曾凱環(huán) 于勇剛 李婷婷 楊改琴 秦瑋珣 左 甲

(1 陜西中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院,咸陽,712046; 2 陜西省中醫(yī)醫(yī)院針灸科,西安,710000)

胃癌是世界范圍內(nèi)最常見的高侵襲性惡性腫瘤之一,也是癌癥相關(guān)死亡的第4大原因,其發(fā)生、進(jìn)展受家族史、飲食、飲酒和幽門螺旋桿菌感染等因素影響,嚴(yán)重影響患者的生命質(zhì)量[1]。因此,預(yù)防胃癌發(fā)生成為現(xiàn)在的重要研究方向,當(dāng)采取以早期診斷和治療為重點的必要措施。胃癌前病變(Precancerous Lesions of Gastric Cancer,PLGC)是指胃黏膜組織發(fā)生病理學(xué)改變并向胃癌轉(zhuǎn)化的一個階段,伴存于慢性萎縮性胃炎的胃腸上皮化生和異型增生[2]。PLGC發(fā)展成胃癌需要相對較長的過程,被認(rèn)為是早期診斷和預(yù)防胃癌發(fā)生的關(guān)鍵階段[3]。目前,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢查方法實現(xiàn)了PLGC早期診斷的目的,然而,關(guān)于PLGC的治療尚缺乏理想的治療措施。內(nèi)鏡治療、幽門螺旋桿菌消除、環(huán)氧合酶抑制劑、非甾體抗炎藥等不僅不良反應(yīng)大,還存在著復(fù)發(fā)風(fēng)險[4-5]。中醫(yī)藥在防治PLGC方面遵循“治未病”思想,辨證論治,能夠顯著減輕甚至逆轉(zhuǎn)胃黏膜萎縮、腸化及異型增生等癌前病理變化,成為近年來胃癌防治研究的重點。

近年來,多項研究證實信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的異常激活或抑制,對PLGC的進(jìn)程有著重要影響。目前,各種誘發(fā)PLGC的信號通路主要包括:核因子κB信號通路、Hippo信號通路、TGF-β/Smads信號通路、MAPK信號通路、JAK/STAT3通路及Wnt/β-catenin信號通路等[6]。其中,Wnt/β-catenin信號通路在胃癌發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮重要作用,已存在許多文獻(xiàn)證實其參與胃癌細(xì)胞異常增殖、分化、轉(zhuǎn)移等過程,被認(rèn)為是PLGC發(fā)生發(fā)展的重要信號通路[7-8]。故在此背景下,將中醫(yī)藥的臨床應(yīng)用與西醫(yī)的微觀知識相結(jié)合,基于經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路,綜述中醫(yī)藥干預(yù)PLGC的研究現(xiàn)狀,以期為中醫(yī)藥治療PLGC及預(yù)防胃癌發(fā)生提供參考。

1 Wnt/β-catenin信號通路機(jī)制

Wnt/β-catenin信號通路又稱為Wnt經(jīng)典通路,參與機(jī)體各種生理過程,如細(xì)胞增殖、分化、凋亡、遷移、侵襲和浸潤等。當(dāng)Wnt/β-catenin信號通路被異常激活時,可促使機(jī)體內(nèi)細(xì)胞不可控制地生長、增殖及分化,從而導(dǎo)致癌癥的發(fā)生發(fā)展。

當(dāng)機(jī)體正常細(xì)胞沒有Wnt信號刺激Wnt/β-catenin信號通路時,該通路處于沉默狀態(tài)。細(xì)胞內(nèi)的β-catenin通過骨架蛋白Axin與結(jié)腸腺瘤性息肉病蛋白(Adenomatous Polyposis Coli,APC)、糖原合成酶激酶3β(Glycogen Synthase Kinase 3β,GSK-3β)及酪蛋白激酶1α(Casein Kinase 1α,CK1α)組成降解復(fù)合物后,GSK-3β、CK1α介導(dǎo)β-catenin磷酸化,促使其泛素化后被蛋白酶體識別而降解,從而保證了胞質(zhì)內(nèi)β-catenin的正常水平含量。見圖1B。

圖1 Wnt/β-catenin信號通路[9]

當(dāng)機(jī)體處于癌變狀態(tài)時,Wnt信號激活該通路,使其處于異常激活狀態(tài)。Wnt信號與細(xì)胞表面共受體的卷曲蛋白受體家族(Frizzled,FZD)和低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6(Lipoprotein Receptor-related Protein5/6,LRP5/6)結(jié)合形成復(fù)合物,激活細(xì)胞質(zhì)蛋白Discelled(Dvl),并使Dvl、Axin與該復(fù)合物結(jié)合,從而抑制了降解復(fù)合物的形成,導(dǎo)致β-catenin的濃度升高,積聚并遷移至細(xì)胞核內(nèi),與核內(nèi)T細(xì)胞特異性因子/淋巴樣增強(qiáng)結(jié)合因子(TCF/LEF)相互作用,觸發(fā)Wnt靶基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。見圖1A。如細(xì)胞周期蛋白D1(Cyclin-D1)、血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、Lgr5及c-Myc等過表達(dá),促使細(xì)胞的不規(guī)則增殖、分裂,癌細(xì)胞向癌旁組織的侵襲、浸潤,腫瘤血管生成,逐漸導(dǎo)致癌癥的形成。

2 Wnt/β-catenin信號通路在PLGC中的作用

研究顯示,Wnt信號通路上存在著多種信號分子與PLGC的發(fā)生相關(guān)聯(lián),Wnt、β-catenin、Cyclin-D1、c-Myc等分子表達(dá)增加均提示胃黏膜組織發(fā)生萎縮性胃炎、腸上皮化生及異型增生等癌變狀態(tài)[10-12]。并且,血清中相應(yīng)分子物質(zhì)水平的改變,如胃泌素-17(Gastrin-17,G-17)、VEGF的升高,亦提示著Wnt信號通路的激活及PLGC的發(fā)生,這些物質(zhì)均可作為胃癌早期診斷的分子標(biāo)志物[13]。彭力等[12]通過實驗研究發(fā)現(xiàn)β-catenin在不同癌前病變狀態(tài)下的陽性表達(dá)率均不相同,伴隨著癌變狀態(tài)的進(jìn)展,其陽性表達(dá)率越高,腸上皮化生及輕型、中型、重型異型增生的陽性表達(dá)率分別為54.29%、50.00%、68.18%、71.15%。該實驗指出,β-catenin不僅僅是Wnt信號通路的關(guān)鍵組成部分,亦是胃癌及癌前病變狀態(tài)發(fā)生發(fā)展的重要代表性標(biāo)志物。

c-Myc是一種致癌轉(zhuǎn)錄因子,亦是胃癌及PLGC形成過程中最常見的原癌基因之一,在生理狀態(tài)下,其調(diào)節(jié)細(xì)胞正常生長,當(dāng)機(jī)體處于致癌環(huán)境的病理狀態(tài)時,其調(diào)節(jié)能力失控而表現(xiàn)出異常轉(zhuǎn)錄,促使細(xì)胞增殖、機(jī)體代謝速度增加等[14]。Cyclin-D1與細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶CDK4/6結(jié)合時,參與調(diào)控細(xì)胞周期正常增殖、分裂,當(dāng)Cyclin-D1失調(diào)時,該分子則轉(zhuǎn)化為一種致癌基因[15],驅(qū)動著胃腫瘤細(xì)胞的快速增殖。因此,在癌前狀態(tài)及胃癌的階段中,c-Myc、Cyclin-D1的陽性表達(dá)率逐漸升高;同時,當(dāng)機(jī)體處于胃炎癌前狀態(tài)時,機(jī)體內(nèi)G-17、上皮生長因子(Epidermal Growth Factor,EGF)等分子水平逐漸升高,激活Wnt信號通路,β-catenin聚集于胞核內(nèi),上調(diào)VEGF的表達(dá)增加,腫瘤微血管形成;同時,β-catenin刺激下游基因c-Myc、Cyclin-D1等活躍表達(dá),細(xì)胞在得到微血管的營養(yǎng)支持下,進(jìn)入不規(guī)律增殖、分裂,腫瘤細(xì)胞向局部浸潤、轉(zhuǎn)移等,導(dǎo)致胃黏膜組織癌變,出現(xiàn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,亦可伴見胃腸上皮化生及異型增生[16-17]。當(dāng)消除炎癥或敲低G-17、EGF等分子時,該通路進(jìn)入沉默狀態(tài),胞質(zhì)中的β-catenin磷酸化而被降解,胞核內(nèi)c-Myc、Cyclin-D1等基因無以表達(dá),細(xì)胞增殖恢復(fù)正常狀態(tài),胃黏膜組織逐漸恢復(fù)正常,PLGC的進(jìn)展受到抑制,從而阻斷了胃癌的發(fā)生[18-19]。此外,當(dāng)靶向抑制c-Myc、Cyclin-D1、VEGF時,胃腫瘤血管生成及細(xì)胞增殖亦受到抑制,癌變細(xì)胞生長停滯[20-22],從而阻斷PLGC的發(fā)生發(fā)展。

3 中醫(yī)藥治療PLGC

3.1 中藥治療PLGC的相關(guān)研究 隨著研究的不斷拓展,中藥治療PLGC的優(yōu)勢逐漸凸顯。相關(guān)研究顯示,中藥活性成分、草藥制劑及中藥配方可以通過直接作用于胃黏膜,發(fā)揮抗炎、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和凋亡、抑制氧化應(yīng)激、抑制糖酵解、抑制血管生成等作用,有效干預(yù)PLGC[23]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn),白花蛇舌草、半枝蓮內(nèi)含的黃酮類及甾醇類化合物成分能有效治療PLGC,起到抗胃黏膜炎癥、抑制細(xì)胞增殖、抗氧化應(yīng)激、抑制血管生成等作用,使得腫瘤細(xì)胞生長所需要的氧供及血液供應(yīng)無法獲得滿足而阻斷胃癌的發(fā)生發(fā)展[24-25];黃芪、丹參藥物中黃芪甲苷、丹參酮ⅡA成分亦可明顯抑制糖酵解過程以阻斷腫瘤細(xì)胞增殖所需要的能量來源,胃癌細(xì)胞無法正常生長而衰亡,從而抑制PLGC進(jìn)一步發(fā)展。亦有研究顯示漢防己乙素可呈依賴性地降低PLGC大鼠體內(nèi)炎癥介質(zhì)水平,抑制組織細(xì)胞致癌基因表達(dá)并增加促凋基因表達(dá),發(fā)揮治療PLGC的作用[26]。

3.2 中藥通過Wnt/β-catenin信號通路作用于PLGC 曹斌等[27]運用蒺藜皂苷處理胃癌細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn),蒺藜皂苷可通過下調(diào)Wnt3a、β-catenin分子含量以抑制Wnt/β-catenin信號通路,從而降低胃癌細(xì)胞增殖活性,并增加抑癌基因p21表達(dá),降低原癌基因Ki67表達(dá)。黃丹[28]將青龍衣抗腫瘤成分作用于胃癌小鼠,采用不同藥劑濃度治療后發(fā)現(xiàn),高濃度的青龍衣組分對腫瘤細(xì)胞抑制率更佳,并可通過調(diào)節(jié)Wnt信號通路降低β-catenin、VEGF、COX-2等相關(guān)蛋白表達(dá),從而抑制腫瘤血管的形成。同時,國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn),青蒿素可通過調(diào)控Wnt信號通路以降低胃癌細(xì)胞Dvl2和Cyclin-D1的分子水平,上調(diào)GSK-3β蛋白含量,促使β-catenin磷酸化而降解,從而誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡,抑制其侵襲和遷移[29-30]。谷金繁等[31]以不同濃度的加味小陷胸湯作用于人胃癌MGC803細(xì)胞,該實驗證實了高濃度的加味小陷胸湯通過Wnt信號通路降低Wnt1、β-catenin、VEGF等信號表達(dá)的作用更佳,并能抑制該細(xì)胞發(fā)生上皮細(xì)胞間質(zhì)化,從而抑制胃癌的發(fā)生發(fā)展。萎胃康顆粒是由西洋參、白術(shù)、三七等多種中藥所組成的中成藥制劑,能通過降低Wnt信號通路上Wnt及β-catenin蛋白含量而治療PLGC,并且在高劑量萎胃康觀察組中,大鼠胃黏膜恢復(fù)程度更接近于正常[32]。宋健等[33]將金果胃康膠囊自產(chǎn)制劑應(yīng)用于毒瘀交阻兼氣陰兩虛型的PLGC大鼠,連續(xù)治療6周后,發(fā)現(xiàn)Wnt信號通路上的Wnt1、β-catenin及Lgr5蛋白表達(dá)含量均降低,其中高濃度金果胃康膠囊劑量組的降低程度更顯著,表明該中成藥制劑可通過抑制Wnt信號通路作用于PLGC的治療。

由此可知,中藥可抑制該信號通路中Wnt、β-catenin、Dvl2、VEGF、Cyclin-D1、Lgr5等分子作用,亦可增加GSK-3β蛋白表達(dá),進(jìn)而干預(yù)該信號通路的激活,抑制胃腫瘤細(xì)胞的生長、增殖與分化,并抑制胃腫瘤血管形成等,起到治療PLGC的作用。

3.3 針灸對PLGC的相關(guān)研究 針灸作為中醫(yī)傳統(tǒng)療法之一,可通過調(diào)節(jié)經(jīng)絡(luò)氣血達(dá)到調(diào)整臟腑功能的目的,可有效緩解慢性胃炎乃至PLGC導(dǎo)致的各種癥狀。陳永等[34]通過實驗研究發(fā)現(xiàn)針刺、艾灸PLGC大鼠足三里和梁門可起到保護(hù)胃黏膜作用,經(jīng)過20次治療后,發(fā)現(xiàn)大鼠血清內(nèi)癌胚抗原水平明顯降低,表明針灸對PLGC具有抑制作用。亦有學(xué)者發(fā)現(xiàn),艾灸梁門和足三里可降低PLGC大鼠原癌基因P53、c-Myc的異常表達(dá),同時降低VEGF蛋白活性,從而抑制胃腫瘤細(xì)胞的浸潤、轉(zhuǎn)移,達(dá)到逆轉(zhuǎn)PLGC的目的[35]。稅典奎等[36]運用穴位埋線聯(lián)合中藥湯劑治療慢性萎縮性胃炎伴腸化生患者,療程3個月,治療結(jié)束后發(fā)現(xiàn),穴位埋線聯(lián)合中藥湯劑綜合療法療效優(yōu)于單一療法,患者癥狀減輕,胃黏膜萎縮及腸化程度改善,PLGC病情得到延緩。

3.4 針灸通過Wnt/β-catenin信號通路作用于PLGC 近年來,關(guān)于針灸干預(yù)Wnt/β-catenin信號通路治療疾病的研究逐漸增多,然而,關(guān)于針灸調(diào)控該信號通路治療PLGC的研究仍相對較少。張瑤[37]通過熱敏灸灸中脘穴治療PLGC大鼠,研究顯示,熱敏灸可通過調(diào)控Wnt信號通路中Wnt2、β-catenin蛋白表達(dá),抑制胃黏膜細(xì)胞增殖、侵襲及浸潤,改善胃腺體萎縮程度,阻斷PLGC的進(jìn)程。胡兵[38]亦將熱敏灸應(yīng)用于PLGC大鼠治療過程中,結(jié)果表明,熱敏灸能下調(diào)該信號通路上β-catenin、TCF-4、Cyclin-D1蛋白的表達(dá),阻斷致癌基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá),促進(jìn)癌變細(xì)胞的凋亡,從而修復(fù)胃黏膜功能,達(dá)到治療PLGC并預(yù)防其癌變的作用。

經(jīng)查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),針灸對Wnt/β-catenin信號通路中Wnt、β-catenin、TCF-4及Cyclin-D1等分子具有抑制作用,并阻斷了該信號通路的異常激活,使胃黏膜病理改變狀態(tài)得到改善,從而治療PLGC并預(yù)防胃癌的發(fā)生。

4 總結(jié)與展望

PLGC作為預(yù)防胃癌發(fā)生的黃金治療階段,因其復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制,目前仍無理想的治療措施,以至于治療PLGC仍是當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究的難題。由于PLGC的病程復(fù)雜,常涉及多通路的交叉作用,而Wnt/β-catenin作為胃癌發(fā)生的主要信號通路,其在PLGC的發(fā)生發(fā)展中呈現(xiàn)異?；罨癄顟B(tài),并且該信號通路中Wnt、β-catenin等分子均可作為PLGC診斷及治療的代表標(biāo)志物,從而受到廣大專家學(xué)者的研究關(guān)注。隨著中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展,中醫(yī)藥在治療PLGC上具有明顯優(yōu)勢,并已逐漸深入到PLGC分子層面的研究。中醫(yī)藥可通過中藥及針灸的形式下調(diào)或上調(diào)Wnt/β-catenin信號通路中的相關(guān)分子,進(jìn)而抑制該信號通路的激活,抑制了胃癌細(xì)胞增殖、分化等作用,阻斷了胃黏膜病理性改變,從而治療PLGC。然而,由于中藥及針灸均具有多靶點調(diào)控信號通路的作用,使中醫(yī)藥療法應(yīng)用于PLGC的臨床研究仍面臨著較大的問題:1)縱觀近年來的相關(guān)研究,發(fā)現(xiàn)選取單一通路進(jìn)行研究探討的文獻(xiàn)居多,今后可進(jìn)一步研究更多通路與PLGC的機(jī)制作用,挖掘各通路之間的關(guān)聯(lián)性,從而為實驗研究提供更可靠的依據(jù)。2)針灸療法涉及穴位及經(jīng)絡(luò)的作用,然而關(guān)于其調(diào)控Wnt/β-catenin信號通路及其他通路的機(jī)制研究仍較少,往后可從這一角度深入研究。

利益沖突聲明:無。