鄧碧蓮，吳 璐，李 婷，柳 婷，歐陽(yáng)征海，楊華生

（江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江西南昌 330004）

玉竹為百合科植物玉竹Polygonatum odoratum（Mill.）Druce 的干燥根莖，是常見(jiàn)的藥食兩用中藥[1]，主要含有多糖、皂苷、黃酮等多種藥理活性成分[2-4]。其中多糖是玉竹研究聚焦的重要成分，也是評(píng)價(jià)玉竹質(zhì)量的主要指標(biāo)[5]。研究表明，玉竹多糖具有確切的降血糖等作用，常用于糖尿病的治療[6]。然而，玉竹多糖吸濕明顯，吸濕后的多糖黏性增強(qiáng)，容易出現(xiàn)結(jié)塊、團(tuán)聚甚至液化等現(xiàn)象，不僅影響其穩(wěn)定性，還能顯著影響其儲(chǔ)存及后續(xù)制劑的工藝操作。

多糖吸濕與很多因素有關(guān)，包括多糖的純度以及蛋白質(zhì)、單糖等雜質(zhì)的含量等，同時(shí)與多糖的粉體學(xué)性質(zhì)有關(guān)，如粒徑、比表面積等[7]。針對(duì)不同的因素，可采用相應(yīng)的方法降低多糖的吸濕性。如多糖吸濕與雜質(zhì)有關(guān)，可去除其中含有的蛋白質(zhì)、單糖等雜質(zhì)，提高多糖純度，降低吸濕性；如多糖吸濕與粉體學(xué)性質(zhì)有關(guān)，則可通過(guò)改性等方法增加粒徑、降低比表面積，進(jìn)而降低其吸濕性。比表面積與粒徑成反比，比表面積越大，粒徑越小，吸濕越明顯。而增加粒徑、降低粉體比表面積的方法主要有兩種：一種是制粒，即將粉末制成顆粒。有研究發(fā)現(xiàn)，五味子多糖制備成顆粒后，粒徑增加，比表面積降低，吸濕性明顯減小[8]。另一種是制片，即將粉末壓制成片劑。與制粒比較，制片可使粉體的比表面積進(jìn)一步縮小，吸濕性進(jìn)一步降低，防潮效果更佳，且體積小，便于保存、運(yùn)輸。同時(shí)，制備的片劑可再作為顆粒劑、膠囊、片劑等中藥制劑的原料?？梢钥闯?，為降低吸濕性而制備的多糖片劑，主要目的是防潮，且具有中藥中間體的性質(zhì)，故也稱(chēng)為防潮中間體片劑。

然而，目前有關(guān)玉竹多糖吸濕因素、防潮方法的研究很少；而逐步回歸分析是一種從眾多因素中找到顯著因素的分析方法，廣泛用于醫(yī)學(xué)、氣象學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)等領(lǐng)域；其通過(guò)建立最優(yōu)回歸方程，方程中只包含影響顯著的因子，而其余影響不顯著的因子均被剔除[9]。因此，本試驗(yàn)以玉竹多糖為研究對(duì)象，先采用逐步回歸分析法，研究玉竹多糖含量，雜質(zhì)蛋白質(zhì)、果糖含量，以及中位徑D50、分布跨度Span、比表面積、休止角、松密度、振實(shí)密度對(duì)吸濕性的影響，探索導(dǎo)致玉竹多糖吸濕的主要因素；在此基礎(chǔ)上，將玉竹多糖制成防潮中間體片劑，降低玉竹多糖的比表面積；再運(yùn)用單因素實(shí)驗(yàn)和Box-Behnken 響應(yīng)面法，優(yōu)化玉竹多糖防潮中間體片劑的處方，并對(duì)其吸濕性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

玉竹飲片 安徽道源堂中藥飲片有限公司；D-果糖 上海源葉生物科技有限公司；無(wú)水葡萄糖西隴科學(xué)股份有限公司；牛血清白蛋白 北京索萊寶科技有限公司；考馬斯亮藍(lán)G250 北京索萊寶科技有限公司；磷酸 西隴化工股份有限公司；PH-102 微晶纖維素 湖州新望藥用輔料有限公司；無(wú)水乳糖鎮(zhèn)江市康富生物工程有限公司；硬脂酸鎂 廣州康本生物科技有限公司。

Agilent 1260 高效液相色譜儀 美國(guó)Agilent 公司；ELSD 6000 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器 美國(guó)Alltech 公司；Mastersizer 2000 激光粒度測(cè)定儀 英國(guó)Malvern 公司；BT-1000 型粉末綜合特性測(cè)定儀 丹東百特儀器有限公司；752 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海欣茂儀器有限公司；DP30A 單沖壓片機(jī) 北京國(guó)藥龍立科技有限公司；YD-1A 片劑硬度測(cè)試儀 天津市光學(xué)儀器廠；CS-1 脆碎度測(cè)試儀 天津市國(guó)銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 基于逐步回歸分析法探索玉竹多糖吸濕的主要因素

1.2.1.1 玉竹多糖的制備 取玉竹，加水回流提取2 次，每次2 h，合并濾液，濃縮至生藥濃度為1 g/mL的玉竹濃縮液。將濃縮液分為五份，加入無(wú)水乙醇至含醇量分別為70%、75%、80%、85%、90%，放入4 ℃冰箱靜置過(guò)夜，過(guò)濾，取沉淀真空干燥，即得不同醇沉濃度的玉竹多糖。取70%醇沉濃度所得的玉竹多糖，分為四份，研缽中研磨，過(guò)篩，得到粒徑為50～65 目、65～80 目、80～100 目、100～120 目的樣品。同法制備75%、80%、85%、90%醇沉濃度得到的多糖不同粒徑的樣品，編號(hào)見(jiàn)表1[10]。

1.2.1.2 玉竹多糖的多糖、蛋白質(zhì)、果糖含量的測(cè)定

采用苯酚-硫酸法測(cè)定多糖的含量，配制玉竹多糖及系列葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液，加入苯酚、濃硫酸，反應(yīng)后在490 nm 處測(cè)定其吸光度，依據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算多糖含量[11]；

采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量，配制玉竹多糖及牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液，加入考馬斯亮藍(lán)G250 酸性染色液，立即混勻，在595 nm 的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以牛血清白蛋白線性方程計(jì)算蛋白質(zhì)濃度[12]。

制備玉竹多糖及系列果糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液，采用HPLCELSD 法測(cè)定果糖含量，色譜柱為Kromasil 100-5-NH2（250×4.6mm，5 μm）柱，流動(dòng)相為乙腈-水（75：25），流速1.0 mL/min，柱溫為30 ℃，漂移管溫度為105 ℃，空氣體積流量為3.2 L/min。以進(jìn)樣量的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，以峰面積的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，依據(jù)果糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)液中果糖濃度，計(jì)算果糖含量[13]。

1.2.1.3 玉竹多糖粉體學(xué)參數(shù)的測(cè)定 采用激光粒度儀測(cè)定粉體的中位徑D50、分布跨度Span、比表面積[14]；采用粉體綜合特性儀測(cè)定粉體的休止角[15]、松密度和振實(shí)密度[16]。

1.2.1.4 玉竹多糖吸濕率測(cè)定 取干燥具塞稱(chēng)量瓶，于放有過(guò)飽和氯化銨溶液的干燥器中放置24 h，精密稱(chēng)定質(zhì)量m1。取玉竹多糖粉末適量，平鋪于稱(chēng)量瓶中，厚度約為1 mm，精密稱(chēng)定質(zhì)量m2。將稱(chēng)量瓶敞口，并與瓶蓋同置于干燥器中，25 ℃保存，120 h取出，精密稱(chēng)定重量，記錄質(zhì)量m3，每種樣品粉末平行測(cè)定3 次，吸濕率計(jì)算公式：吸濕率（%）=（m3-m2）/（m2-m1）×100[17]。

1.2.1.5 逐步回歸分析 逐步回歸是一種雙向篩選的方法，在每引入一個(gè)變量，都要對(duì)回歸方程中每一個(gè)自變量進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，當(dāng)一個(gè)或幾個(gè)自變量的作用無(wú)顯著性意義時(shí)，則會(huì)剔除，盡可能將回歸效果顯著的自變量選入回歸方程[18]。以多糖含量（X1）、蛋白質(zhì)含量（X2）、果糖含量（X3）、中位徑D50（X4）、分布跨度Span（X5）、比表面積（X6）、休止角（X7）、松密度（X8）、振實(shí)密度（X9）為自變量，玉竹多糖120 h吸濕率為因變量（Y），應(yīng)用SPSS 21.0 軟件進(jìn)行逐步回歸分析。

1.2.2 防潮中間體片劑的制備

1.2.2.1 制備工藝 采用粉末直接壓片法，將玉竹多糖、稀釋劑分別粉碎，過(guò)80 目篩，混合，再加入潤(rùn)滑劑，混合均勻，置于壓片機(jī)中壓制成片劑[19]。

1.2.2.2 單因素實(shí)驗(yàn) 取玉竹多糖粉末，固定稀釋劑微晶纖維素MCC 的用量（15%）及潤(rùn)滑劑硬脂酸鎂的用量（0.6%），片劑的直徑設(shè)置為8、9、11、20 mm，考察直徑對(duì)吸濕率、硬度、脆碎度的影響。固定片劑其它因素，考察稀釋劑MCC、乳糖、預(yù)膠化淀粉、甘露醇、糊精等5 種常用的稀釋劑對(duì)粉體休止角及片劑吸濕率、硬度、脆碎度的影響[20]，稀釋劑用量均為玉竹多糖的15%；在此基礎(chǔ)上，分別考察乳糖、MCC 用量（5%、10%、15%、20%、25%、30%）對(duì)休止角、吸濕率、硬度、脆碎度的影響；最后考察潤(rùn)滑劑種類(lèi)（PEG 4000、微粉硅膠、硬脂酸鎂）、用量（0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%）對(duì)休止角、吸濕率、硬度、脆碎度的影響。

1.2.2.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)的測(cè)定 將玉竹多糖制成片劑，吸濕率是重點(diǎn)關(guān)注的指標(biāo)，而為了使壓片過(guò)程順利進(jìn)行，表征粉體的流動(dòng)性的休止角也是需要考慮的；同時(shí)，為使玉竹多糖防潮中間體片劑能較長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存，其硬度、脆碎度也是應(yīng)該關(guān)注的。因此，選擇吸濕率、休止角、硬度、脆碎度為片劑評(píng)價(jià)指標(biāo)。將玉竹多糖、稀釋劑、潤(rùn)滑劑混合后，按1.2.1.3 項(xiàng)下方法測(cè)定混合粉末的休止角；取制備的片劑于稱(chēng)量瓶，余同1.2.1.4項(xiàng)下方法測(cè)定片劑24 h 吸濕率；分別采用脆碎度測(cè)試儀、硬度測(cè)試儀測(cè)定片劑的脆碎度、硬度[21]。

1.2.2.4 響應(yīng)面試驗(yàn) 在單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，以片劑吸濕率（Y1）、粉體休止角（Y2）、片劑硬度（Y3）、片劑脆碎度（Y4）為因變量，乳糖用量（A）、MCC 用量（B）、硬脂酸鎂用量（C）為自變量，利用Design Expert 8.0.6 優(yōu)化玉竹多糖防潮中間體片劑處方。因素、水平安排見(jiàn)表2。

表2 Box-Behnken 設(shè)計(jì)的考察因素和水平Table 2 Investigation factors and levels of Box-Behnken design

1.2.3 防潮中間體片劑吸濕性對(duì)比分析 在優(yōu)化了玉竹多糖防潮中間體片劑處方的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步對(duì)其吸濕性進(jìn)行了對(duì)比分析。取玉竹多糖粉末，按上述最佳處方的輔料量混合，得防潮中間體粉末；將玉竹多糖粉末、防潮中間體粉末壓片，分別得多糖片劑、防潮中間體片劑。測(cè)定多糖粉末、防潮中間體粉末、多糖片劑、防潮中間體片劑2、4、8、12、24、48、72、96、120 h 的吸濕率。

再對(duì)防潮中間體片劑的臨界相對(duì)濕度進(jìn)行對(duì)比分析。取多糖粉末、防潮中間體粉末、多糖片劑、防潮中間體片劑，精密稱(chēng)定質(zhì)量，置于干燥已精密稱(chēng)定質(zhì)量的稱(chēng)量瓶中，置于放有變色硅膠的干燥器中12 h，平衡，備用。將上述平衡好的稱(chēng)量瓶精密稱(chēng)定，置于相對(duì)濕度分別為23%、43%、55%、69%、80%、84%、92%的干燥器中，于25 ℃下保存72 h，取出稱(chēng)量瓶，精密稱(chēng)定，計(jì)算吸濕率。以吸濕率為縱坐標(biāo)，相對(duì)濕度為橫坐標(biāo)作圖，對(duì)作圖中曲線兩端做切線，兩切線的交點(diǎn)對(duì)應(yīng)的橫坐標(biāo)即為臨界相對(duì)濕度[22]。

最后采用SPSS 21.0 軟件，以零級(jí)過(guò)程（Y=A+BX）、一級(jí)過(guò)程（Y=Y∞（1-e-kX）、一元二次曲線（ Y=A+BX+CX2） 、 雙指數(shù)模型（ Y=Y∞-Ae-k1X+Be-k2x）、Logarithmic 模型（Y=A+BlnX）、Higuchi 模型（Y=AX1/2）、Sweibull1 模型（Y=A-Ae-（BX（1-C））D）、Sweibull2（Y=A-（A-B）e-（CX）D）模型等八種模型對(duì)吸濕過(guò)程進(jìn)行擬合（模型中Y 為吸濕率，X 為時(shí)間，Y∞為平衡吸濕常數(shù)，k1為吸濕速率常數(shù)，k2為擴(kuò)散速率常數(shù)，其余為模型參數(shù)），通過(guò)決定系數(shù)（R2）、殘差平方和（RSS）和赤池信息準(zhǔn)則（AIC）3 個(gè)統(tǒng)計(jì)參數(shù)來(lái)檢驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臄M合效果，R2的數(shù)值越接近1，表明曲線的擬合效果越好，RSS 和AIC 的數(shù)值越小，表明曲線的擬合效果越好[23]。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0 軟件進(jìn)行逐步回歸分析和吸濕模型擬合，采用Design-Expert8.0.6中Box-Behnken 進(jìn)行模型建立和方差分析，采用Origin 2019b 進(jìn)行結(jié)果的繪圖制作，所有試驗(yàn)均做三次平行，試驗(yàn)結(jié)果以（平均值±標(biāo)準(zhǔn)差）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 玉竹多糖的多糖、蛋白質(zhì)、果糖含量及粉體學(xué)參數(shù)

玉竹多糖、蛋白質(zhì)、果糖含量及粉體學(xué)參數(shù)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3，隨著醇沉濃度的升高，玉竹多糖粉末中的多糖、蛋白質(zhì)、果糖的含量也升高，當(dāng)醇沉濃度達(dá)到90%時(shí)，含量達(dá)到最高。多糖、蛋白質(zhì)、果糖均為水溶性物質(zhì)，醇的濃度越高，多糖的溶解度越低，因此可采用高濃度醇來(lái)提高多糖的得率[24]，然而這也提高了蛋白質(zhì)、果糖等水溶性雜質(zhì)的含量。因此，采用水提醇沉法制備多糖，常采用Sevage試劑去除蛋白質(zhì)，采用半透膜去除小分子糖，以制備純化多糖[25-26]；同時(shí)，從表3 還可以看出，粒徑與D50、松密度、振實(shí)密度、比表面積、休止角增大也存在密切聯(lián)系，玉竹多糖粉體粒徑減小，D50、松密度和振實(shí)密度也減小，而比表面積、休止角增大，這與文獻(xiàn)報(bào)道的一致[27-28]。

表3 多糖含量、蛋白質(zhì)含量、果糖含量、粉體學(xué)性質(zhì)和吸濕率測(cè)定結(jié)果（ xˉ±s，n=3）Table 3 Determination results of polysaccharide content, protein content, fructose content, powder properties and moisture absorption rate ( xˉ±s, n=3)

2.2 玉竹多糖吸濕率

不同純度、不同粒徑的玉竹多糖樣品的吸濕率結(jié)果見(jiàn)表3，比表面積越大，吸濕率越大，松密度越大，吸濕率越小。比表面積是表征粉體粒子大小的一種量度，也是表示粉體吸附能力的重要指標(biāo)。多糖分子中含有大量的羥基等極性基團(tuán)[29]，易吸附水分子；玉竹多糖比表面積增大，故其與水分子的接觸面積也增大，吸濕增加，這與文獻(xiàn)報(bào)道的一致[30]。松密度是粉體質(zhì)量除以該粉體所占的體積而計(jì)算的密度。一般地，松密度越小，比表面積越大，比表面積與吸濕密切相關(guān)，因此松密度與吸濕也存在一定關(guān)聯(lián)。

2.3 逐步回歸分析

以120 h 吸濕率為因變量（Y），以多糖含量等9 個(gè)指標(biāo)為自變量，逐步回歸分析得到的方程為：Y=16.342+0.355X2+0.337X3+0.379X6-0.156X8

（R2=0.976），式中正、負(fù)號(hào)表示因變量隨自變量的變化方向，系數(shù)的絕對(duì)值表示影響的大小。由回歸方程可知，導(dǎo)致玉竹多糖粉體吸濕的主要因素有比表面積、蛋白質(zhì)含量、果糖含量、松密度（P＜0.05），而D50、Span、振實(shí)密度、休止角對(duì)玉竹多糖吸濕率無(wú)顯著影響（P＞0.05）。從因子的系數(shù)可以看出，比表面積對(duì)玉竹多糖吸濕率影響最大，這結(jié)果也與2.2 項(xiàng)下的直觀分析一致。同時(shí)，玉竹多糖中含有的蛋白質(zhì)、果糖等雜質(zhì)，也是導(dǎo)致玉竹多糖吸濕的次要因素。一方面，蛋白質(zhì)、果糖含有大量的羥基、氨基等極性基團(tuán)，易與水分子結(jié)合，從而導(dǎo)致多糖的吸濕性增強(qiáng)；另一方面，多糖、蛋白質(zhì)、果糖均為水溶性物質(zhì)，基于Elder 假說(shuō)，水溶性藥物的混合物比單一水溶性藥物更加容易吸濕[31]。

2.4 防潮中間體的制備

2.4.1 單因素實(shí)驗(yàn) 片劑直徑對(duì)吸濕率、硬度和脆碎度的影響，結(jié)果見(jiàn)圖1A1～圖1A2。圖1A1 顯示，片劑直徑增加，吸濕率顯著下降（P＜0.05），而直徑對(duì)片劑的硬度、脆碎度無(wú)顯著影響（P＞0.05）（圖1A2），故確定玉竹多糖防潮中間體片劑的直徑為20 mm。稀釋劑種類(lèi)對(duì)休止角、吸濕率、硬度、脆碎度的影響，結(jié)果見(jiàn)圖1B1～圖1B2。結(jié)果顯示，與MCC 相比，甘露醇與多糖混合后粉體的吸濕率顯著減?。≒＜0.05），但流動(dòng)性差，而乳糖、MCC 分別與多糖混合后，流動(dòng)性好，且吸濕率也較小。因此，玉竹多糖防潮中間體片劑選擇乳糖、MCC 為稀釋劑。進(jìn)一步考察乳糖的用量對(duì)休止角、吸濕率、硬度、脆碎度的影響，結(jié)果見(jiàn)圖1C1～圖1C2。結(jié)果顯示，乳糖用量越大，吸濕率、休止角、脆碎度越小，硬度越大。當(dāng)用量達(dá)到20%時(shí)，繼續(xù)增加用量，吸濕率、休止角、脆碎度變化較小，因此選擇5%～20%進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。MCC 用量對(duì)休止角、吸濕率、硬度、脆碎度的影響，結(jié)果見(jiàn)圖1D1～圖1D2。結(jié)果顯示，MCC 用量越大，其吸濕率、休止角、脆碎越小，硬度則越大。當(dāng)用量達(dá)到20%時(shí)，繼續(xù)增加用量，吸濕率、休止角、脆碎度變化不明顯，因此選擇MCC 用量為5%～20%進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。潤(rùn)滑劑種類(lèi)對(duì)休止角、吸濕率、硬度、脆碎度的影響，結(jié)果見(jiàn)圖1E1～圖1E2。結(jié)果顯示，硬脂酸鎂與多糖混合后粉體的休止角最小，而三種潤(rùn)滑劑對(duì)吸濕率、硬度和脆碎度無(wú)明顯差異，因此，選擇硬脂酸鎂為潤(rùn)滑劑。硬脂酸鎂用量對(duì)休止角、吸濕率、硬度、脆碎度的影響，結(jié)果見(jiàn)圖1F1～圖1F2。結(jié)果顯示，休止角隨硬脂酸鎂用量的增加而逐漸減小。當(dāng)用量達(dá)到1%時(shí)，繼續(xù)增加用量，休止角變化不顯著（P＞0.05）。因此選擇用量為0.2%～1.0%進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

圖1 片劑直徑、稀釋劑、潤(rùn)滑劑對(duì)休止角、吸濕率、硬度、脆碎度的影響Fig.1 Effect of tablet diameter, diluent and lubricant on angle of repose, moisture absorption rate, hardness and friability

2.4.2 響應(yīng)面試驗(yàn) 在單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上，選取擇乳糖用量（A）、微晶纖維素用量（B）、硬脂酸鎂用量（C）為考察因素，即自變量，以吸濕率（Y1）、休止角（Y2）、硬度（Y3）、脆碎度（Y4）為評(píng)價(jià)指標(biāo)，即因變量，采用Box-Behnken 設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法進(jìn)行處方優(yōu)化，結(jié)果見(jiàn)表4；再采用Design-Expert 8.0.6 軟件進(jìn)行二次多項(xiàng)式擬合，以相關(guān)系數(shù)R、P為判定標(biāo)準(zhǔn)，所得回歸方程如下：

表4 Box-Behnken 設(shè)計(jì)的試驗(yàn)安排及結(jié)果Table 4 Test arrangements and results of Box-Behnken design

方差分析結(jié)果表明，模型擬合的效果均顯著（P＜0.05），失擬項(xiàng)則均不顯著。吸濕率（Y1）方差分析見(jiàn)表5，因素A、B，二次項(xiàng)A2、B2、C2均極顯著（P＜0.01），交互項(xiàng)AB 為顯著（P＜0.05）；休止角（Y2）方差分析見(jiàn)表4，因素C 為極顯著（P＜0.01），二次項(xiàng)A2、C2均影響顯著（P＜0.05）；硬度（Y3）方差分析見(jiàn)表6，因素A、B，二次項(xiàng)A2均顯著（P＜0.05）；脆碎度（Y4）方差分析見(jiàn)表5，因素A、B 均極顯著（P＜0.01），其他單因素、交互項(xiàng)和二次項(xiàng)則均不顯著（P＞0.05）。根據(jù)回歸模型的數(shù)學(xué)分析，得片劑的最優(yōu)處方為：乳糖用量17.30%、微晶纖維素用量16.74%、硬脂酸鎂用量0.80%。

表5 吸濕率（Y1）和休止角（Y2）回歸模型方差分析Table 5 Variance analysis of regression model for moisture absorption rate (Y1) and angle of repose (Y2)

表6 硬度（Y3）和脆碎度（Y4）回歸模型方差分析Table 6 Variance analysis of regression model for hardness (Y3) and fragility (Y4)

2.4.3 處方工藝驗(yàn)證 基于實(shí)際情況，將最優(yōu)處方微調(diào)整為：乳糖用量17.00%、微晶纖維素用量17.00%、硬脂酸鎂用量0.80%；按此處方制備3 批玉竹多糖防潮中間體片劑，測(cè)定吸濕率（Y1）、休止角（Y2）、硬度（Y3）、脆碎度（Y4），并與預(yù)測(cè)值比較，結(jié)果見(jiàn)表7。結(jié)果表明，實(shí)測(cè)值與預(yù)測(cè)值基本吻合。

表7 最優(yōu)處方驗(yàn)證Table 7 Validation of optimal formulation

2.5 防潮中間體片劑吸濕性對(duì)比分析

多糖粉末、防潮中間體粉末、多糖片劑、防潮中間體片劑見(jiàn)圖2?？梢钥闯?，多糖粉末（圖2A）有吸濕團(tuán)聚現(xiàn)象，將其壓制成片劑（圖2B）后，吸濕有所下降，但壓制時(shí)粉體的流動(dòng)性差；而將多糖粉末加入輔料制成防潮中間體粉末（圖2C），吸濕團(tuán)聚現(xiàn)象改善，流動(dòng)性增加，進(jìn)一步將防潮中間體粉末制成防潮中間體片劑（圖2D），吸濕性明顯降低，且壓片時(shí)不易黏沖，片劑表面光潔。測(cè)定多糖粉末、防潮中間體粉末、多糖片劑、防潮中間體片劑吸濕率，結(jié)果見(jiàn)圖2E。結(jié)果顯示，平衡吸濕率從大到小為多糖粉末＞防潮中間體粉末＞多糖片劑＞防潮中間體片劑，分別為22.25%、16.60%、14.03%、11.03%。結(jié)果表明，輔料有一定的防潮作用，而壓成片劑后，吸濕率進(jìn)一步顯著降低。

圖2 防潮中間體片劑的平衡吸濕率及臨界相對(duì)濕度Fig.2 Equilibrium moisture absorption rate and critical relative humidity of moisture-resistant intermediate tablet

多糖粉末、防潮中間體粉末、多糖片劑、防潮中間體片劑的臨界相對(duì)濕度分別為48.40%、59.58%、66.40%、75.00%，結(jié)果見(jiàn)圖2F。結(jié)果表明，多糖粉末制成防潮中間體片劑后，其臨界相對(duì)濕度顯著增加。同時(shí)也提示，玉竹防潮中間體片劑的儲(chǔ)存環(huán)境，其相對(duì)濕度應(yīng)控制在75%以下。將多糖粉末、防潮中間體粉末、多糖片劑、防潮中間體片劑吸濕過(guò)程進(jìn)行模型擬合，結(jié)果見(jiàn)表8。結(jié)果表明，在8 種吸濕模型中，多糖粉末、防潮中間體粉末、多糖片劑、防潮中間體片劑以雙指數(shù)模型的擬合效果最好；雙指數(shù)模型擬合結(jié)果見(jiàn)表9。

表8 吸濕模型擬合結(jié)果Table 8 Fitting results of hygroscopic model

表9 多糖粉末、多糖片劑、防潮中間體粉末、防潮中間體片劑的雙指數(shù)模型Table 9 Double exponential model of polysaccharide powder,polysaccharide tablet, moisture-resistant intermediate powder and moisture- resistant intermediate tablet

3 結(jié)論

本研究以玉竹多糖為研究對(duì)象，通過(guò)逐步回歸分析法找到導(dǎo)致玉竹多糖吸濕的主要因素——比表面積，故采用制片的方法降低比表面積。在此基礎(chǔ)上，采用單因素實(shí)驗(yàn)、Box-Behnken 設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化處方，得到玉竹多糖防潮中間體片劑的最優(yōu)處方為乳糖用量17.00%、MCC 用量17.00%、硬脂酸鎂用量0.80%。在此條件下制備玉竹防潮中間體片劑，與玉竹多糖粉末比較，平衡吸濕率由22.25%降低至11.03%，臨界相對(duì)濕度由48.40%提高到75.00%。本研究結(jié)果不僅為玉竹多糖吸濕、儲(chǔ)存提供了新視角，同時(shí)也為中藥多糖、中藥提取物的吸濕及儲(chǔ)存提供新方法。需要指出的是，比表面積是導(dǎo)致玉竹多糖吸濕的主要因素，但對(duì)于其他中藥多糖，比表面積對(duì)其吸濕性的影響需進(jìn)一步研究。因此，接下來(lái)可以多種中藥多糖為研究對(duì)象，探索比表面積對(duì)其吸濕的影響，闡明中藥多糖吸濕的規(guī)律。