王文娟,李琛,宮經(jīng)新,劉朝陽,朱翠敏,劉娜娜,劉秀芬

特發(fā)性血小板減少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)是常見的出血性疾病,是免疫系統(tǒng)功能異常引發(fā)血小板過度破壞所致,目前其致病因素尚不明確[1]。ITP好發(fā)于兒童時(shí)期,患者主要出現(xiàn)血小板減少、自發(fā)性出血、骨髓巨核細(xì)胞發(fā)育成熟障礙等病癥[2-3]。尋找準(zhǔn)確、靈敏診斷和預(yù)測ITP患者預(yù)后的生物標(biāo)志物對(duì)提高ITP診斷效率和預(yù)后具有重要的臨床意義。正五聚蛋白3(pentraxin-3,PTX3)能夠與多種可溶性受體配體相結(jié)合,參與血管重塑、炎性反應(yīng)、免疫防御等多種生物學(xué)過程[4-5]。研究發(fā)現(xiàn),其在免疫相關(guān)疾病如過敏性紫癜、心血管疾病、膿毒血癥等疾病中表達(dá)均升高[6-8]。多配體蛋白聚糖1(syndecan-1,SDC-1)是內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)的一種主要核心蛋白,在病理刺激下,內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)損傷,血清SDC-1水平升高,且與內(nèi)皮功能障礙、心血管疾病、血管損傷等疾病密切相關(guān)[9-10]。然而,目前PTX3、SDC-1在ITP中的報(bào)道較為少見,現(xiàn)檢測ITP患者血清PTX3、SDC-1的表達(dá),分析其臨床意義,報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2021年10月—2022年10月滄州市中心醫(yī)院兒內(nèi)科收治的ITP患兒95例為研究組,男55例,女40例,年齡1～14(6.20±1.43)歲。同期醫(yī)院體檢的健康兒童100例為健康對(duì)照組,男50例,女50例,年齡1～12(6.30±1.28)歲。2組男女比例、年齡、BMI、WBC等比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與健康對(duì)照組比較,研究組ITP患者的PLT水平顯著下降(P<0.01),見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(2022-0528),全部受試者或家屬知情同意并簽署知情同意書。

表1 健康對(duì)照組與研究組臨床資料比較

1.2 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn):①患兒符合《兒童原發(fā)性免疫性血小板減少癥診療規(guī)范(2019年版)》中ITP的診斷標(biāo)準(zhǔn)[11];②首次發(fā)病;③入組前未進(jìn)行任何方式的治療;④具有完整臨床病理資料。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):①既往有血栓病史或凝血功能障礙;②合并嚴(yán)重感染;③繼發(fā)性血小板減少性疾病;④先天發(fā)育不全或畸形;⑤既往有自身免疫性疾病、內(nèi)分泌性疾病或其他血液系統(tǒng)疾病史;⑥合并惡性腫瘤者;⑦精神性疾病或認(rèn)知功能障礙;⑧存在心、肝、腎等重要器官功能性障礙者。

1.3 觀測指標(biāo)與方法

1.3.1 血清PTX3、SDC-1檢測:患兒確診后/健康對(duì)照組兒童于體檢當(dāng)日空腹抽取靜脈血2 ml,離心留取上層血清,用EP管分裝,保存在-80℃下,待檢。采用Elx800型酶標(biāo)儀(購自美國BIO-TEK公司),以ELISA法檢測PTX3(試劑盒購自武漢優(yōu)爾生物科技有限公司)、SDC-1(試劑盒購自美國R&D Systems公司)水平。

1.3.2 隨訪:ITP患兒治療后均通過電話或門診接受2個(gè)月的規(guī)律隨訪,依據(jù)《血液病診斷及治療標(biāo)準(zhǔn)》進(jìn)行療效評(píng)估[12]。顯效:患兒PLT恢復(fù)到正常值,未出現(xiàn)出血現(xiàn)象,2個(gè)月內(nèi)未復(fù)發(fā)。有效:患兒PLT恢復(fù)至50×109/L以上或升幅大于30×109/L,出血現(xiàn)象消失,2個(gè)月內(nèi)未復(fù)發(fā)。緩解:患兒PLT升幅不足30×109/L,出血現(xiàn)象減輕;無效:未達(dá)到顯效、有效和緩解標(biāo)準(zhǔn)者。將治療顯效與有效的患兒定義為預(yù)后良好亞組60例,將治療緩解或無效的患兒定義為預(yù)后不良亞組35例。

2 結(jié) 果

2.1 2組血清PTX3、SDC-1水平比較 與健康對(duì)照組比較,研究組ITP患者血清PTX3、SDC-1水平均升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表2。

表2 健康對(duì)照組與研究組血清PTX3、SDC-1水平的比較

2.2 2亞組血清PTX3、SDC-1水平的比較 與預(yù)后良好亞組比較,預(yù)后不良亞組ITP患者血清PTX3、SDC-1水平均顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表3。

表3 預(yù)后良好亞組與預(yù)后不良亞組ITP患兒血清PTX3、SDC-1水平比較

2.3 ITP患兒血清PTX3、SDC-1水平的相關(guān)性 Pearson相關(guān)分析顯示,ITP患兒血清PTX3、SDC-1水平呈正相關(guān)(r=0.700,P<0.001)。

2.4 血清PTX3、SDC-1水平診斷ITP價(jià)值分析 繪制PTX3、SDC-1水平診斷ITP價(jià)值的ROC曲線,并計(jì)算曲線下面積(AUC),結(jié)果顯示:血清PTX3、SDC-1水平與二者聯(lián)合診斷ITP的AUC分別為0.801、0.849、0.861,二者聯(lián)合優(yōu)于PTX3單獨(dú)診斷(Z=2.708,P=0.007),與SDC-1單獨(dú)診斷的AUC比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=0.922,P=0.356),見表4、圖1。

圖1 血清PTX3、SDC-1水平對(duì)ITP診斷價(jià)值的ROC曲線

表4 血清PTX3、SDC-1水平對(duì)ITP診斷價(jià)值的分析

2.5 血清PTX3、SDC-1水平預(yù)測ITP預(yù)后的價(jià)值分析 繪制PTX3、SDC-1水平預(yù)測ITP預(yù)后的ROC曲線,并計(jì)算AUC,結(jié)果顯示:血清PTX3、SDC-1水平與二者聯(lián)合預(yù)測ITP患兒預(yù)后的AUC分別為0.790、0.907、0.918,二者聯(lián)合優(yōu)于PTX3單獨(dú)預(yù)測(Z=2.245,P=0.025),與SDC-1單獨(dú)預(yù)測預(yù)后的AUC比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=0.579,P=0.563),見表5、圖2。

圖2 血清PTX3、SDC-1水平預(yù)測ITP患兒預(yù)后價(jià)值的ROC曲線

表5 血清PTX3、SDC-1水平預(yù)測ITP患兒預(yù)后價(jià)值分析

2.6 Logistic回歸模型分析血清PTX3、SDC-1水平對(duì)ITP患兒預(yù)后的影響 以ITP患者是否發(fā)生不良預(yù)后為因變量,以血清PTX3、SDC-1水平(實(shí)測值)為自變量進(jìn)行多因素Logistic回歸分析,結(jié)果顯示,血清PTX3、SDC-1高水平是ITP患兒發(fā)生不良預(yù)后的危險(xiǎn)因素(P<0.01),見表6。

表6 多因素Logistic回歸分析血清PTX3、SDC-1水平對(duì)ITP患兒預(yù)后的影響

3 討 論

ITP是兒童時(shí)期常見的出血性疾病,該疾病發(fā)病率高、治愈后復(fù)發(fā)率高,患兒臨床主要出現(xiàn)皮膚紫癜、血小板減少、自發(fā)性出血的癥狀,部分患兒還可能合并腹痛、關(guān)節(jié)痛、腎臟損傷等并發(fā)癥,嚴(yán)重威脅著患兒的身體健康和生命安全,給家庭和社會(huì)帶來經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[13-14]。ITP的發(fā)病機(jī)制與原因較為復(fù)雜,目前尚未明確,較多研究者認(rèn)為ITP是抗血小板抗體異常導(dǎo)致單核巨噬系統(tǒng)對(duì)血小板造成破壞和損傷,使血小板數(shù)量驟減,機(jī)體凝血功能障礙,出現(xiàn)自發(fā)性出血所致[15]。臨床針對(duì)ITP主要采用注射糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等進(jìn)行對(duì)癥治療,提升患兒的血小板數(shù)量,這些治療手段可以緩解臨床癥狀,但長期用藥或突然停藥可能會(huì)導(dǎo)致許多嚴(yán)重不良反應(yīng),影響治療效果,預(yù)后不佳[16]。因此,尋找能夠準(zhǔn)確、靈敏診斷和預(yù)測ITP患者預(yù)后的生物標(biāo)志物對(duì)提高ITP診斷效率,降低患兒病死率、改善患兒預(yù)后具有重要意義。本研究發(fā)現(xiàn),與健康對(duì)照組比較,研究組ITP患兒血清中PLT水平顯著下降,說明ITP患兒的PLT數(shù)量降低,機(jī)體的凝血功能出現(xiàn)障礙,可能會(huì)導(dǎo)致自發(fā)性出血。

PTX3屬于進(jìn)化中高度保守的正五聚蛋白家族,其由8個(gè)亞基、381個(gè)氨基酸組成,有1個(gè)N端結(jié)構(gòu)域和1個(gè)C端結(jié)構(gòu)域[17]。研究顯示,PTX3在免疫性、炎性疾病中發(fā)揮著重要作用,能調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)、參與免疫過程、清除凋亡細(xì)胞等[18]。周彬等[7]研究發(fā)現(xiàn)與健康對(duì)照組比較,紫癜性腎炎患兒血清PTX3水平顯著升高,且與腎功能損傷呈正相關(guān),經(jīng)嗎替麥考酚酯和潑尼松聯(lián)合治療后,PTX3水平得到一定改善。許漢斌等[19]研究發(fā)現(xiàn)PTX3水平在小兒過敏性紫癜中異常升高,且與過敏性紫癜患兒發(fā)生紫癜性腎炎關(guān)系密切,對(duì)病情監(jiān)測有重要的作用。本研究結(jié)果顯示,與健康對(duì)照組比較,研究組ITP患兒血清PTX3水平顯著升高,這與相關(guān)文獻(xiàn)的發(fā)現(xiàn)一致;而與預(yù)后良好亞組比較,預(yù)后不良亞組ITP患兒血清PTX3水平顯著升高。這說明PTX3可能參與ITP病情的發(fā)生發(fā)展,對(duì)ITP進(jìn)展和不良預(yù)后具有促進(jìn)作用,其水平升高能反映患ITP和預(yù)后不佳的可能性增加。

SDC-1是在內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的一種主要核心蛋白,分子量為85 kD,可以通過細(xì)胞外段硫酸乙酰肝素鏈與其他因子結(jié)合,參與細(xì)胞間的信號(hào)傳導(dǎo),在心血管疾病、血管損傷、腫瘤等疾病中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用[20]。劉文濤等[21]研究發(fā)現(xiàn)川崎病合并冠狀動(dòng)脈病變患兒血清SDC-1水平升高,高水平的SDC-1可能加重川崎病冠狀動(dòng)脈病變的進(jìn)程。賈鑫燚[22]研究發(fā)現(xiàn)過敏性紫癜患者血清SDC-1水平顯著升高,且SDC-1是過敏性紫癜的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,其可能是早期診斷過敏性紫癜的生物標(biāo)志物。在本研究中,與健康對(duì)照組比較,研究組ITP患兒血清SDC-1水平升高;與預(yù)后良好亞組比較,預(yù)后不良亞組ITP患兒血清SDC-1水平顯著升高。這說明SDC-1與ITP的發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān),其水平升高可能促進(jìn)病情發(fā)展和不良預(yù)后的發(fā)生。

Pearson相關(guān)分析顯示,ITP患兒血清PTX3與SDC-1水平呈正相關(guān),而Logistic回歸分析結(jié)果顯示血清PTX3、SDC-1高水平是ITP患兒發(fā)生不良預(yù)后的危險(xiǎn)因素。這些結(jié)果提示PTX3、SDC-1可能通過正反饋調(diào)節(jié)共同影響ITP的發(fā)生發(fā)展。本研究ROC曲線分析顯示,血清PTX3、SDC-1及二者聯(lián)合診斷ITP的AUC分別為0.801、0.849、0.861,二者聯(lián)合優(yōu)于血清PTX3單獨(dú)診斷,表明二者聯(lián)合檢測對(duì)ITP具有一定診斷價(jià)值;同樣,二者聯(lián)合優(yōu)于血清PTX3單獨(dú)預(yù)測ITP患兒不良預(yù)后,表明二者聯(lián)合檢測對(duì)預(yù)測ITP患兒預(yù)后具有一定價(jià)值。臨床醫(yī)生應(yīng)密切關(guān)注患兒血清PTX3、SDC-1水平,及時(shí)進(jìn)行治療,改善患兒預(yù)后。

綜上所述,ITP患兒血清PTX3、SDC-1水平升高,可能是ITP診斷和預(yù)后評(píng)估的生物標(biāo)志物,對(duì)于ITP的診斷和預(yù)后具有重要的臨床意義。然而,本研究還存在不足之處,PTX3、SDC-1在ITP其他方面的應(yīng)用價(jià)值還尚未明確,還需進(jìn)一步設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行研究。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明

王文娟、李琛、宮經(jīng)新:科研設(shè)計(jì),文章撰寫、修改;劉朝陽、朱翠敏:數(shù)據(jù)整理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析;劉娜娜,劉秀芬:文章審閱、修改