張曉進, 王亮

新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗中心(新疆烏魯木齊 830054)

腫瘤標志物主要由惡性腫瘤細胞生成,不僅能夠顯著反映腫瘤生殖情況,且可監(jiān)測腫瘤對治療的反應(yīng)[1]。文獻指出,腫瘤標志物是肺癌診斷的敏感標志物,其表達與肺癌患者病情嚴重程度及預(yù)后情況直接相關(guān)[2]。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)作為一種高度特異性的促內(nèi)皮生長因子,能夠增加血管通透性,內(nèi)皮細胞遷移能力,這有助于新生血管生成[3]。VEGF在惡性腫瘤中的臨床意義已經(jīng)被證實,與腫瘤轉(zhuǎn)移及侵襲程度有關(guān)[4]。故探索腫瘤標志物、VEGF異常表達的相關(guān)因素可能對指導(dǎo)肺腺癌患者的治療有一定積極意義。降鈣素原(procalcitonin,PCT)作為降鈣素的前體物質(zhì),正常情況下,在機體內(nèi)無活性,且不釋放入血[5]。但有研究指出,部分惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中可釋放大量PCT,導(dǎo)致血清PCT呈過表達狀態(tài)[6]。因此推測血清PCT可能通過影響肺腺癌病情發(fā)展,不利于預(yù)后。本研究主要觀察肺腺癌化療患者血清PCT、腫瘤標志物、VEGF、表皮生長因子域8(EGFL8)表達情況,重點探討PCT在肺腺癌中的臨床意義,以尋求肺腺癌的潛在靶點,為改善患者化療預(yù)后提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本研究為前瞻性研究,以2018年1月至2019年1月在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院接受診治的82例肺腺癌患者為對象進行研究,本研究經(jīng)我院倫理委員會批準實施(批準號:K201712-08),患者知情同意。

納入標準:(1)均經(jīng)病理檢查確診為肺腺癌;(2)初診初治的患者;(3)TNM為Ⅱ～Ⅳ期;(4)統(tǒng)一在醫(yī)院接受化療,預(yù)計生存周期>6個月。

排除標準:(1)仍診斷為其他惡性腫瘤;(2)患有其他呼吸系統(tǒng)疾病;(3)患有急慢性感染性疾病,影響檢測PCT結(jié)果;(4)先天性免疫缺陷,或自身免疫性疾病;(5)正在服用免疫抑制劑,或任何抗感染藥物;(6)檢測結(jié)果顯示驅(qū)動基因突變,接受靶向治療的患者。

剔除標準:(1)隨訪期間全因死亡;(2)失訪;(3)患者主動退出研究。

1.2 檢測方法

1.2.1 實驗室指標檢測方法 82例患者均接受培美曲塞+順鉑方案化療,以21 d為1個化療周期,均化療4個周期。常規(guī)采集患者化療前及4次化療結(jié)束后的空腹靜脈血5 mL,檢測項目包括血清PCT、VEGF、EGFL8及腫瘤標志物[癌胚抗原(CEA)、糖類抗原(CA199、CA125)、神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)、細胞角蛋白19片段(CY-FRA21-1)、鱗狀細胞癌抗原(SCC-Ag)]表達。離心速率為3 000 r/min,離心時間為10 min,離心半徑為10 cm,離心肌購自貝克曼庫爾特商貿(mào)公司。PCT使用免疫發(fā)光法檢測(試劑盒購自北京索萊寶科技公司),VEGF使用ELISA法檢測(試劑盒購自合肥萊爾生物科技公司),腫瘤標志物使用化學(xué)發(fā)光法檢測(試劑盒購自賽默飛世爾科技有限公司),EGFL8使用PCR檢測(試劑盒購自北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限公司)。

1.2.2 預(yù)后評估方法 化療結(jié)束后,對肺腺癌患者隨訪3年,記錄其預(yù)后情況,以隨訪期間復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移視為隨訪終點事件,以隨訪期間腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移視為預(yù)后不良,否則視為預(yù)后良好,分為預(yù)后不良組和預(yù)后良好組。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 研究數(shù)據(jù)均使用SPSS 25.0軟件處理,計數(shù)資料均使用例(%)表示,使用2檢驗,計量資料均接受正態(tài)性檢驗且服從正態(tài)分布,使用表示,組間比較使用獨立樣本t檢驗,組內(nèi)比較采用配對t檢驗;肺腺癌患者血清PCT、腫瘤標志物、VEGF水平間相關(guān)性采用雙變量Pearson直線相關(guān)性檢驗;繪制受試者工作特征(ROC)曲線,并計算ROC曲線下面積(AUC),檢驗血清PCT水平預(yù)測肺腺癌患者發(fā)生轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)風險的價值;P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 隨訪結(jié)果 全部患者均接受為期3年隨訪,隨訪期間死亡7例,失訪4例,退出研究2例,最終69例患者完成研究,其中預(yù)后不良患者23例,發(fā)生率為33.33%(23/69)。

2.2 化療前后血清PCT、腫瘤標志物、VEGF水平比較 化療4個周期后,血清PCT、CEA、CA199、CA125、NSE、CY-FRA21-1、SCC-Ag、VEGF、EGFL8水平均較化療前降低(P<0.05)。見表1。

表1 69例患者化療前后血清PCT、VEGF、EGFL8及腫瘤標志物水平比較

2.3 預(yù)后不良組與預(yù)后良好組基線資料比較 化療前預(yù)后不良組血清PCT、CEA、CA199、CA125、NSE、CY-FRA21-1、SCC-Ag、VEGF、EGFL8水平均高于預(yù)后良好組(P<0.05),在其他資料方面兩組數(shù)據(jù)比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 預(yù)后不良組與預(yù)后良好組基線資料比較

2.4 肺腺癌患者血清PCT、腫瘤標志物、VEGF、EGFL8之間的關(guān)系 使用Pearson直線相關(guān)性分析,肺腺癌患者化療前血清PCT、腫瘤標志物、VEGF、EGFL8之間均呈正相關(guān)(r>0,P<0.05)。見表3。

表3 肺腺癌患者血清PCT、腫瘤標志物、VEGF、EGFL8水平間相關(guān)性分析 r值

2.5 血清PCT、VEGF及腫瘤標志物對肺腺癌患者化療后預(yù)后的影響 將肺腺癌患者血清PCT、CEA、CA199、CA125、NSE、CY-FRA21-1、SCC-Ag、VEGF、EGFL8分別作為協(xié)變量,預(yù)后情況作為因變量(1=預(yù)后不良,0=預(yù)后良好),血清PCT、CEA、CA199、CA125、NSE、CY-FRA21-1、SCC-Ag、VEGF、EGFL8過表達均能夠增加肺腺癌患者化療后預(yù)后不良風險(P<0.05)。見表4。

表4 血清PCT、VEGF及腫瘤標志物對肺腺癌患者化療后預(yù)后的影響

2.6 肺腺癌患者化療后預(yù)后不良影響因素的多因素分析 將肺腺癌患者基線資料及實驗室相關(guān)指標全部納入并分別作為協(xié)變量,以預(yù)后情況作為因變量,對其他基線資料進行校正后建立多元回歸模型顯示,血清PCT、CEA、CA199、CA125、NSE、CY-FRA21-1、SCC-Ag、VEGF、EGFL8過表達均能夠增加肺腺癌患者化療后預(yù)后不良風險(OR>1,P<0.05)。見表5。

表5 肺腺癌患者化療后預(yù)后不良影響因素的多因素分析

2.7 血清PCT預(yù)測肺腺癌患者化療后預(yù)后的ROC曲線 以肺腺癌患者血清PCT水平納入檢驗變量,以化療后預(yù)后情況作為狀態(tài)變量,繪制ROC曲線,化療前血清PCT水平預(yù)測肺腺癌患者化療后預(yù)后不良風險的AUC為0.850(AUC的95%CI=0.735～0.966)最佳閾值取1.961 ng/mL時,敏感度、特異度分別為0.870、0.978,約登指數(shù)為0.848。見圖1。

圖1 血清PCT預(yù)測肺腺癌患者化療后預(yù)后的ROC曲線

3 討論

肺腺癌早期缺乏特異性表現(xiàn)及體征,導(dǎo)致診斷難度增加,容易發(fā)生誤診、漏診事件,這也導(dǎo)致多數(shù)患者確診時病情已發(fā)展至中晚期,喪失手術(shù)治療機會[7]。目前針對無法接受手術(shù)治療的肺腺癌患者,放化療仍是其可選的治療手段,但其治療預(yù)后必然受到影響,如何改善肺腺癌化療后患者的預(yù)后應(yīng)是當前研究的重點。

腫瘤標志物與肺腺癌的關(guān)系已經(jīng)被證實,目前常見的腫瘤標志物包括CEA、CA199、CA125等,其中CEA與腫瘤組織、細胞間的黏附反應(yīng)有關(guān),被證實能夠增加腫瘤轉(zhuǎn)移風險[8]。CA199是一種低聚的糖類蛋白,已被諸多研究證實為多種腫瘤敏感度最高的標志物[9-10]。CA125的表達在腫瘤病情進行中具有重要意義,臨床常將其用于評估腫瘤病情及療效[11]。除腫瘤標志物外,腫瘤患者的預(yù)后還與血管新生有關(guān)。VEGF能夠促進腫瘤新生血管生成,提高瘤體的血流灌注,這為腫瘤生長及轉(zhuǎn)移創(chuàng)造有利條件[12]。楊穎等[13]研究發(fā)現(xiàn),VEGF與血管內(nèi)皮細胞相結(jié)合后能夠提高血管通透性,導(dǎo)致腫瘤細胞滲出或脫落,從而增加腫瘤轉(zhuǎn)移風險,不利于患者預(yù)后。故檢測腫瘤患者的腫瘤標志物、VEGF均能夠反映腫瘤預(yù)后,以指導(dǎo)治療方案調(diào)整。本研究數(shù)據(jù)指出,兩組化療后血清CEA、CA199、CA125、VEGF水平均較化療前降低,且預(yù)后不良組化療前血清CEA、CA199、CA125、VEGF水平均高于預(yù)后良好組,表明腫瘤標志物、VEGF與肺腺癌患者的化療效果及預(yù)后有關(guān)。故分析影響腫瘤標志物、VEGF表達的相關(guān)因素對肺腺癌患者的預(yù)后評估具有重要意義。

PCT目前已被諸多研究證實與多種感染性疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[14-15]。有研究指出,對肺癌手術(shù)患者術(shù)后動態(tài)監(jiān)測PCT能夠顯著評估其治療效果[16]。肺腺癌作為肺癌一種,推測PCT表達可能與肺腺癌患者的化療效果、預(yù)后情況有關(guān)。本研究結(jié)果顯示,化療后血清PCT低于化療前,且預(yù)后不良組化療前血清PCT高于預(yù)后良好組,證實上述推測。究其原因,作為一種免疫調(diào)節(jié)蛋白,PCT的誘導(dǎo)受多種因素的調(diào)節(jié),且其活化過程與活化時間及功能均密切相關(guān),故能夠顯著反映多種疾病的病情發(fā)展程度[17]。同時,大量相關(guān)文獻指出,PCT的表達與組織受損程度、炎癥反應(yīng)的發(fā)生、內(nèi)環(huán)境的紊亂等有關(guān),而腫瘤細胞的產(chǎn)生過程可導(dǎo)致多種促炎因子的生成,進而影響疾病的進展及預(yù)后,故PCT的表達情況與腫瘤細胞的預(yù)后情況密切相關(guān)[18-19]。此外,腫瘤患者在化療過程中均易伴免疫功能紊亂情況及粒細胞缺乏現(xiàn)象,進而使患者體內(nèi)PCT水平顯著升高,不利于預(yù)后[20-21]。為了更進一步明確血清PCT表達與肺腺癌患者化療后腫瘤標志物、VEGF的關(guān)系,本研究對上述各指標之間的關(guān)系進一步作相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),肺腺癌患者血清PCT、腫瘤標志物、VEGF水平間呈正相關(guān);且經(jīng)單因素及多元回歸模型分析,血清PCT、CEA、CA199、CA125、NSE、CY-FRA21-1、SCC-Ag、VEGF、EGFL8過表達據(jù)能夠增加肺腺癌患者化療后預(yù)后不良風險;繪制ROC曲線結(jié)果也顯示,血清PCT能夠作為肺腺癌患者化療后預(yù)后的預(yù)測因子(AUC為0.850)。上述結(jié)果證實,化療前血清PCT過表達與肺腺癌患者化療后腫瘤標志物、VEGF的表達有關(guān),可作為肺腺癌患者化療后預(yù)后不良風險預(yù)測指標。

本研究通過分析PCT與肺腺癌患者腫瘤標志物、血管新生的關(guān)系,證實PCT通過影響腫瘤標志物、血管新生,間接影響肺腺癌患者預(yù)后,為改善肺腺癌預(yù)后探討新的治療靶點,此為本研究的先進性。但肺腺癌治療方法多樣,本研究僅納入化療的患者,靶向治療、免疫治療、放療等其他治療方法尚未納入研究,PCT對這些治療患者的影響如何未能得到具體證實,此為本研究不足之處。今后將繼續(xù)開展前瞻性研究,納入包括靶向治療、免疫治療等在內(nèi)的肺腺癌患者,分析PCT在這些患者治療中的臨床意義,以彌補本研究之不足。

綜上所述,血清PCT可能與肺腺癌患者化療后腫瘤標志物、血管新生有關(guān),臨床可通過早期監(jiān)測肺腺癌患者的血清PCT水平,并積極采取相關(guān)措施,控制血清PCT水平,改善患者預(yù)后。

利益相關(guān)聲明:作者均聲明無利益沖突。

作者貢獻說明:數(shù)據(jù)整理、統(tǒng)計分析、論文撰寫為張曉進;研究設(shè)計和方案指導(dǎo)、論文修改和審閱,研究方案協(xié)助執(zhí)行和實施為王亮。