孫仲宇，李凌云，陳敏，王英姿，劉保友，趙景輝，王洪濤

(1.山東省煙臺(tái)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，山東 煙臺(tái) 265500；2.煙臺(tái)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東 煙臺(tái) 264005；3.萊州市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，山東 萊州 261400)

橘小實(shí)蠅(Bactrocera dorsalis)又稱東方果實(shí)蠅、果蛆，屬雙翅目實(shí)蠅科[1]。 橘小實(shí)蠅最早發(fā)現(xiàn)于亞洲熱帶地區(qū)，在我國(guó)首次發(fā)現(xiàn)于1911 年臺(tái)灣地區(qū)的一處柑橘園內(nèi)，于1937 年出現(xiàn)在大陸地區(qū)[2]。 目前橘小實(shí)蠅已經(jīng)遍布全球超過(guò)75 個(gè)國(guó)家[3]，我國(guó)主要集中分布在南部地區(qū)，如廣東、云南、福建等地[4]。 橘小實(shí)蠅寄主范圍廣，可危害46 科250 種果蔬，且該蟲隱蔽為害，成蟲產(chǎn)卵于果實(shí)內(nèi)，幼蟲于果內(nèi)蛀食，發(fā)育成熟后蛀孔脫果入土化蛹，致果實(shí)內(nèi)部腐爛變質(zhì)從樹上提前脫落，失去實(shí)用價(jià)值并造成經(jīng)濟(jì)損失[5，6]，嚴(yán)重阻礙我國(guó)果蔬產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

橘小實(shí)蠅不斷向北入侵對(duì)北部地區(qū)水果蔬菜產(chǎn)業(yè)造成潛在威脅，隨著全球氣溫不斷升高與運(yùn)輸行業(yè)的快速發(fā)展，橘小實(shí)蠅在未來(lái)幾年內(nèi)還會(huì)有不斷北遷的趨勢(shì)[7]。 近年來(lái)山東等地區(qū)也有發(fā)現(xiàn)，給當(dāng)?shù)毓樊a(chǎn)業(yè)造成不利影響[8，9]。 目前橘小實(shí)蠅的防治主要依靠化學(xué)藥劑，但是隨著藥劑的大量和長(zhǎng)期使用，導(dǎo)致橘小實(shí)蠅的抗藥性不斷增加[10，11]。 為尋找更環(huán)保安全且有效的防治藥劑，本試驗(yàn)選用4 大類15 種常見(jiàn)殺蟲劑對(duì)橘小實(shí)蠅不同蟲態(tài)進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定，以期為合理使用農(nóng)藥防治該蟲提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

橘小實(shí)蠅敏感蟲源由青島農(nóng)業(yè)大學(xué)植物醫(yī)學(xué)學(xué)院周洪旭教授饋贈(zèng)。 置于養(yǎng)蟲室(溫度25±2℃，濕度50%～60%)人工飼養(yǎng)，經(jīng)數(shù)代繁殖進(jìn)行不同蟲態(tài)毒力測(cè)定。

1.2 供試藥劑

供試藥劑有效成分含量、生產(chǎn)廠家等見(jiàn)表1。

表1 農(nóng)藥類型、名稱及生產(chǎn)廠家

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

噻蟲胺、多殺霉素、甲維鹽用N，N-二甲基甲酰胺溶解，其他供試藥劑用丙酮溶解，并用丙酮定容配制成1×104mg/L 母液，在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，將母液用丙酮稀釋成5 ～6 個(gè)不同濃度梯度的藥液備用。

1.3.1 成蟲毒力測(cè)定 成蟲毒力測(cè)定采用藥膜法[12]。 用移液槍吸取5 mL 藥液沿瓶口加入250 mL 錐形瓶中，通過(guò)不斷旋轉(zhuǎn)錐形瓶使丙酮揮發(fā)讓藥液附著在瓶壁內(nèi)側(cè)形成均勻的藥膜，最后將剩余的藥液倒掉。 待瓶中丙酮完全揮發(fā)后，用50 mL 離心管在昆蟲籠內(nèi)捕獲羽化10～12 d 的橘小實(shí)蠅雌、雄成蟲各10 只轉(zhuǎn)移至瓶中，用橡皮筋將紗布綁緊瓶口使瓶身倒置，并在瓶口處放置10%的蜂蜜水浸濕的棉球，保證昆蟲的正常取食。 將錐形瓶放在(25±2)℃、濕度50%～60%的養(yǎng)蟲室內(nèi)，每隔24 h向棉球內(nèi)補(bǔ)充蜂蜜水并觀察記錄成蟲的死亡情況。輕晃瓶身，以成蟲沒(méi)有自主反應(yīng)為死亡標(biāo)準(zhǔn)。 每組處理設(shè)置3 個(gè)重復(fù)，以丙酮為對(duì)照試驗(yàn)。

1.3.2 幼蟲毒力測(cè)定 幼蟲毒力測(cè)定采用浸漬法[13]。 用細(xì)毛筆在飼料盒中挑選2 齡幼蟲15 頭置濾網(wǎng)內(nèi)浸入藥液10 s，取出后轉(zhuǎn)至裝有濾紙的培養(yǎng)皿(Φ＝9 cm)內(nèi)，皿中放入香蕉薄片保證幼蟲的正常取食，將培養(yǎng)皿置于(25±2)℃、濕度50%～60%的養(yǎng)蟲室內(nèi)，每隔24 h 觀察幼蟲的死亡情況，用細(xì)毛筆輕觸蟲體頭部，以無(wú)應(yīng)激反應(yīng)為死亡標(biāo)準(zhǔn)。 每組處理設(shè)置3 個(gè)重復(fù)，以清水為對(duì)照試驗(yàn)。

1.3.3 卵毒力測(cè)定 卵毒力測(cè)定采用點(diǎn)滴法[8]。用移液槍吸取1 000 μL 藥液滴加至放有濾紙的培養(yǎng)皿(Φ＝9 cm)中，用細(xì)毛筆挑取橘小實(shí)蠅1 h 內(nèi)產(chǎn)出卵50 粒置加有藥液的濾紙上，用移液槍吸取200 μL 藥液點(diǎn)滴在卵粒上。 將培養(yǎng)皿置于(25±2)℃、濕度50%～60%的養(yǎng)蟲室內(nèi)，每隔24 h 在解剖鏡下觀察并記錄卵的孵化情況，以卵粒破損為孵化標(biāo)準(zhǔn)。 每組處理設(shè)置3 個(gè)重復(fù)，以清水為對(duì)照試驗(yàn)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

對(duì)死亡蟲數(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)校正，對(duì)照組死亡率＜10%為有效數(shù)據(jù)，計(jì)算各處理死亡率與校正死亡率。計(jì)算公式如下。

死亡率(%)＝死亡試蟲數(shù)/試蟲總數(shù)×100 ；

校正死亡率(%)＝(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(1-對(duì)照組死亡率)×100 。

采用Microsoft Excel 2016、SPSS 18.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)整理與分析，計(jì)算毒力回歸方程、致死中濃度(LC50)、95%置信區(qū)間、相對(duì)毒力指數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑對(duì)橘小實(shí)蠅成蟲的室內(nèi)毒力

藥膜法試驗(yàn)結(jié)果(表2)表明，供試15 種殺蟲劑對(duì)橘小實(shí)蠅成蟲的毒力為毒死蜱＞甲維鹽＞高效氯氟氰菊酯＞多殺霉素＞辛硫磷＞溴氰菊酯＞呋蟲胺＞噻蟲胺＞噻蟲嗪＞聯(lián)苯菊酯＞阿維菌素＞高效氯氰菊酯＞烯啶蟲胺＞吡蟲啉＞啶蟲脒，其中毒死蜱、甲維鹽對(duì)橘小實(shí)蠅成蟲毒力最高，二者的毒力分別是98.4%啶蟲脒的526.83 倍和502.93 倍；高效氯氟氰菊酯、多殺霉素、辛硫磷、溴氰菊酯、呋蟲胺、噻蟲胺、噻蟲嗪也具有較高的毒力，是98.4%啶蟲脒的56.73～277.73 倍。

表2 藥膜法處理48 h 后15 種殺蟲劑對(duì)橘小實(shí)蠅成蟲的毒力

2.2 不同藥劑對(duì)橘小實(shí)蠅幼蟲的室內(nèi)毒力

浸漬法試驗(yàn)結(jié)果(表3)表明，供試15 種殺蟲劑對(duì)橘小實(shí)蠅2 齡幼蟲的毒力為多殺霉素＞阿維菌素＞甲維鹽＞毒死蜱＞辛硫磷＞溴氰菊酯＞高效氯氟氰菊酯＞噻蟲胺＞吡蟲啉＞高效氯氰菊酯＞烯啶蟲胺＞噻蟲嗪＞聯(lián)苯菊酯＞呋蟲胺＞啶蟲脒，其中多殺霉素、阿維菌素、甲維鹽對(duì)橘小實(shí)蠅2 齡幼蟲毒力最高，分別是98.4%啶蟲脒的167 988.00、67 195.20、47 996.57 倍；毒死蜱、辛硫磷、溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、噻蟲胺也具有較高的毒力，是98.4%啶蟲脒的20.00～1 749.88 倍。

表3 浸漬法處理48 h 后15 種殺蟲劑對(duì)橘小實(shí)蠅幼蟲的毒力

2.3 不同藥劑對(duì)橘小實(shí)蠅卵的室內(nèi)毒力

點(diǎn)滴法試驗(yàn)結(jié)果(表4)表明，供試15 種殺蟲劑對(duì)橘小實(shí)蠅卵的毒力為阿維菌素＞毒死蜱＞噻蟲嗪＞辛硫磷＞甲維鹽＞多殺霉素＞吡蟲啉＞噻蟲胺＞高效氯氟氰菊酯＞聯(lián)苯菊酯＞高效氯氰菊酯＞呋蟲胺＞溴氰菊酯＞烯啶蟲胺＞啶蟲脒，其中阿維菌素、毒死蜱對(duì)橘小實(shí)蠅卵毒力最高，分別是98.4%啶蟲脒的356.68 倍和120.91 倍；噻蟲嗪、辛硫磷、甲維鹽、多殺霉素也具有較高的毒力，是98.4%啶蟲脒的10.41～36.72 倍。

表4 點(diǎn)滴法處理48 h 后15 種殺蟲劑對(duì)橘小實(shí)蠅卵的毒力

3 討論與結(jié)論

在有害生物防控中，化學(xué)防治是最便捷、見(jiàn)效最快且不可或缺的措施，有機(jī)磷類、擬除蟲菊酯類、抗生素類以及新煙堿類藥劑是目前使用較普遍的殺蟲劑類型。 本研究結(jié)果表明，毒死蜱、甲維鹽、高效氯氟氰菊酯、多殺霉素、辛硫磷、溴氰菊酯、呋蟲胺、噻蟲胺、噻蟲嗪對(duì)橘小實(shí)蠅敏感品系的成蟲具有較高的毒力，這與何鳳梅[12]、宮慶濤[14]等的研究結(jié)果一致。 因部分有機(jī)磷殺蟲劑具有高毒、高風(fēng)險(xiǎn)等特性，相繼在一些作物上被禁用或限制使用。 蘭亦全和王小明[15]采用浸液法測(cè)定了10 種殺蟲劑對(duì)橘小實(shí)蠅2 齡幼蟲的毒力，研究發(fā)現(xiàn)，2.5%溴氰菊酯乳油、1%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽乳油、2.8%阿維菌素乳油和5%高效氯氟氰菊酯微乳劑對(duì)橘小實(shí)蠅幼蟲防效較好，與本試驗(yàn)采用原藥測(cè)定的結(jié)果類似。 張倩楠等[16]采用飼料混毒法，從8 種內(nèi)吸性殺蟲劑中篩選出的新煙堿類殺蟲劑噻蟲胺、噻蟲嗪對(duì)橘小實(shí)蠅幼蟲的毒力較高。 李建瑛等[8]研究發(fā)現(xiàn)甲維鹽、毒死蜱、噻蟲嗪等藥劑對(duì)橘小實(shí)蠅卵具有較高的毒力，與本研究結(jié)果一致。

本試驗(yàn)確定了15 種殺蟲劑對(duì)橘小實(shí)蠅敏感品系不同蟲態(tài)的毒力，其結(jié)果對(duì)橘小實(shí)蠅田間防治藥劑選擇、延緩抗藥性發(fā)展、提高防治效果等提供了參考。 除化學(xué)防治外，在實(shí)際生產(chǎn)中可采用農(nóng)業(yè)、物理、生物防治手段相結(jié)合，可更安全、科學(xué)的控制此類害蟲的爆發(fā)，如放置食誘劑、懸掛粘蟲板、保護(hù)和利用天敵等[17-21]。