李燕維 倪慕蘭 王宇航

福建中醫(yī)藥大學附屬福鼎醫(yī)院病理科,福建省福鼎市 355200

在消化道中,神經內分泌腫瘤(Neuroendocrine neoplasms,NEN)是僅次于腺癌的第二大常見腫瘤[1]。臨床病理上通常根據典型的鏡下特征和神經內分泌標志物陽性表達進行綜合診斷。目前CD56、突觸素(Syn)、嗜鉻素A(CgA)為臨床病理工作中最常用于NEN診斷的標志物,然而這些標志物單獨使用時并不兼具較高的敏感性和特異性,尤其是腫瘤分化低以及常用組化指標交叉表達時。胰島素瘤相關蛋白1(INSM1)是近年來發(fā)現的特異性表達在神經內分泌腫瘤的一種DNA結合蛋白,目前在國內報道較少。因此本文采用免疫組織化學法檢測INSM1在消化道神經內分泌相關腫瘤中的表達,旨在探討INSM1在消化道神經內分泌腫瘤及其相關腫瘤的臨床病理診斷中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017—2022年我院病理科存檔的石蠟包埋組織學標本198例,消化道神經內分泌腫瘤(GNEN)102例[其中神經內分泌瘤(NET)72例,神經內分泌癌(NEC)30例],消化道非神經內分泌腫瘤(non-GNEN)60例;混合性神經內分泌—非神經內分泌腫瘤(MiNEN)9例,癌伴神經內分泌分化(CWND)27例,所有組織均經10%中性福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋。

1.2 方法 選取所需病理組織蠟塊均經常規(guī)HE染色,并參照第5版WHO消化系統(tǒng)腫瘤分類標準,由2位高年資病理醫(yī)師進行重新核定。經3μm厚連續(xù)切片,采用EnVision兩步法染色,具體操作步驟嚴格按試劑說明書進行。鼠抗人單克隆抗體INSM1、CD56、Syn和兔抗人單克隆抗體CgA均購于福州邁新生物技術開發(fā)有限公司,免疫組化EnVision試劑盒及其他試劑均購自DAKO公司。INSM1定位于細胞核,CD56定位于細胞膜,Syn和CgA定位于細胞質。染色結果依據陽性腫瘤細胞的百分比進行判斷,當陽性著色細胞<5%判為陰性,陽性著色細胞>5%判為陽性。

1.3 統(tǒng)計學方法 所有數據采用SPSS26.0軟件進行統(tǒng)計學分析和處理。計數資料以[n(%)]表示,采用χ2檢驗或Fisher精確檢驗。采用確切概率法分析INSM1與CD56、Syn、CgA的敏感性和特異性的差異。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 INSM1在消化道腫瘤組織中的表達 所選患者年齡(68.5±8.8)歲,男女比例約為1.8∶1,臨床分期根據AJCC第5版分期標準:Ⅰ+Ⅱ期占76%(123/162),Ⅲ+Ⅳ期占24%(39/162)。INSM1在GNEN中的陽性率為97.1%(99/102),顯著高于non-GNEN中的1.7% (1/60),差異有統(tǒng)計學意義(χ2=145.512,P=0.000<0.05)。

2.2 INSM1的蛋白表達與GNEN臨床病理特征的關系 INSM1表達和GNEN臨床病理特征的關系分析結果顯示,INSM1與臨床分期相關(χ2=10.045,P<0. 05),而與腫瘤部位、年齡、性別以及病理分級均無明顯相關性(P>0.05)。見表1。

表1 INSM1的蛋白表達與GNEN臨床病理特征的關系[n(%)]

2.3 INSM1與CD56、Syn 、CgA在GNEN及相關鑒別診斷腫瘤組織中的表達 INSM1在NET、NEC和MiNEN中的陽性率分別為98.6%、93.3%和88.9%,敏感性為96.4%,顯著高于CgA的54.1%(P<0.01);與CD56的91.9%、Syn的94.6%相近(P>0.05)。而在27例CWND中,26例均不表達INSM1,特異性為96.3%, 較CD56的59.2%、Syn的33.3%和CgA的77.8%更高(P<0.05)。見表2。

表2 在GNEN及相關鑒別診斷腫瘤組織中INSM1與CD56、Syn 、CgA的陽性表達[n(%)]

3 討論

NEN是一組起源于肽能神經元和神經內分泌細胞的高度異質性腫瘤。近年來,隨著消化內鏡的普及、診斷技術的提高以及實際發(fā)病率的增加,GNEN已經越來越受到重視。病理診斷除了依靠光鏡下形態(tài)分析外,還必須結合免疫組化標記。現在常用商品化的免疫組化染色神經內分泌標記物有CD56、Syn和CgA。CD56是一種同類親和性的膜糖蛋白,除了在神經內分泌細胞表達外,在甲狀腺濾泡、骨骼肌細胞、自然殺傷細胞、間皮細胞及肝細胞均有一定的表達。Syn是位于突觸前囊泡的跨膜糖蛋白,是神經內分泌顆粒運送過程所需的“外包裝”,這種蛋白也可出現在一些非神經內分泌腫瘤中。所以在GNEN的診斷中CD56和Syn具有比較好的敏感性,但特異性卻不高[2]。臨床病理工作中CD56和Syn的假陽性表達常常給診斷醫(yī)生帶來困擾。CgA是神經內分泌顆粒中的可溶性酸性糖蛋白,在神經內分泌腫瘤中具有很好的特異性,但是由于在多數腫瘤中CgA含量極低,免疫組化方法難以檢測出,所以其敏感性較差,容易造成漏診[3]。

INSM1是近年來新報道的神經內分泌標記物,其作為DNA結合蛋白參與終止細胞有絲分裂和向神經上皮分化等不同生物學功能。細胞信號傳導研究表明,INSM1有助于誘導細胞周期停滯和退出,這是促進細胞分化所必需的[4]。INSM1參與胚胎早期神經內分泌系統(tǒng)的發(fā)生,并在神經內分泌組織中嚴格特異性表達:可在胎兒多種組織中的表達,而在胎兒出生后迅速下降;在正常成人組織中INSM1蛋白僅表達于神經內分泌細胞和組織的細胞核中。也就是說除了神經內分泌組織,在其他發(fā)育成熟的器官中幾乎檢測不到INSM1表達[5]。

既往研究報道,INSM1在肺部NEN的陽性率為87.5%,可作為與非小細胞癌鑒別的指標[6]。在前列腺小細胞癌(共18例)中陽性率為92.3%[7],在子宮頸小細胞癌(共37例)中陽性率為94.6%[8]。王勁松等[9]報道了48例胃腸胰NEN患者中,有39例表達了INSM1(陽性率81.3%),敏感性較CgA高,特異性與傳統(tǒng)指標無明顯差異。本文檢測了102例GNEN和9例MiNEN患者,其中INSM1的NEN成分中顯示明確核陽性表達,表明INSM1是診斷NEN的有效標志物。和以往常用的神經內分泌標記物相比,INSM1的敏感性為96.4%,明顯高于CgA,與CD56、Syn相近。并且INSM1核陽性表達更便于判讀,特別是在活檢小標本存在明顯的組織物理性損傷時,核陽性表達判讀更具優(yōu)勢。同時,在27例容易混淆的CWND中,僅1例表達INSM1,INSM1的特異性為96.3%,較CD56、Syn和CgA更高。

總之,INSM1在GNEN中兼具很高的敏感性和特異性,且INSM1免疫組化陽性表達在細胞核上,較傳統(tǒng)指標更容易地識別和計數,故推薦將INSM1用于GNEN臨床病理診斷。