孫仁爽，趙敏婧

不同產(chǎn)地老鸛草指紋圖譜的建立及抗腫瘤譜效關(guān)系研究

孫仁爽1，趙敏婧2

1. 通化師范學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院（長(zhǎng)白山天然藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室），吉林 通化 134001 2. 梅河口市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，吉林 梅河口 135000

建立老鸛草指紋圖譜，研究老鸛草提取物的指紋圖譜與抗腫瘤活性之間的譜效關(guān)系，初步明確老鸛草抗腫瘤主要活性成分。運(yùn)用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)軟件，建立老鸛草抗腫瘤活性部位的HPLC指紋圖譜。采用MTT法，以人乳腺癌MCF-7細(xì)胞為模型，對(duì)老鸛草樣品的醋酸乙酯部位進(jìn)行抗腫瘤活性測(cè)定。采用多元線性回歸法，將量化共有峰面積與MTT法測(cè)得老鸛草抗腫瘤活性結(jié)果相結(jié)合，構(gòu)建老鸛草抗腫瘤譜效關(guān)系。通過(guò)指紋圖譜的建立，共標(biāo)定了16個(gè)共有峰，確定1號(hào)峰為沒(méi)食子酸、7號(hào)峰為柯里拉京、8號(hào)峰為老鸛草素、12號(hào)峰為鞣花酸。其中29批藥材的相似度均大于0.732，運(yùn)用主成分分析和聚類分析進(jìn)一步分析樣品間差異，將距離較遠(yuǎn)的30號(hào)樣品排除。HPLC指紋圖譜中的16個(gè)共有峰中，有8個(gè)峰對(duì)MCF-7細(xì)胞有作用，得到MCF-7的譜效方程，經(jīng)6批藥材驗(yàn)證，譜效方程計(jì)算值與實(shí)際值的偏差率不超過(guò)10%。該譜-效方程可用于預(yù)測(cè)老鸛草的抗乳腺癌作用物質(zhì)基礎(chǔ)。

老鸛草；指紋圖譜；抗腫瘤；譜效關(guān)系；沒(méi)食子酸；柯里拉京；老鸛草素；鞣花酸

老鸛草為牻牛兒苗科植物老鸛草Maxim的干燥地上部分[1]，具有祛風(fēng)濕、通經(jīng)絡(luò)、止瀉痢等作用[2-3]。目前對(duì)老鸛草的研究多停留在化學(xué)成分的含量測(cè)定及指紋圖譜，這些研究[4-6]所獲得的HPLC圖譜不能反映出老鸛草的內(nèi)在藥效。老鸛草有明顯的抗腫瘤作用，常用于乳腺癌、結(jié)腸癌和肺癌等腫瘤的治療。老鸛草中含有多種生物活性成分，可以抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂，同時(shí)通過(guò)促進(jìn)免疫功能，抵御癌癥的侵襲，因此，老鸛草常被用于癌癥的輔助治療。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)老鸛草的功效，選擇其抗腫瘤作用作為藥效指標(biāo)，對(duì)老鸛草有效部位的指紋圖譜和抗腫瘤作用的關(guān)系進(jìn)行初步的探討，建立能反映老鸛草抗腫瘤藥效[7-9]的譜效關(guān)系方程，闡明其抗腫瘤作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。

1 材料與儀器

1.1 材料

藥材經(jīng)通化師范學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院于俊林教授鑒定為牻牛兒苗科老鸛草Maxim.的干燥地上部分，其來(lái)源信息見(jiàn)表1。

表1 30批老鸛草藥材產(chǎn)地信息

1.2 試劑

對(duì)照品老鸛草素（批號(hào)100503，上海融禾醫(yī)藥科技有限公司）、沒(méi)食子酸（批號(hào)110831-201906）、柯里拉京（批號(hào)111623-200302）、鞣花酸（批號(hào)111959-201903）、羥基喜樹(shù)堿（批號(hào)110832-201908）購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院，質(zhì)量分?jǐn)?shù)均≥98%。人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7由首都醫(yī)科大學(xué)中藥學(xué)院傳代保種。RPMI1640培養(yǎng)基購(gòu)自美國(guó)Gibco公司；甲醇和乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

1.3 儀器

WELLSCAN MK 3型酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio-Rad公司），Agilent1260高效液相色譜儀，KQ3200型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），CP225D型電子天平（德國(guó)Sartorius公司）。

2 方法

2.1 老鸛草HPLC指紋圖譜的建立

2.1.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱定沒(méi)食子酸、柯里拉京、老鸛草素和鞣花酸對(duì)照品，置于4個(gè)50 mL量瓶中，分別用甲醇定容。制成分別含沒(méi)食子酸、柯里拉京、老鸛草素和鞣花酸232、120、50、150 μg/mL的單一對(duì)照品溶液。再精密量取沒(méi)食子酸、柯里拉京、老鸛草素和鞣花酸對(duì)照品溶液各1 mL置10 mL量瓶中，用甲醇定容，制成含沒(méi)食子酸23.2 μg/mL、柯里拉京12 μg/mL、老鸛草素5 μg/mL和鞣花酸15 μg/mL的混合對(duì)照品溶液。

2.1.2 供試品溶液的制備 稱取老鸛草約1 g，精密稱定，粉碎，用18 mL 70%丙酮超聲提取60 min，濾過(guò)，濾液減壓濃縮得浸膏，減壓回收溫度均不超過(guò)40 ℃，濃縮液置10 mL量瓶中，用甲醇定容，搖勻，過(guò)0.45 μm微孔濾膜，得供試品溶液，備用。

2.1.3 色譜條件 色譜柱：Agilent XDB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相見(jiàn)表2，體積流量為0.8 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)278 nm，進(jìn)樣體積2 μL。

2.1.4 精密度試驗(yàn) 取老鸛草樣品（S1）適量，按照“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，將圖譜導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2004A版）”，得到各圖譜的相似度均大于0.92，計(jì)算16個(gè)主要共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD＜2%，峰面積RSD＜2%，符合指紋圖譜的要求。

表2 流動(dòng)相的梯度洗脫程序

2.1.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取老鸛草樣品（S1）適量，按照“2.1.2”項(xiàng)方法制得供試品溶液，分別在0、4、8、12、24 h，按“2.1.3”項(xiàng)色譜條件進(jìn)行測(cè)定，將所得數(shù)據(jù)導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2004A版）”，得到各圖譜的相似度均大于0.93，計(jì)算16個(gè)主要共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD＜2%，峰面積RSD＜2%，符合指紋圖譜的要求。

2.1.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取老鸛草樣品（S1）適量，按照“2.1.2”項(xiàng)下方法平行制得6份供試品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)色譜條件進(jìn)行測(cè)定，將數(shù)據(jù)導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2004A版）”，得到各圖譜的相似度均大于0.91，計(jì)算16個(gè)主要共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD＜2%，峰面積RSD＜2%，符合指紋圖譜的要求。

2.1.7 老鸛草化學(xué)指紋圖譜的構(gòu)建 精密吸取供試品溶液，分別注入液相色譜儀，按照“2.1.3”項(xiàng)色譜條件檢測(cè)。采用國(guó)家藥典委員會(huì)推薦的“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2004A版）”進(jìn)行模式識(shí)別，獲得了老鸛草指紋圖譜的共有模式[10]。以中國(guó)食品藥品檢定研究院提供的老鸛草對(duì)照藥材為參照?qǐng)D譜，對(duì)照?qǐng)D譜的生成方法為平均數(shù)法。

2.2 抗腫瘤活性的測(cè)定

2.2.1 樣品溶液制備 用蒸餾水懸浮分散浸膏后，依次用氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取。分別稱取各樣品適量，用80 μL DMSO配成25 g/L的母液，再用RPMI-1640培養(yǎng)液分別稀釋成0.5、5、50、100、250、500 mg/L溶液，備用。陽(yáng)性藥羥基喜樹(shù)堿用RPMI-1640培養(yǎng)液稀釋成0.01、0.1、l、10、100 mg/L溶液。

2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng) MCF-7細(xì)胞用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液在37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。

2.2.3 MTT法測(cè)定各樣品的抗腫瘤活性 將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化后配制成濃度為1×104個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，按1000個(gè)/孔接種于96孔板，每孔加100 μL。次日加入含不同濃度藥物及相應(yīng)溶劑對(duì)照的新鮮培養(yǎng)基，每孔加100 μL（DMSO終濃度＜0.5%），每藥設(shè)4個(gè)劑量組，每組設(shè)6個(gè)平行孔，給藥后于37 ℃繼續(xù)培養(yǎng)72 h后，棄上清，每孔加100 μL新鮮配制的含0.5 mg/mL MTT的無(wú)血清培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，棄上清液，每孔加200 μL DMSO溶解MTT甲沉淀，用微型振蕩器振蕩混勻，用酶標(biāo)儀在參考波長(zhǎng)490 nm，檢測(cè)波長(zhǎng)570 nm條件下測(cè)定吸光度（）值，以溶劑對(duì)照處理的腫瘤細(xì)胞為對(duì)照組，用公式計(jì)算藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率。并按中效方程計(jì)算半數(shù)抑制濃度（IC50）。

抑制率＝(對(duì)照組平均值－給藥組平均值)/對(duì)照組平均值

2.3 老鸛草抗腫瘤譜-效關(guān)系研究

2.3.1 建立老鸛草抗腫瘤譜-效關(guān)系方程 將HPLC法測(cè)定所得各峰面積均數(shù)化[11]，處理成量化共有峰數(shù)據(jù)。處理后的共有峰數(shù)據(jù)（）為各峰與各峰平均面積的比值（＝峰的面積值/峰平均面積值），以衡量樣品中各成分含量的變化情況。以量化共有峰數(shù)據(jù)為自變量，腫瘤細(xì)胞增殖抑制率為因變量，使用軟件SPSS 21.0，采用后退法建立譜效關(guān)系[12]方程。

2.3.2 建立老鸛草抗腫瘤譜-效關(guān)系驗(yàn)證方程 為證明所列方程的合理性，將HPLC法測(cè)定各峰數(shù)據(jù)均數(shù)化峰面積，處理成量化共有峰數(shù)據(jù)，代入方程進(jìn)行驗(yàn)證[13]。

3 結(jié)果與分析

3.1 老鸛草HPLC指紋圖譜分析

3.1.1 相似度評(píng)價(jià) 將30個(gè)老鸛草樣品的AIA格式的數(shù)據(jù)文件導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)研究版（2004A）》軟件，以吉林通化藥材（S1）作為參照譜圖，多點(diǎn)校正生成對(duì)照?qǐng)D譜（R），計(jì)算各樣品指紋圖譜與生成的對(duì)照?qǐng)D譜的相似度，相似度在0.589～0.976，大部分樣品相似度較高，但是由于產(chǎn)地、生長(zhǎng)環(huán)境和提取純化過(guò)程等原因，個(gè)別樣品與對(duì)照?qǐng)D譜差異較大，不能直接建立老鸛草藥材指紋圖譜[14]的共有模式。運(yùn)用主成分分析和聚類分析進(jìn)一步分析樣品間差異，以便最終能夠建立合理的老鸛草藥材的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。

3.1.2 主成分分析（principal components analysis，PCA） 各老鸛草樣本經(jīng)過(guò)上述實(shí)驗(yàn)獲得各自的色譜數(shù)據(jù)，通過(guò)色譜工作站將圖譜進(jìn)行積分后以保留時(shí)間和色譜峰面積作為數(shù)據(jù)的信息，以相對(duì)保留時(shí)間定位，以對(duì)應(yīng)的峰面積的積分值作為數(shù)據(jù)源，形成30個(gè)樣本數(shù)據(jù)矩陣。對(duì)數(shù)據(jù)矩陣進(jìn)行PCA投影。老鸛草數(shù)據(jù)PCA的平面投影圖見(jiàn)圖1，結(jié)合旋轉(zhuǎn)成份矩陣列表可知，30號(hào)樣品和前3種成分的相關(guān)度都很低，屬于第4種成分?？梢?jiàn)30號(hào)樣品與其他樣品差距較大，進(jìn)一步縮小了選擇范圍。

圖1 PCA平面投影圖

3.1.3 系統(tǒng)聚類分析 對(duì)30個(gè)樣品數(shù)據(jù)進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析，采用組內(nèi)聯(lián)結(jié)法、夾角余弦作為測(cè)量的距離變量，聚類樹(shù)形圖見(jiàn)圖2，結(jié)合PCA分析結(jié)果，將距離較遠(yuǎn)的30號(hào)樣品排除。

3.1.4 老鸛草藥材標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立 將上述29批樣品的AIA數(shù)據(jù)文件導(dǎo)入軟件，對(duì)上述藥材進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，設(shè)定S1為參照，多點(diǎn)校正，設(shè)定參照?qǐng)D譜，將譜峰自動(dòng)匹配，生成的疊加圖見(jiàn)圖3，得到的共有峰對(duì)照?qǐng)D譜見(jiàn)圖4，結(jié)果29批老鸛草藥材具有16個(gè)共有峰。相似度計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表3。相似度計(jì)算結(jié)果表明，29批樣品與對(duì)照?qǐng)D譜比較，相似度均在0.732以上，說(shuō)明不同來(lái)源老鸛草樣品化學(xué)成分差異較大，可為老鸛草藥材的品質(zhì)評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

圖2 老鸛草樣品聚類分析

圖3 29批老鸛草藥材提取物的HPLC疊加圖

1-沒(méi)食子酸 7-柯里拉京 8-老鸛草素 12-鞣花酸

表3 29批樣品相似度評(píng)價(jià)結(jié)果

3.1.5 老鸛草主要共有峰歸屬 經(jīng)過(guò)相似度軟件分析出29個(gè)產(chǎn)地老鸛草藥材具有16個(gè)共有峰。保留時(shí)間依次為12.155、17.893、20.575、27.067、36.649、39.43、50.182、52.617、57.233、59.529、81.643、82.789、84.856、88.980、90.273、91.759 min。將各峰依次編號(hào)為1～16。通過(guò)對(duì)照品色譜圖指認(rèn)，確定1號(hào)峰為沒(méi)食子酸，7號(hào)峰為柯里拉京，8號(hào)峰為老鸛草素，12號(hào)峰為鞣花酸。

3.2 抗腫瘤活性分析

3.2.1 老鸛草中各萃取部位的抗腫瘤活性 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示老鸛草的醋酸乙酯和正丁醇部位對(duì)腫瘤細(xì)胞都有一定的抑制作用，其中醋酸乙酯部位對(duì)MCF-7細(xì)胞的IC50為（12.47±3.86）μg/mL（表4），小于30 μg/mL。一般認(rèn)為當(dāng)植物粗提取物IC50≤30 μg/mL時(shí)，可初步認(rèn)為有一定的抗腫瘤作用，值得進(jìn)一步研究[15]。因此老鸛草70%丙酮提取物的醋酸乙酯部位活性相對(duì)最強(qiáng)，確定為老鸛草的抗腫瘤活性部位。

表4 老鸛草不同萃取部位對(duì)MCF-7細(xì)胞的IC50(, n = 3)

3.2.2 老鸛草醋酸乙酯部位抗腫瘤活性測(cè)定 29份老鸛草藥材的醋酸乙酯部位對(duì)腫瘤細(xì)胞MCF-7的抑制率見(jiàn)表5。

3.3 老鸛草抗腫瘤譜-效關(guān)系研究

3.3.1 量化共有峰數(shù)據(jù) 隨機(jī)選取23個(gè)樣品的量化共有峰數(shù)據(jù)結(jié)果見(jiàn)表6，將16個(gè)共有峰依次設(shè)為1、2、3……16。剩余6個(gè)樣品用于驗(yàn)證的量化共有峰數(shù)據(jù)見(jiàn)表7。

表5 老鸛草提取物對(duì)MCF-7細(xì)胞的抑制率

表6 23個(gè)老鸛草樣品醋酸乙酯層的HPLC量化共有峰均數(shù)化數(shù)據(jù)

續(xù)表6

表7 6個(gè)驗(yàn)證樣品的HPLC量化共有峰均數(shù)化數(shù)據(jù)

3.3.2 老鸛草抗乳腺癌譜-效方程 用后退法篩選出來(lái)的對(duì)抑制MCF-7細(xì)胞株生長(zhǎng)有顯著貢獻(xiàn)的變量有8個(gè)，即1、2、5、10、12、13、14、15。老鸛草抗乳腺癌譜-效方程為＝0.234＋0.0471＋0.0522＋0.1025－0.03310＋0.09712－0.11213－0.08614＋0.15715

3.3.3 殘差圖 方程殘差服從近似正態(tài)分布，自變量和因變量之間呈線性關(guān)系，說(shuō)明所用模型適合用于建立老鸛草醋酸乙酯提取物的抗乳腺癌譜-效關(guān)系方程，見(jiàn)圖5、6。

圖5 因變量馬氏距離分布直方圖

圖6 因變量正態(tài)概率圖

3.3.4 驗(yàn)證方程 將6個(gè)驗(yàn)證樣品的量化共有峰數(shù)據(jù)代入老鸛草抗乳腺癌譜-效方程，計(jì)算偏差率。

偏差率＝估計(jì)值/真實(shí)值－1

從表8可以看出，由所建立的數(shù)學(xué)模型計(jì)算得到的6批老鸛草驗(yàn)證樣品的抑制率估計(jì)值與實(shí)驗(yàn)測(cè)得真實(shí)值的偏差率全部在±10%以內(nèi)。

4 討論

4.1 最佳提取工藝的考察

本實(shí)驗(yàn)選用70%丙酮為溶劑對(duì)老鸛草中的成分進(jìn)行提取。通過(guò)干酪素法對(duì)總鞣質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定，確定老鸛草的最佳提取工藝。選取料液比（A）、超聲時(shí)間（B）和超聲頻率（C）為主要考察因素，每個(gè)因素取3水平，正交試驗(yàn)表安排試驗(yàn)方案，分析結(jié)果表明，以總鞣質(zhì)為考察指標(biāo)時(shí)，各因素的影響大小均為A＞C＞B，即料液比影響最大，超聲時(shí)間影響最小。根據(jù)正交試驗(yàn)確定的最佳提取條件為：液料比為1∶18的70%丙酮在100 kHz超聲頻率下超聲提取60 min。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，重復(fù)3次，得到總鞣質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.83%。結(jié)果表明確定的最佳提取工藝效率較高，切合實(shí)際。

表8 老鸛草抗乳腺癌譜-效相關(guān)質(zhì)量評(píng)價(jià)數(shù)學(xué)模型驗(yàn)證結(jié)果

4.2 色譜條件的考察

本實(shí)驗(yàn)以采于黑龍江大慶的9號(hào)老鸛草樣本考察了Agilent XDB-C18色譜柱、Agilent Zorbax-C18色譜柱、Agilent Extend-C18色譜柱、迪馬C18色譜柱、大連依利特C18色譜柱和美國(guó)熱電C18等6種色譜柱的分離情況，色譜柱規(guī)格均為（250 mm×4.6 mm，5 μm），結(jié)果發(fā)現(xiàn)各色譜柱基本都能達(dá)到基線分離，但是各色譜柱峰位順序改變，因此選用其中一種分離情況最好、出峰最多的Agilent公司的XDB-C18作為實(shí)驗(yàn)用色譜柱。本實(shí)驗(yàn)分別用甲醇-水、乙腈-水、甲醇-乙腈-0.3%磷酸鹽為流動(dòng)相，以不同梯度進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明用甲醇-乙腈-0.3%磷酸鹽梯度洗脫效果最好；體積流量考察了0.8、1.0和1.2 mL/min，結(jié)果1.0、1.2 mL/min的體積流量分離效果不好，選用0.8 mL/min作為流動(dòng)相的體積流量。

4.3 譜效關(guān)系

實(shí)驗(yàn)在不同批次老鸛草提取物HPLC指紋圖譜共有峰與其抗腫瘤作用數(shù)據(jù)量化的基礎(chǔ)上，采用后退法對(duì)老鸛草指紋圖譜共有峰與抗腫瘤作用的大小進(jìn)行相關(guān)性研究。結(jié)果顯示，采用體外活性篩選確定了老鸛草醋酸乙酯萃取部分對(duì)MCF-7細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率最強(qiáng)，作為本實(shí)驗(yàn)老鸛草抗腫瘤的活性部位。以29個(gè)老鸛草樣品為研究對(duì)象，開(kāi)展高效液相色譜分析，所構(gòu)建的老鸛草化學(xué)指紋圖譜，共有16個(gè)共有峰，分析指紋圖譜，可見(jiàn)各樣品的共有峰面積有差別。由所建立的數(shù)學(xué)模型計(jì)算得到的6批老鸛草驗(yàn)證樣品的抑制率估計(jì)值與實(shí)驗(yàn)測(cè)得真實(shí)值的偏差率均在±10%以內(nèi)。本實(shí)驗(yàn)建立了老鸛草抗乳腺癌譜效關(guān)系方程，體現(xiàn)了中藥藥效的產(chǎn)生是多成分相互協(xié)調(diào)、互補(bǔ)或制約的結(jié)果，為老鸛草藥材質(zhì)量控制提供參考[16]。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Establishment of fingerprints and spectrum-effect relationship of anti-tumor activity offrom different places of origin

SUN Ren-shuang1, ZHAO Min-jing2

1. Changbai Mountain Key Laboratory for natural medicine, Medical College, Tonghua Normal Univetsity, Tonghua 134001, China 2. Meihekou Food and Drug Control, Meihekou 135000, China

To establish the HPLC fingerprint ofstudy the spectrum-effect relationship of anti-tumor activity ofand preliminarily clarify its main anti-tumor active components .The similarity evaluation software of traditional Chinese medicine chromatographic fingerprints was used to establish the HPLC fingerprints of the anti-tumor active fractions ofMTT method was used to determine the anti-tumor activity of effective parts ofby using human breast cancer cell MCF-7 as a model. Multiple linear regression method was used to combine the quantitative characteristic peak area with the anti-tumor activity results ofmeasured by MTT method to construct the anti-tumor spectrum effect relationship ofThrough the establishment of fingerprint, 16 common peaks were picked, it is determined that peak 1 is gallic acid, peak 7 is corrilagin, peak 8 is geranium, and peak 12 is ellagic acid. The similarity of each sample was higher than 0.732. Further analyze the differences between samples using principal component analysis and cluster analysis, and exclude sample 30 that is farther away.The results showed that 8 of the 16 common peaks in the HPLC fingerprint had effects on MCF-7 cells, and the spectral efficiency equation for MCF-7 was obtained. After verification by six batches of medicinal materials, the deviation rate between the calculated value of the spectral efficiency equation and the actual value was not exceed 10%.The spectrum-effect equation can be used to predict the anti-breast cancer effect of.

Maxim.; fingerprint ; anti-tumor; spectrum-effect relationship; gallic acid; corilagin; geraniin; ellagic acid

R286.2

A

0253 - 2670(2023)15 - 5003 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.15.025

2022-12-06

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81973431）；通化師范學(xué)院應(yīng)用研究項(xiàng)目：中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)研究（01054）

孫仁爽，男，博士，副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幩幮镔|(zhì)基礎(chǔ)和質(zhì)量控制研究。E-mail: 804590217@qq.com

[責(zé)任編輯 時(shí)圣明]