李 敏,張麥利,趙寶娟,杜 丹

陜西省渭南市中心血站檢驗(yàn)科,陜西渭南 714000

Rh血型系統(tǒng)是國(guó)際輸血協(xié)會(huì)命名的第4號(hào)血型系統(tǒng),也是最復(fù)雜的血型系統(tǒng),具有高度免疫原性和復(fù)雜多態(tài)性,在輸血醫(yī)學(xué)中的臨床重要性?xún)H次于ABO血型系統(tǒng),Rh血型系統(tǒng)目前已發(fā)現(xiàn)54種抗原,具有臨床重要性的抗體大多數(shù)針對(duì)的是5種主要抗原(D、C、c、E、e),其抗原的強(qiáng)弱依次為D>E>C>e>c[1]。RhD陰性在我國(guó)漢族人群中的分布頻率為0.2%～0.5%[2]。本研究通過(guò)對(duì)渭南地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血者抗原表型分布及抗體篩查進(jìn)行分析,了解RhD陰性獻(xiàn)血者抗原及不規(guī)則抗體的分布特點(diǎn),對(duì)于實(shí)施精準(zhǔn)輸血,保障臨床用血安全具有重要意義。本研究對(duì)2020年3月至2022年12月渭南地區(qū)RhD陰性獻(xiàn)血者抗原分布及不規(guī)則抗體進(jìn)行調(diào)查分析,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源 選取2020年3月至2022年12月本血站檢驗(yàn)科從155 353例獻(xiàn)血者中初篩RhD陰性獻(xiàn)血者821例作為研究對(duì)象。

1.2儀器與試劑 KA-2200離心機(jī)(日本Kubota公司)、HW37免疫孵育器(中山市生科試劑儀器有限公司)、微柱凝膠卡(江蘇力博醫(yī)藥生物技術(shù)股份有限公司)、IgM+IgG抗-D[單克隆抗體Milliporw(UK)Ltd]、IgM+IgG抗-D(單克隆抗體Dominion Biologicals Limited)、IgG抗-D(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)、抗-C(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)、抗-c(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)、抗-E(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)、抗-e(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);抗體篩查細(xì)胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);室內(nèi)質(zhì)控(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)。試劑批號(hào)均在有效期內(nèi)。

1.3方法 檢驗(yàn)科采用NEO全自動(dòng)血型分析儀對(duì)所有無(wú)償獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本進(jìn)行RhD抗原初篩,初篩為RhD陰性的標(biāo)本送血型室,分別采用3種不同廠家的試劑進(jìn)行鹽水試管法和抗人球蛋白微柱凝膠卡法陰性確認(rèn)試驗(yàn),如果均不凝集判為RhD陰性,若其中一種方法或試劑出現(xiàn)凝集,則加做直接抗人球蛋白試驗(yàn)排除獻(xiàn)血者自身干擾,若陰性,則判為D抗原變異型,同時(shí)進(jìn)行鹽水試管法的C、c、E、e抗原表型檢測(cè)及抗人球蛋白微柱凝膠卡法的不規(guī)則抗體篩查。

2 結(jié) 果

2.1RhD陰性獻(xiàn)血者抗原表型分布情況比較 821例RhD初篩陰性獻(xiàn)血者中ccee占比最高,為442例(53.84%),其次由高到低依次為Ccee 270例(32.89%)、ccEe 42例(5.12%)、CCee 32例(3.90%)、CcEe 27例(3.29%)、CCEe 6例(0.73%)、ccEE 2例(0.24%),未發(fā)現(xiàn)CCEE、CcEE表型獻(xiàn)血者。

2.2D抗原變異抗原表型分布情況比較 821例初篩RhD陰性獻(xiàn)血者經(jīng)抗人球蛋白確認(rèn)試驗(yàn),確認(rèn)為D抗原變異49例,占RhD初篩陰性人數(shù)的5.97%,以ccEe占比最高。見(jiàn)表1。

表1 49例D抗原變異抗原表型分布情況比較

2.3RhD確認(rèn)陰性與D抗原變異型E抗原分布情況比較 檢出的49例D抗原變異型獻(xiàn)血者中含E抗原36例,抗人球蛋白確認(rèn)試驗(yàn)陰性的772例獻(xiàn)血者中含E抗原72例,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=168.063,P<0.01)。

2.4RhD陰性獻(xiàn)血者意外抗體分布情況比較 821例RhD陰性獻(xiàn)血者中,檢出意外抗體14例,占RhD初篩陰性人數(shù)的1.71%,其中抗-D抗體12例,全部為女性;抗-E抗體1例,為男性;IgM抗-M抗體1例,為男性。

3 討 論

本研究共檢測(cè)821例RhD初篩陰性的獻(xiàn)血者,其中ccee表型占比最高,為53.84%,Ccee其次,占32.89%,與張薇薇等[3]報(bào)道的西安地區(qū)1 944例初篩陰性獻(xiàn)血者中的ccee表型(56.38%)和Ccee表型(28.50%),閆芳等[4]報(bào)道的北京地區(qū)3 795例初篩陰性獻(xiàn)血者中的ccee表型(56.36%)和Ccee表型(27.54%),楊松等[5]報(bào)道的南充市425例初篩陰性獻(xiàn)血者中的ccee表型(50.00%)和Ccee表型(37.70%),王連友等[6]報(bào)道的徐州地區(qū)847例初篩陰性獻(xiàn)血者中的ccee表型(58.80%)和Ccee表型(28.90%)比例相近,表明在我國(guó)RhD陰性獻(xiàn)血者中ccee和Ccee表型分布高度一致。分析認(rèn)為,在臨床救治中,對(duì)于需長(zhǎng)期輸血治療的RhD陰性患者,選擇相同表型的血液尤為重要,特別是已產(chǎn)生同種抗體的患者,輸血時(shí)不應(yīng)僅僅滿(mǎn)足交叉配血符合,還應(yīng)盡量輸入相同表型的血液,以減少輸血反應(yīng)發(fā)生。

本研究共檢出D抗原變異型49例,占RhD初篩陰性人數(shù)的5.97%,與王照軍等[7]報(bào)道的徐州地區(qū)D抗原變異型占5.65%和周娜等[8]報(bào)道的山東省濟(jì)南市D抗原變異型占6.27%相近,與劉麗麗等[9]報(bào)道的廊坊地區(qū)D抗原變異型占4.12%和熊莉等[10]報(bào)道的南昌地區(qū)D抗原變異型占2.78%有較大差異。分析認(rèn)為,不同來(lái)源的抗-D試劑與其細(xì)胞的反應(yīng)強(qiáng)度可能存在差異。在臨床輸血中,RhD變異型對(duì)于獻(xiàn)血者和受血者的處理方式是不同的,若陰性確認(rèn)試驗(yàn)證實(shí)獻(xiàn)血者為D抗原變異型時(shí),則表明其紅細(xì)胞表面存在較弱的D抗原表達(dá),有可能刺激D陰性的受血者產(chǎn)生抗體,應(yīng)被看作是D抗原陽(yáng)性。對(duì)于受血者來(lái)說(shuō),無(wú)論確認(rèn)試驗(yàn)是否能證實(shí)其有弱D抗原表達(dá),為了避免受血者產(chǎn)生針對(duì)缺失D抗原部分的抗-D抗體,該類(lèi)受血者都應(yīng)被作為D抗原陰性受血者。本研究認(rèn)為,可實(shí)施對(duì)D抗原變異型獻(xiàn)血者主動(dòng)臨床咨詢(xún),對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行解釋,告知其作為獻(xiàn)血者和受血者的用血策略,旨在消除獻(xiàn)血者對(duì)臨床檢測(cè)結(jié)果與血站檢測(cè)結(jié)果不符的疑慮。

本研究發(fā)現(xiàn),49例D抗原變異型獻(xiàn)血者中含E抗原36例,與抗人球蛋白確認(rèn)試驗(yàn)陰性的772例獻(xiàn)血者中含E抗原72例有明顯差異,表明含有E抗原的獻(xiàn)血者是D抗原變異型的概率更高。分析認(rèn)為,Rh血型系統(tǒng)其他抗原,如C、E抗原對(duì)于D抗原的表達(dá)均有一定影響,導(dǎo)致D抗原變異型產(chǎn)生[4],提示實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行RhD陰性確認(rèn)時(shí),對(duì)含有E抗原的標(biāo)本應(yīng)加以關(guān)注。

多數(shù)D陽(yáng)性紅細(xì)胞表達(dá)正常RhD蛋白,基因突變導(dǎo)致氨基酸改變,從而改變D抗原的表達(dá),產(chǎn)生弱D、部分D、Del表型,Del紅細(xì)胞上D抗原非常弱,用常規(guī)血清學(xué)方法檢測(cè)不到,但紅細(xì)胞可吸收并放散抗-D抗體,仍然可能免疫RhD陰性受血者。目前本實(shí)驗(yàn)室未將吸收放散試驗(yàn)納入RhD陰性確認(rèn)試驗(yàn),勢(shì)必造成Del漏檢,輸血時(shí)會(huì)存在一定程度的風(fēng)險(xiǎn),這是本實(shí)驗(yàn)室正在努力的方向。

本研究通過(guò)抗人球蛋白微柱凝膠卡法對(duì)RhD陰性獻(xiàn)血者進(jìn)行抗體篩查,共檢出14例意外抗體,其中抗-D抗體12例,全部為女性,因Rh系統(tǒng)的D抗原具有極強(qiáng)的免疫原性,RhD陰性個(gè)體因輸血或妊娠接觸D抗原,極易產(chǎn)生抗-D抗體[11],是引起胎兒或新生兒溶血病的主要抗原,因此,RhD陰性女性在孕前及孕期需定期進(jìn)行不規(guī)則抗體監(jiān)測(cè)[12]。對(duì)存在意外抗體的血液,其供應(yīng)時(shí)必須選擇適宜的成分血品種,以規(guī)避這些意外抗體輸入患者體內(nèi),血漿可報(bào)廢處理,紅細(xì)胞可制成洗滌紅細(xì)胞或冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞供應(yīng)于臨床。

綜上所述,RhD陰性血液是稀有資源,本血站實(shí)施對(duì)RhD陰性獻(xiàn)血者的表型檢測(cè)和不規(guī)則抗體篩查,建立RhD陰性獻(xiàn)血者血型信息數(shù)據(jù)庫(kù),旨在搭建輸血安全信息共享平臺(tái),對(duì)于實(shí)施精準(zhǔn)輸血,增強(qiáng)輸血安全性與有效性,幫助臨床在緊急情況下能快速找到合適的血液具有重要意義。