李澤青　王晗　于海霞　竇廣躍　王鴻英　閆峻

摘? ? 要：為了研究浮萍不同添加比例對60～70周產(chǎn)蛋中后期蛋雞血液常規(guī)、血清生化和抗氧化指標的等影響，采用單因素完全隨機設(shè)計，選擇2 000羽60周齡的產(chǎn)蛋中后期產(chǎn)蛋雞，分成4組，在基礎(chǔ)日糧中分別添加0%、3%、5%、7%浮萍，每組5個重復(fù)，每重復(fù)100羽蛋雞，試驗期60 d。試驗結(jié)束后，對白細胞數(shù)、紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量、血小板數(shù)、淋巴細胞數(shù)、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、膽固醇（CHO）進行分析。結(jié)果表明：與對照組相比，添加適量的浮萍可以降低產(chǎn)蛋中后期蛋雞MDA、BUN、TG、CHO含量，以及白細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)，升高了紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量、血小板數(shù)、TP含量和總抗氧化能力。綜上，蛋雞飼糧中添加適量浮萍能改善產(chǎn)蛋中后期蛋雞血液指標，促進機體代謝，提高機體抗氧化能力。

關(guān)鍵詞：浮萍；蛋雞；血液指標

中圖分類號：S816.7? ? ? ?文獻標識碼：A? ? ? DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2023.S.010

Effects of Dietary Duckweed Supplementation with Different Proportions on Blood Indexes of Laying Hens

LI Zeqing1， WANG Han2， YU Haixia1， DOU Guangyue3， WANG Hongying1， YAN Jun2

（1.Tianjin Agricultural Development Service Center， Tianjin 300061， China; 2.Tianjin Key Laboratory of Animal Molecular Breeding and Biotechnology/Tianjin Engineering Research Center of? Animal Healthy Farming/Institute of Animal Science and Veterinary， Tianjin Academy of Agricultural Sciences， Tianjin 300381， China; 3.Agricultural and Rural Development Service Center of Tianjin Binhai New Area， Tianjin 300480， China）

Abstract： In order to study the effects of different addition ratios of duckweed on blood routine levels， serum biochemical parameters and antioxidant indexes of laying hens aged 60-70 weeks， single factor completely random design was used. A total of 2 000 laying hens aged 60 weeks were divided into 4 groups. Duckweed of 0%， 3%， 5%， and 7% was added to the basal diet with five replicates per group. The experiment lasted for 60 days per replicate of 100 laying hens. At the end of the experiment， leukocyte count， erythrocyte count， hemoglobin content， platelet count， lymphocyte count， malondialdehyde （MDA）， superoxide dismutase （SOD）， glutathione peroxidase （GSH-Px）， total antioxidant capacity （T-AOC）， total protein （TP）， albumin （ALB）， urea nitrogen （BUN）， creatinine （CRE）， uric acid （UA）， triglyceride （TG） and cholesterol （CHO） were analyzed. The results showed that compared with the control group， the contents of MDA， BUN， TG， CHO， leukocyte count and lymphocyte count of laying hens in the middle and later laying period were decreased， and erythrocyte count， hemoglobin content， platelet count， TP content and total antioxidant capacity of laying hens were increased after adding duckweed in the moderate amount. In conclusion， dietary duckweed supplementation can improve some blood indexes， promote metabolism and enhance antioxidant capacity of laying hens in the middle and later laying period.

Key words： duckweed; laying hens; blood index

隨著社會的快速發(fā)展，人們對食品安全的關(guān)注也不斷提升。長期濫用抗生素而導(dǎo)致的細菌耐藥、藥物殘留、環(huán)境污染等問題層出不窮，迫使畜牧業(yè)急需開發(fā)一種安全高效、無殘留、不易產(chǎn)生耐藥性的天然綠色抗生素替代品。植物提取物是一類來源于天然植物的活性物質(zhì)。眾多研究表明，在動物飼料中添加單一或復(fù)合植物提取物對畜禽生長發(fā)育及生產(chǎn)性能具有促進作用，“營養(yǎng)活性物質(zhì)組學(xué)”理論認為，這可能是多種營養(yǎng)活性物質(zhì)之間的協(xié)同作用。浮萍（Lemna minor L.），浮萍科水面浮生植物，各地均有種植，是一種優(yōu)質(zhì)的飼料、食物和藥用植物[1]。浮萍中的主要有效化學(xué)成分為芹菜素、木犀草素、葒草素、牡荊素[2-4]等，其在抗氧化、抗菌、抗寄生蟲、免疫調(diào)節(jié)和促進修復(fù)方面均有一定作用[5-9]。浮萍的次級代謝產(chǎn)物中包括異黃酮，是一類豆科植物中的黃酮類化合物。有研究表明，42日齡的公雞飼喂含異黃酮（10～80 mg·kg-1）的飼糧可顯著降低血漿中MDA含量，提高血漿T-AOC和SOD活性[10]。還有研究證明，經(jīng)芹菜素治療能夠明顯提高AD大鼠海馬組織SOD、GSH-Px活性并降低MDA含量，降低TNF-α、IL-1β、IL-6水平，提高Nrf2、HO-1蛋白表達量[11]。但是，在產(chǎn)蛋中后期蛋雞飼糧中添加浮萍對蛋雞血清中酶和免疫因子的變化缺乏研究和探討。本試驗通過在蛋雞飼糧中添加不同比例的浮萍，研究其對產(chǎn)蛋中后期蛋雞各種血液指標的影響，以期為浮萍在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗使用的浮萍由華睿（天津）生態(tài)環(huán)境科技有限公司提供，風干物采用粉碎機粉碎后過40目篩，避光干燥保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗設(shè)計

按照一定比例（0%、3%、5%、7%）將浮萍添加到產(chǎn)蛋雞基礎(chǔ)飼糧中。試驗選擇2 000羽60周齡的產(chǎn)蛋中后期產(chǎn)蛋雞作試驗動物，分為4組，每組500羽。其中，1組為對照組，其他3組為試驗組。每個試驗組隨機分為5個重復(fù)，每個重復(fù)100羽蛋雞。飼養(yǎng)試驗過程包括預(yù)試驗7 d，正式試驗60 d。基礎(chǔ)飼糧為正常的商業(yè)飼糧，營養(yǎng)成分見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗組和對照組的蛋雞飼養(yǎng)在相同環(huán)境內(nèi)，每日上午、下午喂料2次。所有試驗蛋雞自由采食、飲水，每日恒定光照16 h，溫度平均21 ℃，相對濕度為40%～55%，自然通風。每日觀察雞群健康狀況、記錄死淘數(shù)，每日清糞、撿蛋各1次，保持雞舍內(nèi)的溫度和濕度，每日對雞舍通風，按常規(guī)程序進行雞只免疫和欄舍消毒。

1.4 血清指標測定

試驗第60天，每個重復(fù)隨機選取3只體質(zhì)量接近的健康蛋雞，自由飲水但空腹12 h，翅靜脈采血4 mL，其中2 mL血液加抗凝劑用于血常規(guī)指標測定；另外2 mL血液靜置后，3 500 r·min-1離心10 min，分離血清樣品用于血清生化指標測定。

抗凝血樣品使用全自動血液分析儀進行血常規(guī)指標檢測，檢測指標為：白細胞數(shù)、紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量、血小板數(shù)和淋巴細胞數(shù)。

血清樣品使用全自動生化分析系統(tǒng)測定，檢測指標為：丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、膽固醇（CHO）。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

本研究數(shù)據(jù)采用Excel 2013軟件進行整理，使用SPSS 24.0中單因素方差分析（one-way ANOVA）分析數(shù)據(jù)顯著性，數(shù)據(jù)以平均值±標準誤表示。P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 浮萍對產(chǎn)蛋中后期蛋雞血常規(guī)的影響

如表2所述，與對照組相比，3%浮萍組白細胞數(shù)、血小板和淋巴細胞數(shù)顯著降低（P<0.05）；5%浮萍組白細胞數(shù)顯著降低（P<0.05）； 3%浮萍組、5%浮萍組、7%浮萍紅細胞數(shù)和血紅蛋白含量有升高趨勢，但無顯著差異（P>0.05）。

2.2 浮萍對產(chǎn)蛋中后期蛋雞血清生化指標的影響

如表3所述，與對照組相比，3%浮萍組T-AOC、 TP和CRE水平顯著升高（P<0.05），MDA、BUN、TG和CHO水平顯著降低（P<0.05）；5%浮萍組T-AOC和CRE水平顯著升高（P<0.05），MDA、BUN、 UA、TG和CHO水平顯著降低（P<0.05）；7%浮萍組TG和CHO水平顯著升高（P<0.05），BUN和UA水平顯著降低（P<0.05）。各組別間血清中SOD和GSH-Px水平均無顯著性差異（P>0.05）。

3 討論與結(jié)論

3.1 浮萍對產(chǎn)蛋中后期蛋雞血常規(guī)的影響

血液在促進新陳代謝和維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)方面起著重要作用，其成分和含量的變化都可在一定程度上反映器官或組織的病理學(xué)改變[12]，因此血常規(guī)成為評價動物健康與否的重要依據(jù)。白細胞被稱為機體第一道防線，當機體受到細菌侵襲或發(fā)生炎癥會刺激白細胞數(shù)量急劇增多[13]。紅細胞的主要功能是運輸O2和CO2，此外還在酸堿平衡中起一定的緩沖作用。這2項功能都是通過紅細胞中的血紅蛋白來實現(xiàn)的。血小板的作用機制在于能夠發(fā)揮較強的黏附血管內(nèi)皮細胞的能力，負責機體凝血功能。本研究結(jié)果表明，隨著飼糧中浮萍添加比例的升高，蛋雞血清中白細胞數(shù)下降，紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量和血小板數(shù)升高，提示浮萍可能提高產(chǎn)蛋中后期蛋雞代謝水平和免疫水平。原因可能是浮萍中包含的活性物質(zhì)芹菜素具有抗紅細胞溶血的特性，亦或者是葒草苷和木犀草素對紅細胞自然老化的保護作用，具體原因仍需要進一步研究。

3.2 浮萍對產(chǎn)蛋中后期蛋雞血清生化指標的影響

血清生化指標的變化可以反映動物機體的物質(zhì)代謝水平。超氧化物歧化酶（SOD）是體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的第一道防線，它可以催化清除超氧陰離子自由基，使其發(fā)生歧化反應(yīng)生成H2O2和O2，從而去除活性氧，維持氧代謝的平衡，然后在谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的作用下，清除由SOD產(chǎn)生的H2O2，把其轉(zhuǎn)化為對機體無害的水和氫氣，這些酶的活性可以反映自由基的清除能力。丙二醛（MDA）是自由基攻擊多不飽和脂肪酸引發(fā)脂質(zhì)過氧化形成的終產(chǎn)物[14]。總抗氧化能力（T-AOC）代表體內(nèi)酶類和非酶類抗氧化物的總體水平，是反映機體抗氧化作用的重要指標。研究表明，浮萍中的主要有效化學(xué)成分芹菜素可抑制對乙酰氨基酚誘導(dǎo)的大鼠肝毒性中的脂質(zhì)過氧化水平，并顯著增加酶抗氧化防御機制[15]。本研究結(jié)果也顯示，在飼糧中添加浮萍可使血清中MDA含量下降，T-AOC升高，能夠增強產(chǎn)蛋中后期蛋雞抗氧化能力。

血清中的白蛋白（ALB）和總蛋白（TP）以及尿素氮（BUN）是動物機體氮代謝相關(guān)指標，在機體蛋白質(zhì)的合成、運輸與代謝過程中起著不可或缺的作用。白蛋白（ALB）主要參與動物機體組織修復(fù)和能量代謝，由肝臟實質(zhì)細胞合成?？偟鞍祝═P）由白蛋白和球蛋白組成，具有維持血管內(nèi)膠體滲透壓和酸堿平衡的作用，與機體免疫力也有關(guān)聯(lián)。一般來說，血清總蛋白、白蛋白含量升高提示肝臟蛋白質(zhì)合成能力增強[16]。血清尿素氮（BUN）經(jīng)腎小球濾過排出體外，腎小球受損后，濾過作用降低，會引起血清中尿素氮濃度升高。肌酐（CRE）是動物肌肉代謝過程中的小分子物質(zhì)，主要經(jīng)腎小球濾過排出體外，因此，血清尿素氮（BUN）和肌酐（CRE）含量都是臨床評價腎功能的重要指標[17]。尿酸（UA）是動物機體內(nèi)氨基酸或蛋白質(zhì)的最終代謝產(chǎn)物，機體UA含量越低，表明蛋白質(zhì)利用率越高。本研究結(jié)果表明，在飼糧中添加浮萍可提高血清總蛋白含量，降低尿素氮水平，增強產(chǎn)蛋中后期蛋雞生產(chǎn)性能，增加經(jīng)濟效益。

血清中的膽固醇（CHO）和甘油三酯（TG）的含量與蛋雞體內(nèi)脂質(zhì)代謝息息相關(guān)。膽固醇（CHO）和甘油三酯（TG）的含量越低，代表機體對脂質(zhì)的吸收代謝越好，利用率越高。前人研究表明飼糧中添加10 mg·kg-1大豆黃酮有降低產(chǎn)蛋雞血漿總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的作用[18]。本試驗結(jié)果與以上結(jié)論一致，飼糧中添加3%、5%浮萍后降低了蛋雞血清中膽固醇和甘油三酯的含量，說明添加3%～5%浮萍可以降低蛋雞血清中膽固醇和甘油三酯含量，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝。

綜上所述，蛋雞飼糧中添加浮萍能改善產(chǎn)蛋中后期蛋雞血液指標，促進機體代謝，提高機體抗氧化能力，研究結(jié)果可為進一步研發(fā)新型飼料添加劑提供參考依據(jù)。

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收稿日期：2023-03-25

作者簡介：李澤青（1983—），女，天津人，獸醫(yī)師，碩士，主要從事畜禽健康養(yǎng)殖技術(shù)推廣研究。

通訊作者簡介：王鴻英（1970—），女，湖南寧鄉(xiāng)人，推廣研究員，碩士，主要從事生態(tài)健康養(yǎng)殖研究;

閆峻（1984—），江蘇徐州人，副研究員，博士，主要從事飼料資源開發(fā)與評價、畜禽高效生產(chǎn)營養(yǎng)調(diào)控與優(yōu)質(zhì)風味豬肉開發(fā)研究。