尹 鵬, 楊蕓蕓, 趙一凡, 杜 穩(wěn), 李 秋, 彭君建, 劉虎軍

(國(guó)家糧食和物資儲(chǔ)備局科學(xué)研究院1,北京 100037) (中國(guó)計(jì)量大學(xué)2,杭州 310018) (山東魯花集團(tuán)有限公司3,萊陽 265200) (江蘇豐尚油脂工程技術(shù)有限公司4,揚(yáng)州 225000)

霉菌在自然界中種類繁多,分布廣泛,是導(dǎo)致糧食、飼料霉腐變質(zhì)的主要因子[1]。真菌毒素是部分霉菌生長(zhǎng)過程中產(chǎn)生的有毒次級(jí)代謝物。據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)統(tǒng)計(jì),全球每年有25%的農(nóng)產(chǎn)品受到真菌毒素污染[2],由此引起農(nóng)產(chǎn)品和飼料的損失達(dá)數(shù)百億美元,其中我國(guó)是世界上受真菌毒素污染最嚴(yán)重的國(guó)家之一,每年真菌毒素污染造成的糧油損失數(shù)量較大,經(jīng)濟(jì)損失達(dá)數(shù)百億美元[3],給糧食安全與人類健康帶來嚴(yán)重威脅。因此,研發(fā)包括阻控畜禽中毒的微生態(tài)制劑等在內(nèi)的真菌毒素防控技術(shù)和材料具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義[4,5]。

微生態(tài)制劑主要由乳酸菌、芽孢桿菌、酵母菌、放線菌等幾大類微生物組合而成[6],經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)、后加工等工藝制成的生物制劑或活菌制劑。釀酒酵母具有改善畜禽消化道菌群平衡、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、提供豐富的營(yíng)養(yǎng)物、無毒、無副作用等大量?jī)?yōu)點(diǎn),農(nóng)業(yè)部公告第2038號(hào)規(guī)定了釀酒酵母及其水解物均可作為發(fā)酵飼料原料,釀酒酵母可作為飼料添加劑。釀酒酵母屬于一種單細(xì)胞微生物,其特點(diǎn)是耐酸性較強(qiáng),屬于兼性厭氧型真菌,含有大量核酸、蛋白質(zhì)和豐富的風(fēng)味物質(zhì),經(jīng)發(fā)酵、水解、干燥等工藝可獲得酵母提取物、酵母培養(yǎng)物以及酵母水解物等酵母類微生態(tài)制劑。酵母水解物可減少或者替代抗生素在斷奶仔豬飼糧中的使用,這為研發(fā)無抗飼料提供了有力的理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持[7]。釀酒酵母水解后,細(xì)胞壁中的甘露低聚糖、葡聚糖等成分充分暴露,能夠與真菌毒素有效結(jié)合,有效阻止被體內(nèi)吸收。Yiannikouris等[8]研究表明酵母細(xì)胞壁可以有效減少大鼠體內(nèi)對(duì)AFB1的吸收。朱榮華[9]發(fā)現(xiàn)酵母來源細(xì)胞壁的酯化葡甘露聚糖可以有效地吸附玉米赤霉烯酮類真菌毒素。加之酵母水解物在改善牲畜胃腸道菌群平衡和動(dòng)物飼料適口性、增強(qiáng)禽畜免疫力、無毒可再生、不會(huì)造成環(huán)境污染和抗藥性等方面的優(yōu)勢(shì)[10],因此酵母水解物對(duì)真菌毒素的阻控方面具有重要的應(yīng)用潛力[11]。

培養(yǎng)基組分、發(fā)酵條件以及各因素之間的交互作用是微生物生長(zhǎng)的關(guān)鍵,因此在規(guī)模化生產(chǎn)之前需要對(duì)各個(gè)因素進(jìn)行探索和優(yōu)化。目前針對(duì)培養(yǎng)基的優(yōu)化主要采用單因素、正交設(shè)計(jì)、響應(yīng)面優(yōu)化等方法[12-15]。但是發(fā)酵過程中各營(yíng)養(yǎng)成分之間具有復(fù)雜非線性,傳統(tǒng)的方法在處理非線性問題時(shí)具有一定的局限性。而人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)算法( Artificial Neural Network,ANN)具備學(xué)習(xí)能力、自適應(yīng)能力和自組織能力,通過構(gòu)建數(shù)學(xué)模型并不斷調(diào)整內(nèi)部大部分節(jié)點(diǎn)間互相連接關(guān)系表現(xiàn)出一些技能特性,在信號(hào)處理、自動(dòng)控制、模式識(shí)別和預(yù)測(cè)分析方面解決了許多其他機(jī)器系統(tǒng)很難處理的問題,能夠反映復(fù)雜的非線性關(guān)系,具備全局預(yù)測(cè)能力,BP 算法是神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型中最常用的一種算法[16-18]。

研究以實(shí)驗(yàn)室前期篩選得到的一株性能優(yōu)良的釀酒酵母菌株(ASAG-39)作為出發(fā)菌株,通過單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)發(fā)酵過程中需要的碳源、氮源以及無機(jī)鹽的種類、添加量進(jìn)行初步篩選,進(jìn)一步建立BP人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)深度學(xué)習(xí)模型,遺傳算法進(jìn)行全局尋優(yōu)得到最佳的碳源、氮源以及無機(jī)鹽的添加量,預(yù)測(cè)釀酒酵母發(fā)酵的最大OD600,通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證模型的可靠性。同時(shí),研究了釀酒酵母水解物對(duì)部分真菌毒素的吸附效果,從而為下一步研發(fā)酵母水解物在真菌毒素阻控方面的新材料和技術(shù)提供了參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑

釀酒酵母(ASAG-39)由國(guó)家糧食和物資儲(chǔ)備局科學(xué)研究院實(shí)驗(yàn)室篩選保藏。

酵母粉、蛋白酶:生物試劑;蔗糖、葡萄糖、麥芽糖、可溶性淀粉、玉米將干粉、KH2PO4、MgSO4、ZnSO4、檸檬酸、玉米赤霉烯酮標(biāo)準(zhǔn)品(Zearalenone,ZEN)、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇標(biāo)準(zhǔn)品(Deoxynivalenol,DON)、黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)品(黃曲霉毒素B1,AFB1):分析純;甲醇、乙腈:色譜純。

固體培養(yǎng)基:葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%、酵母粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.0%、蛋白胨質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%、瓊脂質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%,115 ℃滅菌質(zhì)量分?jǐn)?shù)20 min。

種子培養(yǎng)基:葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%、酵母粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.0%、蛋白胨質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%,115 ℃滅菌20 min。

初始(發(fā)酵)培養(yǎng)基:葡萄糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.0%、酵母粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.0%,調(diào)節(jié)初始pH 6.0,115 ℃滅菌20 min。

1.2 儀器與設(shè)備

HPS-400生化培養(yǎng)箱,ISF1-X恒溫?fù)u床,eppendorf 5424R臺(tái)式高速離心機(jī),UZ-2450紫外-可見分光光度計(jì),Waters 2495高效液相色譜,熒光檢測(cè)器,紫外檢測(cè)器,C1810 nm, 5 μm, 4.6 mm×150 mm色譜柱。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 發(fā)酵條件優(yōu)化

取凍存的釀酒酵母ASAG-39在固體培養(yǎng)基活化,30 ℃條件培養(yǎng)40～72 h。取單一菌株經(jīng)種子培養(yǎng)基30 ℃、210 r/min培養(yǎng)12 h后,5%的接種量轉(zhuǎn)接至初始培養(yǎng)基中,按照控制變量法依次確定最佳發(fā)酵時(shí)間、初始pH、溫度、轉(zhuǎn)速。

1.3.2 培養(yǎng)基的優(yōu)化

單因素實(shí)驗(yàn):在已確定的發(fā)酵條件的基礎(chǔ)上,改變單一因素,分別對(duì)碳源、氮源及無機(jī)鹽種類及添加量進(jìn)行優(yōu)化。

多因素實(shí)驗(yàn):在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,利用軟件Design-expert 8.0.6設(shè)計(jì)中心組合,測(cè)定發(fā)酵結(jié)束后發(fā)酵液的OD600。建立BP人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型,基于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)訓(xùn)練模型,使其能夠較精確地預(yù)測(cè)實(shí)際值(實(shí)驗(yàn)值),優(yōu)化好的網(wǎng)絡(luò)與遺傳算法結(jié)合進(jìn)行尋優(yōu)最佳配方。

1.3.3 BP人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型和遺傳算法

采用反向傳播法建立人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)(ANN)模型,整個(gè)模型包括3個(gè)層次:輸入層、隱含層、輸出層。基于軟件Design-expert 8.0.6設(shè)計(jì)中心組合,經(jīng)過實(shí)驗(yàn)獲得的30組數(shù)據(jù)為樣本,randperm函數(shù)打亂數(shù)據(jù)增加數(shù)據(jù)的隨機(jī)性,mapminmax函數(shù)歸一化、反歸一化數(shù)據(jù),newff構(gòu)建初始網(wǎng)絡(luò)net,train函數(shù)對(duì)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)net的數(shù)據(jù)進(jìn)行訓(xùn)練。error和R2反映模型的可靠性。

error=abs(output_prediction-output_test)./output_test;R2=(N×sum(output_prediction.×output_test)-sum(output_prediction)× sum(output_test))^2/((N×sum(output_prediction).^2)-(sum(output_prediction)^2)×(N×sum(output_test).^2)-(sum(output_test)^2))。式中:error為相對(duì)誤差;R2為擬合系數(shù);output_prediction為模型預(yù)測(cè)輸出數(shù)據(jù);output_test為實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù);N為訓(xùn)練數(shù)據(jù)的組數(shù);sum為求和函數(shù)。

將擬合效果較好(R2>0.99,error<0.05)的模型進(jìn)行下一步遺傳算法尋優(yōu)。遺傳算法是可直接對(duì)結(jié)構(gòu)對(duì)象進(jìn)行相關(guān)操作,不存在求導(dǎo)和函數(shù)連續(xù)性的限定,具有全局尋優(yōu)的優(yōu)勢(shì)。綜合考慮精度、收斂速度以及計(jì)算規(guī)模等,將每代染色體種群設(shè)為50,在求出所有染色體適應(yīng)度值之后,通過輪盤選擇法對(duì)種群進(jìn)行選擇,最大迭代次數(shù)100次,采用單點(diǎn)交叉和單點(diǎn)變異,交叉概率為0.5,變異概率為0.08。在此基礎(chǔ)上反歸一化輸出最優(yōu)值以及相應(yīng)的個(gè)體。

1.3.4 OD600測(cè)定

菌體OD600的測(cè)定:取2 mL的發(fā)酵液于2 mL的離心管中,12 000 r/min離心5 min棄去上清液,用去離子水洗滌菌體2～3次,適當(dāng)稀釋后用可見-紫外分光光度計(jì)測(cè)定吸光度OD600。

1.3.5 釀酒酵母水解物制備和體外毒素吸附實(shí)驗(yàn)

釀酒酵母的水解方法[19]:取一定量的干酵母于80～95 ℃水浴,熱激30 s。以酵母干物質(zhì)的質(zhì)量計(jì),加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)1‰～5‰的檸檬酸,在45～55 ℃,200 r/min磁力攪拌反應(yīng)6～12 h,使其自溶。以酵母干物質(zhì)的質(zhì)量計(jì),添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)1‰～5‰的復(fù)合酶,調(diào)節(jié)pH 5～7,在55～65 ℃,200 r/min磁力攪拌使其酶解6～12 h,將其進(jìn)行冷凍干燥備用。

酵母水解物對(duì)毒素吸附:取毒素標(biāo)品加去離子水制得質(zhì)量濃度分別為10 μg/mL的ZEN和DON溶以及5 μg/mL的AFB1溶液,pH調(diào)整為7.0,添加不同濃度的酵母水解物,37 ℃吸附2 h,反應(yīng)結(jié)束后在轉(zhuǎn)速12 000 r/min離心5 min,取上清液1 mL過濾膜,液相色譜檢測(cè)其中的毒素含量。

1.3.6 ZEN 、DON、AFB1的檢測(cè)[20,21]

ZEN的檢測(cè)方法及條件:

流動(dòng)相:體積分?jǐn)?shù)50%水,體積分?jǐn)?shù)50%乙腈;流量:1 mL/min;檢測(cè)器:熒光檢測(cè)器,激發(fā)波長(zhǎng)274 nm,發(fā)射波長(zhǎng)440 nm;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣量:10 μL。

DON的檢測(cè)方法及條件:

流動(dòng)相:體積分?jǐn)?shù)80%水,體積分?jǐn)?shù)20%甲醇;流量:1 mL/min;檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器,218 nm;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣量:10 μL。

AFB1的檢測(cè)方法及條件:

流動(dòng)相:體積分?jǐn)?shù)50%水,體積分?jǐn)?shù)50%甲醇;流量:0.8 mL/min;檢測(cè)器:熒光檢測(cè)器,柱后光化學(xué)衍生化,激發(fā)波長(zhǎng)360 nm,發(fā)射波長(zhǎng)440 nm;柱子溫度:40 ℃;進(jìn)樣量:10 μL。

2 結(jié)果與討論

2.1 發(fā)酵條件的優(yōu)化

對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化之前首先進(jìn)行發(fā)酵條件的選擇,以O(shè)D600為測(cè)試指標(biāo),分別對(duì)發(fā)酵時(shí)間、pH、溫度以及搖床轉(zhuǎn)速進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明最佳發(fā)酵條件為:發(fā)酵時(shí)間36 h,發(fā)酵溫度30 ℃,pH 6.0,搖床轉(zhuǎn)速210 r/min,在此基礎(chǔ)上進(jìn)行培養(yǎng)基單因素優(yōu)化。

2.2 單因素優(yōu)化酵母培養(yǎng)基

碳源不僅為細(xì)胞內(nèi)分解代謝提供小分子的碳鏈骨架,同時(shí)為細(xì)胞代謝提供生命活動(dòng)所需要的能量。在初始培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,研究了單糖、二糖以及多糖淀粉的添加量對(duì)釀酒酵母生物量的影響,通過設(shè)置不同濃度的碳源,將最適添加量匯總(表1)。實(shí)驗(yàn)表明,最適合用蔗糖作為釀酒酵母的碳源,當(dāng)蔗糖、酵母粉、蛋白胨質(zhì)量濃度分別17.5、1.0、2.0 g/100 mL時(shí),OD600值最大為25.8。

表1 不同碳源對(duì)酵母生長(zhǎng)的影響

氮源是微生物生長(zhǎng)過程中蛋白質(zhì)等合成的原料,適當(dāng)?shù)牡茨軌虼龠M(jìn)微生物的生長(zhǎng),對(duì)該株釀酒酵母培養(yǎng)過程的氮源進(jìn)行了研究,通過設(shè)置不同濃度的氮源,將最適添加量匯總(表2)。實(shí)驗(yàn)表明,酵母粉較蛋白胨更加適合作為氮源,當(dāng)蔗糖、酵母粉質(zhì)量濃度分別為17.5、10.0 g/100 mL時(shí),OD600值最大為28.92。

表2 不同氮源對(duì)酵母生長(zhǎng)的影響

無機(jī)鹽不僅能夠?yàn)槲⑸锏纳L(zhǎng)提供所需要的微量元素,而且是微生物合成代謝過程中很多酶反應(yīng)過程的激酶。KH2PO4、MgSO4在酵母生長(zhǎng)過程中,均是代謝過程中重要的激酶[17]。因此,對(duì)該株釀酒酵母培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的組分進(jìn)行優(yōu)化,通過設(shè)置不同濃度的無機(jī)鹽,將最適添加量匯總(表3)。實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)蔗糖、酵母粉、KH2PO4和MgSO4質(zhì)量濃度分別為17.5、10.0、0.1、0.6 g/100 mL時(shí),OD600值最大為32.78。

表3 不同無機(jī)鹽對(duì)酵母生長(zhǎng)的影響

2.3 多因素優(yōu)化酵母培養(yǎng)基

微生物發(fā)酵培養(yǎng)基多因素的優(yōu)化一般采用正交實(shí)驗(yàn)、響應(yīng)面優(yōu)化等方法[6-9]。但由于發(fā)酵過程中各營(yíng)養(yǎng)成分之間對(duì)酵母生長(zhǎng)代謝具有高度非線性,即各營(yíng)養(yǎng)成分在微生物的生化代謝和生長(zhǎng)過程中非常復(fù)雜,不是簡(jiǎn)單的線性影響,因此傳統(tǒng)的正交、響應(yīng)面方法在處理高度非線性問題方面具有一定的局限性。而BP人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)能夠反映復(fù)雜的非線性關(guān)系,具備深度學(xué)習(xí)和廣泛預(yù)測(cè)能力,結(jié)合遺傳算法可以更加精確推斷最佳培養(yǎng)基配方。模型運(yùn)行的本質(zhì)是先利用樣本數(shù)據(jù)建立起神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型,然后施加輸入,通過模型運(yùn)算得到預(yù)測(cè)結(jié)果。

2.3.1 中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

以提高釀酒酵母的生物量為目標(biāo),根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)確定蔗糖、酵母粉、KH2PO4和MgSO4的4個(gè)因子,借助Design-expert 8.0.6軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)組數(shù)為30的中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),分別取值培養(yǎng)基組分蔗糖質(zhì)量濃度12.5、15.0、17.5、20.0、22.5 g/100 mL,酵母粉質(zhì)量濃度5.0、7.5、10.0、12.5、15.0 g/100 mL,KH2PO4質(zhì)量濃度0、1、2、3、4 g/L,MgSO4質(zhì)量濃度2、4、6、8、10 g/L(表4),按照設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基組成進(jìn)行實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果匯總見表5。

表4 中心組合設(shè)計(jì)各因素取值范圍

表5 不同培養(yǎng)基組分的生物量

2.3.2 人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型的建立與遺傳算法優(yōu)化

實(shí)驗(yàn)選擇的BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)輸入層數(shù)-隱藏層數(shù)-輸出層數(shù)為4-5-1建立初始網(wǎng)絡(luò)模型,隨機(jī)打亂數(shù)據(jù)之后,選擇前20組數(shù)據(jù)來訓(xùn)練網(wǎng)絡(luò)模型,另外10組數(shù)據(jù)用來驗(yàn)證模型的可靠性,其中設(shè)置參數(shù)學(xué)習(xí)效率0.1,迭代次數(shù)1 000次。通過20組數(shù)據(jù)訓(xùn)練模型見圖1a,預(yù)測(cè)值與實(shí)驗(yàn)值(真實(shí)值)之間的相對(duì)誤差在5%之內(nèi)。其余10組數(shù)據(jù)對(duì)模型進(jìn)行驗(yàn)證見圖1b,其預(yù)測(cè)值與真實(shí)值之間的相對(duì)誤差5%以內(nèi),且模型運(yùn)行輸出的擬合系數(shù)R2為0.997,模型可以較好的模擬實(shí)驗(yàn)值,表明該網(wǎng)絡(luò)能夠較好模擬培養(yǎng)基組分與生物量之間的關(guān)系。

圖1 BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)學(xué)習(xí)和預(yù)測(cè)能力

2.3.3 遺傳算法尋找最優(yōu)解

在模型可靠的基礎(chǔ)上,遺傳算法尋優(yōu)結(jié)果見圖2,經(jīng)過運(yùn)行能夠看出當(dāng)?shù)?2次左右就能夠達(dá)到收斂,此時(shí)最佳配方蔗糖、酵母粉、KH2PO4和MgSO4質(zhì)量濃度分別為18.90、8.90、0.05、0.80 g/100 mL,此時(shí)生物量OD600能達(dá)到38.9。通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,按此配方經(jīng)過種子培養(yǎng)、發(fā)酵,測(cè)得發(fā)酵液生物量OD600為37.1,偏差為4.6%,在相對(duì)誤差5%的范圍內(nèi),與單因素(表3)最大生物量OD60032.78相比增加了13.2%。

圖2 遺傳算法適應(yīng)度曲線

2.4 酵母水解物對(duì)真菌毒素的體外吸附研究

酵母經(jīng)自溶、酶解等處理可以獲得水解物,酵母水解物是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、誘食性強(qiáng)的綠色飼料添加劑,具有良好的促生長(zhǎng)、增強(qiáng)免疫、抗氧化、保護(hù)腸道等生物活性功能[22]。其中,酵母水解物所含有的細(xì)胞壁多糖,能夠與毒素、病毒等病原結(jié)合,增強(qiáng)其免疫原性[23]。將該株釀酒酵母經(jīng)水解獲得酵母水解物,在體外研究其對(duì)真菌毒素的吸附效果。結(jié)果(見圖3)表明,當(dāng)酵母水解物的質(zhì)量濃度是4、4、8 mg/mL,單位水解物對(duì)ZEN、DON和AFB1的削減量達(dá)到最大,分別615.4、46.0、434.6 μg/g,該酵母水解物對(duì)真菌毒素ZEN和AFB1吸附效果較好。

圖3 酵母水解物對(duì)3種毒素的吸附效果

3 結(jié)論

對(duì)一株釀酒酵母進(jìn)行了發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化,通過模擬腸道內(nèi)中性的水環(huán)境,對(duì)其水解物進(jìn)行了幾種真菌毒素的吸附研究,水解物對(duì)ZEN和AFB1吸附性能良好。通過單因素實(shí)驗(yàn)、中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)以及人工智能手段,優(yōu)化得到最佳的培養(yǎng)基配方:蔗糖、酵母粉、KH2PO4、MgSO4質(zhì)量濃度分別為18.90、8.90、0.05、0.80 g/100 mL,預(yù)測(cè)的OD600為38.9,經(jīng)驗(yàn)證與該配方下實(shí)際OD600的37.1偏差4.6%,提高了13.2%,驗(yàn)證了模型的可靠性。為微生物發(fā)酵過程培養(yǎng)基的精準(zhǔn)優(yōu)化提供了一種可靠方法。

酵母細(xì)胞壁多糖或改性的細(xì)胞壁多糖對(duì)部分真菌毒素具有良好吸附效果,酵母水解物是經(jīng)自溶和酶解之后不做進(jìn)一步的質(zhì)壁分離,直接進(jìn)行干燥獲得的產(chǎn)品。該物質(zhì)既具備良好的細(xì)胞質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),也具備細(xì)胞壁的活性功能。因此,探索釀酒酵母水解物對(duì)真菌毒素的體外吸附模擬,該酵母水解物對(duì)ZEN和AFB1最大吸附量分別為615.4、434.6 μg/g。

下一步可以繼續(xù)優(yōu)化水解物的吸附性能并開展該株酵母水解物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),包括對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的影響、對(duì)腸道菌群的影響以及對(duì)免疫器官的影響,以期獲得該株酵母水解物能夠應(yīng)用的數(shù)據(jù)參考。