唐亞娥，王 壇，米 山

（銅川市糧油產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站，陜西銅川 727000）

小麥?zhǔn)俏覈闹饕Z食作物之一，我國2022年小麥產(chǎn)量13 772萬t，占全國糧食總產(chǎn)量的20.06%。陜西省作為小麥的主產(chǎn)省之一，總產(chǎn)量約占全國小麥總產(chǎn)量的9%。真菌毒素是由真菌產(chǎn)生的小分子次級(jí)代謝產(chǎn)物，具有致癌、致畸和肝毒性的危害，可經(jīng)過生物積累進(jìn)入食物鏈。嘔吐毒素是真菌毒素的一種，又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON），因其可以使動(dòng)物產(chǎn)生嘔吐癥狀而被稱為嘔吐毒素，是麥類中最常見的真菌毒素之一[1-2]。陜西人民飲食習(xí)慣以面食為主，因此小麥的質(zhì)量安全顯得尤為重要。

我國《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》（GB 2761—2017）規(guī)定小麥、小麥粉中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇限量為1 000 μg·kg-1。小麥中嘔吐毒素的檢測(cè)方法有液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法、時(shí)間分辨熒光免疫定量法、膠體金快速定量法和膠體金定性法等[3-4]。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜、高效液相色譜等儀器檢測(cè)方法具有準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性好、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，但儀器設(shè)備相對(duì)昂貴，對(duì)檢測(cè)人員的要求高，需要在專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室操作，不適合在小麥?zhǔn)諆?chǔ)期間使用；免疫層析試紙條法因其快速、簡(jiǎn)便、成本低的特點(diǎn)而適合小麥?zhǔn)諆?chǔ)現(xiàn)場(chǎng)[5]?！都Z食質(zhì)量安全監(jiān)管辦法》第二十七條中明確規(guī)定，糧食經(jīng)營者收購驗(yàn)質(zhì)檢驗(yàn)以及縣級(jí)以上糧食行政管理部門依法開展的糧食質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)與抽查檢驗(yàn)，可采用國家糧食行政管理部門認(rèn)可的快速檢驗(yàn)方法，快速檢驗(yàn)結(jié)果可作為收購驗(yàn)質(zhì)依據(jù)和質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)與抽檢篩查的依據(jù)。采用快速檢驗(yàn)方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)和抽查檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)測(cè)定結(jié)果為國家標(biāo)準(zhǔn)臨界值時(shí)，應(yīng)當(dāng)按照國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行復(fù)核檢驗(yàn)[6]。

目前，小麥中嘔吐毒素快速檢驗(yàn)方法的應(yīng)用在實(shí)際糧食收購中已初具規(guī)模，主要為膠體金免疫層析方法，隨著《糧油檢驗(yàn) 谷物中黃曲霉毒素B1的測(cè)定時(shí)間分辨熒光免疫層析定量法》（LS/T 6143—2023）標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布，熒光免疫層析試紙條也開始進(jìn)入市場(chǎng)，由于產(chǎn)品新進(jìn)入市場(chǎng)且食品安全快速檢測(cè)試劑生產(chǎn)廠家受到的監(jiān)管與食品生產(chǎn)以及醫(yī)療器械生產(chǎn)均不同，導(dǎo)致各個(gè)廠家產(chǎn)品質(zhì)量差異較大[7]，影響小麥質(zhì)量安全的判斷，甚至?xí)斐梢恍﹪?yán)重的經(jīng)濟(jì)糾紛和損失。

為在基層檢測(cè)中更加準(zhǔn)確地檢出小麥中的嘔吐毒素，給予收儲(chǔ)單位和貿(mào)易商有效的參考，本評(píng)價(jià)選取了在陜西市場(chǎng)知名度相對(duì)高的A、B、C、D共4家產(chǎn)品。評(píng)價(jià)了不同廠家產(chǎn)品在小麥基質(zhì)上對(duì)于嘔吐毒素的檢測(cè)能力。這對(duì)于幫助用戶了解現(xiàn)有快速檢測(cè)產(chǎn)品質(zhì)量并進(jìn)行合適的選擇、推動(dòng)快速檢測(cè)產(chǎn)品生產(chǎn)廠家改進(jìn)產(chǎn)品質(zhì)量具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。

1 材料與方法

1.1 材料

小麥、小麥粉常規(guī)樣品，來源于各收儲(chǔ)單位日常送檢；小麥粉有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，GBW(E)100382，證書編號(hào)TOXIN-JTBW1。

1.2 儀器與試劑

天平（RC-XY110-2C，北京睿誠永創(chuàng)科技有限公司），振蕩器（HMG-WX，北京美正生物科技有限公司），離心機(jī)（Timi-10k，上海泰坦科技股份有限公司），4個(gè)廠家嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測(cè)卡/試紙條及對(duì)應(yīng)的熒光定量讀數(shù)儀。

1.3 評(píng)價(jià)方法

1.3.1 評(píng)價(jià)樣品的選擇

根據(jù)小麥中DON的國家限量（1 000 μg·kg-1），使用低、中、高3個(gè)濃度水平的樣品進(jìn)行評(píng)價(jià)，樣品均通過《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙?；苌锏臏y(cè)定》（GB 5009.111—2016）中第二法免疫親和層析凈化高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定，且滿足能力驗(yàn)證均勻性和穩(wěn)定性要求，評(píng)價(jià)用樣品中嘔吐毒素含量如表1所示。

表1 樣品中嘔吐毒素含量

1.3.2 準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)

對(duì)上述小麥及小麥粉樣品中DON含量進(jìn)行檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程按照各個(gè)廠家說明書分別進(jìn)行操作，每個(gè)樣品分別平行測(cè)定兩次取平均值進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)。用每個(gè)樣品的檢測(cè)回收率來評(píng)價(jià)該廠家產(chǎn)品的準(zhǔn)確度，回收率計(jì)算公式為

1.3.3 精密度評(píng)價(jià)

選取DON含量低、中、高3個(gè)濃度的小麥樣品進(jìn)行6平行檢測(cè)，用每個(gè)樣品的檢測(cè)結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差來評(píng)價(jià)該廠家產(chǎn)品的精密度，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算公式為

1.3.4 其他指標(biāo)評(píng)價(jià)

快速檢測(cè)產(chǎn)品因具有操作便捷、檢測(cè)效率高和檢測(cè)成本低等特點(diǎn)，適合在基層使用。本評(píng)價(jià)也對(duì)各廠家嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測(cè)卡/試紙條的操作便捷性、檢測(cè)效率、檢測(cè)成本進(jìn)行比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 準(zhǔn)確度

4個(gè)廠家DON熒光定量檢測(cè)卡/試紙條檢測(cè)小麥及小麥粉樣品中DON回收率結(jié)果如表2所示。A廠家產(chǎn)品對(duì)小麥和小麥粉基質(zhì)中DON低濃度水平的回收率為66%～152%，中、高濃度水平的回收率為83%～103%，有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)回收率為73%。B廠家產(chǎn)品對(duì)小麥和小麥粉基質(zhì)中DON低濃度水平的回收率為71%～116%，中濃度水平的回收率為76%～102%，高濃度水平的回收率為85%～90%，有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)回收率為92%。C廠家產(chǎn)品對(duì)小麥和小麥粉基質(zhì)中DON低濃度水平的回收率為62%～104%，中濃度水平的回收率為83%～86%，高濃度水平的回收率為86%～119%，有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)回收率為97%。D廠家產(chǎn)品對(duì)小麥和小麥粉基質(zhì)中DON低濃度水平的回收率為84%～134%，中濃度水平的回收率為95%～117%，高濃度水平的回收率為98%～111%，有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)回收率為118%。

表2 小麥及小麥粉樣品中DON檢測(cè)結(jié)果

2.2 精密度

4個(gè)廠家DON熒光定量檢測(cè)卡/試紙條檢測(cè)小麥中DON相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果如圖1所示。A廠家產(chǎn)品檢測(cè)小麥中DON僅有高濃度水平的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差超過15%，中低濃度水平的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于15%。B、C、D廠家產(chǎn)品檢測(cè)小麥中DON低中高濃度水平的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于15%，其中C廠家和D廠家低中高濃度水平的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%。

圖1 不同廠家產(chǎn)品小麥中DON檢測(cè)結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

2.3 其他指標(biāo)評(píng)價(jià)

由表3可知，對(duì)比4家免疫層析試紙條形式為一步法或者兩步法，且提取液為去離子水或50%乙醇-水溶液操作和獲取均較為便捷、環(huán)保，單個(gè)樣本檢測(cè)時(shí)間均能控制在10 min以內(nèi)，檢測(cè)成本均在25～36元。從這些指標(biāo)上看均能滿足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需求。

表3 不同廠家產(chǎn)品其他指標(biāo)對(duì)比

3 結(jié)論

從基本指標(biāo)對(duì)比來看，4個(gè)廠家的嘔吐毒素?zé)晒舛織l的產(chǎn)品設(shè)計(jì)均能滿足糧食收儲(chǔ)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需求。不同廠家均有回收率超出80%～120%的結(jié)果。結(jié)合檢測(cè)結(jié)果的精密度，A廠家高濃度水平檢測(cè)結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差超出15%，偏差較大不符合糧食收儲(chǔ)要求；B、C、D廠家檢測(cè)結(jié)果精密度較好，但存在整體偏低或偏高的風(fēng)險(xiǎn)，整體偏低容易引起假陰性造成收儲(chǔ)糧食的不安全性，而整體偏高容易引起假陽性，容易造成送糧商家的損失。本評(píng)價(jià)從使用者的角度對(duì)市場(chǎng)上知名度較高的熒光免疫層析產(chǎn)品性能進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)，僅涉及準(zhǔn)確度、精密度兩個(gè)主要性能指標(biāo)，但是對(duì)檢測(cè)限、定量限，特異性及基質(zhì)效應(yīng)未能進(jìn)行進(jìn)一步評(píng)價(jià)，具有一定的局限性。但本評(píng)價(jià)對(duì)于幫助用戶了解現(xiàn)有快速檢測(cè)產(chǎn)品質(zhì)量并做出合適的選擇、推動(dòng)快速檢測(cè)產(chǎn)品生產(chǎn)廠家改進(jìn)產(chǎn)品質(zhì)量具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。