白 雁，郭心瑤，秦啟亮，嚴(yán) 方*

（1中國(guó)藥科大學(xué)藥物分析系，南京 210009；2青海省黃南藏族自治州食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，同仁 811399）

20世紀(jì)20年代，Otto Warburg發(fā)現(xiàn)即使在充足的氧氣為線粒體呼吸提供燃料的情況下，腫瘤細(xì)胞也會(huì)優(yōu)先使用糖酵解而不是線粒體氧化磷酸化（oxidative phosphorylation，OXPHOS）來產(chǎn)生三磷酸腺苷（adenosine-triphosphate，ATP），這種現(xiàn)象被稱為“Warburg效應(yīng)”或有氧糖酵解［1］。有氧糖酵解被認(rèn)為是腫瘤發(fā)生和進(jìn)展的標(biāo)志［2-3］，其為癌細(xì)胞提供大分子和細(xì)胞器生物合成所需的糖酵解中間體，以支持腫瘤快速增殖的需要［4］。乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）作為有氧糖酵解的關(guān)鍵酶，催化丙酮酸和乳酸之間的相互轉(zhuǎn)化，在糖酵解過程中發(fā)揮著重要作用。LDH 是一種四聚體酶，由 兩 種 亞 基LDHA 和LDHB 組 成［5］。其 中，LDHA 在許多惡性腫瘤中異常過表達(dá)，并與腫瘤的生長(zhǎng)、維持和侵襲有關(guān)。上調(diào)的LDHA通過增加乳酸的產(chǎn)生、加速糖酵解、調(diào)節(jié)活性氧的產(chǎn)生以及大量腫瘤相關(guān)蛋白表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤的惡性進(jìn)展。同時(shí)，采用LDHA作為診斷和治療靶點(diǎn)的臨床試驗(yàn)也取得了令人鼓舞的結(jié)果［6］。然而LDHB 在腫瘤中作用機(jī)制的相關(guān)研究相對(duì)較少，但日益增多的文獻(xiàn)報(bào)道均顯示，LDHB 作為一種糖酵解酶也與多種腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，如肺癌［7］、胰腺癌［8］、前列腺癌［9］等。并且，與LDHA 在多種腫瘤中發(fā)揮促進(jìn)腫瘤發(fā)展的作用不同的是，LDHB 在不同腫瘤中的作用不同，不僅可以作為致癌因子發(fā)揮促癌作用，而且可以作為抑癌因子發(fā)揮抑癌作用［10］，因此本文對(duì)LDHB 在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的功能進(jìn)行了綜述。

1 有氧糖酵解和LDHB

大量研究表明，腫瘤細(xì)胞中糖酵解明顯升高的主要原因之一是代謝途徑相關(guān)酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體基因的轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)，從而使相應(yīng)蛋白表達(dá)增加，如LDH、磷酸果糖激酶1（phosphofructokinase-1，PFK-1）、己糖激酶（hexokinase，HK）、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（glucose transporter 1，GLUT1）等［11］。其中LDH 是有氧糖酵解中催化丙酮酸和乳酸轉(zhuǎn)化可逆反應(yīng)的關(guān)鍵酶，包含五種同工酶分別是LDH1（H4）、LDH2（MH3）、LDH3（M2H2）、LDH4（M3H）、LDH5（M4），均為L(zhǎng)DHA（M 亞基）和LDHB（H 亞基）兩種亞基組成的四聚體酶［5］。LDHA 由位于染色體11p15.1上的ldha基因編碼，主要在骨骼肌中表達(dá)；LDHB 由位于染色體12p12.1上的ldhb基因編碼，主要在心肌中表達(dá)。LDHA 與LDHB 有著相似的分子結(jié)構(gòu)，但蛋白活性位點(diǎn)周圍的帶電殘基存在差異，從而帶有不同的正負(fù)電荷，表現(xiàn)出不同的動(dòng)力學(xué)特征。LDHA 蛋白分子上帶1 個(gè)正電荷，而LDHB 蛋白分子上帶6 個(gè)負(fù)電荷，所以LDHA 優(yōu)先與丙酮酸結(jié)合，催化丙酮酸轉(zhuǎn)化為乳酸的正向反應(yīng)；LDHB 優(yōu)先與乳酸結(jié)合，催化乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸的逆向反應(yīng)［10，12-13］。

2 腫瘤細(xì)胞中調(diào)控LDHB表達(dá)及酶活的機(jī)制

在不同的腫瘤細(xì)胞中，多種途徑可調(diào)控LDHB的表達(dá)及酶活。其中DNA 甲基化修飾、轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控和其他調(diào)控機(jī)制都調(diào)控了LDHB的表達(dá)，只有蛋白質(zhì)翻譯后修飾調(diào)控了LDHB 的酶活。

2.1 DNA甲基化修飾調(diào)控LDHB表達(dá)

DNA 甲基化是指DNA 序列上特定的堿基在DNA 甲基化轉(zhuǎn)移酶的催化作用下，以S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體，通過共價(jià)鍵結(jié)合的方式獲得一個(gè)甲基基團(tuán)的化學(xué)修飾過程，可以發(fā)生在胞嘧啶、腺嘌呤以及鳥嘌呤等位點(diǎn)，其中胞嘧啶上第5位碳原子的甲基化是哺乳動(dòng)物DNA 甲基化的唯一形式。啟動(dòng)子的異常甲基化會(huì)使基因轉(zhuǎn)錄受到抑制，從而調(diào)節(jié)基因表達(dá)［14］。Cui 等［15］研究發(fā)現(xiàn)胰腺癌細(xì)胞中LDHB 的啟動(dòng)子高度甲基化，導(dǎo)致LDHB表達(dá)下調(diào)。而Liu 等［9］的研究則表明，前列腺癌細(xì)胞中的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1（fibroblast growth factor receptor 1，F(xiàn)GFR1）促進(jìn)了LDHB 啟動(dòng)子甲基化，抑制了其轉(zhuǎn)錄，下調(diào)了其蛋白表達(dá)。

2.2 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控LDHB表達(dá)

2.2.1 轉(zhuǎn)錄因子HIF-1 調(diào)控LDHB 表達(dá) 缺氧誘導(dǎo)因子1（hypoxia-inducible factor-1，HIF-1）是一種含有α 和β 亞基的異二聚體。當(dāng)缺氧時(shí)，穩(wěn)定的HIF-1α 進(jìn)入細(xì)胞核結(jié)合HIF-1β，然后這種復(fù)合物與缺氧響應(yīng)元件（hypoxia-responsive elements，HRE）結(jié)合，激活靶基因轉(zhuǎn)錄［6］。臨床病例研究中，Zhang 等［16］檢測(cè)79 例結(jié)直腸癌患者的蛋白表達(dá)情況發(fā)現(xiàn)，HIF-1α 和LDHB 的表達(dá)呈顯著正相關(guān)。而在細(xì)胞水平上的研究則發(fā)現(xiàn)，在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中，過表達(dá)HIF-1α 后LDHB 表達(dá)上調(diào)，敲低HIF-1α 后LDHB 表達(dá)下調(diào)［17］。然而，在乳腺癌細(xì)胞中，過表達(dá)HIF-1α 后LDHB 的表達(dá)則下調(diào)，顯示HIF-1α 和LDHB 的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)［18］。這些研究結(jié)果表明，HIF-1α對(duì)LDHB具有雙向調(diào)控作用。

2.2.2 轉(zhuǎn)錄因子STAT3調(diào)控LDHB表達(dá) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）是一種細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子，可將細(xì)胞外信號(hào)傳導(dǎo)至細(xì)胞核。STAT3 在細(xì)胞質(zhì)中以無活性的形式存在，當(dāng)其酪氨酸殘基磷酸化后被激活?；罨腟TAT3 形成二聚體結(jié)構(gòu)，并通過核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白進(jìn)入細(xì)胞核，與基因啟動(dòng)子結(jié)合，進(jìn)而激活靶基因轉(zhuǎn)錄［19］。Zha 等［20］發(fā)現(xiàn)人前列腺癌細(xì)胞PC3，肝癌細(xì)胞Bel-7402、HepG2，非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549，胰腺癌細(xì)胞PANC-1 和乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-468 等細(xì)胞中的哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）可以激活STAT3，活化的STAT3 進(jìn)一步激活LDHB 轉(zhuǎn)錄，上調(diào)LDHB 表達(dá)，增強(qiáng)糖酵解，從而促進(jìn)mTOR 介導(dǎo)的腫瘤發(fā)生。

2.2.3 轉(zhuǎn)錄因子KLF14 調(diào)控LDHB 表達(dá)Krüppel-like 轉(zhuǎn)錄因子14（Krüppel-like transcription factor 14，KLF14）是 Krüppel-like 轉(zhuǎn) 錄 因 子（Krüppel-like transcription factor，KLF）家族成員中唯一不含內(nèi)含子的基因，其N 端含有一個(gè)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)域，C 端含有一個(gè)高度保守的DNA 結(jié)合域，且C端結(jié)合區(qū)含有3 個(gè)連續(xù)的C2H2 鋅指模體，能特異性識(shí)別和結(jié)合靶基因啟動(dòng)子區(qū)域的GC 盒、CACCC盒等核心元件，進(jìn)而調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄［21］。Wu等［22］的研究顯示，結(jié)直腸癌細(xì)胞中的KLF14 可降低LDHB 啟動(dòng)子活性，并顯著下調(diào)LDHB 表達(dá)，降低糖酵解通量，進(jìn)而抑制結(jié)直腸癌的進(jìn)展。

2.3 轉(zhuǎn)錄后調(diào)控LDHB表達(dá)

轉(zhuǎn)錄后調(diào)控是指基因轉(zhuǎn)錄后在mRNA 加工、翻譯等過程中的調(diào)節(jié)。轉(zhuǎn)錄后調(diào)控包括RNA 的可變剪接、mRNA 的5′加帽和3′加尾、microRNA（miRNA）調(diào)控等。miRNA 是一類由19～22 個(gè)核苷酸組成的非編碼小RNA 分子，參與多種生物學(xué)過程，包括發(fā)育、分化、凋亡和細(xì)胞增殖。它們通過翻譯抑制和mRNA 切割調(diào)節(jié)基因表達(dá)［23］。在默克爾細(xì)胞癌［24］和甲狀腺乳頭狀癌［25］等腫瘤的細(xì)胞中都發(fā)現(xiàn)miR-375 和LDHB 表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，并通過降解LDHB mRNA，降低LDHB mRNA 的豐度，從而下調(diào)LDHB 蛋白表達(dá)。這些研究成果表明，miR-375 可以靶向LDHB 的mRNA，從而負(fù)調(diào)控LDHB蛋白表達(dá)。

2.4 其他機(jī)制調(diào)控LDHB表達(dá)

長(zhǎng) 鏈 非 編 碼RNA（long non-coding RNAs，lncRNAs）是長(zhǎng)度超過200 個(gè)核苷酸的非蛋白編碼RNA 分子，可與DNA、RNA 和蛋白質(zhì)結(jié)合，在各個(gè)水平上進(jìn)行基因調(diào)控［26］。La Montagna 等［27］在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)LncRNA KIMAT1 可與LDHB 蛋白結(jié)合，增強(qiáng)LDHB 蛋白穩(wěn)定性，從而上調(diào)LDHB表達(dá)水平。

此外，啟動(dòng)子區(qū)的堿基突變會(huì)改變啟動(dòng)子活性，導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄活性發(fā)生變化，從而調(diào)節(jié)基因表達(dá)。Liu 等［28］對(duì)90 例三陰性乳腺癌患者和110 例非三陰性乳腺癌患者以及169 例健康漢族患者的LDHB 啟動(dòng)子區(qū)進(jìn)行了測(cè)序和分析，發(fā)現(xiàn)三陰性乳腺癌患者LDHB啟動(dòng)子區(qū)發(fā)生了rs11046147 G ＞ A的突變，這種突變顯著增強(qiáng)了LDHB 啟動(dòng)子活性，提高了LDHB 的表達(dá)。該突變體在三陰性乳腺癌患者中普遍存在，對(duì)三陰性乳腺腫瘤發(fā)生可能起到關(guān)鍵作用。

2.5 蛋白質(zhì)翻譯后修飾調(diào)控LDHB酶活

翻譯后修飾（post-translational modifications，PTMs）是蛋白質(zhì)功能調(diào)控的重要方式，它通過改變蛋白質(zhì)的帶電性、親/疏水性和空間結(jié)構(gòu)等性狀來影響蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能。蛋白質(zhì)的PTMs 方式極其多樣，以乙酰化、磷酸化、糖基化、泛素化等較為常見［29］。近年來研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的發(fā)生常伴隨PTMs異常，其在腫瘤進(jìn)展中起重要作用。

Shi 等［30］研究發(fā)現(xiàn)LDHB 是一個(gè)乙?；鞍祝ヒ阴；?（sirtuin 5，SIRT5）可使LDHB 329 位賴氨酸（K329）去乙?；Ｈヒ阴；疞DHB 的酶活性顯著增加，并且其有利于結(jié)直腸癌細(xì)胞中溶酶體酸化和自噬溶酶體成熟，進(jìn)而增加癌細(xì)胞自噬。同時(shí)，LDHB K329 去乙?；€可以通過促進(jìn)癌細(xì)胞的呼吸作用和ATP 生成，從而加速結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖和腫瘤生長(zhǎng)。此外，Cheng 等［31］的研究發(fā)現(xiàn)，Aurora-A 可以直接與LDHB 相互作用并磷酸化其162 位絲氨酸。磷酸化LDHB 解除了丙酮酸的底物抑制作用，導(dǎo)致其丙酮酸還原為乳酸活性顯著提高，進(jìn)一步促進(jìn)了癌細(xì)胞中糖酵解通量、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+）的再生、乳酸的產(chǎn)生和糖酵解中間體的生物合成，從而促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞增殖。

3 LDHB和腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系

3.1 LDHB促進(jìn)和抑制腫瘤作用

LDHB 在不同腫瘤中有不同作用，既可促進(jìn)又可抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展。

3.1.1 LDHB 的促癌作用 LDHB 在多種腫瘤中高表達(dá)并且發(fā)揮著促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的作用，如乳腺癌、骨肉瘤、甲狀腺乳頭狀癌等。

臨床病例研究中，Wang 等［8］采用免疫組化檢測(cè)了50 對(duì)胰腺癌組織和匹配的鄰近正常組織中LDHB 蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)與鄰近正常組織相比，胰腺癌組織表達(dá)更高水平的LDHB。類似情況，Wang 等［32］比較56 例骨肉瘤組織和相鄰正常組織也發(fā)現(xiàn)，與相鄰正常組織相比，骨肉瘤組織中LDHB表達(dá)水平顯著升高。另外，Luo 等［33］在對(duì)胰腺導(dǎo)管腺癌標(biāo)本、瘤周組織標(biāo)本、良性胰腺標(biāo)本和正常胰腺標(biāo)本研究中發(fā)現(xiàn)，106 例胰腺導(dǎo)管腺癌標(biāo)本中，57例（53.8%）檢測(cè)到LDHB陽(yáng)性表達(dá)；35例瘤周組織標(biāo)本中，11 例（31.4%）檢測(cè)到LDHB 陽(yáng)性表達(dá)；55例良性胰腺標(biāo)本中，13例（23.6%）檢測(cè)到LDHB陽(yáng)性表達(dá)；13例正常胰腺組織中均未檢測(cè)到LDHB的表達(dá)。這些數(shù)據(jù)表明，胰腺導(dǎo)管腺癌中LDHB蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于瘤周組織、良性胰腺和正常胰腺組織。LDHB 陽(yáng)性表達(dá)的瘤周組織和胰腺良性病變還顯示出不典型增生或上皮內(nèi)瘤變，提示LDHB是一種致癌因子，參與胰腺導(dǎo)管腺癌的癌變過程。此外，LDHB 的表達(dá)還與乳腺腫瘤狀態(tài)有關(guān)，Yustisia Ika 等［34］在對(duì)32 例乳腺纖維腺瘤和31例浸潤(rùn)性乳腺癌臨床樣本的研究中發(fā)現(xiàn)，32 例纖維腺瘤中29 例（91%）表達(dá)LDHB，然而31 例浸潤(rùn)性乳腺癌中只有20 例（64.5%）表達(dá)LDHB，表明LDHB在不同腫瘤狀態(tài)之間的表達(dá)存在顯著差異。

在細(xì)胞水平上的相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，沉默LDHB會(huì)降低甲狀腺乳頭狀癌［25］、非小細(xì)胞肺癌［35］和胰腺癌［8］細(xì)胞中的有氧糖酵解，抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)。同時(shí)LDHB 表達(dá)上調(diào)促進(jìn)了骨肉瘤細(xì)胞增殖、遷移和侵襲活性，抑制了細(xì)胞凋亡［32，36］。此外，McCleland等［7，37］研究發(fā)現(xiàn)LDHB在三陰性乳腺癌和含有癌基因kras 擴(kuò)增型與突變型的肺腺癌細(xì)胞中過度表達(dá)；并且體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示LDHB敲除可抑制癌細(xì)胞增殖，體內(nèi)異種移植腫瘤實(shí)驗(yàn)證實(shí)了LDHB敲除可顯著抑制小鼠體內(nèi)異種移植瘤的生長(zhǎng)。這些結(jié)果顯示了LDHB對(duì)于三陰性乳腺癌和kras擴(kuò)增型與突變型肺腺癌的生長(zhǎng)是必需的。除此之外，Brisson等［38］在對(duì)多種癌細(xì)胞的研究中還發(fā)現(xiàn)，LDHB 通過控制溶酶體活性與酸化、自噬囊泡成熟和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)水解，增強(qiáng)癌細(xì)胞自噬，進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞增殖；而沉默LDHB 可抑制癌細(xì)胞自噬和增殖，并誘導(dǎo)凋亡細(xì)胞死亡。

3.1.2 LDHB的抑癌作用 有趣的是，LDHB雖在多種腫瘤中表現(xiàn)出促進(jìn)腫瘤發(fā)展的作用，但其在膀胱尿路上皮癌和肝癌等腫瘤中又發(fā)揮了抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用，抑制LDHB表達(dá)反而會(huì)增強(qiáng)癌細(xì)胞增殖、侵襲能力。

Sheng 等［39］運(yùn)用比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究了20 例臨床膀胱尿路上皮癌腫瘤樣本發(fā)現(xiàn)，LDHB 表達(dá)水平隨著組織學(xué)分級(jí)升高而降低，在高級(jí)別膀胱癌組織中的表達(dá)明顯低于非高級(jí)別膀胱尿路上皮癌組織。Chen 等［40］在對(duì)75 例肝癌患者正常及癌變組織的LDHB 表達(dá)水平進(jìn)行研究時(shí)也發(fā)現(xiàn)，LDHB在肝癌組織中的表達(dá)明顯低于非癌組織，且與肝癌病理分級(jí)、血管浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。細(xì)胞水平上研究則表明，下調(diào)LDHB表達(dá)可增強(qiáng)前列腺癌細(xì)胞的致瘤性［9］。

3.2 LDHB促進(jìn)和抑制腫瘤的分子機(jī)制

3.2.1 LDHB 的促癌作用分子機(jī)制 Rosso 等［41］分析了21 例乳腺癌患者的腫瘤組織發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織中的LDHB 表達(dá)水平與上皮鈣黏蛋白（epithelial cadherin，E-cadherin）變體水平呈正相關(guān)。在細(xì)胞水平上，下調(diào)LDHB 表達(dá)可導(dǎo)致穩(wěn)定轉(zhuǎn)染E-cadherin 變體乳腺癌細(xì)胞活力顯著降低，增殖減少。同樣在乳腺癌細(xì)胞中，F(xiàn)u 等［42］研究發(fā)現(xiàn)高遷移率族框蛋白2（high-mobility group box 2，HMGB2）也與LDHB 表達(dá)水平呈正相關(guān)，HMGB2 通過上調(diào)LDHB 表達(dá)，增強(qiáng)糖酵解、加速癌細(xì)胞增殖，從而促進(jìn)乳腺癌進(jìn)展。此外，Li 等［43］研究發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中，LDHB 和發(fā)育多潛能相關(guān)蛋白4（developmental pluripotency-associated 4，Dppa4）的表達(dá)水平呈正相關(guān)。敲低LDHB 可逆轉(zhuǎn)Dppa4 對(duì)癌細(xì)胞糖酵解和增殖的促進(jìn)作用，Dppa4-LDHB 軸在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的糖酵解過程中起重要作用，參與調(diào)控非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展。LDHB還可以通過降低AMP活化蛋白激酶α（AMP-activated protein kinase α，AMPKα）磷酸化水平阻礙其激活，進(jìn)而促進(jìn)癌基因kras介導(dǎo)的肺腫瘤發(fā)生［27］。

在更詳細(xì)的代謝途徑研究中，突變異檸檬酸脫氫酶（isocitrate dehydrogenases，IDHs）產(chǎn)生的代謝物R-2-羥基戊二酸（R-2-hydroxyglutarate，R-2HG），被報(bào)道具有抗腫瘤活性。Qing 等［44］研究發(fā)現(xiàn)，在白血病細(xì)胞中，R-2HG 通過脂肪和肥胖相關(guān)蛋白（fat mass and obesity-associated protein，F(xiàn)TO）/血小板型磷酸果糖激酶（phosphofructokinase platelet，PFKP）/LDHB 軸抑制LDHB 的表達(dá)，從而抑制有氧糖酵解，發(fā)揮抗腫瘤活性。而抗癌藥物4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸酯（4-amino-2-t-rifluoromethylphenyl retinate，ATPR）則是通過視黃酸受體α（retinoic acid receptor α，RARα）/LDHB/細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白 激 酶（extracellular regulated protein kinases，ERK）糖酵解信號(hào)通路下調(diào)LDHB 表達(dá)，抑制糖酵解，抑制白血病細(xì)胞增殖，從而產(chǎn)生了抗白血病的作用［45］。同時(shí)，在胰腺癌細(xì)胞中L型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2（L-type amino acid transporter 2，LAT2）可以通過LAT2-mTOR-LDHB 通路，靶向激活mTOR 并上調(diào)LDHB 表達(dá)；過表達(dá)LDHB 可激活糖酵解通路，并促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞對(duì)吉西他濱的化療耐藥性［46］。

3.2.2 LDHB 的抑癌作用分子機(jī)制 Hong 等［47］通過研究肝癌細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，LDHB 沉默可誘導(dǎo)糖酵解增強(qiáng)，并通過乳酸介導(dǎo)丙酮酸脫氫酶激酶（pyruvate dehydrogenase kinase，PDK）激活，增加丙酮酸脫氫酶（pyruvate dehydrogenase，PDH）的抑制性磷酸化，減弱PDH 活性，從而降低氧化磷酸化通量。這一結(jié)果顯示了，LDHB 沉默是增強(qiáng)糖酵解的關(guān)鍵機(jī)制，并在肝癌進(jìn)展中參與線粒體功能障礙的維持，抑制氧化磷酸化通路。此外，Kim等［48］還報(bào)道了LDHB 抑制不僅可以啟動(dòng)和維持代謝向有氧糖酵解的轉(zhuǎn)變，而且通過誘導(dǎo)緊密連接蛋白-1（claudin-1，Cln-1）蛋白表達(dá)促進(jìn)了肝癌細(xì)胞的侵襲。

3.3 LDHB與臨床患者預(yù)后

LDHB 不僅發(fā)揮促進(jìn)與抑制腫瘤作用，而且其表達(dá)水平還與患者預(yù)后相關(guān)。Luo 等［33］研究發(fā)現(xiàn)LDHB 表達(dá)水平與胰腺導(dǎo)管腺癌患者生存率呈負(fù)相關(guān)，LDHB 陽(yáng)性表達(dá)的患者存活時(shí)間明顯短于LDHB 陰性表達(dá)的患者，LDHB 蛋白的陽(yáng)性表達(dá)與胰腺導(dǎo)管腺癌患者的進(jìn)展和不良預(yù)后有關(guān)。此外，LDHB 高表達(dá)對(duì)三陰性乳腺癌［37］、胰腺癌［46，8］、骨肉瘤［36］和肺腺癌［7］患者生存率有著顯著影響，LDHB過表達(dá)的患者預(yù)后較差。Sun等［49］的研究則顯示了LDHB 的過表達(dá)會(huì)導(dǎo)致口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞對(duì)紫杉醇、順鉑和5 氟尿嘧啶（TPF）新輔助化療方式中紫杉醇的耐藥性，高LDHB 表達(dá)與TPF化療效果差以及口腔鱗狀細(xì)胞癌患者較短的總生存期和無病生存期相關(guān)。

相反，Koh 等［50］研究發(fā)現(xiàn)LDHB 陽(yáng)性肺鱗狀細(xì)胞癌患者的無復(fù)發(fā)生存率高于LDHB 陰性患者。高LDHB 表達(dá)和血清LDH 水平與肺鱗狀細(xì)胞癌患者更好的臨床治療結(jié)果顯著相關(guān)。此外，有研究報(bào)道低LDHB/LDHA 比值與肝癌、前列腺癌患者不良預(yù)后顯著相關(guān)。LDHB 的低表達(dá)和LDHA 的過表達(dá)與前列腺癌患者的生化復(fù)發(fā)和生存時(shí)間短相關(guān)，LDHB 表達(dá)越低的前列腺癌患者的無復(fù)發(fā)生存率越差［9，12，47］。

4 LDHB作為腫瘤診斷的生物標(biāo)志物

LDHB 可作為一種臨床生物標(biāo)志物，用于對(duì)腫瘤患者的診斷，對(duì)腫瘤治療具有重要意義。研究表明LDHB 是肺鱗狀細(xì)胞癌［50］、骨肉瘤［36］復(fù)發(fā)的獨(dú)立預(yù)測(cè)標(biāo)志物以及頭頸部鱗狀細(xì)胞癌［51］的潛在預(yù)后標(biāo)志物。除此之外，de Haas 等［52］還發(fā)現(xiàn)，ldhb、ccnb1和myc3 種基因的表達(dá)水平能夠預(yù)測(cè)成神經(jīng)管細(xì)胞瘤患者的生存情況；腫瘤組織中同時(shí)表達(dá)LDHB 和周期蛋白B1（cyclin B1，CCNB1）蛋白的患者預(yù)后很差，而低表達(dá)MYC 蛋白的患者預(yù)后良好；多因素分析則顯示LDHB/CCNB1 和MYC 均是獨(dú)立的成神經(jīng)管細(xì)胞瘤的預(yù)后標(biāo)志物。

5 總結(jié)與展望

腫瘤是一種生物能量代謝失調(diào)的疾病。代謝重編程是腫瘤的主要特征，為癌細(xì)胞提供了獨(dú)特的生存環(huán)境以及大量生物合成途徑所需的中間體，滿足了快速增殖癌細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求。腫瘤代謝重編程包括谷氨酰胺分解增加以及脂質(zhì)代謝、有氧糖酵解增加等。有氧糖酵解在腫瘤增殖、遷移和侵襲中起著關(guān)鍵作用，與腫瘤生長(zhǎng)和進(jìn)展密切相關(guān)。

LDHB 是有氧糖酵解的關(guān)鍵酶，不僅參與了多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展，而且可以作為生物標(biāo)志物用于對(duì)腫瘤患者的診斷和預(yù)后判斷。雖然LDHB 和LDHA 都與腫瘤進(jìn)展有關(guān)，但是與LDHA 相比，LDHB 與腫瘤的關(guān)系要復(fù)雜得多。LDHA 在所有腫瘤細(xì)胞中均表現(xiàn)出相似高的表達(dá)水平，然而從目前有關(guān)LDHB 的研究來看，LDHB 在不同腫瘤中的表達(dá)水平不同，并參與了多種不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，發(fā)揮了不同的生物學(xué)作用。在乳腺癌、肺癌、甲狀腺乳頭狀癌等腫瘤中LDHB作為一種致癌因子，發(fā)揮著增強(qiáng)糖酵解的作用，促進(jìn)腫瘤增殖、侵襲和遷移；但有趣的是LDHB又在前列腺癌、肝癌、膀胱尿路上皮癌等腫瘤中作為糖酵解的抑制因子發(fā)揮抑癌作用，高LDHB表達(dá)反而會(huì)降低癌細(xì)胞增殖和侵襲活力。本課題組研究發(fā)現(xiàn)LDHB 是一個(gè)糖基化蛋白，同時(shí)在肝癌細(xì)胞上的研究顯示，糖基化LDHB會(huì)降低肝癌細(xì)胞糖酵解通量，抑制肝癌細(xì)胞增殖。本研究結(jié)果和已有文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致，表明了LDHB在肝癌中作為糖酵解抑制因子，抑制肝癌進(jìn)展。此外，后續(xù)實(shí)驗(yàn)還將聚焦于糖酵解通路相關(guān)蛋白與代謝物的研究，深入了解LDHB在糖酵解通路中的具體作用機(jī)制。

綜上所述，LDHB 與各種腫瘤的關(guān)系相當(dāng)復(fù)雜，因此還需要更多的研究來闡明LDHB在不同腫瘤中的作用以及影響腫瘤進(jìn)展詳細(xì)的分子機(jī)制，為其今后用于腫瘤診斷和治療奠定理論基礎(chǔ)。