)果與飼料中添加適量的β 葡聚糖能夠顯著提高紅鯛 (Pagrus auratus)[16]、南亞鯪魚 (Labeorohitahamilton)[17]及大黃魚 (Pseudosciaenacrocea)[18]生長性能的結(jié)果相似；也與添加其他多糖如樺褐孔菌多糖[9]能顯著提高凡納濱對蝦的成活率和攝食量，靈芝多糖[11]和β-1,3 葡聚糖[13]能顯著提高凡納濱對蝦的終體質(zhì)量、平均體質(zhì)量增長率的結(jié)果一致。這可能是由于多糖進(jìn)入到養(yǎng)殖動物腸道內(nèi)，為其提供營養(yǎng)，且在腸道內(nèi)發(fā)酵生成短鏈脂肪酸，保護(hù)和修復(fù)腸道上皮細(xì)胞，改善腸道結(jié)構(gòu)，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收，從而提高了攝食量、生長性能及腸道健康度，促使對蝦攝入更多飼料和營養(yǎng)以滿足自身生長及日?；顒铀璧哪芰?。多糖因具有獨(dú)特的功效與特點(diǎn)，目前已在水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中發(fā)揮著重要作用。

血清中生化指標(biāo)是反映養(yǎng)殖動物體內(nèi)物質(zhì)代謝和組織器官機(jī)能狀態(tài)的重要指標(biāo)[19]。總蛋白和膽固醇等指標(biāo)變化是動物體內(nèi)蛋白代謝和脂類吸收水平的體現(xiàn)，而尿酸是動物血清中蛋白質(zhì)代謝分解后產(chǎn)生的，尿酸濃度越低，表明蛋白質(zhì)分解的越少，其濃度也反映出動物體內(nèi)的物質(zhì)代謝是否正常[20-22]。本研究中，添加不同水平的裂褶菌多糖能提高對蝦血清總蛋白濃度，膽固醇和谷草轉(zhuǎn)氨酶無顯著差異，尿酸濃度和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著降低，與劉小玲等[9]研究的樺褐孔菌多糖對凡納濱對蝦生化指標(biāo)影響的結(jié)果一致，表明飼料中添加裂褶菌多糖能減少蛋白質(zhì)的異常消耗分解，保護(hù)對蝦健康。

溶菌酶、總一氧化氮合成酶、酚氧化酶和堿性磷酸酶等是血清中的重要免疫酶，其活性高低直接反映對蝦免疫能力的強(qiáng)弱，而增強(qiáng)免疫力和抗氧化能力是魚蝦預(yù)防病害的重要途徑[23]。本研究中，添加裂褶菌多糖能提高對蝦溶菌酶、酚氧化酶、堿性磷酸酶和總一氧化氮合成酶等免疫酶活性；還能增強(qiáng)總抗氧化能力、超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性，降低丙二醛濃度，且S2 組免疫酶活性和抗氧化能力顯著高于對照組 (P＜0.05)。楊娜等[15]將不同劑量的裂褶菌多糖灌喂小鼠發(fā)現(xiàn)，其對免疫力低下的小鼠有一定的恢復(fù)作用，可增強(qiáng)小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬能力，當(dāng)裂褶菌多糖質(zhì)量濃度為2 000 μg·mL-1時，對結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的抑制率可達(dá)45.32%。在水產(chǎn)飼料中添加多糖或單糖等免疫增強(qiáng)劑可顯著提高凡納濱對蝦[8]、卵形鯧鲹 (Trachinotusovatus)[24]、刺參 (Stichopusjaponicus)[25]、大菱鲆 (Scophthalmusmaximus)[26]和舌齒鱸 (Dicentrarchuslabrax)[27]等養(yǎng)殖動物的溶菌酶、酚氧化酶等免疫酶活性和抗氧化能力，與本研究結(jié)果相似。但在實(shí)際養(yǎng)殖過程中，使用免疫增強(qiáng)劑提高養(yǎng)殖動物免疫力，其效果與使用劑量和時間有密切關(guān)系，有研究發(fā)現(xiàn)高劑量的β-1,3 葡聚糖會抑制魚蝦的生長，降低其免疫能力[28-30]。故在養(yǎng)殖過程中使用免疫多糖應(yīng)確定適用劑量，以達(dá)到最佳的養(yǎng)殖效果。

腸道是機(jī)體消化吸收的主要器官，內(nèi)含大量結(jié)構(gòu)復(fù)雜的微生物菌群，承擔(dān)著營養(yǎng)吸收的重任。微生物菌群與宿主之間存在著相互促進(jìn)、相互依賴、相互制約的關(guān)系。通常來說，腸道菌群的多樣性降低可能會使腸道菌群結(jié)構(gòu)紊亂，增加機(jī)體的患病風(fēng)險[31]。Wu 等[32]研究發(fā)現(xiàn)，厚壁菌門、軟壁菌門、變形菌門、放線菌門和擬桿菌門等是健康凡納濱對蝦腸道中的主要組成門類，與本研究結(jié)果類似。有研究指出變形菌門通常在機(jī)體腐敗中起重要作用，其含量過高可能會導(dǎo)腸道微生態(tài)環(huán)境發(fā)生改變、失調(diào)或者腸炎等，而厚壁菌門可幫助腸道發(fā)酵多糖、吸收營養(yǎng)等[33-34]。本研究中，添加裂褶菌多糖可提高對蝦腸道上皮細(xì)胞高度，S2 和S3 組顯著高于對照組 (P＜0.05)，變形菌門相對豐度降低。說明添加裂褶菌多糖調(diào)控了凡納濱對蝦的腸道菌群結(jié)構(gòu)，降低了有害菌的相對豐度。有報道發(fā)現(xiàn)，魯杰氏菌通過產(chǎn)生抑菌蛋白和密度感應(yīng)淬滅酶等方式防控水產(chǎn)養(yǎng)殖病害，并且能夠抑制發(fā)光弧菌 (Vibrio vulnificus) 等多種常見病原菌[35]。Pseudoruegeriasp.M32A2M 分泌的新化合物二酮哌嗪環(huán) [Ala-Gly]，對幾種甲藻類有特定的殺藻活性，但對硅藻類無影響[36]；而Muricauda則是一種潛在的有機(jī)污染物降解菌。陳曉瑛等[37]研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加低聚木糖，對蝦腸道的總菌和雙歧桿菌數(shù)量顯著高于對照組(P＜0.05)，腸道弧菌數(shù)量顯著低于對照組 (P＜0.05)；Su 等[38]和潘金露[39]均報道了飼料中添加殼寡糖 (COS) 能夠顯著降低魚類腸道弧菌屬的相對豐度；殷朝敏等[40]將裂褶菌多糖的復(fù)合制劑應(yīng)用于調(diào)控人體的腸道菌群，效果顯著。與本研究添加裂褶菌多糖的S1 和S2 組中Formosa、Pseudoruegeria和Muricauda的相對豐度均顯著高于對照組 (P＜0.05)，S2 和S3 組魯杰氏菌屬的相對豐度顯著高于對照組 (P＜0.05)，而與對蝦白便綜合癥相關(guān)的致病弧菌屬[41]的相對豐度顯著低于對照組(P＜0.05) 的結(jié)果相似。這可能是由于多糖作為碳源能促進(jìn)腸道內(nèi)有益菌的增殖，同時多糖的結(jié)構(gòu)物質(zhì)與病原微生物外源凝集素相似，其與病原菌相結(jié)合，攜帶病原菌排出體外，減少了病原菌與腸道的結(jié)合[42]。從而起到調(diào)控養(yǎng)殖動物的腸道菌群結(jié)構(gòu)、促進(jìn)有益菌增殖、降低有害菌豐度的作用，進(jìn)而減少腸道相關(guān)疾病的發(fā)生。

4 結(jié)論

飼料中添加1.0% 的裂褶菌多糖對凡納濱對蝦的生長性能、抗氧化能力和免疫力均有顯著提升作用，同時還能調(diào)控腸道門和屬水平上的菌群豐度，提高有益菌占比，降低有害菌占比。