陳 瑜，李曉麗，韓光奎，倪 亞，李 勇

(1.泗陽縣三莊鎮(zhèn)農(nóng)村工作局，江蘇 泗陽 223700；2.泗陽縣水產(chǎn)技術(shù)指導(dǎo)站，江蘇 泗陽 223700；3.泗陽縣倪亞水產(chǎn)技術(shù)服務(wù)中心，江蘇 泗陽 223700)

2022 年12 月初，泗陽縣穿城柴河漁場(chǎng)丁老板13 畝塘放養(yǎng)的草魚種，入塘不到1 周，陸續(xù)發(fā)生水霉病，經(jīng)歷兩個(gè)多月的治療，效果一般，死魚不斷，造成一定的病害損失?，F(xiàn)回顧整個(gè)疾病過程，溯源找因，探索處置方案，以此啟示和指導(dǎo)養(yǎng)殖戶做足、做實(shí)前期預(yù)防細(xì)節(jié)，以期達(dá)到科學(xué)精準(zhǔn)防控。

一、疾病發(fā)生與診斷

1.病情問診

發(fā)病池塘13 畝，平均水深1.8 米。2022 年11 月底成魚起捕銷售后，因年底魚種價(jià)格便宜，于12月3日在塘底凍曬不到4天就從附近購魚種入塘。主放品種為草魚，搭配放養(yǎng)鰱、鳙、鯉，具體放養(yǎng)情況見表1。拉網(wǎng)起捕、操作運(yùn)輸較規(guī)范，入塘前，于水車廂中以1 升水加40 克食鹽配比浸浴10 分鐘左右，采用塑料布鋪設(shè)放魚道，謹(jǐn)慎細(xì)致入塘。魚種入塘約1周，于12月9日發(fā)現(xiàn)有草魚種零星死亡，開始使用硫醚沙星與二氧化氯潑灑，連用3 天，不僅未見好轉(zhuǎn)，魚死亡量反而上升，從每天7～8 尾上升至30 尾，至2023 年2 月1 日，草魚死亡量約1 150 尾，單品種死亡率11%。整個(gè)治療過程長、見效慢。

表1 13畝塘魚種放養(yǎng)情況

2.塘口看診

12月15日接診后，塘口巡查發(fā)現(xiàn)有20多尾草魚獨(dú)游岸邊，其遇人不驚，反應(yīng)遲緩，池塘下風(fēng)口處慢游魚較多；水中明顯可見魚體尾柄、頭部著生灰白色絮狀絨毛，少數(shù)魚體鰭條潰爛，呈掃帚狀，也見部分瀕死魚鰭條完好，但鰭末梢發(fā)白，呈白色鑲邊；魚體連片發(fā)炎、鱗片脫落，部分肌肉潰爛，潰爛灶邊緣著生灰白色絨毛物；多數(shù)可見眼眶、吻部肌肉潰爛。

3.病灶鏡檢

用眼科剪刀剪取瀕死魚少許病灶邊緣灰白色絨毛，制成水浸片進(jìn)行顯微鏡觀察，見水霉外菌絲，呈暗灰色，粗壯，分枝較少，梢端膨大成棒狀。

4.病魚剖檢

魚體周身鱗片粗糙，暗淡發(fā)灰無光澤；部分瀕死魚眼球凹陷；鰓絲暗紫腫脹，鰓絲末端有灰白色發(fā)暗弧線，整個(gè)鰓絲覆蓋明顯灰白色黏液；脾正常，未見脆性變化，肝臟見花斑狀纖維化紋路；膽囊大，膽汁盈足，暗灰綠色；腸道內(nèi)無食物，韌性尚好，內(nèi)皺襞較完好，無明顯壞死細(xì)胞脫落；腎臟暗紅有彈性；心臟動(dòng)脈球血液淤積發(fā)紫。

5.寄生蟲檢查

將魚腸道剖檢，刮取腸道內(nèi)容物，鏡檢無腸道寄生蟲；剪取鰓絲制成水浸片，鏡檢見大量車輪蟲寄生，10×10倍視野下計(jì)數(shù)33個(gè)車輪蟲。

6.水質(zhì)檢測(cè)

12 月15 日10 時(shí)，池塘下風(fēng)口水溫2℃、透明度30 厘米、pH 7.9、氨氮1.41 毫克/升、亞硝酸鹽0.01 毫克/升、高錳酸鹽指數(shù)6.81 毫克/升、總氮2.51 毫克/升、總磷0.19 毫克/升、懸浮物67.7毫克/升?？傮w水質(zhì)指標(biāo)氨氮偏高，懸浮物偏多，藻類單一。

7.實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌檢測(cè)與藥敏試驗(yàn)

細(xì)菌檢測(cè)：在無菌實(shí)驗(yàn)室用接菌環(huán)探入病灶潰爛深處，接菌劃線分離于普通營養(yǎng)瓊脂平板上，經(jīng)生化培養(yǎng)箱中28℃、24 小時(shí)培養(yǎng)后，挑取優(yōu)勢(shì)菌落，再次劃線純化分離培養(yǎng)(28℃下)24 小時(shí)，依據(jù)梅里埃API-20E細(xì)菌鑒定操作規(guī)程，挑取純化分離后的菌落配制0.5麥?zhǔn)蠞岫染鷳乙?，將其按?guī)定量滴加至試劑條每個(gè)生化反應(yīng)小杯管中，置于恒溫生化培養(yǎng)箱37℃、24 小時(shí)進(jìn)行生化反應(yīng)，比色判讀。另用無菌棉簽蘸取1個(gè)純化菌落進(jìn)行氧化酶反應(yīng)試驗(yàn)判讀。判讀鑒定結(jié)果為API-20E生化反應(yīng)序號(hào)為2200004，菌株為熒光假單胞菌，鑒定率99.9%(見表2)。

表2 實(shí)驗(yàn)室病菌檢測(cè)API-20E鑒定試劑條生化反應(yīng)判讀結(jié)果

菌落形態(tài)觀察：圓形，直徑1.5～2 毫米，灰白色，半透明，邊緣整齊，微凹，表面較光滑。菌株革蘭氏染色陰性(G-)，桿狀，兩端鈍圓。

藥敏試驗(yàn)：藥敏分析96 孔試劑板，對(duì)分離純化菌株進(jìn)行藥物感受性試驗(yàn)，其結(jié)果如表3。

試驗(yàn)表明：本次分離得到的優(yōu)勢(shì)菌落熒光假單胞菌對(duì)磺胺間甲氧嘧啶鈉、氟苯尼考、甲砜霉素耐藥性最強(qiáng)，氟苯尼考對(duì)熒光假單胞菌的MIC值水平較高，MIC＞100微克/毫升，其次磺胺間甲氧嘧啶鈉MIC＞512微克/毫升。鹽酸多西環(huán)素對(duì)熒光假單胞菌最為敏感，MIC值0.2微克/毫升，其次為恩諾沙星，MIC 值0.39 微克/毫升。據(jù)此，首選抗菌藥物為鹽酸多西環(huán)素和恩諾沙星，另外硫酸新霉素MIC值1.56微克/毫升，也可用于處方選藥。

二、綜合診斷結(jié)果與給藥處方及療效

1.診斷結(jié)果

綜合池塘環(huán)境觀察、水質(zhì)檢測(cè)、瀕死魚解剖鏡檢和實(shí)驗(yàn)室病原檢測(cè)，本次病例為冬放魚種水霉病繼發(fā)細(xì)菌性赤皮、蛀鰭、疥瘡等，屬真菌性與細(xì)菌性綜合感染發(fā)病。

2.給藥處方

①選擇晴好天氣，在13:00前后，使用硫酸銅0.5 克/米3+硫酸亞鐵0.2 克/米3，化水全池潑灑殺滅車輪蟲(第1 天)；②五倍子末200 克/(畝·米)+食鹽2 500 克/(畝·米)，熬水全池潑灑(第3 天)；③10%聚維酮碘500 毫升/(畝·米)(繼第4天開始潑灑，隔天1次，用藥2次)；④底部增氧與改良，過氧碳酸鈉400 克/(畝·米)(根據(jù)監(jiān)測(cè)氨氮、pH指標(biāo)變化適度增減)，治療期間隔天1 次，共4 次，于17:00 前后使用；⑤發(fā)病時(shí)段氣溫較低，魚攝食不旺，雖然藥敏試驗(yàn)出恩諾沙星、鹽酸多西環(huán)素、硫酸新霉素對(duì)致病菌敏感，但實(shí)際內(nèi)服抗菌措施很難到位。

3.防控效果

12 月15 日接診后，在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室病原檢測(cè)的同時(shí)，就初定給藥方案予以治療，主要從環(huán)境改良與水體滅菌入手，歷經(jīng)1周療程，所見瀕死魚體表絮狀絨毛明顯減少，但草魚體表肌肉潰爛、蛀鰭等繼發(fā)細(xì)菌性感染的死亡尾數(shù)持續(xù)15 尾/天左右，占比多數(shù)，后續(xù)跟蹤流調(diào)此現(xiàn)象延續(xù)至2月初才漸漸回落。