王 帥，于偉杰

（赤峰學院附屬醫(yī)院乳腺外科 內(nèi)蒙古 赤峰 024050）

乳腺癌是臨床最常見惡性腫瘤之一，近年來其發(fā)病率呈明顯上升趨勢，且趨于年輕化。乳腺癌早期無典型臨床癥狀，多表現(xiàn)為乳腺小腫塊，易與乳腺良性結(jié)節(jié)相混淆，故臨床診斷難度較大，隨病情進展，可出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移甚至累及全身多器官，往往導致患者預后不良。由此可見，加強乳腺癌的早期診斷尤為重要。影像學檢查是乳腺癌早期篩查的重要方法，其中高頻超聲可利用多普勒效應原理清晰顯示乳腺組織形態(tài)特征及與周圍組織的關系，其診斷結(jié)果有一定的主觀性，單獨應用存在局限性[1-2]。微小RNA（MicroRNA，miRNA）可通過調(diào)控mRNA 翻譯的方式調(diào)節(jié)靶基因表達，其中miR-194被證實在直腸癌、骨肉瘤等多種惡性腫瘤發(fā)生及發(fā)展過程中發(fā)揮抑癌基因作用，可作為潛在的新型無創(chuàng)診斷腫瘤標志物[3-4]。鑒于此，本研究旨在探討乳腺高頻超聲聯(lián)合血清miR-194 對乳腺癌的診斷價值，以期為早期診斷乳腺癌提供新思路，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年6 月—2023年3 月赤峰學院附屬醫(yī)院收治的乳腺腫塊患者76 例，根據(jù)病理檢查結(jié)果分為乳腺癌組（n=42）和乳腺良性病變組（n=34）。乳腺癌組年齡33～69 歲，平均（51.95±3.93）歲；體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）18～29 kg/m2，平均（24.93±1.24）kg/m2；月經(jīng)狀態(tài)：未絕經(jīng)14 例，已絕經(jīng)28 例。乳腺良性病變組年齡30～70 歲，平均（49.05±4.86）歲；體質(zhì)量指數(shù)18～28 kg/m2，平均（24.88±1.30）kg/m2；月經(jīng)狀態(tài)：未絕經(jīng)12 例，已絕經(jīng)22 例。兩組年齡、體質(zhì)量指數(shù)、月經(jīng)狀態(tài)資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），有可比性。

納入標準：①乳腺癌、乳腺良性病變患者均經(jīng)病理檢查確診；②所有受檢者均行高頻超聲檢查，臨床資料完整；③所有受檢者均知情同意。排除標準：①合并其他原發(fā)性惡性腫瘤者；②超聲圖像偽影過重，影響判斷者；③妊娠期或哺乳期婦女；④合并精神系統(tǒng)疾病、認知功能障礙者。

1.2 方法

乳腺高頻超聲檢查：采用日本HITACHI ALOKA Noblus型彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率設置為（6～10）MHz，所有受檢者均采取仰臥位，雙臂上舉，充分暴露乳房組織，利用超聲探頭接觸乳腺，以逆時針方向全面掃查，觀察乳房是否存在腫塊以及腫塊的大小、形態(tài)、鈣化情況及內(nèi)部回聲等，之后經(jīng)彩超血流觀察腫塊內(nèi)部血流分布情況，所有操作均由2 名影像學專業(yè)醫(yī)生采用雙盲法評估，若存在意見不一致，雙方談論后以統(tǒng)一意見作為最終診斷結(jié)果。

血清miR-194檢測：抽取所有受檢者空腹狀態(tài)下靜脈血5 mL，在水浴箱中靜置10 min，以離心半徑15 cm、離心速度3000 r/min 分離血清，取上清液采用TRIzol 試劑（美國Invitrogen 公司提供）提取血清總RNA，miRNeasy 試劑盒（美國Qiagen 公司）逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，使用PCR 儀進行實時熒光定量PCR，反應體系為25，以GAPDH 為內(nèi)參。反應條件：預變性94 ℃ 5 min，變性95 ℃ 15 s，退火50 ℃ 30 s，延伸72 ℃ 30 s，40 個循環(huán)，每個樣品設3 個復孔。采用2-△△CT 法計miR-194相對表達量。引物序列，上游：5’-CATTCAACCCTGTCGGTGAGT-3’，下游：5’-GCTGTCAACCATACCCTACGTAACC-3’。

1.3 觀察指標

①以病理檢查結(jié)果為金標準，分析乳腺高頻超聲對乳腺癌的診斷效能，指標包括靈敏度、特異度和準確率；②比較兩組血清miR-194 水平；③比較不同病理特征乳腺癌患者血清miR-194水平；④采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析單獨miR-194 檢測及miR-194 聯(lián)合乳腺高頻超聲對乳腺癌的診斷效能。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 26.0 統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間采用方差分析；計數(shù)資料以頻數(shù)（n）、百分率（%）表示，采用χ2檢驗；診斷效能采用ROC 曲線分析；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺高頻超聲診斷乳腺癌的效能分析

以病理檢查結(jié)果為金標準，乳腺高頻超聲診斷乳腺癌的靈敏度、特異度和準確率分別為85.71%（36/42）、88.24%（30/34）和86.84%（66/76），見表1。

表1 乳腺高頻超聲診斷乳腺癌的結(jié)果 單位：例

2.2 兩組血清miR-194 水平比較

乳腺癌組血清miR-194 水平低于乳腺良性病變組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組血清miR-194 水平比較（）

表2 兩組血清miR-194 水平比較（）

2.3 不同病理特征乳腺癌患者血清miR-194 水平比較

TNM 分期為Ⅲ期乳腺癌患者血清miR-194 水平低于Ⅱ期和Ⅰ期患者，低分化患者血清miR-194 水平低于中、高分化患者，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清miR-194 水平低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；不同病理類型患者血清miR-194 水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 不同病理特征乳腺癌患者血清miR-194 水平比較（）

2.4 ROC 曲線分析單獨miR-194 檢測及miR-194聯(lián)合乳腺高頻超聲對乳腺癌的診斷效能

ROC 曲線分析顯示，血清miR-194 診斷乳腺癌的AUC 為0.881（0.822～0.941），最佳截斷值為1.60，預測靈敏度、特異度分別為81.6%、83.2%；血清miR-194 聯(lián)合乳腺高頻超聲診斷乳腺癌的AUC 為0.975（0.953～0.996），靈敏度、特異度分別為94.7%、90.1%，見圖1。

圖1 ROC 曲線分析單獨miR-194 檢測及miR-194 聯(lián)合乳腺高頻超聲對乳腺癌的診斷效能

3 討論

近年來，隨著環(huán)境及生活習慣的改變，乳腺癌的發(fā)病率明顯增加，據(jù)世界癌癥報告指出[5]，2020 年全球新增乳腺癌226萬例，占全部腫瘤新發(fā)的11.7%，已成為危害女性健康的常見惡性腫瘤。由于乳腺癌早期無典型臨床癥狀，導致大多數(shù)患者就診時多出現(xiàn)腫瘤進展及遠處轉(zhuǎn)移，錯過最佳治療時機，且具有一定的病死率，故積極探索高靈敏度、特異度的早期乳腺癌診斷方法對保障患者生命安全十分有利。

高頻超聲具有操作便捷、無創(chuàng)性及圖像清晰等優(yōu)勢，另外，乳腺解剖位置比較表淺，故高頻超聲對乳腺腫塊的大小形態(tài)及內(nèi)部回聲等檢查較為敏感，因此廣泛應用于乳腺腫塊性質(zhì)的鑒別診斷中。胡璇等[6]研究表明，彩色多普勒高頻超聲診斷乳腺癌的靈敏度、特異度及準確率分別為86.2%、89.1%和88.5%。本研究結(jié)果顯示，以病理檢查結(jié)果為金標準，乳腺高頻超聲診斷乳腺癌的靈敏度、特異度和準確率分別為85.71%、88.24%、86.84%，與上述研究報道基本相符。說明高頻超聲對臨床診斷乳腺癌具有較好的準確性。但也有研究表明，高頻超聲診斷乳腺癌同樣也有一定局限性，如診斷結(jié)果具有一定的主觀性，針對病灶較小、內(nèi)部血流信號稀少時無法準確顯示[7]。此外，與正常乳腺組織相比，微小浸潤癌及導管原位癌聲阻抗差異不明顯，因超聲識別率低，易出現(xiàn)誤診和漏診現(xiàn)象，故大多數(shù)學者建議多種方法聯(lián)合診斷更具有學科的前沿性。

隨著分子生物學技術的不斷發(fā)展，人們對腫瘤的發(fā)病機制及其生物學行為有了更深刻的認識，miR 作為新型無創(chuàng)診斷腫瘤標志物在多種惡性腫瘤腫瘤發(fā)生及發(fā)展中的作用越來越受到臨床重視[8]。也有研究指出，腫瘤患者血液循環(huán)中miRNA 表達分子不易受強酸強堿環(huán)境及反復凍融樣本等條件影響，具有較高穩(wěn)定性和特異性，更適用于臨床檢測[9]。miR-194 作為一種抑癌基因，在多種惡性腫瘤中表達異常，參與腫瘤的增殖、侵襲等過程，如在胃癌中miR-194 可通過靶向KDM5B 抑制胃癌細胞增殖，進而發(fā)揮抑癌基因作用；在乳腺癌中，miR-194又可通過抑制Wnt/β-catenin 信號通路激活，下調(diào)其下游基因p-GSK-3β、C-Myc 等表達，抑制癌細胞增殖、侵襲和遷移[10-11]。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組血清miR-194水平低于乳腺良性病變組（P＜0.05）；進一步分析顯示，不同TNM 分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清miR-194 水平比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），江寧祥等[12]研究表明，miR-194 在乳腺癌組織及患者血清中均呈現(xiàn)低表達，支持本研究論點。說明乳腺癌血清miR-194 呈低水平表達，且表達水平與病情進程密切相關。另外，本研究結(jié)果顯示，血清miR-194 聯(lián)合乳腺高頻超聲診斷乳腺癌的AUC 為0.975（0.953～0.996），靈敏度、特異度分別為94.7%、90.1%，均高于單獨檢測。說明通過乳腺高頻超聲及血清miR-194 的聯(lián)合檢測可提供互補信息，進而達到提高乳腺癌診斷效能的目的。

綜上所述，乳腺高頻超聲及血清miR-194 水平對乳腺癌均具有一定的診斷價值，且聯(lián)合應用的診斷效能更高。