牛東玲,趙格格,馬 佳,胡永強(qiáng),蘇玉兵

(1 寧夏大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,銀川 750021;2 固原市六盤山林業(yè)局,寧夏固原 756000)

寧夏位于中國西北地區(qū)東部,地處蒙古高原、黃土高原和青藏高原的交匯處,其特殊的地理位置和過渡性特征,造就了該區(qū)復(fù)雜多樣的生態(tài)系統(tǒng)。如南部六盤山地區(qū)的森林生態(tài)系統(tǒng)及灌叢生態(tài)系統(tǒng),中北部地區(qū)的草原、荒漠及沙地等生態(tài)系統(tǒng)[1],這些生態(tài)系統(tǒng)為地衣型真菌提供了非常多樣的生存條件。有關(guān)寧夏地衣的報(bào)道可追朔到1964年[2],當(dāng)時(shí)僅描述了梅花衣屬(Parmelia)的1個(gè)種,現(xiàn)在隸屬于黃梅屬(Xanthoparmelia)。之后,在1991年,魏江春在《中國地衣綜覽》一書中,對之前中國所有地衣的研究進(jìn)行了整理,收錄了寧夏地衣4屬7個(gè)種[3],均為葉狀地衣,主要附生于樹干或巖石上,對于具體的采集地點(diǎn)沒有詳細(xì)的記錄。到了21世紀(jì),涉及寧夏地衣的報(bào)道逐漸增多,在最新出版的《中國地衣型真菌綜覽》(2020)中[4],收錄了47種分布在寧夏的地衣。根據(jù)筆者對寧夏賀蘭山東麓地衣資源的調(diào)查,僅賀蘭山東麓荒漠草原區(qū)就有74種地衣型真菌[5],而實(shí)際的物種多樣性要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于這個(gè)數(shù)字。隨著對標(biāo)本逐步深入的研究,新記錄、新物種還將不斷地被發(fā)現(xiàn)。本研究報(bào)道的3個(gè)種就是近期在對采自寧夏賀蘭山和六盤山含有蒽醌類化合物的地衣物種進(jìn)行標(biāo)本整理過程中發(fā)現(xiàn)的中國新分布。

1 材料和方法

1.1 材 料

標(biāo)本采集于寧夏賀蘭山和六盤山國家級自然保護(hù)區(qū),存放在寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院植物標(biāo)本室(NXAC)。

1.2 方 法

經(jīng)典分類學(xué)研究:采用體視顯微鏡(OLYMPUS SZX16)觀察形態(tài)結(jié)構(gòu),利用奧林巴斯數(shù)碼顯微照相系統(tǒng)(OLYMPUS DP 26)進(jìn)行拍照。通過對子囊盤徒手切片制作臨時(shí)裝片,置于光學(xué)顯微鏡OLYMPUS BX43F觀察顯微結(jié)構(gòu)并拍照。通過顯色反應(yīng)(CT) 和薄層層析(TLC) 鑒定次生代謝產(chǎn)物[6]。

分子生物學(xué)研究:DNA提取采用Biospin植物基因組DNA提取試劑盒從干燥的樣本中獲得。rDNA內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS1-2)使用ITS1F[7]和ITS4[8]為引物經(jīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)進(jìn)行擴(kuò)增,PCR混合物(25 μL)由25 μg BSA、1 U Taq DNA聚合酶、dNTP (0.2 mmol/L)、引物(每個(gè)0.5 μmol/L)和PCR緩沖液,用H2O調(diào)節(jié)至25 μL。PCR反應(yīng)程序:96 ℃預(yù)變性2 min,隨后96 ℃變性10 s,52 ℃退火10 s,60 ℃延伸30 s,循環(huán)30次,循環(huán)結(jié)束后60 ℃延伸4 min,4 ℃保存。擴(kuò)增產(chǎn)物純化鑒定后使用ABI3730XL自動測序儀進(jìn)行測序。根據(jù)雙向測序結(jié)果,采用Sequencher 4.1.4軟件(Gene Codes, USA)拼接完整序列,并進(jìn)行人工校正,通過BanKit在線提交序列至NCBI,獲得登錄號(表1)。

表1 3個(gè)樣品的登錄號及憑證標(biāo)本信息

2 結(jié)果與討論

2.1 亞洲黃燭衣(新擬)

CandelariaasiaticaD. Liu &J.-S Hur,Mycobiology, 46(4): 308(2018)。常附生于樹干或其他地衣體上(圖1,A),小型葉狀,貼生于基物,直徑0.2～2.0 cm,常在基物上連接成片;裂片背腹性明顯,貼生或直立,上表面亮黃色,下表面白色,具不規(guī)則鋸齒狀邊緣,末級裂片分枝短,寬約0.1～0.2 mm,裂片頂端可見類似于酵母的出芽體,單一或連續(xù)成串(圖1,B),芽體直徑約0.05 mm;上皮層明顯,10～12.5 μm厚,為假薄壁組織,藻胞層不均勻分布,50～75 μm厚,髓層白色,30～50 μm厚,下皮層白色,不連續(xù),細(xì)胞近等徑,排列緊密,常生有假根,假根單一,0.1～0.3 mm長(圖1,C、D);未見子囊盤及分生孢子器。

A. 生境; B. 裂片邊緣(示芽體); C. 帶假根的下表面; D. 地衣體橫切面。標(biāo)尺: A～C = 0.5 mm; D = 10 μm。

化學(xué)特性: 皮層K-,含未知色素成分;髓層 K-,KC-,C-,PD-,主要含卡里堿和枕酸。

生境和分布:發(fā)現(xiàn)于寧夏六盤山國家級自然保護(hù)區(qū),附生于海拔 1 859 m的榆樹樹干上。在韓國[9]和日本[10]有分布。

引證標(biāo)本:中國寧夏,涇源,六盤山,海拔1 859 m,2017-05-26,牛東玲17-0003。

亞洲黃燭衣(Candelariaasiatica)和同色黃燭衣(C.concolor)在形態(tài)上比較相似,二者均為小型葉狀地衣,但是前者在末級裂片頂端常溢縮形成芽體,不同于同色黃燭衣形成的粉芽結(jié)構(gòu),其在裂片邊緣常形成多量細(xì)顆粒狀粉芽。根據(jù)相關(guān)報(bào)道[9],亞洲黃燭衣不同于同色黃燭衣的另一個(gè)特征是具有粗糙、粉狀的上表面。但據(jù)筆者觀察,這個(gè)形態(tài)區(qū)別尚需通過對更多材料的觀察進(jìn)一步確認(rèn)其分類價(jià)值。

2.2 黃厚膜衣(新擬)

Placolecisloekoesiana(S.Y. Kondr., Farkas, J.J. Woo &Hur) An. C. Yin,Mycobiology, 47(4): 406(2019)。地衣體殼狀,黃棕色至橄欖黃色,地衣體中心網(wǎng)格狀,裂紋明顯;中央裂片較短、窄,常凸起呈半球形,直徑約1 mm,裂片聚集或分散,周圍裂片明顯輻射狀;上皮層的外側(cè)覆有一多糖樣薄層,7.5～12.5 μm厚,上面分布有明顯的孔道(圖2,A);上皮層由假薄壁組織構(gòu)成,厚約30～37.5 μm,外側(cè)2～3層細(xì)胞呈淡黃褐色;藻胞層45～57.5 μm厚,藻細(xì)胞圓球形或橢球形,(8～12) μm×(9～15) μm;髓層亮黃色,115～125 μm厚,無下皮層(圖2,B);無裂芽或粉芽;子囊盤側(cè)生,網(wǎng)衣型,黑色,無柄,半球形或盤面平,直徑0.2～1.0 mm(圖2,B);子實(shí)層無色,遇I+呈藍(lán)色;側(cè)絲頂端細(xì)胞膨大如頭狀,內(nèi)部形成明顯色素帽(圖2,C);子囊狹棒狀,8孢,孢子單胞,無色,橢圓形,(5～6) μm×(7～11) μm(圖2,D)。

A. 中央裂片縱切面(示上皮層上方薄層及通道); B. 子囊盤和地衣體 (示黃色的髓); C. 側(cè)絲 (示具有色素帽的頂端細(xì)胞); D. 子囊和子囊孢子; E. 分生孢子; F. 生境。

分生孢子器埋生,梨形,100 μm×125 μm,在上表面僅留1個(gè)黑色出口,分生孢子無色,桿狀,3～5 μm長(圖2,E)。

化學(xué)特性:髓層K+紫色,C-,I+藍(lán)色。髓層含有蒽醌類物質(zhì),主要有大黃素,地衣紅素和 fragilin等。

生境與分布:附生于中國寧夏賀蘭山海拔1 300～2 200 m的巖石表面(圖2,F),在韓國有分布[11]。

引證標(biāo)本:中國寧夏,銀川,賀蘭山,海拔2 189 m,2017-07-10,牛東玲 17-0454; 賀蘭山,海拔1 366 m,2010-09-24,牛東玲10-0275;賀蘭山,海拔1 500 m,2014-10-09, 牛東玲19-0002。

該種和Placolecisopaca非常像,但是該種地衣體顏色更黃,裂片則較短狹,同時(shí)髓層為亮黃色。而后者地衣體顏色偏棕色,髓層為赭色,裂片較長。

2.3 粉橙衣(新擬)(圖3)

A. 生境; B. 粉芽堆。

CaloplacalenaeS?chting &Figueras,Lichenologist, 39(1): 8 (2007)。地衣體石生,殼狀,緊密貼附于基物,土黃色或棕黃色(圖3,A),小團(tuán)塊存在或連接成片,邊緣裂片明顯;中部龜裂狀,龜裂片直徑約1 mm,連續(xù),平展或凸起,表面粗糙,微粉霜;上皮層由假薄壁組織構(gòu)成,菌絲交織,排列致密,約30～100 μm厚,淡黃褐色,藻細(xì)胞穿插于髓層,不連續(xù);龜裂片邊緣或上表面常形成大量的粉芽堆,粉芽堆唇狀或橢圓狀(圖3,B),粉芽亮黃色,近球形,直徑約40～50 μm;未見子囊盤和分生孢子器。

化學(xué)特性:髓層 K+紫紅色,C-。髓層含有蒽醌類物質(zhì),主要有大黃素,石黃酮和fragilin等。

生境與分布:常附生于賀蘭山和六盤山海拔1 700～2 910 m裸露的垂直巖面上。在蒙古共和國、西伯利亞、雅庫提亞、阿爾泰共和國及俄羅斯有分布[12]。

引證標(biāo)本:中國寧夏,銀川,賀蘭山,海拔2 906 m,2017-07-18,牛東玲17-0657; 固原,六盤山,海拔1 715 m,2022-05-28,牛東玲22052812。

粉橙衣(Caloplacalenae)與C.ehrenbergii在地衣體比較相似,但是前者形成豐富的粉芽堆,后者不形成;并且,前者的分生孢子器較之后者顏色更深一些;分布于阿爾泰共和國的粉橙衣既有粉芽堆,又有有性繁殖結(jié)構(gòu)子囊盤[12]。國內(nèi)采集的標(biāo)本僅見粉芽堆,未見到分生孢子器和子囊盤。

致謝：野外調(diào)查得到了歷屆學(xué)生的幫助,在此表示衷心感謝!