章達(dá)桂

福建省福鼎市醫(yī)院病理科 355200

膀胱癌在泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤中十分常見(jiàn),男性發(fā)病率明顯高于女性,根據(jù)其組織來(lái)源可分為膀胱尿路上皮癌、膀胱鱗狀細(xì)胞癌、膀胱小細(xì)胞癌等,其中以膀胱尿路上皮癌最為多見(jiàn)[1]。尿路上皮癌主要以浸潤(rùn)的方式生長(zhǎng),具有多灶發(fā)生、復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn),因其臨床癥狀無(wú)特異性,早期檢出率較低,目前仍缺乏敏感而特異性的預(yù)測(cè)指標(biāo)[2]。GATA結(jié)合蛋白3(GATA-binding protein 3,GATA-3)主要來(lái)源于轉(zhuǎn)錄因子GATA家族,可對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)進(jìn)行調(diào)控,同時(shí)還能促使細(xì)胞分化,一般認(rèn)為在驅(qū)動(dòng)2型輔助T細(xì)胞分化方面具有較高的特異性,同時(shí)也認(rèn)為該轉(zhuǎn)錄因子可直接參與到尿路上皮癌的發(fā)生發(fā)展中,其陽(yáng)性表達(dá)與膀胱癌預(yù)后存在關(guān)聯(lián)[3]。配對(duì)盒基因8(Paired box gene 8,PAX-8)主要來(lái)源于蛋白轉(zhuǎn)錄因子配對(duì)盒家族,可直接參與到甲狀腺、腎臟、米勒管的胚胎發(fā)育過(guò)程中,一般認(rèn)為其表達(dá)與癌癥的發(fā)生發(fā)展存在一定關(guān)聯(lián)[4]?；诖?本文就尿路上皮癌組織中PAX-8、GATA-3的表達(dá)與臨床病理特征的相關(guān)性進(jìn)行分析,報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入標(biāo)準(zhǔn):病理學(xué)檢查確診為尿路上皮癌;首次確診入院治療者;石蠟組織切片完整;自愿參與且已簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):近期接受放化療干預(yù)者;合并其他惡性腫瘤;合并免疫性或代謝性疾病;石蠟組織切片中腫瘤組織不完整或免疫組織化學(xué)染色不均勻。根據(jù)納入、排除標(biāo)準(zhǔn),選取本院2020年1月—2022年1月收治的144例尿路上皮癌患者的石蠟標(biāo)本作為觀察組,其中男95例,女49例;年齡37～87歲,平均年齡(54.58±5.34)歲;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例,未見(jiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移132例。另選取同期100例患者的癌旁正常尿路上皮組織標(biāo)本作為對(duì)照組,其中男70例,女30例;年齡36～86歲,平均年齡(53.54±5.65)歲。

1.2 方法 免疫組化方法:取石蠟標(biāo)本3μm重新切片,經(jīng)過(guò)二甲苯、乙醇梯度脫蠟至水、內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷,并采用抗原熱修復(fù),封閉組織蛋白,加入稀釋濃度為1∶50的一抗孵育過(guò)夜,再加入稀釋濃度為1∶50的二抗孵育15min,DAB顯色、復(fù)染、封片,隨后采用顯微鏡觀察。GATA-3兔單克隆抗體(ab199428)購(gòu)自美國(guó)Abcam公司。PAX-8鼠單抗(ZM-0468)購(gòu)自北京中杉金橋生物有限公司。均嚴(yán)格按照相關(guān)說(shuō)明書操作。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較兩組患者的PAX-8、GATA-3表達(dá)陽(yáng)性率。PAX-8陽(yáng)性判定:染色后,細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色或黃褐色顆粒表示陽(yáng)性。GATA-3陽(yáng)性判定:按陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在腫瘤細(xì)胞中的占比判斷,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占比≥10%表示陽(yáng)性,<10%表示陰性。(2)分析尿路上皮癌組織中PAX-8、GATA-3表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系,包括性別、年齡(<65歲、≥65歲)、病變部位(上尿路、下尿路)、組織學(xué)分級(jí)(高級(jí)別、低級(jí)別)、有無(wú)組織浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有無(wú)復(fù)發(fā)、分期(T1～T2、T3～T4)、腫瘤直徑(<3cm、≥3cm)、有無(wú)脈管癌栓、有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。(3)分析尿路上皮癌組織中PAX-8、GATA-3與臨床病理特征的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 兩組PAX-8、GATA-3表達(dá)陽(yáng)性率比較 觀察組患者PAX-8表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組,GATA-3表達(dá)陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 兩組PAX-8、GATA-3表達(dá)陽(yáng)性率對(duì)比[n(%)]

2.2 尿路上皮癌組織中PAX-8表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 PAX-8陽(yáng)性與陰性的性別、年齡、病變部位、組織學(xué)分級(jí)、有無(wú)組織浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有無(wú)復(fù)發(fā)、腫瘤直徑、有無(wú)脈管癌栓比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);PAX-8陽(yáng)性與陰性的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、分期比較存在顯著差異(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 尿路上皮癌組織中PAX-8表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系[n(%)]

2.3 尿路上皮癌組織中GATA-3表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 GATA-3陽(yáng)性與陰性的性別、年齡、病變部位、有無(wú)組織浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有無(wú)復(fù)發(fā)、腫瘤直徑、有無(wú)脈管癌栓、有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);GATA-3陽(yáng)性與陰性的組織學(xué)分級(jí)、分期比較存在顯著差異(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 尿路上皮癌組織中GATA-3表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系[n(%)]

2.4 尿路上皮癌組織中PAX-8、GATA-3與臨床病理特征的相關(guān)性 PAX-8表達(dá)與分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)性(r=0.964、0.764,P<0.05);GATA-3表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)、分期呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.849,-0.684,P<0.05)。

3 討論

尿路上皮癌的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜,臨床目前尚未完全明確,考慮與遺傳、藥物、脂肪攝入量高等因素有關(guān)[5]。相較于其他膀胱腫瘤而言,尿路上皮癌具有獨(dú)特性,例如診斷時(shí)浸潤(rùn)的發(fā)生率高達(dá)60%,盡管近幾年臨床診療技術(shù)和設(shè)備不斷提升,但尿路上皮癌的預(yù)后相較于其他膀胱癌而言仍比較差,且目前關(guān)于尿路上皮癌預(yù)后指標(biāo)的研究尚未成熟,還需進(jìn)一步尋找敏感性和特異性高的預(yù)測(cè)指標(biāo)[6]。

GATA-3在甲狀旁腺、T淋巴細(xì)胞和尿路上皮等多種正常發(fā)育的細(xì)胞或組織中均有表達(dá),而在相同腫瘤中,GATA-3的免疫組化陽(yáng)性表達(dá)率也受到相當(dāng)?shù)南拗?可見(jiàn)GATA-3表達(dá)在腫瘤細(xì)胞組織中具有較高的特異性[7]。PAX基因是一個(gè)發(fā)育調(diào)控基因家族,PAX-8含有成對(duì)結(jié)構(gòu)域和八聚體,大量研究認(rèn)為PAX家族編碼的轉(zhuǎn)錄因子與細(xì)胞增殖、分化及腫瘤的發(fā)生發(fā)展存在關(guān)聯(lián)[8]。既往研究發(fā)現(xiàn),PAX-8在卵巢癌、腎細(xì)胞癌及所有腎源性肌瘤中均具有陽(yáng)性表達(dá),一般轉(zhuǎn)錄因子多在胚胎時(shí)呈現(xiàn)出高表達(dá),器官成熟后表達(dá)將會(huì)逐漸減弱,但PAX-8在胚胎組織和成熟的Mullerian’s上皮中均出現(xiàn)高表達(dá)的情況,可見(jiàn)PAX-8不僅參與到胚胎的發(fā)育過(guò)程中,在成熟組織中也能發(fā)揮出至關(guān)重要的作用[9]。本研究發(fā)現(xiàn),相較于對(duì)照組而言,觀察組患者的PAX-8、GATA-3表達(dá)陽(yáng)性率更高。提示PAX-8、GATA-3表達(dá)在尿路上皮癌鑒別診斷中存在一定價(jià)值。目前有大量研究證實(shí)GATA-3表達(dá)與尿路上皮癌pT分期存在明顯相關(guān)性,也有研究認(rèn)為GATA-3的陽(yáng)性表達(dá)與上尿路上皮癌的臨床病理特征不存在相關(guān)性,爭(zhēng)議性較大[10]。GATA-3可直接參與到腫瘤細(xì)胞的增殖、分化和凋亡過(guò)程中,能夠通過(guò)下調(diào)轉(zhuǎn)移基因和上調(diào)轉(zhuǎn)移抑制基因的方式抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移性生長(zhǎng),因此GATA-3表達(dá)多處于正常組織中[11]。隨著腫瘤的分期、分級(jí)的增加,GATA-3表達(dá)將會(huì)出現(xiàn)逐漸降低的情況,可作為免疫組化標(biāo)志物判斷腫瘤的進(jìn)展情況[12]。在尿路上皮癌中,PAX-8在高分期、有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中一般呈低表達(dá);GATA-3在高級(jí)別、高分期中一般呈高表達(dá)。本次研究發(fā)現(xiàn),GATA-3陽(yáng)性多為高級(jí)別和T3～T4期患者;PAX-8陽(yáng)性多為T3～T4期、有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者。由此可見(jiàn),PAX-8、GATA-3陽(yáng)性表達(dá)與PAX-8、GATA-3在尿路上皮癌中的表達(dá)情況存在一定關(guān)聯(lián),可作為尿路上皮癌的預(yù)測(cè)因子。本次研究還發(fā)現(xiàn),GATA-3與組織學(xué)分級(jí)、分期呈負(fù)相關(guān)性。提示GATA-3表達(dá)與尿路上皮癌的發(fā)生發(fā)展存在一定關(guān)聯(lián)。目前,已有大量研究證實(shí)GATA-3低表達(dá)與尿路上皮癌的臨床病理特征存在相關(guān)性,但對(duì)于PAX-8表達(dá)與尿路上皮癌的臨床病理特征相關(guān)性的研究較少[13]。PAX-8作為轉(zhuǎn)錄因子的一員,與胚胎的發(fā)育有關(guān),PAX基因表達(dá)的蛋白質(zhì)均會(huì)在胚胎發(fā)育中調(diào)控組織和器官的分化,可有效加快器官發(fā)育和腫瘤的發(fā)生發(fā)展速度[14]。PAX-8具有獨(dú)特的組織特異性,在正常腎集合管上皮細(xì)胞中出現(xiàn)彌漫強(qiáng)陽(yáng)性,其高表達(dá)多來(lái)源于中腎管各組織器官或原發(fā)、轉(zhuǎn)移性腫瘤中,與腫瘤轉(zhuǎn)移存在密切關(guān)聯(lián)[15]。腫瘤轉(zhuǎn)移與分期存在密切關(guān)聯(lián),分期越晚,癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移越廣泛,PAX-8陽(yáng)性表達(dá)率也會(huì)隨之增高,說(shuō)明尿路上皮癌組織標(biāo)本PAX-8表達(dá)越高,腫瘤的惡性程度越高,預(yù)后相對(duì)而言較差[16-17]。本研究發(fā)現(xiàn),PAX-8高表達(dá)在T3～T4期、有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中的占比更高,PAX-8表達(dá)與分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)性。提示PAX-8高表達(dá)與尿路上皮癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及分期情況密切相關(guān)。

綜上所述,尿路上皮癌組織中的PAX-8、GATA-3表達(dá)與其分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等臨床病理特征存在一定的關(guān)聯(lián)。但本研究仍存在樣本量少、未考慮腫瘤異質(zhì)性等其他因素,還需進(jìn)一步探索與研究,才能保障結(jié)果的真實(shí)性、可靠性。