郭寧寧，范 鑫，周 娟，季 晨，周博文，姜宏堯，韓俊平

1 天津嘉立荷牧業(yè)集團有限公司，天津 300402

2 樂陵市畜牧業(yè)發(fā)展中心，山東德州 253607

3 天津津墾牧業(yè)集團有限公司，天津 300450

0 引言

在奶牛場中，對于奶牛的妊娠診斷主要包括直腸觸診法、試紙條檢測法以及B超聲像技術(shù)（簡稱“B超”）。直腸觸診法有簡單便捷的優(yōu)點，但對于技術(shù)員觸診經(jīng)驗有較高的要求，并且在奶牛妊娠早期，直腸觸診法的診斷準確率較低；試紙條檢測法主要是通過對奶牛妊娠期機體分泌的相關(guān)特異性糖蛋白或是孕酮進行檢測，從而確定奶牛的妊娠狀態(tài)，試紙條檢測法具有檢測快速、準確的優(yōu)點，但試紙條的一次性使用對于奶牛場來說是成本相對較高[1，2]。B超是發(fā)明于20世紀50年代的超聲聲像技術(shù)，在21世紀之后逐漸應(yīng)用于奶牛場早期妊娠診斷中，B超具有準確快速，對胎兒傷害小的優(yōu)點，對于對B超原理熟悉的人員，在經(jīng)過培訓(xùn)后可以很快掌握，B超診斷儀價格較為昂貴，但儀器的長期性和穩(wěn)定性是其不可替代的優(yōu)點[3]。B超不僅應(yīng)用在奶牛早期妊娠診斷工作上，并且在奶牛生殖系統(tǒng)疾病診斷上，同樣作為一種非損傷性的、高確診率的技術(shù)得到了應(yīng)用和發(fā)展[4]。目前，我國奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅猛，千頭奶牛場、萬頭奶牛場的建設(shè)在奶牛管理方面有較大的需求，繁殖工作往往是奶牛場工作的核心，B超可以提高奶牛早期妊娠的準確率，對假妊娠和繁殖疾病等牛只及時干預(yù)或治療，從而降低經(jīng)濟損失[5，6]。

1 B超的技術(shù)原理

超聲診斷技術(shù)建立于20世紀50年代，70年代開始逐漸發(fā)展應(yīng)用，B超是利用A型超聲聲像和M型超聲聲像顯示技術(shù)發(fā)展起來的，將A型的幅度調(diào)制顯示改為輝度調(diào)制顯示，亮度隨著回聲信號大小而變化，反映動物機體組織二維切面斷層圖像。B超顯示的實時切面圖像，真實性強，直觀性好，容易掌握。B超只有20多年歷史，但發(fā)展十分迅速，儀器不斷更新?lián)Q代，近年每年都有改進的新型B超診斷儀出現(xiàn)，B超診斷儀已成為超聲診斷最基本、最重要的設(shè)備[7]。

B超診斷儀的基本原理是利用超聲波的物理特性和動物機體組織的結(jié)構(gòu)特性，通過超聲探頭發(fā)射超聲，經(jīng)動物機體反射后形成回升，再通過接收器收集后形成回聲圖像。動物機體的不同部位對超聲的反射能力不同，因而回聲的強弱也不同，因此在圖像中會顯示強回聲區(qū)、等回聲區(qū)、低回聲區(qū)和無回聲區(qū)，從而顯示動物機體的不同結(jié)構(gòu)或是同一部位的不同狀態(tài)，就可以對組織器官的結(jié)構(gòu)和形態(tài)等進行相應(yīng)的判斷[8]。

2 B超診斷的檢查方法

目前，在奶牛場中主要使用兩種類型的B超儀器，分為手持式B超診斷儀和頭戴式B超診斷儀，兩種儀器的主要不同點在于顯示屏，使用方法是一致的。B超掃描法在奶牛上的應(yīng)用根據(jù)目的主要包括3種：體外掃描法、陰道掃描法和直腸掃描法。在奶牛場繁殖工作中主要應(yīng)用的方法是直腸掃描法。

直腸掃描法診斷時，首先將待檢奶牛保定在頸夾或臥床上，使用清潔劑清洗奶牛肛門四周，檢查手佩戴長臂手套后，涂抹潤滑劑，五指并攏旋轉(zhuǎn)穿過肛門，進入直腸后，手心隆起，一點點向外掏出但手切勿伸出直腸避免直腸充氣，清除直腸糞便后，將涂抹耦合劑的超聲探頭放入檢查手中，超聲探頭朝向手外，小心操作避免損傷直腸黏膜，將探頭緊貼子宮頸、子宮體和兩側(cè)子宮角橫向縱向進行掃描，通過顯示屏觀察結(jié)果。探查卵巢時，則需要緊貼直腸外壁繼續(xù)向深向下探入進行掃描檢查，對卵巢檢查時更需要小心謹慎，避免損傷[9]。

3 B超的早期妊娠診斷

目前，在不返情的條件下，奶牛一般在配種后第30天開始進行早期妊娠檢查，青年牛可以提前至26～28 天。妊娠檢查主要分為兩種：手檢和B超檢查。直腸檢查法主要采用的方法為胎膜滑動技術(shù)，使用大拇指和食指輕握子宮角，抬起后慢慢松手，子宮角內(nèi)部有墜落感則表明存在胎膜，奶牛是妊娠狀態(tài)，但手檢錯誤率較高，并且對檢查人的經(jīng)驗技術(shù)水平有較高的要求，所以目前大部分奶牛場采用的是B超檢查。B超檢查主要是檢查羊水和胎兒，在不清楚的情況下檢查卵泡和黃體。羊水是均勻液性無回聲區(qū)，在B超聲像上呈現(xiàn)均勻黑色圓形；卵泡為無回聲區(qū)，卵泡壁為強回聲區(qū)，在B超聲像上呈現(xiàn)邊緣清晰光滑的圓形或不規(guī)則圓形；黃體在不同時期有著不同的構(gòu)造，因此其B超聲像也根據(jù)其不同時期存在區(qū)別，發(fā)育期黃體內(nèi)為血管破裂后形成的血凝塊，因此在B超聲像上呈現(xiàn)不規(guī)則的灰黑色，中期黃體的主體部分為顆粒細胞吸收脂質(zhì)后增生肥大形成的黃體細胞，在B超上呈現(xiàn)顆粒的黑色狀結(jié)構(gòu)，外緣有明顯的分界線，當(dāng)黃體退化后邊緣線則不再明顯[10]。

3.1 未妊娠奶牛

未妊娠奶牛正常子宮B超聲像見圖1（橫切）和圖2（縱切），如圖所示，正常未妊娠奶牛子宮為閉合狀態(tài)，其B超聲像橫切面類似于胡蘿卜橫切，縱切面與胡蘿卜縱切類似，在B超聲像上可見緊密的低回聲區(qū)，外層為回聲較強的子宮肌肉層，內(nèi)層為回聲稍強的子宮腔。未妊娠時，奶牛子宮肌肉層較薄，回聲較為均勻，而當(dāng)奶牛妊娠后，子宮壁則會變粗變厚，回聲變得不再均勻。

圖1 未妊娠奶牛正常子宮B 超聲像圖（橫切面）

圖2 未妊娠奶牛正常子宮B 超聲像圖（縱切面）

正常奶牛卵巢B超聲像見圖2左，如圖所示，正常奶牛卵巢呈扁圓形，邊緣致密，回聲強且邊緣明顯，B超聲像顯示為實質(zhì)性回聲，在卵巢上可見大小不等的不同發(fā)育階段的卵泡，B超聲像顯示為低回聲的液性暗區(qū)，液性暗區(qū)的大小取決于卵泡發(fā)育階段。如圖3所示為多卵泡發(fā)育的卵巢B超聲像圖。

圖3 多卵泡發(fā)育卵巢B 超聲像

圖4 奶牛正常卵巢B 超聲像圖

3.2 妊娠奶牛

早期妊娠診斷可以對奶牛進行分群飼養(yǎng)管理，從而降低飼養(yǎng)成本，減少奶牛應(yīng)激，有效預(yù)防奶牛的早期胚胎死亡、流產(chǎn)以及難產(chǎn)等，從而提高胎牛的成活率，減少經(jīng)濟損失。

奶牛進行B超的早期妊娠檢查一般是在配種后30天左右，育成牛的早期妊娠檢查可提前至26～28 天，通過B超進行早期妊娠診斷不僅可以判斷奶牛與否妊娠，還可以通過聲像去判定母牛懷胎數(shù)、胎兒日齡以及胎兒性別。正常情況下，在B超聲像上可以觀察到胎兒的心跳位點和胎體個數(shù)，通過對心跳位點或是胎體個數(shù)的檢查可以推斷出母牛的懷胎數(shù)。當(dāng)對母牛懷胎數(shù)有診斷后，可以在分娩時提前做好準備，減少難產(chǎn)的風(fēng)險。

B超妊娠診斷還可以對胎兒的日齡進行判斷，胎兒在生長發(fā)育的第2周左右，胚胎內(nèi)細胞群增殖分化，逐漸在外圍形成內(nèi)胚層和外胚層，外胚層的近滋養(yǎng)層會與內(nèi)胚層共同形成一個腔，為羊膜腔，腔壁為羊膜，羊膜會將胚胎完全包裹，羊膜腔內(nèi)充滿羊水，而胚胎腹側(cè)繼續(xù)向外膨出，包裹羊膜囊，形成尿囊，尿囊與胚胎的消化管相連，起到排泄器官的作用。

如圖5所示，為妊娠30 天左右奶牛子宮B超聲像圖，此時在B超聲像上外圍高回聲區(qū)為擴張的子宮角壁，而子宮內(nèi)致密的高回聲亮點則為正在發(fā)育的胚胎，胚胎外圍和子宮角內(nèi)的低回聲區(qū)則為胚液，這個階段，胚胎的子葉胎盤發(fā)育不完全，在B超聲像上較難顯示。

圖5 妊娠30 天奶牛子宮B 超聲像圖

如圖6所示為妊娠50 天左右的奶牛子宮B超聲像圖，子宮中心致密高回聲區(qū)為胚胎，此時已經(jīng)能清晰地看到初具成形的胚胎輪廓，在胚胎外圍有一圈高亮的回聲輪廓為羊膜囊，羊膜囊外圍的低回聲區(qū)為尿囊腔，胚胎左上低回聲區(qū)為另一側(cè)未孕的子宮角。如圖7所示為妊娠50 天左右的小牛胚胎，此時胚胎被完全包裹在羊膜囊和尿囊中，羊膜囊中充滿羊水，此時胎盤子葉仍未發(fā)育完全。

圖6 妊娠50 天奶牛子宮B 超聲像圖

圖7 妊娠50 天左右胚胎

如圖8所示為妊娠60 天左右的奶牛子宮B超聲像圖，子宮中心致密高回聲區(qū)為胚胎，此時胚胎的頭部、軀干以及肢蹄部分均十分清晰，在胚胎最右側(cè)高亮強回聲區(qū)分別為羊膜囊和尿囊部分，聲像中黑色低回聲區(qū)分別為羊膜囊包裹的羊水和尿囊包裹的尿囊液，胚胎上方除肢蹄部分外也可看到臍帶部分，此時，胎盤子葉已經(jīng)開始逐漸發(fā)育，在尿囊外圍看到微微隆起的部分即為子葉。如圖9所示為妊娠60 天左右小牛胚胎，此時可以看出胚胎的頭部、眼部、軀干以及四肢均已初步成形，胚胎腹部有臍帶與胎盤連接，胎衣上的點狀的粉白色部分即為胎盤子葉[11]。

圖8 妊娠60 天奶牛子宮B 超聲像圖

圖9 妊娠60 天左右胚胎

在如今的獸用B超中，顯示屏上一般都有網(wǎng)格標記，每1 格均為1 cm×1 cm的方格，在網(wǎng)格線中胚胎的大小可以很明顯地看出，通過觀察胚胎的大小，就可以大致推斷胚胎的日齡。如表1與表2所示即為B超診斷時胚胎頂臀長和胚胎腦直徑與胚胎日齡的關(guān)系[12]。

表1 胚胎頂臀長與胚胎日齡的關(guān)系

表2 胚胎腦直徑與胚胎日齡的關(guān)系

4 B超在奶牛繁殖障礙疾病上的應(yīng)用

B超在奶牛場的作用不僅僅在于對奶牛早期妊娠的診斷，對于奶牛繁殖障礙疾病上同樣有著提高診斷率的作用，當(dāng)奶牛生殖系統(tǒng)存在疾病時，子宮或是卵巢的形態(tài)結(jié)構(gòu)就會產(chǎn)生不同程度的變化，在B超的聲像圖上也會與正常生殖器官存在較大的差異，結(jié)合臨床診斷便可以提高疾病診斷的準確率。

4.1 卵巢靜止

卵巢靜止是由于卵巢機能暫時受到擾亂，長期處于靜止狀態(tài)，母牛持久性不發(fā)情，卵巢的形狀、大小、質(zhì)地正常，但觸摸卵巢無卵泡和黃體，不出現(xiàn)周期性活動。因此，有人將卵巢靜止定義為沒有卵泡的卵巢，其實這種說法是不準確的，卵巢靜止狀態(tài)下的卵巢卵泡較小無法通過直腸檢查觸摸到，并不是沒有卵泡發(fā)育。B超聲像下的卵巢靜止卵巢較為致密，看不到明顯的成熟卵泡或是黃體，在相隔5～7 天后再次進行B超重復(fù)檢查，超聲像圖未見明顯變化，即可確診為卵巢靜止[13]。

4.2 卵巢囊腫

卵巢囊腫是指在奶牛的卵巢上形成囊性腫物，主要分為卵泡囊腫和黃體囊腫兩種。

卵泡囊腫一般認為是由奶牛機體的促卵泡素分泌過多或是黃體激素分泌不足引起的，還有一些影響卵巢排卵的因素，如日糧中缺乏維生素A，同期發(fā)情期間激素制劑使用不當(dāng)，生殖系統(tǒng)疾病如子宮炎、子宮內(nèi)膜炎、胎衣不下以及其他卵巢疾病繼發(fā)引起的。囊腫狀態(tài)下卵泡比一般的卵泡要大，囊腫數(shù)量表現(xiàn)為單個或是多個，一側(cè)卵巢或兩側(cè)同時發(fā)生，大小不等，與核桃或是拳頭相當(dāng)，囊腫壁薄而致密，其內(nèi)充滿囊腫液，如圖10為卵泡囊腫的B超聲像圖，具體表現(xiàn)為一個或多個較大面積的液性低回聲暗區(qū)，卵泡壁邊緣光滑，厚度小于或等于0.3 cm，無小梁結(jié)構(gòu)[14]。

圖10 卵泡囊腫的B 超聲像圖

正常黃體本身就為囊性結(jié)構(gòu)，當(dāng)囊性黃體持續(xù)存在增長或是黃體內(nèi)血腫含血量較多，血液被吸收后，均會導(dǎo)致黃體囊腫，黃體囊腫一種是由于促性腺激素分泌紊亂，黃體過量發(fā)育，尤其是妊娠黃體，腔較大，含有較多的液體，即被認為是黃體囊腫，另一種是在黃體退化為白體的過程中，由于某種原因?qū)е履夷[。如圖11為黃體囊腫的B超聲像圖，具體表現(xiàn)為有大面積的無回聲液性暗區(qū)，有時會出現(xiàn)一些薄而亮的白線，黃體壁邊緣光滑，輪廓清晰，厚度多大于0.3 cm，會出現(xiàn)小梁結(jié)構(gòu)[10]。

圖11 黃體囊腫的B 超聲像圖

4.3 持久黃體

正常奶牛卵巢的活動是周期性的，卵泡生長發(fā)育排出后，卵泡壁塌陷逐漸黃體化發(fā)育為黃體，當(dāng)黃體存在時，黃體會分泌黃體酮，抑制卵泡的生長發(fā)育，而當(dāng)卵子未受精時，黃體則會逐漸退化，從而開始新的卵泡生長發(fā)育階段，若卵子成功受精，則黃體會發(fā)育未妊娠黃體，一方面抑制卵泡的生長發(fā)育，一方面起到維持妊娠的作用。而當(dāng)排卵后周期性黃體或是當(dāng)奶牛分娩后的妊娠黃體持續(xù)存在于卵巢中，抑制卵泡正常的生長發(fā)育和抑制奶牛發(fā)情的現(xiàn)象，就被稱為持久黃體，持久黃體會引起奶牛的卵巢性不孕癥。在B超檢查時，在卵巢上會發(fā)現(xiàn)邊緣清晰的較低回聲包裹著一圈無回聲的區(qū)域或是中等強度回聲的圓形或橢圓形區(qū)域，此為有腔黃體的B超聲像圖（圖12）。而有時表現(xiàn)為邊緣輪廓清晰，內(nèi)部為帶狀或絲狀的不均勻的低強度回聲，則為實性黃體的聲像圖。當(dāng)相隔5～7 天進行連續(xù)2～3 次B超檢查時，奶牛卵巢上在同一部位觀察到同樣大小、同樣形態(tài)的黃體，則可以診斷為持久黃體[15]。

圖12 有腔黃體的B 超聲像圖

4.4 子宮炎

子宮炎是奶牛在分娩后最為常見的生殖系統(tǒng)疾病，奶牛在產(chǎn)后，通常需要2～3 個情期去進行生殖系統(tǒng)的恢復(fù)，但當(dāng)其出現(xiàn)子宮炎癥時，往往會造成奶牛發(fā)情延遲，從而延后首配天數(shù)，且配種后不孕率高，造成奶牛泌乳期延長，淘汰率增加。如圖13所示為奶牛子宮炎的B超聲像圖，奶?；甲訉m炎后，子宮內(nèi)膜分泌炎性滲出物，因此在子宮的B超聲像圖上可見子宮角內(nèi)的帶狀、點狀或是雪花狀的無回聲暗區(qū)，子宮壁有所增厚，直腸檢查可見陰門流出粉紅色或是灰白的炎性分泌物和分泌液[16]。

圖13 子宮炎的B 超聲像圖

5 小結(jié)

本文闡述了B超在奶牛場繁殖工作中的應(yīng)用。相比于傳統(tǒng)的直腸檢查法，B超在奶牛中的推廣與應(yīng)用，較大地提前了奶牛早期妊娠診斷的時間，提高了奶牛早期妊娠診斷的準確率，其快速、安全、準確和有效的特點已經(jīng)成為奶牛場不可或缺的一部分。本文介紹了奶牛場兩種早期妊娠的檢查方法：直腸檢查法和B超診斷法，并對B超技術(shù)的原理進行了簡單介紹，接著對B超技術(shù)在奶牛早期妊娠診斷上的應(yīng)用進行了詳細介紹，隨后以奶牛生殖系統(tǒng)中卵巢和子宮作為重點，介紹了奶牛生殖系統(tǒng)疾病的B超聲像圖的基本特征。B超在奶牛場的應(yīng)用不僅在早期妊娠的診斷，還可以應(yīng)用在奶牛生殖系統(tǒng)疾病的檢查上，而這些都需要建立在對奶牛未妊娠和妊娠狀態(tài)下的子宮和卵巢聲像圖特點進行了解，這樣才可以有效提高早期妊娠診斷和生殖系統(tǒng)疾病檢查的診斷率。